Tânia Aparecida Sartori Sanchez Bachega.

Introdução: A hiperplasia adrenal congênita (HAC) por deficiência da 21-hidroxilase é um distúrbio genético que prejudica a síntese de cortisol e/ou aldosterona, resultando em aumento da produção de andrógenos pelas glândulas adrenais. Os sintomas variam desde virilização pré-natal da genitália externa, podendo incluir crises de perda de sal neonatal, com potencial fatal. O tratamento visa corrigir as deficiências hormonais, prevenir crises de insuficiência adrenal e controlar a produção de andrógenos para garantir crescimento, puberdade e fertilidade adequados. A titulação adequada do glicocorticoide ao longo do desenvolvimento é desafiadora, levando a exposição ao hiper ou hipocortisolismo, ambos associados a consequências metabólicas como obesidade, resistência à insulina, diabetes mellitus tipo 2 e hipertensão arterial. O risco cardiovascular (RCV) nessa população é incerto, devido à heterogeneidade no tratamento e nos alvos hormonais entre os centros de acompanhamento. Também, não está claro se o RCV está relacionado ao tratamento com glicocorticoide ou ao próprio hiperandrogenismo. A concentração sérica de HDL colesterol (HDL-c), fator sabidamente determinante no RCV, se mostra variável nos diversos estudos, não havendo até o momento pesquisas sobre sua funcionalidade nessa doença rara. Objetivos: Avaliar o impacto do hiperandrogenismo e da terapia com glicocorticoides sobre o risco cardiovascular de pacientes com as formas clássica e não clássica de HAC, por meio da avaliação da funcionalidade da partícula de HDL e da sua correlação com marcadores precoces de risco cardiovascular. Casuística e métodos: Serão avaliados 40 pacientes portadores de HAC forma clássica, com idade maior do que 18 anos, submetidos à tratamento com acetato de cortisona ou hidrocortisona na infância e baixas doses de dexametasona ou prednisona após obtenção da estatura final, sendo 20 pacientes do grupo de bom controle hormonal e 20 pacientes do grupo de mau controle (andrógenos elevados); os dados serão comparados aos de 20 controles saudáveis, pareados para sexo, idade e IMC. Também, serão avaliadas 40 pacientes, do sexo de feminino, portadoras da forma não clássica (NC) de HAC, com idade média de 33 9 anos, sendo 20 pacientes em tratamento com glicocorticoides, desde o diagnóstico, que serão comparadas com outras 20 pacientes em uso de contraceptivos orais, além de 20 controles saudáveis pareadas para idade e IMC. O RCV será avaliado pela análise da funcionalidade da partícula de HDL, após seu isolamento por ultrafiltração, sendo utilizadas para medir a remoção de 14C-colesterol de macrófagos, inibição da oxidação de LDL e modulação da secreção de citocinas inflamatórias em macrófagos. Além disso, será realizada correlação com a quantificação de gordura visceral por tomografia computadorizada de abdome, com avaliação da resistência insulínica pelo método QUICKI revisado (QUICKr) e com a medida da velocidade de onda de pulso. Justificativa: o estudo objetiva essencialmente elucidar se há aumento de risco cardiovascular nos pacientes com HAC. Utilizaremos metodologias sofisticadas, ainda não estudadas previamente nesta população. Adicionalmente, determinaremos se este aumento de risco está associado ao tratamento ou ao hiperandrogenismo que os pacientes são submetidos, bem como com o regime de tratamento escolhido nas pacientes com forma NC de HAC. Com uma casuística homogênea em relação ao esquema terapêutico empregado desde a infância até a idade adulta, esse estudo se diferencia dos demais. Os resultados auxiliarão em questões ainda controversas sobre alvos terapêuticos, e provavelmente contribuirão para a melhora da qualidade de vida desses pacientes.

