Rosana Camarini.

O consumo de álcool por mulheres grávidas é um sério problema de saúde pública, além dos malefícios para a mãe, o álcool pode atravessar a barreira placentária e afetar o desenvolvimento do feto. A exposição ao álcool pode acarretar efeitos diretos no feto e seu consumo durante a gestação também pode interferir no vínculo entre a mãe e o bebê, possivelmente reduzindo a liberação de ocitocina materna. Por outro lado, nossos estudos com animais experimentais mostraram que o enriquecimento ambiental (EA) durante a gestação preveniu os prejuízos nos comportamentos maternais direcionados aos filhotes (Processos FAPESP 2021/04816-1 e 2017/13756-7). Mostraram também que o EA é capaz de modular o sistema ocitocinérgico, aumentando as concentrações de ocitocina e do RNAm no hipotálamo em animais machos (Processo FAPESP 2015/02397-0, Rae et al., 2018; Rae et al, submetido). Os neurônios ocitocinérgicos se projetam para regiões encefálicas, que inclui a área pré-ótica medial (medial preoptic area, MPOA, em inglês) do hipotálamo, importantes para a manifestação do comportamento materno. Além da própria OT, existem moduladores do sistema ocitocinérgico capazes de influenciar no comportamento materno, como a dopamina (Stolzenberg et al., 2007) e o estrogênio (Siegel, Rosenblatt, 1975). A ativação de receptores D1 de eferências da MPOA ou a ativação desses receptores no núcleo accumbens promovem o início do comportamento materno e variações hormonais e ambientais afetam esse comportamento. Neste estudo, nosso objetivo é avaliar possíveis mecanismos pelos quais o EA, durante a gestação, pode prevenir os prejuízos do álcool no comportamento materno e no desenvolvimento da prole, com foco no sistema ocitocinérgico, uma vez que o laboratório é pioneiro nesses estudos. Para isso, camundongos fêmeas Swiss serão distribuídas em 4 grupos, de acordo com o tipo de alojamento durante a gestação (padrão ou enriquecido) e tratamento (água ou etanol [3 g/kg]; administrado por gavagem). Primeiramente, iremos avaliar se o EA é capaz de alterar o metabolismo do etanol, por meio de medidas de concentração de álcool no sangue e atividade enzimática hepática da mãe e da prole. Em seguida, investigaremos os efeitos do EA no sistema ocitocinérgico durante a gestação, por meio de medidas da expressão gênica de ocitocina no hipotálamo, além de analisar a expressão dos receptores de estradiol (ER e ) na área pré-óptica medial. Em seguida, investigaremos a atividade de neurônios dopaminérgicos diante do comportamento materno, por meio da técnica de fotometria por fibra. Além disso, avaliaremos as possíveis alterações epigenéticas do receptor de ocitocina da prole. Portanto, nossa pesquisa visa elucidar os potenciais mecanismos ocitocinérgicos ou dopaminérgicos através dos quais a exposição ao EA durante a gestação pode oferecer proteção contra os efeitos prejudiciais do álcool no comportamento materno.

Dispositivo que registra e monitora o comportamento de ingestão líquida em animais por meio de sensores instalados em bebedouros dentro de uma câmara experimental, com potencial para patenteamento.

aúde pública, uma vez que a droga é capaz de atravessar a barreira placentária e afetar o desenvolvimento embrio-fetal. Além dos efeitos diretos da exposição do álcool no feto, o consumo durante a gestação também pode interferir no cuidado que a mãe expressa com o filhote, já que a droga parece interromper a interação entre eles, provavelmente por reduzir a liberação materna de ocitocina (OT). Já o enriquecimento ambiental (EA) durante a gestação pode aumentar os comportamentos direcionados aos filhotes, uma vez que tem se mostrado capaz de modular o sistema ocitocinérgico, conforme estudo de nosso laboratório. Desvendar os mecanismos pelos quais o EA modula o sistema de OT pode ajudar a desenvolver métodos ou estratégias para prevenção dos Transtornos do Espectro Alcoólico Fetal. O objetivo do presente estudo é avaliar os efeitos da exposição ao EA durante a gestação, sobre os déficits induzidos pelo álcool no comportamento materno e no desenvolvimento da prole, assim como os mecanismos induzidos pelo EA no sistema de OT. Para isso, camundongos Swiss fêmeas serão distribuídos em quatro grupos: alojadas em gaiola-padrão e tratadas com água ou etanol (3 g/kg, gavagem); alojadas em EA e tratadas com água ou etanol. O tratamento com etanol será realizado de GD15 a PND10. Serão avaliados: o comportamento materno e o desenvolvimento físico e reflexológico da prole, os comportamentos relacionados à ansiedade, agressividade, interação social e consumo de etanol dos animais na idade adulta. Avaliaremos o papel do sistema ocitocinérgico nos mecanismos do EA por meio das medidas de concentrações de OT e RNAm de OT nas mães. Investigaremos como a atividade de neurônios ocitocinérgicos no hipotálamo da prole respondem a estímulos recompensadores. Prosseguiremos com a análise da modulação do sistema OT sobre o sistema dopaminérgico em animais expostos ao EA. Como análise complementar, será avaliado o secretoma de astrócitos da prole, como marcadores da sinalização extracelular mediada por astrócitos e homeostase encefálica.

