Thiago Mattar Cunha.

A divulgação das atividade e descobertas científicas realizada na academia para a sociedade cada vez mais tem se tornado fundamental, tanto para a instrução da mesma quanto para sua valorização. O programa de Pós-graduação em farmacologia é um dos mais tradicionais programas de pós-graduação do Brasil. Fundado há mais de 50 anos pelo Prof. Rocha e Silva, formou mais de 300 pesquisadores que são referencias na ciência nacional. Além disso, as descobertas científicas realizadas em seu âmbito tiveram impacto na sociedade, destacando-se os estudos seminais que levaram ao desenvolvimento do Captopril, um dos principais medicamentos utilizados no controle da hipertensão arterial. Embora o programa tenha reconhecimento científico nacional e internacional, acreditamos que podemos melhorar nossa comunicação com a sociedade por meio da divulgação/difusão científica voltadas para a comunidade científica, estudantes e público leigo em geral. Para viabilizar essa extensão, é imprescindível o envolvimento dos diversos setores da comunidade universitária e os estudantes da graduação são parte importante desta. A proposta do PPG-Farmacologia envolvendo estudantes de graduação do Programa Unificado de Bolsas de Estudos tem como objetivo ampliar a difusão de informações sobre os estudos realizados em seu âmbito ao público leigo em geral, em especial a estudantes de ensino fundamental e médio, por meio do aperfeiçoamento de seu site, midas sociais, produção de pequenos vídeos entre outras atividades. A produção de materiais em diferentes tipos de mídias digitais, como textos, vídeos e jogos, além de ações em eventos pontuais como Congresso Brasileiro de Farmacologia, Workshop do Programa, entre outras atividades.

Os pacientes graves com COVID-19 desenvolvem síndrome do desconforto respiratório agudo que pode progredir para síndrome da tempestade de citocinas, disfunções de órgãos e morte. Há uma necessidade urgente de tratamentos para reduzir a morbidade e mortalidade. Embora a fisiopatologia de COVID-19 não seja totalmente compreendida, um crescente corpo de evidências sugere um papel importante do sistema complemento, especialmente a sinalização C5a / C5aR1, como tendo um papel prejudicial essencial no desenvolvimento de COVID-19. Nesse sentido, inibidores do receptor do complemento C5ar1 podem ser promissores no tratamento da COVID-19 O objetivo principal desse projeto será avaliar a eficácia do tratamento com um inibidor do receptores do fator do complemento C5a (C5ar1), em colaboração com a empresa Farmacêutica Dompe pharma, em um modelo experimental de COVID-19, em camundongos transgênicos que expressam a Ace2 humana

O desenvolvimento de animais geneticamente (AGM) modificados revolucionou a área das ciências biomédicas nos últimos 40 anos. As técnicas de transgenia no desenvolvimento de AGM vem sendo aprimorada para sua melhor especificidade e facilidade. Nesse contexto, técnicas de eletroporação de zigotos, com diferentes ferramentas moleculares, tem possibilitado uma maior agilidade nesses processos. A FMRP e o Centro de Pesquisas em Doenças Inflamatórias criaram um laboratório de modificação genômica de zigotos, o que vem possibilitando desenvolvimento de AGM para vários pesquisadores da USP e outras Universidades. Temos utilizado a técnica de injeção pronuclear em zigotos de camundongos para esse fim. Como a técnica de injeção pronuclear exige um treinamento intenso do pesquisador, bem como trata-se de uma técnica quase artesanal de manipulação de zigotos, isso tem dificultado e diminuído a rapidez no desenvolvimento dos vários projetos. Nesse sentido, esse projeto visa o desenvolvimento de uma plataforma de modificação genômica de zigotos de camundongos e ratos baseado em eletroporação. A concretização desse projeto facilitará e aumentará nossa capacidade de produzir novas linhagens de AGM, o que poderá nos dar independência tecno-cientifica, além de reduzir significativamente o número de animais utilizados nas técnicas tradicionais de injeção pronuclear.