A triagem neonatal (TN) tem o objetivo de diagnosticar precocemente doenças frequentes e graves, em fase pré-sintomática. APAE-SP, foi pioneira na triagem neonatal no Brasil, começando pela triagem da fenilcetonúria em 1986. Paulatinamente a TN foi se expandido para o Brasil e para se obter equidade, em 06/06/2001, a portaria 822 do Ministério da Saúde (MS) cria o Programa Nacional de Triagem Neonatal (PNTN), que prevê financiamento dos testes neonatais/confirmatórios, seguimento dos afetados e dispensação das medicações. Inicialmente o programa incluía o diagnóstico de 4 doenças, apenas 10 anos depois foi prevista a inclusão de 2 outras. A Disc. de Endocrinologia-HCFMUSP enviou para o MS dados das comorbidades relacionadas ao diagnóstico tardio de sua casuística de indivíduos com Hiperplasia Adrenal Congênita (HAC), que resultou na sua inclusão na sua PNTN. Subsequentemente, Gyselle Hayashi e Profa Tânia participaram de Grupo de Trabalho da Secretaria de Saúde do Estado de São Paulo na criação do fluxo da TN da HAC. Desde então, o HCFMUSP mantém parceria com o Instituto Jô Clemente (antiga APAE-SP), para otimizar o diagnóstico da HAC na TN pública, que resultou em publicações científicas, 1o lugar do Prêmio Abril Saúde-2015 e Mestrado de Giselle, gerente do IJC. No atual fluxo de TN da HAC em SP, os recém-nascidos (RN) com o primeiro teste moderadamente alterado, com a dosagem da 17OH-progestrona por método imunofluorimétrico, são convocados para nova coleta. Considerando que a maioria dos testes alterados representam falso-positivos, este procedimento causa stress para as famílias e retarda a elucidação diagnóstica. Ressaltamos que nem sempre os municípios podem fornecer transporte para estas famílias, o que coloca os RNs afetados em risco de morte pela crise de perda de sal. A Endocrinologia da FMUSP tem como uma de suas linhas de pesquisa a triagem neonatal. Desta forma, este projeto tem 2 objetivos, o primeiro será o de otimizar o tempo do diagnóstico da HAC, através da padronização da dosagem da 17OH-progesterona por LC-MS/MS nas amostras neonatais coletadas inicialmente, evitando a convocação destes RNs. Sabidamente, a metodologia de LC-MS/MS é o método padrão ouro para a dosagem de esteroides e seu emprego na primeira amostra com resultados alterados ajudará na diferenciação diagnóstica. Adicionalmente, a FEPE (Fundação Ecumênica de Proteção ao Excepcional, em Curitiba) é outro laboratório de renome, credenciado no PNTN. A FEPE participará com o envio de amostras de afetados pela HAC, a fim de termos número significativo de casos para análise de valores preditivos positivos e negativos. Paralelamente, dois alunos de mestrado e doutorado virão para SP, para aprendizado das metodologias de LC-MS/MS e de diagnóstico molecular da HAC para implantação em Curitiba. Em 26/05/21, o Sr Antonie Daher (fundador da Casa dos Raros-CDR) e a Profa Tânia (presidente da SBTEIM), participaram de movimento social para expandir o número de doenças a serem rastreadas pelo PNTN, além de terem prestado assessoria científica para o sancionamento da lei 14.154, que prevê a ampliação do PNTN para ~ 53 doenças. Com a ampliação, torna-se necessária a otimização do fluxo da TN, a fim de que possa colocar em prática a expansão prevista na lei. O segundo objetivo deste projeto envolve a educação de gestores públicos em TN. Embora o PNTN esteja evoluindo no Brasil, o ritmo ainda é lento. O fluxo de TN envolve não apenas a excelência dos índices de TN como também depende do envolvimento de gestores na organização, através: de programas de educação da famílias durante o pré-natal, da disponibilização do transporte das amostras para os laboratórios, da inserção dos pacientes em redes terciárias e pela dispensação das medicações. Tendo em vista a rotatividade dos gestores públicos, identificamos esta lacuna de educação. Utilizaremos a expertise da CDR, que

As diferenças do desenvolvimento sexual (DDS) representam um conjunto de doenças congênitas em que o desenvolvimento de sexo cromossômico, gonadal ou anatômico é atípico. O conhecimento atual permite estabelecer um diagnóstico molecular em apenas cerca de 50 dos pacientes. Novos mecanismos de regulação gênica estão emergindo como novas causas de DDS e explicando diferentes fenótipos causados pela mesma mutação gênica. A identificação das causas moleculares das DDSs amplia o conhecimento dos mecanismos de determinação gonadal. Neste projeto, vamos utilizar novos recursos para abordar o genoma humano com os objetivos de (1) identificar novos genes candidatos como causa de 46,XY DDS e 46,XX DDS utilizando o sequenciamento de todo exoma; (2) investigar o papel de mecanismos epigenéticos ( metilação e miRNAs) na etiologia e modulação do fenótipo de pacientes com DDS 46,XX e 46,XY.