Mitos e verdades sobre as doenças do nosso cotidiano: criação de uma plataforma de fundamentos e divulgação científica para a sociedade.

s condições ambientais exercem uma grande influência sobre os efeitos comportamentais e neuroquímicos induzidos pelas drogas de abuso. O estresse tem um papel importante no desenvolvimento da dependência, assim como nas recaídas. Por outro lado, a exposição de roedores a estímulos como brinquedos, rodas de exercício e convívio com outros indivíduos, um modelo conhecido como enriquecimento ambiental (EA), é capaz de produzir efeitos benéficos ao indivíduo e prevenir ou reverter condições patológicas, incluindo efeitos comportamentais/neuroquímicos induzidos pelas drogas de abuso. Dados de nosso laboratório demonstraram que o EA diminuiu o consumo de álcool em animais expostos ao estresse agudo por contenção (Marianno et al., 2017) e diminuiu o efeito ansiogênico induzido por um estresse agudo, mediado por uma redução na translocação nuclear de receptores de glicocorticoide (Novaes et al., 2017). Em nosso estudo anterior, mostramos que o EA preveniu e reverteu o desenvolvimento da sensibilização comportamental ao etanol (Rueda et al., 2012) e diminuiu as concentrações de BDNF (Brain-Derived Neurotrophic Factor) no córtex pré-frontal de animais submetidos ao EA, sugerindo um possível papel desse fator neurotrófico nos mecanismos neuroquímicos induzidos pelo EA (Rueda et al., 2012). Além disso, encontramos também alterações na expressão de microRNAs que são controlados por fatores neurotróficos, como o BDNF, em animais que não expressaram sensibilização comportamental ao etanol após exposição ao EA (Rueda, 2017). Várias moléculas estão comumente envolvidas na sinalização da neuroadaptação induzida pela dependência e pelo estresse, como o fator de liberação de corticotrofina (CRF) e o BDNF. As recaídas em decorrência de estados emocionais e estresse desempenham um papel importante na motivação para manutenção do consumo de álcool, assim como a desregulação do eixo do estresse fortalece a busca pela droga Os mecanismos pelos quais o EA induz seus efeitos sobre a resiliência ao estresse e à dependência não estão elucidados. Vários estímulos ambientais levam ao controle epigenético da expressão do Bdnf. As variações nas concentrações de BDNF que ocorrem entre os indivíduos em resposta a um estímulo ou tratamento farmacológico podem ser resultantes não somente do polimorfismo genético, mas também de uma programação epigenética alterada. Este projeto tem como objetivos dar continuidade aos estudos já conduzidos em nosso laboratório com o EA e BDNF, além de avaliar as concentrações de corticosterona plasmática e a expressão do receptor glicocorticoide no córtex pré-frontal. Os objetivos do projeto serão avaliar o envolvimento do EA na resiliência ao estresse crônico imprevisível e o papel das modificações epigenéticas no gene Bdnf no córtex pré-frontal; além de avaliar a participação do eixo HPA nesse processo, por meio da expressão do receptor glicocorticoide nuclear e citosólico e inibição do eixo HPA. A segunda parte do projeto visa estudar os efeitos do EA sobre o consumo de etanol em animais submetidos ao estresse crônico imprevisível.