A presente década começa com uma emergência sanitária mundial, a pandemia do novo coronavírus, o causador da síndrome respiratória aguda grave 2 (COVID-19), também conhecido por SARS-Cov2. Até o momento, são mais de 900 mil casos positivos que resultaram em mais de 44 mil mortes em 180 países. Tendo em vista esses dados epidemiológicos, fazem-se necessárias estratégias para contenção da transmissão do vírus e principalmente alternativas eficazes no tratamento desta doença. Nesse contexto, com o projeto visamos avaliar a versatilidade da utilização de uma biblioteca CRISPRko na identificação de fatores críticos para infecção e replicação do SARS-Cov2. Essa biblioteca consiste no agrupamento de 77.441 guias direcionadas para aproximadamente 19 mil genes humanos. Essa ferramenta nos permitirá um rastreio global do genoma humano, por meio deleção gênica mediado por CRISPR/Cas9 em células epiteliais de pulmão humano. Após seleção contra genes essenciais para a viabilidade celular, submetemos as células a cinco rodadas de infecção letal com isolado humano (do Brasil) de uma cepa de SARS-Cov2. Finalmente, poderemos determinar genes e vias envolvidos na replicação e infecção viral, pelo sequenciamento das células sobreviventes e detecção das guias presentes naquela população. Com essa estratégia de alta cobertura, acreditamos que poderemos apontar novos alvos potenciais para o desenvolvimento de terapêuticas para essa doença.

Nesse projeto em colaboração com a empresa GlaxoSmithKline (GSK) visamos identificar e validar novos alvos farmacológicos para o desenvolvimento de novas terapia contra a dor neuropática.

In the chronic pain scenario, the neuropathic pain is a very severe untreatable condition. Peripheral nerve injury produces complex molecular and biochemical changes in the nociceptive system. Many pain mediators/modulators and the entailed phenotypic alterations are well described, but not accompanied by more efficient drugs development. Metabolites are products and substrates of cell metabolism and participate in essential cell functions. Metabolic imbalance is the primary result of diseases and causes phenotypic abnormalities due to metabolite accumulation or depletion in the tissue during pathological conditions such as cancer, diabetes, and ischemia. Peripheral neuropathy can produce a severe metabolic disturbance in nociceptive system components due to the local constant energy requirement. Despite that, the metabolites influence on the development of chronic pain is still unknown. GPR91 is a G- protein coupled receptor, and its natural ligand is succinate, a Krebs? cycle metabolite. Our preliminary data show that succinate intrathecally injected can increase pain hypersensitivity in wild type mice, but not in GPR91 knockout mice, which are also resistant to develop neuropathic pain. It is reasonable to suppose that succinate is a pronociceptive molecule and can act through GPR91. Our project aims to explore the relationship among succinate, GPR91 and chronic pain in the development of neuropathic pain. The results will provide fundamental insights into cell energy management and its implication in chronic pain syndrome condition. Also, it is a possibility to introduce a new conceptive in the field and to explore new targets for the development of more efficient drugs.

Diseases with an inflammatory component, including arthritis and sepsis, are a complex and heterogeneous group of disorders that affect the world population. The current options for the treatment of these diseases are still limited and in some cases, ineffective due to limited understanding of the mechanisms underlying these disorders. Thus, the overall aim of this proposal is to extend our understanding about the role of some ion channels (TRPM2 and HCN) and receptors (angiotensin receptors- AT1, AT2) in arthritis and sepsis. Firstly, animal models of arthritis or sepsis will be used to characterize the involvement of HCN2/Angio II/ AT2R pathway or TRPM2 ion channel in these pathologies respectively. After that, the project will focus in translational research, performing experiments with blood from patients with sepsis as well as blood and synovial fluid samples from patients rheumatoid arthritis or osteoarthritis. Thus, understanding the mechanisms of these pathologies through basic science and after with a translational approach, possible new therapeutic targets for the treatment of these diseases can be identified.

As dores crônicas representam um grande fardo para a sociedade nos dias atuais. Diversas são as tentativas de se elucidar os eventos teciduais, celulares e moleculares responsáveis por desencadeá-las, para que se possa instituir terapias mais eficazes para seu tratamento. O succinato é um produto da metabolização do GABA e um metabólito do ciclo do ácido cítrico (ciclo de Krebs). Foi descoberto como ligante endógeno do receptor GPR91, até então considerado um receptor órfão da família dos receptores acoplados à proteína GJá foi descrito que GPR91 encontra-se expresso em neurônios e células dendríticas, sendo que nestas, atua sinergicamente com a ativação de receptores do tipo Toll. Sabe-se ainda que, quando ativado, é capaz de gerar correntes de Ca2+ em células da glia. A lesão de nervo periférico causa degeneração de neurônios gabaérgicos na medula espinal e gera estresse celular aumentando o metabolismo local, podendo levar a um maior acúmulo de vários metabólitos, incluindo o succinato. Resultados preliminares do nosso grupo mostram que, quando injetado por via intratecal, o succinato é capaz de induzir alodínia mecânica em camundongos selvagens; e mostram também que animas deficientes para GPR91 são prevenidos de desenvolverem hipersensibilidade mecânica durante neuropatia periférica induzida por lesão de nervo. Diante dessas informações e evidências, por meio de paradigmas metodológicos modernos que integram ferramentas de biologia celular, molecular, comportamento, farmacologia e genética, o presente projeto se propõe a testar a hipótese de que o succinato e GRP91 desempenham papel importante no desenvolvimento e manutenção da dor crônica de origem neuropática por lesão de nervo periférico em camundongos. A possibilidade dessa comprovação adicionaria um conceito importante e inédito na área de pesquisa de dores crônicas, sugerindo um novo sítio de atuação fármacos específicos e mais eficazes voltadas à analgesia.

