Stephen Fernandes de Paula Rodrigues.

Curso voltado para difusão da Toxicologia entre alunos de graduação na área da saúde e biológicas oriundos de diversas partes do país.

O tratamento agudo do AVE isquêmico é realizado com terapia trombolítica, utilizando o ativador do plasminogênio tissular recombinante (rtPA), contudo, esse agente deve ser administrado dentro de três horas após o início dos sintomas, o que limita bastante o seu uso, visto que, na maioria dos casos, o tempo entre o reconhecimento dos sintomas e a tomada de decisão para administração do tratamento trombolítico excede três horas. Sabendo?se que o recrutamento e a ativação de células inflamatórias sanguíneas no tecido pós?isquêmico podem acelerar e estender a lesão tecidual que é iniciada com o insulto isquêmico, e que nanopartículas de ouro (AuNP) possuem efeito anti?inflamatório, nós resolvemos estudar o possível efeito terapêutico das AuNP sobre a lesão focal aguda causada pela isquemia cerebral seguida de reperfusão tecidual.

Desde a antiguidade, as plantas medicinais vêm sendo utilizadas para o tratamento de diversas doenças e, gradativamente, o uso destes medicamentos naturais tem aumentado, porém, na maioria das vezes, o emprego do medicamento popular é realizado sem critérios adequados, ou seja, sem a fundamentação necessária na literatura para o uso, o que em algumas vezes, poderá resultar em efeitos indesejáveis e tóxicos. Achyrocline satureoides (Lam) D.C., popularmente conhecida como marcela, marcela do campo, macelinha, macela ou camomila-nacional é muito utilizada popularmente para tratar males do estomago e do intestino, problemas respiratórios, anemias, inflamações, infecções virais, diabetes e doenças de próstata. Nosso grupo de pesquisa vem desenvolvendo trabalhos com o objetivo de esclarecer os mecanismos antiinflamatórios das inflorescências da Marcela. No presente projeto serão investigadas as ações do extrato das inflorescências da Achyrocline satureoides sobre as funções de neutrófilos. Para tanto, serão empregados Ratos Wistar, machos. Os efeitos da administração oral do extrato sobre a migração de neutrófilos in vivo serão investigados na inflamação induzida pelo lipopolisacarídeo de E.coli (LPS) no tecido subcutâneo dorsal (bolsa de ar); sobre fenômenos de interação leucócito-endotélio (comportamento rolling e adesão) na microcirculação mesentérica em ensaios de microscopia intravital e sobre as secreções de mediadores quimiotáxicos (leucotrieno B4 e CINC) por ensaios imunoenzimáticos no exsudato obtido da bolsa de ar inflamada. Ensaios in vitro, empregando neutrófilos obtidos da cavidade peritoneal dos animais (4hs após a injeção local de glicogênio de ostra a 1%) e pré-incubados com o extrato, serão realizados para quantificar a expressão de moléculas de adesão e de receptores para o LPS toll-like receptor-4 (TLR-4) em ensaios de citometria de fluxo; a adesão de neutrófilos à cultura de célula endotelial e a quimiotaxia em câmara de Boyden.

A Diabetes (DM) é uma doença que acomete atualmente 285 milhões de pessoas em todo o mundo. Em 2030, estima-se que 428 milhões de pessoas apresentem esta doença (IDF, 2010). Uma vez que a literatura relata uma possível associação entre a DM e a exposição aos poluentes orgânicos persistentes (POPs), como as bifenilas policloradas (PCBs), o presente projeto visa investigar se a exposição ao PCB n°126 (3,3',4,4',5-Pentaclorobifenil) desencadeia alterações endógenas envolvidas na gênese da diabetes do tipo II. Para tanto, ratos Wistar machos serão expostos por instilação ao PCB126 nas concentrações de 1 ou 10 ppb (1 ou 10 µg/L). Animais expostos ao veículo serão utilizados como controle. 24 horas após a última exposição, os animais serão sacrificados para coleta do sangue circulante e pâncreas. Em amostras de sangue, serão avaliados: o número de células circulantes; a expressão de moléculas de adesão em leucócitos circulantes, por citometria de fluxo; os níveis plasmáticos de moléculas de adesão circulantes de atividade endotelial e a concentração de citocinas próinflamatórias, como IL-1alfa, TNF-alfa e IL-6 por kits de ELISA e o NO, por Reação de Griess; o perfil bioquímico e lipídico, a concentração de insulina e glicose basal e o teste de tolerância à glicose intravenoso. Em amostras de tecido pancreático, serão avaliados: a pureza e a viabilidade morfológica das ilhotas pancreáticas; a atividade da mieloperoxidase; a estereologia do pâncreas; a proteômica para o perfil de proteínas inflamatórias; a expressão dos receptores AhR e PPARs por western blot, e por microscopia intravital será analisada a interação leucócito-endotélio no pâncreas. Os dados obtidos poderão contribuir para a elucidação dos efeitos causados pela exposição aos PCBs, possivelmente sobre alterações observadas durante o desenvolvimento da diabetes do tipo II. Valor do projeto: R$ 200.000,00