Introdução: A hiperplasia adrenal congênita por deficiência da 21-hidroxilase é um erro herdado do metabolismo que resulta no comprometimento da síntese do cortisol e/ou aldosterona e aumento da produção adrenal de andrógenos. Apresenta espectro fenotípico que varia desde virilização pré-natal da genitália externa, associada ou não à crise de perda de sal no período neonatal, podendo evoluir para óbito. Seu tratamento objetiva suprir as deficiências de glico e mineralocorticoide a fim de prevenir a crise de insuficiência adrenal, reduzir a secreção dos esteroides androgênicos e promover crescimento, puberdade e fertilidade adequados. Porém, a titulação da dose ideal de glicocorticoide nas diversas fases do desenvolvimento é um desafio na prática clínica e, frequentemente, os pacientes ficam expostos ao hiper ou hipocortisolismo, com ambos podendo ter consequências metabólicas como obesidade, resistência à insulina, diabetes mellitus tipo 2 e hipertensão arterial sistêmica. Os dados sobre risco cardiovascular nessa população permanecem incertos, possivelmente devido à heterogeneidade do tratamento e de seus alvos hormonais nos diversos centros de acompanhamento, não sendo bem estabelecido também se esse risco estaria relacionado ao tratamento com glicocorticoide ou ao próprio hiperandrogenismo. A concentração sérica de HDL colesterol, fator sabidamente determinante no RCV, se mostra variável nos diversos estudos, não havendo até o momento pesquisas sobre sua funcionalidade nessa doença rara. Objetivos: Avaliar o impacto do hiperandrogenismo e da terapia com glicocorticoides sobre o risco cardiovascular de pacientes com as formas clássicas de HAC, por meio da avaliação da funcionalidade da HDL e da sua correlação com marcadores precoces de risco cardiovascular: gordura visceral e velocidade da onda de pulso. Casuística e métodos: Serão avaliados 40 pacientes portadores de HAC forma clássica, com idade maior que 18 anos, seguidos em um único centro, submetidos à tratamento com acetato de cortisona ou hidrocortisona na infância e baixas doses de dexametasona ou prednisona após obtenção da estatura final, sendo 20 pacientes do grupo de bom controle hormonal e 20 pacientes do grupo de mau controle (andrógenos elevados); os dados serão comparados aos de 20 controles saudáveis, pareados para sexo, idade e IMC. O RCV será avaliado pela análise da funcionalidade da partícula de HDL, após seu isolamento por ultrafiltração; as HDL serão utilizadas para medir a remoção de 14C-colesterol de macrófagos; para inibição da oxidação de LDL e para modular a secreção de citocinas inflamatórias em macrófagos estimulados com lipopolissacarídeos. Além disso, será realizada correlação com a quantificação de gordura visceral por tomografia computadorizada de abdome, com avaliação da resistência insulínica pelo método QUICKI revisado e com a medida da velocidade de onda de pulso, que identifica doença aterosclerótica subclínica, medida pela velocidade de propagação de um pulso entre as artérias carótida comum e femoral. Justificativa: o estudo objetiva essencialmente elucidar se há aumento de risco cardiovascular nos pacientes com HAC. Utilizaremos metodologia ainda não estudada previamente nesta população. Determinaremos se este aumento de risco está associado ao tratamento ou ao hiperandrogenismo. Com uma casuística homogênea em relação ao esquema terapêutico empregado desde a infância até a idade adulta, esse estudo se diferencia dos demais. Os resultados auxiliarão em questões ainda controversas sobre alvos terapêuticos, e provavelmente contribuirão para a melhora da qualidade de vida desses pacientes.