Inflammatory and neuropsychiatric diseases are a complex and heterogeneous group of diseases that affect more than 15% of the word population. The current options for the treatment of these diseases are still limited and in some cases, inefficient due to limited understanding of the mechanisms underlying these diseases. In this context, there is an intention to create an international collaborative consortium between Ribeirao Preto Medical School (FMRP), School of Pharmacy of Ribeiro Preto (FCFRP), both belonging to University of São Paulo (USP), and University of Nottinghan (UoN). The overarching objective is to build capacities to promote knowledge transfer and offer relevant training for graduate students from the Partner Institutions, in order to establish a framework for an integrative research in drug discovery. In this context, our goals will be to identify: 1) novel roles for GPCRs in inflammatory and neuropsychiatric diseases; 2) novel lead compounds with GPCRs modulating capacities; and 3) potential drug candidates for the treatment of inflammatory and neuropsychiatric diseases, which will be investigated by a multidisciplinary team. To this end, the collaborative consortium will joint expertise of researchers from biological sciences (pharmacologists, molecular pharmacologists, cell biologists, drug discovery scientists) and from chemical science (bioinformatics, medicinal chemistry, synthetic chemistry).

Nos últimos 25 anos, nosso grupo de pesquisa vem desenvolvendo estudos na área de inflamação, visando o melhor entendimento dos mecanismos fisiopatológicos do processo inflamatório. Dando continuidade, no presente projeto pretendemos realizar uma abordagem moleculares dos mecanismos envolvidos na fisiopatologia destas doenças, particularmente investigando o papel das enzimas fosfatidilionositol 3-kinase na gênese e manutenção da artrite reumatoide, dor crônica e sepse. Para isto, pretendemos investigar o papel destas kinases: 1) nos mecanismos envolvidos na ativação das células envolvidas no reconhecimento dos agentes desencadeadores destas doenças bem como nos mecanismos efetores destas doenças. O desenvolvimento do projeto permitirá identificar novos alvos biológicos comuns para a maioria dos três temas supracitados, o que permitirá o desenvolvimento de novos marcadores biológicos e também novos tratamentos para estas doenças.

Inflammatory diseases are a complex and heterogeneous group of diseases that affect more than 10% of the word population. The current options for the treatment of these diseases are still limited and in some cases, inefficient due to limited understanding of the mechanisms underlying these diseases. The development of translational research by a center that can generate scientific knowledge and also identify new therapeutic targets of inflammatory diseases is imperative. The Center for research in inflammatory diseases (CPDI) will be created with this goal. The general objective of the CPDI will be to perform integrative and translational research to identify, validate and target known and novel biological pathways involved with the induction and resolution of inflammation. As a result, we expect the development of innovative therapeutic strategies and drugs that effectively target inflammatory diseases. The project will involve high-throughput genetic screenings, in vivo and in vitro models of diseases, modeling and chemical synthesis, as well as the discovery of new natural molecules from plants and saliva from arthropods. After selecting the potential drugs and bio-drugs, CPDI will protect the intellectual property and, after partnerships with private companies, coordinate pre-clinical toxicological studies and early clinical trials. The CPDI will also dedicate intense efforts to disseminate knowledge to the general public, in order to fulfill the societal objective of spreading education and generating an enthusiasm for science.