The insular cortex is involved in various brain functions including consciousness, emotion, homeostasis, perception, self-awareness, empathy, and interpersonal experience. It is divided into several subregions including the dorsal and ventral anterior insula, posterior insula, and granular, agranular, and dysgranular cortex. The current study will focus on the anterior insular cortex (AIC). 
In drug addiction, it is believed that that interoceptive signals generated by physiological states in the body (somatic states), including the hedonic effects of abused drugs, activate the posterior insular cortex, which in turn activates the AIC. Via its connections to the hippocampus and other limbic regions, activation of the AIC generates conscious awareness of drug effects and stores them as memories associated with the context in which drugs are taken (Naqvi et al., Ann NY Acad Sci, 2014; Droutman et al., Trends Cog Sci, 2015).
This project will determine if chemogenetic activation of the AIC produces conditioned rewarding effects.

Avaliar os efeitos da separação materna por 24 horas na preferência condicionada por lugar, na sensibilização comportamental e no perfil de micro-RNAs

O enriquecimento ambiental (EA) permite estudar a influência do ambiente na resposta a diversas manipulações, entre elas o tratamento a drogas de abuso. Nosso laboratório demonstrou que o EA é capaz de prevenir e reverter a sensibilização comportamental ao etanol em camundongos, e que isto estaria acompanhado da diminuição da sinalização do fator neurotrófico derivado do encéfalo (BDNF) no córtex pré-frontal destes animais. Uma das formas de atuação do EA pode envolver sua ação sobre a via do estresse. O estresse tem um papel chave na dependência e recaída e diversos estudos apontam que o etanol é capaz de ativar o eixo HPA e aumentar os níveis de hormônios relacionados ao estresse como CRF e corticosterona. Outro hormônio envolvido na resposta ao estresse é a oxitocina (OT), a qual tem um grande potencial para reverter efeitos deletérios de drogas de abuso, inclusive diminuir o consumo de etanol. Este projeto avalia os efeitos do EA sobre parâmetros comportamentais (ansiedade, depressão e memória), sobre a expressão gênica do Bdnf no córtex pré-frontal, e avaliar a participação da via de sinalização do BDNF no córtex pré-frontal sobre o efeito protetor do EA frente à sensibilização comportamental ao etanol. Também são avaliadas os níveis de OT e a distribuição e quantidade de seus receptores, bem como a preferência condicionada a lugar (CPP) ao etanol e a estímulos sociais em animais sob condições de EA, e a participação da oxitocina sobre esses parâmetros. O consumo excessivo de álcool (recaída) após um período de abstinência é uma das principais características do processo da dependência. Condições ambientais positivas podem ajudar a minimizar os desejos e os sintomas de abstinência, entretanto, condições negativas, como situações de estresse, podem desempenhar um papel importante na vulnerabilidade a recaída. Este estudo também avalia se o EA altera o consumo de etanol após períodos de abstinência e após situações de estresse.

Estímulos ambientais positivos e negativos são capazes de afetar o uso de drogas, sendo que o ambiente é mais importante do que a genética no que diz respeito à dependência ao álcool. Enquanto fatores estressantes, como por exemplo, o isolamento social, aumenta o consumo e a preferência pelo álcool em roedores, o enriquecimento ambiental (EA) confere proteção contra a vulnerabilidade à adição. Os mecanismos centrais envolvidos nesta proteção ainda não estão esclarecidos. Uma das formas de atuação do EA pode envolver sua ação sobre o sistema oxitocinérgico, considerando-se o efeito pró-social da oxitocina (OT) e seu papel na prevenção e tratamento da dependência. O sistema de recompensa cerebral que medeia respostas a recompensas naturais é corrompido pela exposição crônica a drogas de abuso, sendo que a via dopaminérgica mesolimbicocortical é uma das principais vias envolvidas na ativação deste sistema. Nossa hipótese é de que a ação da OT sobre o sistema dopaminérgico, principalmente nas regiões do núcleo accumbens (NAcc) e córtex pré-frontal (CPF), seja responsável pelo equilíbrio entre o valor recompensador do estímulo social e de recompensa das drogas. Outro papel importante, e talvez modulado pela OT, exercido pela dopamina (DA) é a motivação, que pode estar diminuída pela constante presença de estímulos proporcionados pelo EA.