Nos últimos anos, a nanotecnologia tem se destacado como uma ferramenta importante para o desenvolvimento de novos produtos nas mais variadas áreas, incluindo a farmacêutica. Dentre os diversos produtos nanotecnológicos disponíveis, os sistemas nanoparticulados ganham destaque por proporcionar vetorização de forma sustentada e atuar como carreadores de fármacos, aumentando a eficácia terapêutica. Estas características são fundamentais para o tratamento de inúmeras doenças, dentre as quais, as neoplasias. Apesar das inúmeras vantagens dos nanofármacos antineoplásicos, os parâmetros farmacológicos e toxicológicos desta estratégia terapêutica precisam ser melhor entendidos. Neste contexto, o presente estudo visa avaliar a atividade anti-carcinogênica e os possíveis efeitos tóxicos de nanocápsulas de indometacina e éster etílico de indometacina (associados ou não) e de sua formulação usual. Para tanto, os ensaios in vivo serão realizados em camundongas C57BL6. O tumor cerebral será induzido in vivo pela inoculação intracraniana da linhagem de células GL261 de glioma maligno de camundongo, 10 dias antes do início dos tratamentos. Os tratamentos serão realizados em dois protocolos distintos: 1) para avaliação da cinética de distribuição no tecido cerebral, os fármacos, marcados com fluoróforos serão administrados, nas doses de 1 ou 5 mg/kg, 30 minutos, 2 horas ou 4 horas, por via oral e intravenosa, ou 2) serão administrados uma vez dia, por via oral ou intraperitoneal, durante 10 dias, para avaliação do desenvolvimento tumoral ou para avaliação de parâmetros microcirculatórios. Os ensaios de microscopia intravital serão realizados para avaliar a distribuição das nanocápsulas na microcirculação do tecido cerebral, bem como a interação leucócito-endotélio, leucócito-plaqueta e plaqueta-endotélio, formação de trombos e de áreas hemorrágicas em vasos da microcirculação cerebral.

Nos últimos anos, a nanotecnologia tem se destacado como uma ferramenta importante para o desenvolvimento de novos produtos nas mais variadas áreas da academia e do setor privado, incluindo as de atuação farmacêutica. Dentre os produtos nanotecnológicos disponíveis na área farmacêutica, os sistemas nanoparticulados ganham destaque por proporcionar vetorização de forma sustentada e atuar como carreadores de fármacos, aumentando a eficácia terapêutica. Estas características são fundamentais para o tratamento de inúmeras doenças, dentre as quais, as neoplasias. Apesar das inúmeras vantagens dos nanofármacos anti-neoplásicos, os parâmetros farmacológicos e toxicológicos desta estratégia terapêutica precisam ser melhor compreendidos. Assim, o presente estudo visa implementar a metodologia de microscopia intravital para estudos nanotoxicológicos, ainda não abordados no Brasil, pelo estudo da atividade anti-carcinogênica e os efeitos tóxicos na microcirculação provocados pelas nanocápsulas de indometacina e de éster etílico de indometacina e de suas formulações usuais. Para tanto, ensaios serão realizados em camundongos fêmeas C57BL6, adultas, empregando nanocápsulas marcadas com fluoróforos. A distribuição das nanacápsulas e seus efeitos serão mensurados no tecido cerebral na vigência de formação de tumor cerebral induzido pela inoculação intracraniana de células da linhagem de glioma maligno GL261. Além da distribuição das nanocápsulas na microcirculação do tecido cerebral, serão analisados a interação leucócito-endotélio, leucócito-plaqueta e plaqueta-endotélio, formação de trombos e de áreas hemorrágicas em vasos da microcirculação cerebral. A eficácia terapêutica dos compostos será avaliada pela mensuração da cinética de formação da massa tumoral no cérebro. Valor do projeto: R$ 300.000,00