A intensa migração de neutrófilos e o dano tecidual que a acompanha, estão presentes em diversas doenças inflamatórias. Portanto, a busca de fármacos que interfiram com o tráfego de neutrófilos no processo inflamatório tem sido cada vez maior. Estudos iniciais do nosso grupo de pesquisa com os compostos neovestitol e vestitol isolados da própolis tipo 13 (vermelha), e com uma fração bioativa identificada da geoprópolis de Melipona scutellaris, mostraram-se promissores sobre a inibição na migração de neutrófilos. No entanto, estes resultados são apenas iniciais, sendo necessários mais estudos para isolar e identificar o composto responsável pela atividade da fração bioativa, bem como comprovar a eficiência dos compostos isolados sobre a inibição da migração de neutrófilos, e por fim elucidar seus mecanismos de ação. Assim, o objetivo deste estudo é avaliar a atividade e possíveis mecanismos dos compostos isolados de própolis brasileiras sobre a modulação da migração de neutrófilos no processo inflamatório. O estudo será conduzido em duas etapas: a primeira será composta pela obtenção dos compostos bioativos (neovestitol e vestitol) da própolis vermelha, como também o isolamento e a identificação do composto bioativo da fração da geoprópolis; na segunda etapa, serão aplicados os ensaios biológicos com os compostos isolados de ambas as própolis, onde serão avaliadas suas atividades sobre: a migração de neutrófilos induzida por LPS ou mBSA; o rolamento leucocitário e a adesão no endotélio vênular; a síntese e/ou liberação de mediadores inflamatórios (TNF-±, CXCL1/KC, CXCL2 e LTB4) no lavado peritoneal in vivo; a expressão das moléculas P-selectina e ICAM-1 (presentes nas células endoteliais); a síntese e/ou liberação de mediadores inflamatórios produzidos por neutrófilos in vitro; as vias de sinalização intracelulares e expressão de Toll-like receptor (TLR) 2, TLR4 e B2-integrinas em neutrófilos in vitro; a quimiotaxia de neutrófilos in vitro e os níveis intracelulares de cálcio; os mecanismos moleculares de ação e efeitos toxicológicos na expressão genômica de células humanas. Espera-se com esse estudo obter compostos bioativos isolados de duas variedades de própolis brasileiras, capazes de inibir a migração de neutrófilos induzida por diferentes estímulos inflamatórios e que tenham os seus mecanismos de ação elucidados. Além disso, espera-se que estas informações contribuam para que futuramente estes compostos possam ser utilizados como novos agentes anti-inflamatórios ou protótipos de novos fármacos.

The Seventh Framework Programme: Resolution of inflammation is a key determinant of pathology. Resolution of inflammation is an active process which involves diverse pathways and molecules. The general objective of the studies proposed here is to identify and validate molecules involved in the resolution of inflammation as a basis for the development of innovative therapeutic strategies in chronic inflammatory and autoimmune diseases. The project will involve a pipeline including, on the one hand, endogenous ?resolutors? of inflammation such as atypical decoy receptors, and on the other the characterization and testing of compounds. Tapping resources of natural compounds will be a major thrust. A major focus will be on mechanisms which regulate the permanence and egress of leukocytes in tissues. The project will capitalize on and bring added value to a strong tradition in the consortium in the fields of: negative regulators; industrial-academic collaboration; European-Brazilian collaboration; identification and characterization of innovative inhibitors of natural origin in Brazil.

Projeto temático FAPESP- Nos últimos 25 anos, nosso grupo de pesquisa vem desenvolvendo estudos na área de inflamação, visando o melhor entendimento dos mecanismos fisiopatológicos do processo inflamatório. Dando continuidade, no presente projeto pretendemos desenvolver investigação translacional na área de doenças inflamatórias, especificamente em artrite reumatóide, dor crônica e sepse. Para os três temas, pretendemos investigar de maneira integrada: 1) mecanismos envolvidos no reconhecimento dos agentes desencadeadores, com enfoque nos receptores de reconhecimento padrão (TLRs e NLRs) e seus ligantes endógenos e nas ativações das células de reconhecimento (células dendríticas, glia, mastócitos, sinoviócitos); 2) mecanismos efetores, especificamente papel de citocinas/quimiocinas e seus receptores e de células efetoras (neutrófilos, linfócitos e macrófagos); 3) sinalização intracelular, incluindo receptores intracelulares (AhR, PPARgama, LXR) e fatores de transcrição (NFkB, AP-1, CREB); e por fim 4) moduladores da resposta imune, com enfoque em adenosina, indoleamina 2,3-dioxigenase, eicosanóides e molécula co-estimulatória CD28. O desenvolvimento do projeto permitirá identificar novos alvos biológicos comuns para a maioria dos três temas supracitados, o que permitirá o desenvolvimento de novos marcadores biológicos e também novos tratamentos para estas doenças.