A fase da adolescência difere da fase adulta em vários aspectos, inclusive em parâmetros comportamentais e neuroquímicos. A exposição repetida de cocaína aumenta a resposta locomotora, induzindo sensibilização comportamental, um fenômeno usado para estudar adaptações moleculares de longa duração, decorrentes do uso prolongado de drogas de abuso, e que está associada à fissura pela droga. Nosso laboratório tem mostrado que existe uma variabilidade, dependente da idade, na sensibilização à cocaína e ao etanol. A cocaína promove aumento de DA no núcleo accumbens. A via de ativação do AMPc é regulada por vários sistemas, dentre eles o dopaminérgico. O aumento da ativação da via do AMPc que ocorre em resposta à administração de drogas de abuso, e a conseqüente ativação do CREB, parecem mediar vários aspectos da dependência. Um dos genes ativado pelo CREB é o BDNF. De fato, os estudos têm demonstrado que a cocaína altera a atividade do CREB e do BDNF em roedores adultos. O CREB é um fator de transcrição que tem um papel importante nas bases moleculares da fissura e das recaídas. Os adolescentes apresentam uma resposta dopaminérgica antecipatória mais precoce do que os adultos, o que pode aumentar a expectativa pela droga. Com base nesses dados, o presente trabalho tem como objetivo investigar as conseqüências dessa resposta dopaminérgica diferenciada dos adolescentes, na expressão de CREB e BDNF.

This proposed collaborative project between Sao Paulo University (P.I. Camarini) and University of Surrey (P.I. Bailey) is part of ongoing projects funded by FAPESP (title: Influência do enriquecimento ambiental sobre efeitos comportamentais e neuroquímicos induzidos pelo etanol; Influence of environmental enrichment on ethanol-induced behavioural and neurochemical effects; Camarini) and interdisciplinary project funded by MRC-ESRC (title: Effect and neurobiological mechanisms of exercise on nicotine craving, Bailey). Both labs have independently acquired strong evidence to suggest that environmental enrichment and exercise maybe useful in aiding those who are attempting to refrain from nicotine and alcohol use. 
The aim of this collaborative project is to identify possible mechanisms by which environmental enrichment and exercise may influence nicotine and alcohol related behaviours, especially addictive related ones.

As condições ambientais exercem uma grande influência sobre os efeitos comportamentais e neuroquímicos induzidos pelas drogas de abuso. O estresse tem um papel importante na determinação da vulnerabilidade ao desenvolvimento de dependência. Por outro lado, a exposição de roedores a estímulos como brinquedos, rodas de exercício e convívio com outros indivíduos, um modelo conhecido como enriquecimento ambiental (EA), é capaz de produzir efeitos benéficos em várias regiões encefálicas e prevenir ou reverter condições patológicas, incluindo efeitos comportamentais/neuroquímicos induzidos pelas drogas de abuso.A sensibilização é definida como um aumento progressivo dos efeitos locomotores estimulantes induzidos pela administração repetida de drogas de abuso e tem sido associada a neroadaptações que permeiam a dependência a drogas de abuso. 
Os mecanismos pelos quais o EA induz seus efeitos protetores não estão elucidados. O EA tem mostrado alterar os níveis de BDNF (um fator neurotrófico) em vários modelos, incluindo modelos de memória e aprendizagem e dependência à cocaína. O BDNF está envolvido na resposta a diversas drogas de abuso. Por exemplo, camundongos haplodeficientes de BDNF exibem maior grau de preferência condicionada de lugar e de sensibilização locomotora ao etanol e maior consumo de álcool. Além do BDNF, um gene também modulado pelo CREB é o do fator de transcrição Egr-1. Estudos recentes de nosso laboratório mostraram que o tratamento agudo de etanol aumentou a expressão do Egr-1, enquanto que a administração prolongada de etanol pareada com pistas ambientais eliciou uma supressão da expressão basal de Egr-1. 
Uma das formas de atuação do EA pode envolver sua ação sobre o mecanismo de estresse. O estresse tem um papel chave na dependência e recaída e diversos estudos apontam que o etanol é capaz de induzir o eixo HPA e aumentar os níveis de hormônios relacionados ao estresse, como CRF, e corticosterona. O EA pode ser considerado um agente estressor leve, o que não só ajudaria o animal a lidar melhor com futuras situações estressantes, como também diminuiria a modulação causada pelo etanol na circuitaria do estresse. Além disso, o EA tem efeitos benéficos sobre aprendizado, memória e interação social, o que também pode ser mediado por sistemas relacionados ao estresse. . A dependência representa uma usurpação patológica de processos neuronais relacionados à aprendizagem relacionada com recompensas, ou à procura de recompensas naturais. Neste projeto será utilizada a preferência condicionada a lugar (CPP) para avaliar os efeitos do EA sobre os efeitos recompensadores do etanol. Também serão realizados testes de reconhecimento de objetos para avaliação de memória. Este projeto tem como objetivos estudar os mecanismos pelos quais o EA inibiu o desenvolvimento e expressão da sensibilização comportamental ao etanol. A partir dos dados comportamentais, serão investigados possíveis mediadores neuronais envolvidos nos efeitos do EA sobre a sensibilização comportamental ao etanol.