Hiperplasia adrenal congênita (HAC) é um distúrbio genético sério, cronicamente debilitante e
de risco à vida, caracterizado pelo comprometimento da síntese adrenal do cortisol e consequente
superprodução de andrógenos adrenais. A deficiência de cortisol perturba o equilíbrio do eixo
hipotalâmico-pituitário-adrenal (HPA) por meio da remoção do feedback negativo ao hipotálamo e à
glândula pituitária fornecido pelos níveis normais de cortisol. Isto leva à hipersecreção
compensatória do fator de liberação de corticotropina (CRF) pelo hipotálamo, superprodução de
hormônio adrenocorticotrópico (ACTH) pela glândula pituitária e consequente hiperplasia adrenal e
superprodução de hormônios adrenais à jusante, como 17-hidroxiprogesterona (17-OHP) e
androstenediona (A4), levando ao excesso de andrógeno. O excesso de andrógeno pode resultar em
menstruações irregulares, amenorreia, hirsutismo e virilização nas mulheres; tumores testiculares
de remanescente adrenal (TARTs) nos homens; e produção aumentada de sebo, acne, perfis de
pressão arterial vespertina alterados e comprometimento da fertilidade em qualquer dos sexos.
O tratamento padrão atual para HAC é o uso a longo prazo de níveis suprafisiológicos de
glicocorticoides (GCs) para substituir o cortisol deficiente e suprimir a superprodução de andrógeno.
Esta é uma terapia problemática com efeitos colaterais significativos (por exemplo, perda de
densidade mineral óssea, síndrome de Cushing iatrogênica, distúrbios metabólicos e risco
cardiovascular elevado), uma janela terapêutica estreita e baixa eficácia global do tratamento. Uma
opção de tratamento não esteroidal que controle os níveis de andrógeno e reduza a dependência do
participante de GCs de alta dose seria um benefício significativo para participantes com HAC. Devido
à natureza séria da HAC e as limitações e riscos da terapia crônica com GC, novos tratamentos são
urgentemente necessários para participantes com HAC.
Tildacerfont, um antagonista de molécula pequena potente e altamente seletivo de receptores CRF
tipo 1 (CRF1) na glândula pituitária, está sendo estudado para o tratamento de HAC combase em
sua capacidade de bloquear o sinal de CRF produzido pelo hipotálamo, reduzindo assim a
superprodução de ACTH pela glândula pituitária e reduzindo o acúmulo excessivo de
hormônios adrenais à jusante. Este mecanismo de ação foi validado na HAC em estudos clínicos
de fase mais inicial de tildacerfont. Devido a seu mecanismo de ação, tildacerfont podepermitir que
um participante com HAC tenha níveis de andrógeno normais enquanto administra GC em níveis de
reposição fisiológicos.
Até o momento, tildacerfont demonstrou um perfil de segurança aceitável em doses eficazes em
estudos de toxicologia não clínica, estudos clínicos de Fase 1 em voluntários hígidos e estudos de
Fase 2 em participantes adultos com HAC clássica. Os dados de 2 estudos de Fase 2 anteriores
demonstraram a prova de conceito para tildacerfont como um tratamento para HAC, com reduções
significativas em ACTH (demonstrando envolvimento alvo) e 17-OHP e A4 (demonstrando eficácia da
redução de hormônios adrenais à jusante na HAC) e mostraram melhora contínua nos níveis de
biomarcador em um período de 12 semanas.
Em contraste com os estudos de Fase 2 de tildacerfont concluídos anteriormente, que foram
menores, abertos e de duração mais curta, o Estudo SPR001-203 é um estudo maior, randomizado,
duplo-cego, controlado por placebo, de variação de dose que investigará a eficácia e segurança de
até 70 semanas de tratamento com tildacerfont em participantes com HAC clássica que apresentam
biomarcadores elevados na visita basal com seu regime de GC atual. Um Período de Extensão Aberta
opcional fornecerá tratamento aberto adicional com tildacerfont na dose de 200 mg QD por até 240
semanas.