Chamada Pública MCT/CNPq - N º 14/2012 - Universal - Durante lesões teciduais, especialmente àquelas relacionadas a processos de isquemia- reperfusão e trauma, um conjunto de substâncias endógenas é liberado tanto no local da lesão quanto na circulação, estando envolvidas na indução da resposta inflamatória local, bem como mediando processos fisiopatológicos que acontecem em órgãos distantes ao órgão lesionado. Entre as várias substâncias liberadas durantes estes processos um grupo delas têm sido recentemente denominadas DAMPs [padrões moleculares associados à lesão (damage-associated molecular patterns)]. No presente estudo, nós avaliaremos de forma inovadora o papel que os DAMPs exercem na ativação das células da glia, processo fundamental na gênese da dor crônica inflamatória e neuropática. A dor crônica representa um importante problema de saúde pública e cada vez mais existe a necessidade de entende-lá visando à obtenção de desenvolvermos novos tratamentos. Nos últimos anos inúmeros avanços têm sido alcançados nos que diz respeito aos mecanismos moleculares que participam da indução e manutenção da dor crônica, no entanto, eles não foram totalmente elucidados. Inúmeros trabalhos têm descrito que as células da glia presentes no sistema nervoso central, principalmente na medula espinal, participam desses mecanismos. Por exemplo, durante um processo inflamatório periférico ou após uma lesão de nervo sensorial, ocorre uma intensa ativação das células da glia na medula espinal, as quais liberam inúmeros mediadores inflamatórios como citocinas, fatores de crescimento, óxido nítrico entre outras. Essas substâncias são então responsáveis pela manutenção da hiperexcitabilidade neuronal e consequentemente para a manutenção do processo doloroso crônico. Foi demonstrado também que o processo de ativação das células da glia depende da ativação de TLR4. No entanto, os mecanismos envolvidos na ativação do TLR4 ainda não foram elucidados. Neste sentido, o presente projeto tamb

IASP Early Career Research Grants Program ? 2011. There is a great number of evidence showing that after peripheral inflammation or lesion of sensitive neurons, glial cell present into the spinal cord became activated and they play a crucial role in the induction and maintenance of chronic pain states. Glial cell participate in these events through the production of several substance including cytokines, grow factors and nitric oxide. However the mechanisms involved in the activation of these cells are not complete understood. Recently, it was described that pattern recognition receptors such as Toll-like receptor (TLRs) might play a role in these events and consequently in the genesis of chronic pain. In addition to the role of PRRs in recognising pathogen-associated molecules, there is a novel concept in which endogenous substances (Damage associated molecular pattern; DAMPs) could also activate PRRs. In the present project we will test the hypothesis that during peripheral inflammation or nerve lesion two specific DAMPs [myeloid-related protein 14 (MRP14) and mitochondrial DAMPs - mtDNA] are released into the spinal cord, and, acting through TLR4 and TLR9 respectively, they stimulate glial cell activation contributing to the pathophysiology of chronic pain.

O Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia de Fármacos e Medicamentos (INCT-INOFAR), coordenado pelo Professor Dr Eliezer J. Barreiro, LASSBio, UFRJ, se enquadra na área da Saúde, atendendo à indução do Edital de concorrência nesta área prioritária e se situa, especificamente, na especialidade de Fármacos e Medicamentos tendo como metas principais articular, organizadamente, as competências nacionais existentes no País e situadas nos diferentes estágios desta intrincada cadeia de inovação, a exemplo do Instituto do Milênio Inovação e Desenvolvimento em Fármacos e Medicamentos (IM-INOFAR, Proc. CNPq 420.015/05-1), projeto inspirador desta proposta e em vias de conclusão no início de 2009, que alcançou expressivos resultados. O INCT-INOFAR pretende dar continuidade aos esforços de pesquisa realizados no IM-INOFAR e avançar na cadeia de inovação em fármacos e medicamentos os expressivos resultados obtidos no IM-INOFAR que lograram a descoberta de novos compostos-protótipos, candidatos a novos fármacos antiinflamatórios e antiasmáticos, completando seus estudos até os ensaios pré-clínicos. No âmbito do INCT-INOFAR também serão estudados outros compostos promissores descobertos nas áreas do sistema cardiovascular (SCV); sistema nervoso central (SNC), da quimioterapia de doenças negligenciadas, da inflamação e da dor, logrando-se a identificação de protótipos cardioativos, antipsicóticos, leishmanicidas, antiinflamatórios e analgésicos não opióides que serão objeto de estudos visando atingir a fase pré-clínica. O INCT-INOFAR conta a participação de empresa farmacêutica associada que é responsável pelas etapas de desenvolvimento farmacotécnico dos eventuais compostos-protótipos que atingirem este estágio da cadeia de inovação. A equipe participante do INCT-INOFAR inclui especialistas, líderes dos grupos de pesquisa associados, que atuam nas diversas fases hierárquicas da cadeia de inovação em fármacos e medicamentos lotados em institutos de pesquisa e instituições de ens