Nem todos os usuários de drogas se tornam dependentes, mas o indivíduo dependente de drogas tem grande dificuldade em desfocar dos estímulos associados à ela e aprender novas associações. Isto se deve à indução de alterações drásticas de plasticidade sináptica decorrentes da exposição repetida às drogas, principalmente em regiões do sistema de recompensa como o núcleo accumbens. As alterações do sistema glutamatérgico associadas à plasticidade sináptica são moduladas pelos receptores glutamatérgicos metabotrópicos, possíveis alvos para o tratamento da dependência. Os receptores mGluR1/5 tem envolvimento nos processos de consumo de etanol e na indução de plasticidade. No entanto, pouco se sabe sobre como a exposição repetida ao etanol pode alterar a expressão e o funcionamento desses receptores. Neste estudo pretendemos unir técnicas farmacológicas, bioquímicas e eletrofisiológicas para avaliar a expressão (western blot) e função (micro-infusão de fármacos e/ou eletrofisiologia de slices) dos receptores mGluR1/5 em camundongos (Suíço Albino) que desenvolveram sensibilização comportamental (uma forma de adaptação comportamental associada à vulnerabilidade a dependência) ou que consumiram voluntariamente etanol. Considerando que nem todos os animais desenvolvem a sensibilização ou consomem altos níveis de etanol, avaliaremos se a variabilidade individual nos modelos comportamentais estudados está associada à plasticidade de receptores mGluR1/5.

Camundongos C57BL/6 serão alocados em caixas padrão ou em caixas grandes com variados estímulos (enriquecimento ambiental). Serão oferecidas 2 garrafas (uma com água e outra com álcool) para beberem. Os animais serão expostos ao estresse por contenção agudo ou estresse crônico imprevisível e o consumo de água e álcool será quantificado. Será feita quantificação da metilação do DNA. .

O modelo de enriquecimento ambiental (EA) é usado para demonstrar mudanças comportamentais e neuroquímicas decorrentes da experiência em um ambiente rico. O projeto investiga os efeitos do EA na sensibilização comportamental ao etanol e visa explorar a participação do fator neurotrófico BDNF e do fator de transcrição neuronal Egr-1 nos efeitos do EA sobre a dependência ao etanol.

O surgimento e a manutenção do comportamento maternal (CM) são controlados pela interação de fatores ambientais, bioquímicos, hormonais e neurais. Mudanças hormonais que ocorrem no final da gestação e durante a lactação, como a alteração dos níveis de estrógeno, progesterona, prolactina, ocitocina, b-endorfina entre outros são necessárias para o estabelecimento e a expressão desse importante comportamento. A estimulação opioidérgica decorrente do tratamento com morfina em fêmeas reprodutoras gera efeitos tardios diferenciados de acordo com o estado fisiológico no momento do tratamento. Resultados recentes mostram que a ativação opioidérgica da substância cinzenta periaquedutal (PAG) lateral estimula o comportamento de caça predatória de ratas lactantes e quando esta região é lesionada, o CM é restabelecido. Em função disto foi proposto um novo papel funcional para a PAG lateral como um sítio de seleção de respostas motivacionais em ratas lactantes e torna-se importante investigar se modulações farmacológicas promoveriam alterações no CM em ratas lactantes e se esse fenômeno seria mediado por ações específicas dos três subtipos de receptores opióides mais estudados na PAG lateral. A hipótese para o estudo é a de que a expressão dos genes que codificam para esses receptores na PAG lateral, e dos seus produtos protéicos, seria modulada pela estimulação opioidérgica ao final da prenhez, com possíveis implicações para a seleção de comportamentos durante a lactação, como o maternal, imprescindível para a sobrevivência da espécie.

