Heitor Franco de Andrade Junior.

A leishmaniose visceral (LV), epidêmica no Brasil, têm sido estudados usando antígenos clássicos ou proteicos em geral. Haptenos são macromoléculas de peso molecular entre 1 e 5 KDa que são compostas por peptídeos, polissacarídeos pequenos e lipídios complexos, e que tem a capacidade de reagir com anticorpos e células imunes de forma incompleta, talvez interferindo na resposta imune. Várias doenças crônicas humanas cursam com altos níveis de anticorpos, mas a mais comum é a LV. Métodos de cromatografia de exclusão molecular permitem separar estas moléculas de extratos brutos de promastigotas, possibilitando sua purificação e caracterização, além de sua associação com moléculas carreadoras e assim uso em ensaios clássicos. Neste projeto, pretendemos estudar a bioquímica e a imunologia de haptenos de extratos brutos de promastigotas e amastigotas axênicos de L. (L.) infantum chagasi por cromatografia de exclusão molecular sequencial. Isto envolve, a: quantificação por dosagem de açucares; b: estudos estruturais por MALDI-TOF e espectrometria de massa; c: identificação e quantificação destes haptenos em urina ou sangue de modelos experimentais; d: determinação de anticorpos específicos por ensaios de fase sólida de captura de anticorpos ou com híbridos seus com proteínas carreadoras em modelos experimentais de hamsteres ou de camundongos BALB/C deficiente geneticamente de ³-interferon; e: estudos de seus efeitos sobre a resposta imune nestes modelos, através de estudos in vivo e in vitro. Isto permitirá determinar se estes haptenos interferem com a resposta imune na LV na imunossupressão e doença visceral e, portanto, com importância clínica e patogenética.

A malária humana, grave endemia mundial, cursa com diferentes graus de severidade, tanto associado ao parasita ou características dos pacientes. Para um mesmo parasita, em especial para o P. falciparum, parece não haver um determinante parasitário especifico na determinação da agressividade da doença humana. O controle da infecção depende do baço e de ampliação harmônica da estrutura esplênica associada a resposta imune, mediada por quimiocinas. Temos estudado o eixo CXCL12-CXCR4 em malárias de roedores, mostrando que uma resposta adequada de células CD11c+ está associada a menor morbidade da infecção, e que a suplementação de CXCL12 pode reverter parcialmente esta gravidade. Esta quimiocina liga-se a seus receptores CXCR4 nas células linfóides e hematopoéticas. Na infecção pelo HIV, onde o CXCR4 é um co-receptor do vírus, existem haplótipos de CXCL12 que foram relacionados à pior progressão da infecção e que são altamente prevalentes na África, onde podem ter sido selecionados pela intensa endemia malárica. Recentemente, foi descrito um novo receptor para a CXCL12, o CXCR7, com funções vasculares e inflamatórias. Neste estudo, pretendemos estudar a freqüência de alelos para estes genes em populações do Acre, com histórico de malária e sua gravidade e em populações africanas, procurando evidenciar diferenças de freqüências de haplótipos do eixo CXCL12-CXCR4/CXCR7 relacionadas a gravidade da malária.

Neste projeto estão sendo realizados estudos sobre os principais vírus responsáveis por quadros de febres hemorrágicas no Brasil, quais sejam, febre amarela, dengue, hantavírus, e hepatites virais B e D. O programa de pesquisa do INCT de Febres Hemorrágicas Virais é composto de 7 projetos e estão sendo desenvolvidos de forma complementar e contam com a participação do Instituto Evandro Chagas (Seção de Arbovirologia e Febres Hemorrágicas; Seção de Hepatopatias e Seção de Patologia); Universidade de São Paulo (Departamento de Patologia e Gastroenterologia); Instituto Butantã (Virologia), Laboratório Central do Amapá e Laboratório Central do Tocantins. As pesquisas envolvem o desenvolvimento de novos métodos diagnósticos (sorológicos e moleculares); estudo da epidemiologia molecular das febres hemorrágicas virais no Brasil; estudo da patogenia e imunopatologia dessas viroses incluindo as respostas imunes inata e adaptativa com mensuração de diversos marcadores celulares e citocinas, bem como estudos genéticos de susceptibilidade ao dengue e de cepas virais de dengue associadas com quadros de encefalites.

