Rafael Simone Saia.

A mucosa intestinal desempenha papel crítico no organismo, ao atuar como barreira de separação entre a lamina propria e o meio ambiente externo contido no lúmen intestinal. A inflamação sistêmica consiste em uma injúria primária a esse epitélio, promovendo alteração na permeabilidade intestinal e translocação bacteriana. Os mediadores pró-inflamatórios sintetizados durante a endotoxemia, como o interferon-#947;, interleucina (IL)-1#946;, IL-6, fator de necrose tumoral-#945; e óxido nítrico, contribuem com a ruptura na barreira intestinal ao reduzirem a expressão de proteínas constituintes das tight junctions (TJs). A colecistocinina (CCK) é um peptídeo sintetizado em células enteroendócrinas, cuja atividade imunorregulatória tem sido reportada em vários modelos de inflamação sistêmica e local. Assim, este projeto visa avaliar a participação da CCK na restauração da integridade da barreira intestinal durante a inflamação sistêmica induzida por lipopolissacarídeo (LPS) em ratos. Serão avaliadas a permeabilidade intestinal, a expressão de proteínas integrantes das TJs (ZO-1, ocludina, claudina-1 e claudina-2) por Western blot e a síntese de citocinas nas mucosas ileal e colônica, em animais controle, endotoxêmicos e tratados com agonista e antagonista de receptores de CCK. Nossa hipótese é de que a CCK reduza a translocação bacteriana para os linfonodos mesentéricos ao preservar a expressão de proteínas constituintes das TJs, resultante da modulação negativa da resposta inflamatória induzida pelo LPS. A elucidação desses mecanismos de ação da CCK na preservação da integridade da mucosa intestinal poderá fornecer bases científicas para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas hormonais para pacientes com choque séptico.

A aterosclerose é uma importante causa de morbidade e mortalidade em todo o mundo. A quimiocina CCL2/MCP-1 (proteína quimiotáxica de monócitos-1) é apontada como responsável pelo recrutamento de monócitos e na diferenciação de macrófagos. A metaloproteinase de matriz-2 (MMP-2) está associada ao desenvolvimento e desestabilização dos trombos ateroscleróticos. Entretanto, na literatura há uma controvérsia importante entre a relação da MMP-2 com a CCL2. Alguns estudos mostram que a CCL2 aumenta a atividade da MMP-2 e potencializa a ação pró-inflamatória. Outros estudos, na maioria in vitro, mostraram que a MMP-2 cliva a CCL2 o que causa uma ação antinflamatória.

A hipótese atualmente prevalente é de que parte das manifestações clínicas que ocorrem durante a sepse seja causada por uma excessiva resposta do hospedeiro frente à infecção, originando uma resposta inflamatória descontrolada. Várias das características da sepse podem ser reproduzidas, experimentalmente, através da administração do lipopolissacarídeo (LPS), um componente da parede externa de bactérias Gram-negativas. A presença do LPS permite sua ligação ao receptor, composto pelo TLR4, CD 14 e a proteína mielóide-2, havendo como conseqüência, a ativação dos macrófagos para a produção de proteínas inflamatórias, como citocinas e a enzima oxido nítrico sintase induzível (iNOS). A iNOS catalisa a oxidação do aminoácido L-arginina, liberando oxido nítrico (NO) e L-citrulina. O NO é um mediador gasoso e um radical livre que apresenta importante função como agente antimicrobiano. Os macrófagos apresentam receptores que se ligam ao hormônio colecistoquinina (CCK), os quais possuem um aumento na sua expressão após o tratamento com LPS. Esse fato sugere uma possível modulação do sistema imune pela CCK. Por isso, neste trabalho propomos avaliar a participação da CCK na síntese de NO em cultura de macrófagos peritoneais e em ratos submetidos ao choque endotoxêmico, através da medida indireta de seus metábolitos estáveis (nitrito e nitrato). Além disso, iremos avaliar o papel da CCK na expressão do gene e na síntese da iNOS. Deste modo, temos como objetivo demonstrar a comunicação e a interação entre os sistemas imune e endócrino.