O etanol promove a liberação de dopamina no núcleo accumbens tanto de roedores quanto de humanos. A via de ativação do AMPc é regulada por vários sistemas, dentre eles, o dopaminérgico. O tratamento crônico com etanol diminui a atividade da adenilato ciclase e da proteína quinase A, além de alterar os níveis de fosforilação do fator de transcrição CREB e do NF-kB. Seguindo uma de nossas linhas de pesquisa (estudo de drogas de abuso em adolescentes), o projeto visa estudar os efeitos do etanol na expressão do CREB e NF-kB em animais adolescentes tratados aguda e cronicamente com etanol. Ainda, avaliamos eventuais alterações na expressão do fator neurotrófico BDNF e de seu receptor TrkB em várias estruturas encefálicas.

Pesquisas epidemiológicas mostram que quanto maior a precocidade do primeiro contato com drogas de abuso, maior a probabilidade de o indivíduo tornar-se dependente. Dados comportamentais e neuroquímicos sustentam a hipótese de que mudanças maturacionais no desenvolvimento neural do adolescente possam contribuir para uma maior vulnerabilidade dos jovens às ações das drogas de abuso. A administração repetida de etanol induz uma sensibilização aos seus efeitos estimulantes, acompanhada por neuroadaptações que contribuem para o beber descontrolado. A influência de fatores ambientais pode ser crítica no desenvolvimento da sensibilização a drogas de abuso e o óxido nítrico é um mensageiro difuso do cérebro, envolvido em aprendizagem e na sensibilização comportamental à cocaína. O sistema dopaminérgico mesolímbico tem sido considerado um sistema confluente e determinante deste fenômeno. O etanol aumenta a liberação de DA no núcleo accumbens de ratos adultos, que é uma das condições para que a sensibilização se desenvolva. O objetivo deste projeto é estudar as alterações comportamentais e neuroquímicas decorrentes da administração aguda e crônica de etanol em adolescentes e seus reflexos na vida adulta. Assim, estudaremos: 1) o desenvolvimento e a expressão da sensibilização comportamental aos efeitos estimulantes do etanol em adolescentes, medindo-se a atividade locomotora em campo aberto; 2) as possíveis consequências da pré-exposição ao álcool durante a adolescência no consumo da droga durante a vida adulta. Para isso, usaremos o método de livre escolha entre 2 garrafas (uma com álcool mais água e outra com água); 3) a atividade da óxido nítrico sintase em regiões cerebrais de adolescentes e adultos após administração crônica de etanol, por meio da conversão enzimática de 3H-arginina a 3H-citrulina; 4) a liberação de DA após administração de álcool durante a adolescência, usando-se a microdiálise.

Adolescentes de várias espécies diferem dos adultos em muitos aspectos, dentre eles, padrão de consumo de drogas. Em paradigmas de auto-administração, ratos adolescentes consomem mais etanol, relativo ao peso corpóreo, do que adultos. No presente estudo, ratos adolescentes (Ado) (dia pós-nascimento = 28) e adultos (Adu) (DPN = 73) foram tratados com uma solução alcoólica (33%) (E) p.o. ou água (C) por um período de 15 dias. Foram medidos, durante o tratamento, o padrão de consumo de água e alimentos. Uma hora após a última administração, os animais foram sacrificados e o sangue coletado para análises bioquímicas e hematológicas. O cérebro dos animais foi retirado e dissecado (córtex frontal, n.accumbens, hipotálamo e hipocampo), para análise da concentração de dopamina (DA) e seus metabólitos. Os adultos tratados com álcool apresentaram um padrão de consumo (água e alimentos) menor do que os controles durante todo o tratamento, enquanto os adolescentes experimentais apresentaram uma diminuição no consumo de alimento, mas não de água, a partir do meio do tratamento. Os resultados hematológicos mostraram diferenças significantes entre os grupos para algumas medidas. Glicemia: Ado-E > Ado-C; Hemácias: Ado-C < Adu-C; Ado-E < Adu-E; Segmentados: Ado-E > Ado-C; Linfócitos: Ado-E < Ado-C. Os resultados bioquímicos mostraram que os animais experimentais (E) apresentaram uma atividade da creatina quinase (CK) menor do que os respectivos controles. Adultos-E apresentaram níveis de lactato desidrogenase (LD) menor do que os demais grupos: Adu-C, Ado-E e Ado-C. O etanol pode alterar o padrão de consumo dos adolescentes, aumentar os riscos de hiperglicemia quando administrado durante a adolescência e alterar os padrões hematológicos, podendo causar anemia. A atividade enzimática de enzimas que usam o mesmo cofator (NAD) que o etanol, na metabolização de seus substratos, mostrou-se alterada. As concentrações de DA nas várias regiões cerebrais serão medidas em HPLC.