Projeto de Pesquisa - Projeto Regular - Fapesp- A artrite reumatóide (AR) é uma doença auto-imune inflamatória crônica que afeta aproximadamente 1% da população mundial, e é caracterizada pela inltração de células do sistema imune no espaço sinovial articular. A patogênese da AR envolve aumento da resposta inflamatória imune Th17 e uma disfunção nas células T reguladoras (Treg). Recentes estudos revelaram que a ativação do receptor de hidrocarbonetos de arila (AhR) exerce um papel dual na diferenciação das células Treg e Th17 e no desenvolvimento da encefalomielite experimental auto-imune, podendo reduzir ou exacerbar sua gravidade. Esta modulação dual é dependente do tipo de ligante que ativa o AhR. Demonstrou-se também que a ativação de AhR, além de participar da expressão de IL-17 e IL-22 em células Th17, aumenta também a expressão das citocinas pró-inflamatórias IL-8, IL-1beta e IL-6 em sinoviócitos. Em pacientes com AR foram encontrados altos níveis de expressão de AhR. No entanto, ainda não foi determinado o papel da ativação deste receptor no desenvolvimento tanto da artrite experimental como em humanos. O objetivo do presente trabalho é avaliar a participação da ativação do AhR na patogênese da AR. Para investigar os mecanismos envolvidos nesse efeito, será utilizado o modelo murino de artrite induzida por antígeno (AIA) e avaliada a possível relação dos polimorfismos genéticos no AhR com o desenvolvimento da AR em humanos. Estas variantes genéticas no AhR podem ser importantes marcadores prognósticos ou de susceptibilidade a AR.

Processo: 472325/2010-8- Edital MCT/CNPq 14/2010 - Universal. A dor é considerada o principal sintoma de várias doenças inflamatórias uma vez que leva o paciente a procurar ajuda médica. Embora existam muitas drogas analgésicas no mercado, seus mecanismos de ação não são completamente compreendidos, principalmente, no que diz respeito aos mecanismos moleculares. O aumento da intensidade dolorosa durante o processo inflamatório (hiperalgesia) é causado pela sensibilização dos neurônios nociceptivos primários (nociceptores), devido à ação direta de mediadores inflamatórios descritos como mediadores hipernociceptivos finais (prostaglandinas e aminas simpáticas). Cabe ressaltar que paralelamente à liberação dos mediadores pró-nociceptivos ocorre também a liberação de mediadores que modulam negativamente o processo doloroso durante a inflamação, entre eles estão os canabinóides, adenosina, óxido nítrico e monóxido de carbono. Nesse sentido, o controle farmacológico periférico da dor inflamatória baseia-se em duas estratégias principais: a) uso de fármacos que previnem a sensibilização dos nociceptores (ex: inibidores de COX), ou seja, inibem a liberação e/ou ação de substâncias que os sensibilizam; b) fármacos que bloqueiam diretamente a sensibilização dos nociceptores, como a dipirona, diclofenaco e, principalmente, os opióides. Em uma perspectiva futura poderia-se fazer uso de drogas que mimetizem os efeitos dos mediadores antinociceptivos endógenos. Em relação ao efeito analgésico produzido pela segunda classe, evidências indiretas indicam que este é dependente da ativação da via do óxido nítrico, a qual culmina na modulação da atividade de canais de potássio sensíveis ao ATP. No entanto, estas evidências necessitam ser comprovadas de forma mais direta, assim como os mecanismos intracelulares envolvidos na ativação da via do NO precisam ser totalmente estabelecidos. Além disso, a implicação da modulação dos canais de potássio para a excitabilidade neuronal também não

Processo: 472487/2010-8 - Edital MCT/CNPq N º 14/2010- Universal. Durante os últimos 40 anos nosso grupo de pesquisa vem estudando os mecanismos envolvidos na gênese da dor inflamatória. Nesse contexto, fomos os pioneiros na demonstração de que a hiperalgesia inflamatória resulta da sensibilização dos neurônios nociceptivos primários, principalmente pela ação direta das prostaglandinas. Contribuímos assim para a elucidação do mecanismo de ação das principais drogas utilizadas no seu controle, as drogas do tipo da aspirina (AINEs). Também de forma pioneira, nosso grupo de pesquisa elucidou o papel de um grande número de citocinas na gênese da dor inflamatória. Com o presente projeto pretendemos dar continuidade a esses estudos, divididos em três objetivos principais: a) investigar a contribuição específica dos diferentes tipos de neurônios nociceptivos primários (fibras C peptidérgicas X fibras C não-peptidérgicas) para a gênese da dor inflamatória aguda e crônica, b) investigar o papel das células satélites presentes no gânglio da raiz dorsal e que envolvem os neurônios nociceptivos primários, para a gênese da dor inflamatória; c) investigar a contribuição dos diferentes tipos de canais de potássio para a sensibilização dos nociceptores durante a hiperalgesia inflamatória aguda e crônica.