Este projeto visa a determinação das populações celulares envolvidas na hematopiese Pós-Irradiação, associada a recuperação de células tronco por uso de quimiocinas recombinantes, em especial o SDf-1.

Com o aumento dos casos de Leishmaniose em todo o mundo,como no Brasil,a OMS incluiu a doença dentre as seis mais importantes.Devido ao aumento dos casos de resistência ao tratamento ulizado,assim como a alta toxidade das drogas e seus acentuados efeitos colaterais,os quais muitas vezes,impedem o uso de determinadas drogas.Este projeto visa pesquisar fármacos e compostos com ação anti-Leishmania,como o antimonial pentavalente (Glucantime),resultados publicados,ou a Pentamidina, e enzimas produtoras de peróxido de hidrogênio,encapsulados em lipossomos.A radiação será utilizada para esterelização e modificação da estrutura do lipossomo,visto que substâncias submetidas á radiação ionizante são preferencialmente captadas por fagócitos mononucleares, via receptores específicos.Assim, espera-se obter compostos estéreis de ação antiparasitária,sendo dirigidos especificamente ás célulkas-alvo (Macrófagos).

A toxoplasmose é uma doença de alta prevalência,atingindo cerca de 2/3 da populção adulta brasileira.Geralmente assitomática,esta infecção é responsavel por comprometimento ocular siginificativo em um numero significativo de paciente,devido a retinocoroidite causada pelo protozoário.Outro problema siginificativo é a possibilidade de infecções congênita graves adquiridas aguda da gestante,com graves lesões no concepto,ocorrendo em cerca de 1 a cada 1000 nascimento no Brasil.Um das maneira de controlar esta patologia seria a definição das fontes de infecção,permitindo assim intervenções epsecíficas no sentido de reduzir o risco da infecção.A transmissão da toxoplasmose é feita pela ingestão de carnes contendo cistos residuais adquiridos quando da infecção de animais de produção ou por ingestão de formas livres de resistência,oocistos, liberados nas fezes de gatos contaminados.Assim neste projeto,pretendemos a prevalência da infecção em ovinos,caprinos e bovinos sacrificados para alimentação humana, bem como determinação da prevalência ambiental de oocistos,através do estudo da prevalência de infecção em gatos e cães de vida livre.Dessa maneira,pretendemos avaliar a fonte de infecção mais provável na infecção pelo Toxoplasma gondi,visando a intervenção específica mais racional para a prevenção da infecção humana.

A malária é a protozoose de maior mortalidade no mundo,mas a maioria dos pacientes apresenta resposta adequada,desde que a função esplênica seja mantida.Em modelos de roedores,esta função espl~enica de filtração e eliminação das hemácias infectadas parece ser controlada por células dendríticas de função complexa,que sao as principais controladoras de abertura ou fechamento da rede de filtração.Entre os fatores principais que controlam as células imunes, as quimiocinas tem siddo omportância crescente e uma delas,SDF,são específicamente preduzidas por células dendríticas esplênicas,modulando a fixação de células imunológicamente competenmtes.No presente projeto,prentendemos estudar a produção local desta quimiocina e de outras correlatas durante a infecção experimental de camundongos por Plasmodium chbaudi CR,uma cepa de malária de roedores com controle expntâneo da parasitemia,corrlacionando estes chados com a produção local de radicais livres efetores,como o nitrogênio e oxigênio,para elucidação dos fatores que poderiam controlar a rede esplênica e assim o controle da infecção.

Neste projeto iniciamos o desenvolvimento de uma vacina por radiação ionizante, a partir do desenvolvimento de estudos de imunidade humoral, celular e agora de imuniade mucosal, com estudos epidemiológicos e de prevalência da infecção.

Trata-se de um projeto para estudo das consequencias da malária em pácientes com anemia ferropriva. Foi desenvolvido experimentalmente em camundongos e dele resultaram 03 publicações completas.

Neste projeto, desenvolvemos o estudo histologico e metabólico de malárias experimentais de roedor, visando o estabelecimento de modelos de malária cerebral de roedores, tendo resultado em uma tese de Doutoramento orientada pelo Prof. Dr. Carlos E.P.Corbett.

Esta é uma atividade de pesquisa e desenvolvimento relacionada a minha atuação didática como professor de patologia de moléstias transmissíveis e visa contemplar diversas situações de pesquisa onde oriento, pesquiso e colobaora na área de pesquisa não diretamente realcionadas a minha área especilização de protozoologia.