Estudo do papel do sistema glutamatérgico na sensibilização comportamental ao etanol e na sensibilização cruzada entre estresse e etanol, por meio de investigação farmacológica&#10;Participação do óxido nítrico na sensibilização comportamental ao etanol e na sensibilização cruzada entre estresse e etanol, por meio da medida da atividade da NOS

A proteína VMAT é responsável pelo transporte de monoaminas para dentro das vesículas. O comportamento de animais nocaute com deficiência da proteína transportadora de monoaminas vesicular (VMAT) foi medido após administração de cocaína e anfetamina.&#10;Foram medidos: atividade locomotora, estereotipia, preferência condicionada de lugar

A tirosina quinase Fyn tem um importante papel na mediação da tolerância aguda ao etanol. Recentemente, foi mostrado que a compartimentalização da Fyn à subunidade do receptor NMDA (NMDAR), no hipocampo, regula a fosforilação do NR2B em resposta ao etanol. Esse processo participa da tolerância aguda de NMDAR à inibição ao etanol em cortes hipocampais. Nesse estudo, nós determinamos: 1) se a tolerância agua à inibição ao etanol é mediada por NMDAR que contém NR2B, &quot;in vivo&quot;. 2) se o aumento na sensibilidade aguda ao etanol em camundongos Fyn -/- influi no consumo de etanol ou nos efeitos recompensadores desta droga. O teste de perda de reflexo postural foi usado para estudar os efeitos agudos/sedativos do etanol após injeções i.p. de doses sedativas de etanol. A preferência condicionada de lugar foi usada para estudar as propriedades recompensadoras do etanol. O protocolo de escolha entre 2 garrafas (uma com etanol e outra com água) foi usado para medir a auto-administração de etanol. Os resultados mostram que injeções sistêmicas do antagonista seletivo de NMDAR que contém a subunidade NR2B, ifenprodil,aboliu as diferenças entre Fyn +/+ e Fyn -/- em relação à sensibilidade aos efeitos sedativos agudos do etanol. Além disso, camundongos Fyn-/- e Fyn +/+ não diferiram no consumo voluntário de etanol ou nas propriedades reforçadores do mesmo. Os resultados sugerem que a interação entre Fyn e NR2B é importante para os efeitos agudos sedativos do etanol e que alterações na sensibilidade aguda ao etanol não correlacionam, necessariamente, com os níveis de consumo de etanol ou com as propriedades reforçadores da droga.

O sistema dopaminérgico (DA) mesolímbico, que origina-se na área ventral do tegmento (VTA), está envolvido em muitos comportamentos relacionados à dependência, incluindo auto-administração. O consumo de etanol regulado pela VTA parece ser modulado por receptores GABAA. Uma única exposição prévia ao etanol aumenta o consumo voluntário desta droga em camundongos C57BL/J6. Nesse estudo, nós examinamos as mudanças que ocorrem em sinapses GABA dentro de neurônios DA da VTA após uma única exposição &quot;in vivo&quot; ao etanol. A corrente pós-sináptica inibitória (IPSC) evocada por GABA-A em neurônios DA de animais tratados com etanol exibiu uma depressão pulso-pareada (PPD) comparada com animais controles, que exibiram facilitação pulso-pareada (PPF). A PPD estava presente 1 semana após a exposição aguda ao etanol. O antagonista de receptor GABAB mudou a PPD para PPF, indicando que a ativação de receptores GABAB pode ter um papel em mediar a PPD em camundongos tratados com etanol. A ativação da adenilato ciclase pela forskolina aumentou a amplitude da IPSC de GABAA nos controles mas não nos tratados com etanol. Já um inibidor de PKA diminuiu a amplitude da IPSC de GABAA nos tratados mas não nos controles. Os resultados indicam que a potencialização de sinapses GABAérgicas, dependente de PKA, ocorre em VTA após uma única exposição de etanol e que a potencialização pode ser uma modificação sináptica que permeia o aumento do consumo de etanol em animais com uma história prévia de etanol.

Determinação do papel do fator de liberação da corticotrofina no consumo de etanol, na sensibilidade locomotora e no sistema de recompensa. O estudo usou animais com deficiência de CRF. A deficiência ao CRF levou a um auento excessivo do consumo de etanol, por ter reduzido a sensibilidade aos efeitos locomotores e recompensadores do etanol