As doenças inflamatórias constituem um grupo complexo e heterogêneo de doenças, sendo causa importante de morbidade e mortalidade, representando um enorme problema sócio-econômico. No presente projeto, pretendemos desenvolver investigação translacional na área de Doenças Inflamatórias. Além disto, a associação com químicos com sólida formação em modelagem molecular e síntese de moléculas permitirá desenvolvimento de novos medicamentos para tratamento destas doenças. Nosso projeto é constituído de 03 sub-projetos: 1) doenças inflamatórias infecciosas; 2) doenças inflamatórias autoimunes e alérgicas; 3) doenças inflamatórias vasculares aterosclerósticas. Assim, desenvolvendo os projetos acima apresentados identificar novos alvos biológicos comuns para a maioria das doenças inflamatórias supracitadas. Para isso, serão realizados estudos comparativos dessas doenças, esperando que os dados obtidos e a integração da pesquisa básica e clínica contribua para a identificação de novos alvos terapêuticos comuns para as doenças estudadas. Especificamente pretendemos: a) determinar o papel dos receptores TLR e NOD e das galectinas nas doenças infecciosas, autoimunes/alérgicas e aterosclerose (induzida por diabetes e alcoolismo); b) estudos comparativos sobre a participação de diferentes populações celulares nos diversos modelos experimentais das doenças inflamatórias investigadas fornecerão evidências sobre a participação das seguintes populações celulares IFN-+, IFN-/IL-17+, IL-4+/IL-10+, IFN-/IL-10+, TGF-β/IL-9+. Idem quanto à participação das citocinas (novos membros da família da IL-1, da IL-6, IL-10, IL-12, IL-18, IL-21, IL-22, IL-23, IL-25, IL-33), das quimiocina e seus receptores (CCR1, CCR2, CCR4, CCR5, CCR6, CXCR2 e CX3CR1) e também de outras moléculas envolvidas na resistência e suscpetibilidade às infecções e doenças autoimunes/alérgicas e vascular aterosclerótica; c) paralelamente a cada modelo de doença experimental, serão realizados es

Universal CNPq 476541/2007-7. O gene st2 codifica duas proteínas; i. uma forma ligada à membrana denominada ST2L e ii. uma forma solúvel, sST2. A participação dessas moléculas na regulação de respostas inflamatórias tem sido investigada, porém, ainda existem controvérsias. Demonstrou-se que o tratamento com anticorpo anti-ST2L melhora doenças infecciosas e autoimunes do padrão Th2, e piora doenças de padrão Th1. Por outro lado, o tratamento com o sST2 reduz a gravidade das lesões na artrite induzida por colágeno em camundongos, o que está relacionado à inibição direta da produção de citocinas pró-inflamatórias como TNF-, IL-6 e IL-12. Essas citocinas já foram relacionadas ao desenvolvimento de hipernocicepção central/periférica e/ou migração de neutrófilos. Recentemente, foi demonstrado que o ligante do receptor ST2L é uma citocina da família da IL-1 denominada IL-33. Porém, apesar de existirem evidências de que o receptor da IL-33 esteja envolvido em respostas Th1 e Th2, somente os efeitos Th2 da IL-33 foram investigados até o momento. Dessa forma, será investigado se a IL-33 também medeia resposta inflamatória Th1 avaliando-se a hipernocicepção (hiperalgesia e alodinia em animais) periférica (cutânea e articular) e espinal, e migração de neutrófilos induzidos pelo desafio com antígeno em animais previamente imunizados. Além da participação da IL-33 nessas respostas, também serão avaliados os mecanismos envolvidos

Processo: 2007/51247-5. Temático. Nosso projeto é constituído de 3 subprojetos que investigam: a) mecanismos envolvidos na gênese da dor inflamatória aguda e crônica assim como os mecanismos envolvidos nos efeitos de diversos analgésicos, b) mediadores envolvidos na migração de neutrófilos em diferentes modelos de inflamação imune, c) mecanismos envolvidos na falência da migração de neutrófilos para foco infeccioso observado na sepse grave. Em relação aos subprojetos relacionados à dor pretendem-se determinar quais citocinas, receptores Toll-like, taquicinas e C5a sensibilização os nociceptores na vigência de dor aguda e persistente. Em nível molecular pretende determinar as vias de sinalização e os fatores de trascrição envolvidos na sensibilização. Por outro será investigado macanismos moleculares envolvidos nas ações analgésicas da morfina e de canabinóides. Quanto aos mecanismos envolvidos na migração de leucócitos pretendem-se determinar quais citocinas, quimoocinas e seus receptores estão envolvidos no recrutamento de leucócitos em diferentes modelos de doenças inflamtórias bem como os mecanismos pelos quais estes mediadores induzem a migração. O papel modulador do NO, CO, H2S e PGJ2 sobre a migração será também determinado. Pretende-se também determinar os mecanismos pelos quais salivas de insetos vetores modulam a resposta inflamatória. Finalmente utilizando-se modelos in vivo e in vitro serão determinados os mecanismos envolvidos na falência de migração de neutrófilos na sepse, focando no papel de citocinas/quimiocinas, radicais livres, receptores toll-like, rolamento/adesão dos neutrófilos ao endotélio vascular, vias de sinalização e fatores de transcrição e também o papel da desensibilização dos receptores para agentes quimiotáxicos.