O estudo avalia os efeitos de tomar a pílula anticoncepcional na produção dos hormônios
masculinos (andrógenos), muitas vezes produzidos em excesso na Hiperplasia adrenal
congênita (HAC), e em todo o metabolismo em pacientes adolescentes do sexo feminino
e adultas jovens com HAC. Estamos fazendo este estudo para explorar uma possível
otimização da terapia (redução do nível de andrógeno, possivelmente diminuindo dose de
cortisona) para mulheres com HAC.

Analisar a performance do diagnóstico clínico e pela triagem neonatal da Hiperplasia Adrenal Congênita, na América Latina.

As Diferenças do Desenvolvimento Sexual (DDS) representam um conjunto de doenças congênitas em que o desenvolvimento de sexo cromossômico, gonadal ou anatômico é atípico. O conhecimento atual permite estabelecer um diagnóstico molecular em apenas cerca de 50 dos pacientes. Novos mecanismos de regulação gênica estão emergindo como novas causas de DDS e explicando diferentes fenótipos causados pela mesma mutação gênica. A identificação das causas moleculares das DDSs amplia o conhecimento dos mecanismos de determinação gonadal. Neste projeto, vamos utilizar novos recursos para abordar o genoma humano com os objetivos de (1) identificar novos genes candidatos como causa de 46,XY DDS e 46,XX DDS utilizando o sequenciamento de todo exoma; (2) investigar o papel de mecanismos epigenéticos (metilação e miRNAs) na etiologia e modulação do fenótipo de pacientes com DDS 46,XX e 46,XY. (AU)

A dose de cloridrato de nevanimibe para o tratamento da hiperplasia adrenal congênita clássica

Avaliação de risco cardiovascular em pacientes com a forma não clássica da deficiência da 21-hidroxilase submetidos ao tratamento com glicocorticóides em longo prazo

Análise do custo-efetividade da triagem neonatal para a hiperplasia adrenal congênita: comparação de duas populações diagnosticadas com e sem triagem neonatal.

Análise da relação do desempenho das funções cognitivas com as concentrações séricas dos esteroides sexuais em homens idosos.

Prevalência dos fatores de risco cardiovascular em transexuais femininos em tratamento com ésteres de testosterona e sua correlação com as variantes polimórficas do gene do receptor androgênico

Projeto que visa detectar variantes raras envolvidas na patogênese da SOP em pacientes com fenótipos atípicos, extremos ou casos familiares.

A HAC é uma doença autossômica recessiva, de significativa morbi/ mortalidade e incidência elevada. O quadro clínico varia desde virilização da genitália externa nas meninas, causando erros de determinação sexual, até desidratação hiponatrêmica e choque nos primeiros dias de vida. Recentemente, a triagem para HAC foi incluída no PNTN em 9 estados brasileiros, com programação de abranger todo o país até 2015. A dosagem da 17OH-progesterona no papel de filtro (N17-OHP) é eficaz no primeiro teste de triagem, porém apresenta alta taxa de resultados falso-positivos (FP) e negativos (FN), atribuídos sobretudo à prematuridade e tempo de vida na coleta, respectivamente. Entretanto, uma triagem positiva exige teste confirmatório sérico e 7 a 17% deles mantêm 17-OHP alterada, fazendo com que estes recém-nascidos (RNs) sejam mantidos em seguimento. Não há na população brasileira estudos avaliando a eficácia das diferentes métodos diagnósticos na triagem neonatal (TN). Objetivos: determinar valores da N17-OHP de acordo com o grau de prematuridade (4 faixas de peso ao nascimento-PN) em amostras coletadas antes e depois de 72 horas de vida. Avaliar qual dosagem hormonal no teste confirmatório sérico é mais eficaz pela metodologia LC-MS/MS. Casuística: análise de 100.000 RNs submetidos à TN em laboratórios do PNTN. Métodos: determinação dos valores de referência da N17-OHP, para convocação do RN de rotina e de emergência, para cada grupo de PN e tempo de vida. RNs com N17-OHP e 2x Percentil 99,8th ou e 99,5th na repetição do teste do pezinho serão convocados para dosagem dos esteroides no soro. Amostras com 17-OHP sérica elevada serão submetidas ao sequenciamento do gene CYP21A2, padrão-ouro para confirmação ou exclusão diagnóstica. Resultados esperados: otimização do diagnóstico da HAC no PNTN, com redução dos FP, diminuindo os custos do Programa.

