Andréa Cristina Fogaça.

Auxílio Regular FAPESP (2020/16462-7)

Acordos de Cooperação / GACR - Czech Science Foundation / GACR -Projeto de Pesquisa - Regular

Os carrapatos apresentam hábito de vida parasitário, alimentando-se obrigatoriamente do sangue e/ou da linfa de vertebrados. Como consequência da hematofagia, esses artrópodes transmitem uma grande diversidade de patógenos. Dentre as riquetsioses transmitidas por carrapatos, destacam-se a Anaplasmose Bovina (AB) e a Febre Maculosa Brasileira (FMB). A AB é uma doença severa que acomete os bovinos, sendo ocasionada por Anaplasma marginale e transmitida, no Brasil, pelo carrapato Rhipicephalus microplus. Apesar de apresentar importância médico-veterinária e econômica, não existe uma vacina comercial eficiente para o controle de R. microplus nem da AB. Similarmente, não existem vacinas para a prevenção da FMB, a riquetsiose mais severa que acomete o homem. No nosso país, o agente etiológico da FMB, Rickettsia rickettsii, é transmitido por carrapatos do gênero Amblyomma. O presente projeto tem como objetivo elucidar os fatores moleculares envolvidos na interação entre carrapatos, riquétsias e os hospedeiros vertebrados. Para isso, reunimos uma rede coesa de pesquisadores com linhas de pesquisa complementares. Os dados obtidos poderão levar à identificação de alvos para o desenvolvimento de vacinas tanto para o controle de carrapatos quanto da AB e da FMB. Além disso, propomos investigar a susceptibilidade de A. marginale a antimicrobianos, permitindo um controle mais efetivo da AB através de quimioprofilaxia, prática cada vez mais utilizada em associação à vacinação.

A Febre Maculosa das Montanhas Rochosas, conhecida no Brasil como Febre Maculosa Brasileira (FMB), é a riquetsiose mais grave que acomete o homem. O agente etiológico da FMB, a bactéria intracelular obrigatória Rickettsia rickettsii, é transmitida pela picada de diferentes espécies de carrapatos. No Brasil, os carrapatos Amblyomma cajennense e A. aureolatum são os dois principais vetores. Além da baixa prevalência de carrapatos infectados por R. rickettsii em áreas endêmicas para a FMB, carrapatos experimentalmente infectados apresentam menores taxas reprodutivas e de sobrevivência. Esses dados sugerem que a bactéria também seja patogênica para os seus carrapatos vetores. Com o objetivo de elucidar os mecanismos moleculares de patogenicidade de R. rickettsii para seus vetores, determinamos os efeitos da infecção sobre o perfil de expressão gênica de A. aureolatum e de A. cajennense. Observamos a indução dos genes codificadores de um peptídeo antimicrobiano (hebraeína), proteínas com domínio de inibidor de serino-proteases Kunitz-type, proteínas secretadas e proteínas mitocondriais nas glândulas salivares de ambas as espécies. O objetivo geral do presente projeto é determinar se a modulação gênica observada, de fato, reflete em alterações no conteúdo proteico nas glândulas salivares de carrapatos infectados. Para tal, propomos utilizar uma abordagem proteômica. Além disso, pretendemos identificar as proteínas e lipídeos que são diferencialmente secretados na saliva de carrapatos infectados. Assim, os objetivos específicos do presente projeto são determinar, utilizando espectrometria de massas (MS): (i) o proteoma (conjunto de proteínas) das glândulas salivares e (ii) o proteoma e o lipidoma (conjunto de lipídeos) da saliva de A. aureolatum infectados ou não por R. rickettsii. Algumas das proteínas e lipídeos identificados por MS serão, no futuro, selecionadas para a determinação do seu papel específico na aquisição e na transmissão da bactéria.

O controle e a prevenção de doenças infecciosas e parasitárias, incluindo
aquelas transmitidas por artrópodes hematófagos permanecem uma meta distante. Nas
últimas décadas tem se evidenciado cada vez mais que os medicamentos até então
empregados possuem eficácia variável e muitos efeitos adversos. Esse cenário alarmante traz à tona a necessidade de abordagens inovadoras no sentido de se entender os detalhes da interação vetor-patógeno-hospedeiro. Nesse contexto, o Núcleo de Apoio à Pesquisa em Moléculas Bioativas de Artrópodes Vetores (NAP-MOBIARVE) tem como objetivo identificar e caracterizar alvos potenciais para o desenvolvimento de novos medicamentos para controle/tratamento dessas doenças ou ainda para o melhoramento da eficácia de drogas pré-existentes. Esperamos com
esse projeto iniciar uma revolução na pesquisa de moléculas bioativas provenientes de
artrópodes vetores, gerando conhecimentos úteis para a área de biologia desses
ectoparasitas que poderão desvendar moléculas que facilitam a invasão e a infecção de patógenos, futuros candidatos para vacinas e de controle dos vetores. Outras áreas não diretamente relacionadas também se beneficiarão com a criação de ferramentas bioquímicas e farmacológicas, descoberta de anti-inflamatórios, imunomoduladores, antimicrobianos, antiparasitários e antitumorais.