Processo: 483951/2007-2- Edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal. Nosso grupo tem contribuído com novos conceitos sobre mecanismos e controle de nocicepção, aplicáveis à compreensão da dor humana de origem periférica e ao desenvolvimento de medicamentos. Neste sentido, a seguir, exemplificaremos com estudos que foram realizados e que atualmente estão em andamento em nosso laboratório. São projetos que consideramos relevantes para o desenvolvimento do conhecimento da nossa área de estudo. Nossos estudos envolvem a analise da contribuição do processo inflamatório como estímulo para a sensibilização dos neurônios nociceptivos periféricos (hipernocicepção) assim como a análise das variações moleculares neuronais desenvolvidas durante os processos de sensibilização e de ação de analgésicos. Nossas investigações tem tido ultimamente uma grande abertura experimental com a adaptação do teste de von Frey a camundongos geneticamente modificados (?knockout?), o desenvolvimento de uma técnica in vivo muito confiável de injeção intra-ganglionar no rato e a analise com ajuda da microscopia confocal das células ganglionares submetidas a vários tratamentos farmacológicos. Começamos em 1972 propondo que a dor inflamatória decorria da ação de estímulos mecânicos, químicos ou térmicos em nociceptores sensibilizados pelas prostaglandinas. Atualmente, nossa hipótese de trabalho baseia-se em que esta sensibilização, (hipernocicepção), decorre fundamentalmente do abaixamento do limiar pelo aumento de canais de sódio, em particular o NaV1.8 e da diminuição do potencial de repouso, devido ao fechamento de canais de potássio. Nossa compreensão, como já salientamos, baseia-se na utilização de modelos comportamentais, apoiados por ensaios bioquímicos e mais recentemente com a utilização de animais geneticamente modificados. Para avançarmos em nossos estudos torna-se fundamental estudar a dinâmica de canais iônicos envolvidos nos processos neuronais em estudo. Em nosso modelo de do

Inflamação, Sepse e Câncer: Aspectos fisiopatológicos, Modulação farmacológica e Mecanismos moleculares envolvidos na ativação celular

Processo: 471157/2006-6. Edital MCT/CNPq 02/2006 - Universal. O controle farmacológico da dor inflamatória baseia-se em duas estratégias principais: a) uso de fármacos que previnem a sensibilização dos nociceptores (inibidores de COX, simpatolíticos, bloqueadores de citocinas), ou seja, inibem a liberação ou a ação de substâncias que sensibilizam os nociceptores; b) fármacos que revertem a sensibilização dos nociceptores já instalada, como dipirona alguns AINES (diclofenaco ou keterolaco) e principalmente os opióides. Em relação aos efeitos analgésicos periféricos dos opióides demonstrou-se que morfina causa antinocicepção dependente da ativação da via óxido nítrico (NO)/GMPcíclico. No entanto, os mecanismos intracelulares envolvidos na ativação desta via ainda não estão estabelecidos. A via de sinalização intracelular dependente da fosfatidilinositol 3-kinase (PI3k)/proteína kinase B (também denominada AKT) vem ganhando atenção ultimamente, sendo que a isoforma PI3K-gama é ativada por receptores acoplados a proteína G. Foi demonstrado que alguns efeitos dos agonistas opióides dependem da ativação desta via, como por exemplo a analgesia induzida pela administração central de morfina, bem como uma parte da desensibilização dos receptores opióides que acontece frente a seus agonistas. Além disto, dados recentes demonstram que a ativação da via PI3K/AKT é importante para a ativação da oxido nítrico sintase endotelial com conseqüente produção de NO pelas células endoteliais frente a vários estímulos. Em conjunto, estes dados nos levaram a hipotetizar que o efeito antinociceptivo periférico dos opióides depende da ativação da via PI3K/AKT levando a uma conseqüente ativação da via NO/GMPc. Esta hipótese será testada avaliando-se os efeitos antinociceptivos periféricos dos opióides em animais deficientes para a PI3K e em animais tratados com drogas seletivas para a enzima PI3K ou para a AKT. Os efeitos dos agonistas opióides sobre a produção de NO em células