A pubarca precoce é caracterizada pelo aparecimento de pêlos pubianos antes dos 8 anos nas meninas e 9 anos nos meninos. Ela é dita idiopática quando outras causas orgânicas como tumores virilizantes ou hiperplasia adrenal congênita são excluídas. No entanto, esse grupo de pacientes não é homogêneo, pode se manifestar ou não com aumento dos precursores androgênicos, deidroepiandrosterona (DHEA) e sulfato de deidroepiandrosterona(DHEAS), e/ou evoluir na idade adulta com a síndrome de ovários policísticos e complicações metabólicas como obesidade, resistência insulínica, diabetes e dislipidemia. Recentemente uma nova tecnologia denominada metabolômica está sendo amplamente utilizada na pesquisa médica com o objetivo de investigar a fisiopatologia das doenças e ainda caracterizar biomarcadores indicadores de prognóstico e de resposta terapêutica. A metabolômica consiste na análise qualitativa e quantitativa de todas as pequenas moléculas, resultantes do metabolismo celular, presente em determinada amostra de fluido biológico ou tecido. O presente estudo objetiva caracterizar nos pacientes com pubarca precoce idiopática o aumento de espécimes androgênicas e/ou seus metabólitos ainda não detectadas por metodologias convencionais de dosagem hormonal, utilizando estratégia de metabolômica. Adicionalmente, pretende avaliar se o perfil dos metabólitos esteróides é capaz de se correlacionar com maior frequencia de complicações metabólicas. A casuística desse subprojeto consta de 30 crianças avaliadas no Hospital das Clínicas da FMUSP: Grupo 1 - com pubarca precoce idiopática e todos os andrógenos normais; Grupo 2 ? com pubarca precoce idiopática e valores de DHEA e DHEAS aumentados; Grupo 3 ? controles normais. Todas as crianças terão uma amostra de soro e urina coletadas. As amostras de sangue e a alíquota de urina serão encaminhadas para o Laboratório Fleury, onde serão analisadas. As amostras serão submetidas a análises por cromatografia líquida de ultra perfomance (UPLC)

Utilização da farmacogenética na omitização da reposição hormonal com glicocorticoide na terapia da hiperplasia adrenal congênita.