Nos últimos anos, a nanotecnologia tem se destacado como uma ferramenta importante para o desenvolvimento de novos produtos nas mais variadas áreas da academia e do setor privado, incluindo as de atuação farmacêutica. Dentre os produtos nanotecnológicos disponíveis na área farmacêutica, os sistemas nanoparticulados ganham destaque por proporcionar vetorização de forma sustentada e atuar como carreadores de fármacos, aumentando a eficácia terapêutica. Estas características são fundamentais para o tratamento de inúmeras doenças, dentre as quais, as neoplasias. Apesar das inúmeras vantagens dos nanofármacos anti-neoplásicos, os parâmetros farmacológicos e toxicológicos desta estratégia terapêutica precisam ser melhor compreendidos. Assim, o presente estudo visa implementar a metodologia de microscopia intravital para estudos nanotoxicológicos, ainda não abordados no Brasil, pelo estudo da atividade anti-carcinogênica e os efeitos tóxicos na microcirculação provocados pelas nanocápsulas de indometacina e de éster etílico de indometacina e de suas formulações usuais. Para tanto, ensaios serão realizados em camundongos fêmeas C57BL6, adultas, empregando nanocápsulas marcadas com fluoróforos. A distribuição das nanacápsulas e seus efeitos serão mensurados no tecido cerebral na vigência de formação de tumor cerebral induzido pela inoculação intracraniana de células da linhagem de glioma maligno GL261. Além da distribuição das nanocápsulas na microcirculação do tecido cerebral, serão analisados a interação leucócito-endotélio, leucócito-plaqueta e plaqueta-endotélio, formação de trombos e de áreas hemorrágicas em vasos da microcirculação cerebral. A eficácia terapêutica dos compostos será avaliada pela mensuração da cinética de formação da massa tumoral no cérebro. Valor do projeto (Jovem Pesquisador): R$ 20.000,00

A nanotecnologia é uma das mais novas áreas da fronteira do conhecimento científico-tecnológico, sendo que nanobiomateriais formados pela conjugação entre nano partículas e biomoléculas tem sido o foco de intensa pesquisa, tendo-se em vista o desenvolvimento de tecnologias capazes de aumentar a seletividade, sensibilidade e praticidade, por exemplo, dos métodos de imunoensaio, diagnóstico de doenças, quantificação e separação de biomoléculas atualmente empregados. Todavia, apesar dos significativos avanços na área, não foram encontrados na literatura modelos capazes de explicar ou prever por quais sítios de ligação devem ocorrer às interações proteína-nanopartícula, como também pouco se conhece acerca dos fatores que determinam a estabilidade e a funcionalidade dos nanobiomateriais. Assim, neste projeto visamos à realização de um estudo minucioso com o intuito de compreender e sistematizar os fatores responsáveis pela coordenação das proteínas nas nano partículas de ouro e sua influência sobre a estabilidade das suspensões e a funcionalidade das proteínas. Desta forma, espera-se obter nanobiomateriais com propriedades adequadas para o desenvolvimento ou aprimoramento de testes de imunoensaio do tipo ELISA, ou métodos para diagnóstico de Doença de Chagas e Hanseníase utilizando-se as propriedades plasmônicas das nano partículas de ouro acopladas a técnicas como SERS, SPR e microscopia Raman confocal. Este projeto faz parte do Projeto Temático FAPESP 2009/08584-6, "Química e Nanotecnologia Supramolecular". (AU)