A Hiperplasia Adrenal Congênita por deficiência da 21-hidroxilase (HAC) é uma doença de mortalidade neonatal elevada sendo elegível para Programas Públicos de Triagem Neonatal (TN). É causada por mutações no gene CYP21A2, as quais acarretam diferentes comprometimentos da atividade enzimática com amplo espectro de manifestações clínicas. Apesar da eficiência da TN diagnosticar os casos graves, a taxa elevada de resultados falso-positivos (RFP), principalmente relacionados à prematuridade, é um dos maiores problemas, pois eleva os custos dos programas e causa ansiedade nas famílias. Objetivo: Determinar se os valores da 17OH-progesterona neonatal (N17OHP) das coletas no terceiro dia de vida diferem significativamente das coletas a partir do quarto dia. Determinar seus valores de corte com o melhor percentil da N17OHP (99,5 ou 99,8) de acordo com o peso ao nascimento e idade no momento da coleta a ser utilizado na TN que ofereça a taxa menor de RFP. Métodos: Foi avaliada, retrospectivamente, a N17OHP de 271.810 Rns de acordo com o tempo de vida na coleta (G1: 48 - <72h e G2: &#8805;72h) e peso ao nascimento (P1: &#8804;1.500g, P2: 1.501-2.000g, P3: 2.001-2.500g e P4: &#8805;2.500g), pelo método imunofluorimétrico. N17OHP com valores elevados foram confirmados no soro por Espectrometria de Massas em Tandem ? LC-MS/MS. Recém-nascidos (Rns) afetados e/ou assintomáticos e com valores persistentemente elevados de 17OHP sérica foram submetidos ao estudo molecular. Resultados: os valores da N17OHP no grupo G1 realizado no terceiro dia de vida foram significativamente menores do que em G2 em todos os grupos de peso (p <0.001). O percentil 99,8 da N17OHP foi o melhor valor de corte para distinguir os Rns não afetados dos afetados: G1 (P1: 120; P2: 71; P3: 39 e P4: 20 ng /mL) e no G2 (P1: 173; P2: 90; P3: 66 e P4: 25 ng/mL) e a taxa de RFP em ambos os G1 e G2 foi de 0,20% para o percentil 99,8 em relação aos 0,5% encontrados nos percentis 99,5 em ambos os grupos. Vinte e seis Rns apresentaram a forma perdedora de sal ? PS (13M e 13F), nestes a N17OHP variou de 31 a 524 ng/mL no grupo G1 e de 53 a 736 ng/mL no grupo G2. Três Rns foram diagnosticados com a forma virilizante simples (1M e 2F) e os valores da N17OHP variaram de 36 a 51 ng/mL. Resultados falso-negativos não ocorreram. O valor preditivo positivo (VPP) no teste do papel filtro foi de 5,6% e 14,1% nos grupos G1 e G2, respectivamente, ao se utilizar o percentil 99,8 enquanto que valores de 2,3% e 7% foram observados no percentil 99,5. Dentre os casos com TN alterada (RFP), 24% também apresentaram 17OHP sérica elevada quando dosada por LC-MS/MS. Os casos assintomáticos foram acompanhados até normalização da 17OHP sérica e/ou submetidos ao estudo molecular, que identificou dois Rns com genótipo que prediz a forma não clássica Conclusão: a melhor estratégia para otimização do diagnóstico da HAC na triagem neonatal é utilizar o percentil 99,8 na dosagem da N17OHP em dois grupos de tempo de vida na coleta, sendo também subdivididos em quatro de peso ao nascimento. Esta estratégia se mantém eficaz no diagnóstico da forma perdedora de sal e reduz de forma significativa a taxa de RFP.

A deficiência da 21-hidroxilase (21OHD) é um frequente erro herdado do metabolismo que resulta no comprometimento da síntese do cortisol e/ou aldosterona e no aumento da produção de andrógenos. A doença é caracterizada por uma diversidade fenotípica, variando desde virilização pré-natal da genitália externa de fetos femininos e pós-natal em ambos os sexos, com ou sem perda de sal, até quadros assintomáticos. Em seu tratamento é necessária reposição com glicocorticóide para se evitar a insuficiência adrenocortical e os sinais de virilização. Um fino ajuste na dose diária da medicação é necessário para obter bom controle hormonal, bem como evitar sub ou super tratamento, com o objetivo de preservar o potencial de estatura final e fertilidade. Entretanto, tem sido observado o desenvolvimento de obesidade e/ou síndrome metabólica durante a terapia destes pacientes; porém, a prevalência destas complicações ainda não é conhecida, bem como se estão associadas com a dose utilizada de glicocorticóide ou se existem fatores genéticos predisponentes. Uma vez que os glicocorticóides apresentam importante função na regulação da distribuição da gordura corporal e no desenvolvimento da síndrome metabólica, nossos objetivos são: 1) determinar a incidência de obesidade e de síndrome metabólica em pacientes com a forma clássica da deficiência da 21-hidroxilase em tratamento com glicocorticóide e correlacionar com a dose cumulativa total; 2) avaliar se existem fatores genéticos predisponentes através da determinação da distribuição alélica de genes envolvidos na ação e/ou metabolismo dos glicocorticóides (NR3C1, 11(3HSD1, CYP3A4, CYP3A7) em pacientes com a deficiência da 21-hidroxilase, com a síndrome metabólica e em indivíduos controles; 3) avaliar se o citocromo P4503A7, o qual se correlacionou com a menor dose de glicocorticóide durante a terapia com glicocorticóide, apresenta atividade de 21-hidroxilação extra-adrenal in vitro. Casuística: 100 pacientes 1 com a deficiência da 21 hidroxilase, 50 pacientes com síndrome metabólica e 50 controles. Metodologia: Serão analisados dados antropométricos e laboratoriais dos prontuários dos 3 grupos de indivíduos. Dos pacientes com a deficiência da 21-hidroxilase, também será analisada a dose total cumulativa utilizada de glicocorticóide. DNA genômico dos indivíduos serão extraídos de leucócitos periféricos, os genes acima citados serão amplificados por PCR, os produtos submetidos à reação de sequenciamento automático direto com o kit ABI Prism Big Dye Terminator Cycle Sequencing Ready Reaction (Applied Biosystems, Perkin-Elmer Corporation, Inc., Foster City, EUA) e à eletroforese capilar em sequenciador automático, ou também à digestão enzimática. A capacidade de 21-hidroxilação da enzima P4503A7 será avaliada através de sua expressão in vitro em E. coli, subseqüentes ensaios enzimáticos com 17OH-progesterona triciada e análise em cromatografia de camada fina.

A deficiência da 21-hidroxilase (21OHD) é uma doença hereditária que compromete a síntese do Cortisol, sendo necessária a reposição com glicocorticoides (GC). Ajustes na dose de GC tornam-se importantes durante o período crescimento, pois doses elevadas ou subdoses levarão ao comprometimento da estatura. Entretanto, nota-se diversidade interindividual nesta dose para se obter bom controle. Supomos que esta variação se relacione ao metabolismo e/ou ação dos GC. Dentre os citocromos hepáticos envolvidos no metabolismo, destaca-se o P4503A7, e quando presente a variante CYP3A7*1C, este passa a ser expresso na vida pós-natal. A variante A503V do gene POR, doador de elétrons, foi associada a diminuição da produção de androgênios. Polimorfismos no gene do receptor de GC, os quais aumentam ou diminuem a sensibilidade ao hormônio, também podem alterar a necessidade diária de glicocorticoide. Avaliaremos se as variantes gênicas supracitadas interferem na dose diária de glicocorticoide no tratamento da 21OHD. Estes resultados poderiam otimizar o tratamento

A deficiência da 21-hidroxilase (21-OHD) é uma doença autossômica recessiva que compromete a síntese de cortisol e/ou aldosterona. É a causa mais frequente de distúrbio da diferenciação sexual 46,XX. Apresenta uma diversidade fenotípica, a qual é decorrente de mutações no gene CYP21A2. Observa-se forte correlação do comprometimento da atividade enzimática conferida pelo genótipo com a forma de apresentação clínica e com os valores hormonais. Entretanto, esta correlação não é observada com o grau de virilização da genitália externa em mulheres. Variações individuais na sensibilidade periférica aos andrógenos poderiam ser responsáveis por esta diversidade fenotípica. A ação dos andrógenos é mediada pelo receptor de andrógenos (RA) e o seu gene codificador apresenta polimorfismo de repetições CAG, que altera a atividade de transativação. Em estudo anterior observamos uma influência do trato CAG no fenótipo de virilização genital; entretanto, esta associação não ocorreu em todos os casos. Supomos que variações interinviduais no metabolismo da testosterona na vida fetal também poderiam interferir no fenótipo de virilização. O principal citocromo metabolizador de testosterona no fígado fetal é o P4503A7, seu gene (CYP3A7) possui polimorfismos que podem alterar a sua atividade catalítica. Outro fator genético que poderia contribuir para diferenças na metabolização da testosterona é o fator de transcrição CAR (receptor androstane constitutivo), que se liga ao elemento de resposta do promotor do CYP3A7. O seu gene (NR1I3) também é polimórfico e estes podem modular a atividade de transativação dos P4503A. Objetivos: 1) Caracterizar a distribuição alélica dos genes CYP3A7 e NR1I3 na população normal brasileira e nas pacientes com a forma clássica da 21-OHD. 2) Correlacionar as variantes alélicas presentes nos genes envolvidos no metabolismo pré-natal da testosterona com o grau de virilização genital de pacientes com a forma clássica da deficiência da 21-OHD. Casuística: foram

O Instituto é constituído de vários projetos nas diferentes àreas da saúde &#10;humana e da àrea de Reprodução (projeto do qual participam a Endocrinolgia e a Ginecologia).