Evelin Capellari Cárnio.

O objetivo deste projeto é investigar como a via Angiotensina-(1-7)/receptor Mas pode atuar como alvo terapêutico dual, capaz de modular de forma integrada inflamação, metabolismo energético e termorregulação durante a sepse e o choque endotoxêmico. Para isso, serão utilizadas abordagens multi-ômicas (transcriptômica, metabolômica e bioenergética), associadas a análises fisiológicas e neurofisiológicas, em modelos pré-clínicos de endotoxemia esepse polimicrobiana. A proposta está estruturada em três eixos complementares: caracterizar assinaturas temporais eespaciais de inflamação e metabolismo; avaliar os efeitos da administração central e periférica da Ang-(1-7) sobre esses circuitos; e investigar o papel do corpo carotídeo como sensor aferente da integração inflamatória e metabólica. Espera-se identificar biomarcadores preditivos e validar a via Ang-(1-7)/Mas como um novo alvo terapêutico para condições inflamatórias graves.

Neste estudo, mostramos que a administração oral de CORM-401 a ratosleva a um aumento na temperatura corporal quando mantido em sua zona determoneutralidade causado pelo aumento da termogênese sem tremores, semafetar nem a quantidade de perda de calor através da pele da cauda nem a pressãoarterial. Assim, os presentes dados são consistentes com a noção de que a entregade quantidades controladas de CO ao corpo causa um aumento na temperaturacorporal associado a uma produção elevada de calor, indicando que estetermoefetor é especificamente ativado após a liberação sistêmica de CO. Alémdisso, estas respostas termorreguladoras não foram associadas a quaisqueralterações significativas na pressão arterial. A termogênese sem tremores é definidacomo um aumento na produção de calor metabólico (acima do metabolismo basal)que não está associado à atividade muscular, mas resulta principalmente doaumento do metabolismo da gordura marrom

A comunicação neuroimune tem sido bastante explorada com o objetivo de encontrar novos alvos terapêuticos para as doenças inflamatórias. Com a descoberta da "via colinérgica anti-inflamatória", diversos estudos foram conduzidos explorando o potencial anti-inflamatório do nervo vago. Entretanto, mais recentemente, evidências têm sugerido que os barorreceptores (essenciais no controle da pressão arterial) podem também possuir participação na modulação do sistema imune. Assim, o presente estudo irá investigar a presença de mediadores da resposta inflamatória nas aferências barorreceptoreas de ratos. Para tanto, cerca de 5 a 7 dias antes do experimento, ratos Sprague-Dawley receberão o marcador DiI para identificar as aferências barorreceptoras. Após esse período, os animais serão anestesiados e será feito o registro da pressão arterial, registro da atividade do nervo depressor aórtico e o monitoramento da temperatura corporal. Em seguida, serão coletados o arco aórtico, o gânglio nodoso, o nervo depressor aórtico e amostras de sangue em momentos diferentes - antes (basal) e após (30, 60, 90 e 120 min) a administração de salina (grupo controle) ou de LPS (grupo experimental). A administração de LPS será usada para induzir a inflamação sistêmica. Serão avaliados os parâmetros hemodinâmicos, a atividade do nervo depressor aórtico e a sensibilidade barorreflexa por meio de programas computacionais específicos. A expressão dos mediadores da resposta inflamatória nos tecidos coletados será analisada por meio de técnicas de PCR, Western blot e imunofluorescência nos diferentes momentos estudados. As concentrações plasmáticas de citocinas, de nitrato/nitrito e de vasopressina serão identificadas por meio de procedimentos específicos, para validar o modelo de inflamação sistêmica. Espera-se com o presente estudo identificar a presença de receptores do sistema imune nas aferências barorreceptoras, contribuindo com o progresso dos estudos envolvendo a participação dos barorreceptores na comunicação neuroimune e sugerindo um novo alvo terapêutico para a modulação do sistema imune.

Projeto Temático Fapesp 2016/17681-9

O choque séptico é a complicação mais comum da sepse e responsável por um grande número de casos de morte em unidades de terapia intensiva. Em pacientes com diagnóstico de sepse, a febre é um dos sinais mais comuns, entretanto a hipotermia pode ocorrer e geralmente está associada a infecções severas, prognóstico pior e alta mortalidade. A confluência de vários fatores contribuem para a deterioração da condição clínica do paciente que evoluem para choque séptico. Um dos principais fatores é a aumentada síntese de óxido nítrico que pode mediar alterações na função cardiovascular e termorregulatória.
O enfermeiro é capaz de detectar o início dos sinais clínicos desses quadros, que incluem: complicação do quadro pulmonar (com presença de taquipnéia), sudorese fria, confusão mental, oligúria, taquicardia, hipotensão arterial e alteração da temperatura corporal. A detecção desses sinais pode ser facilmente realizada com instrumentos apropriados e exame físico.
Neste estudo o objetivo será correlacionar os valores de temperatura e as concentrações plasmáticas de óxido nítrico em pacientes com diagnóstico de sepse, sepse grave e choque séptico.

A hipótese atualmente prevalente é de que parte das manifestações clínicas que ocorrem durante a sepse seja causada por uma excessiva resposta do hospedeiro frente à infecção, originando uma resposta inflamatória descontrolada. Várias das características da sepse podem ser reproduzidas, experimentalmente, através da administração do lipopolissacarídeo (LPS), um componente da parede externa de bactérias Gram-negativas. A presença do LPS permite sua ligação ao receptor, composto pelo TLR4, CD14 e a proteína mielóide-2, havendo como conseqüência, a ativação dos macrófagos para a produção de proteínas inflamatórias, como citocinas e a enzima óxido nítrico sintase induzível (iNOS). A iNOS catalisa a oxidação do aminoácido L-arginina, liberando óxido nítrico (NO) e L-citrulina. O NO é um mediador gasoso e um radical livre que apresenta importante função como agente antimicrobiano. Os macrófagos apresentam receptores que se ligam ao hormônio colecistoquinina (CCK), os quais possuem um aumento na sua expressão após o tratamento com LPS. Esse fato sugere uma possível modulação do sistema imune pela CCK. Por isso, neste trabalho propomos avaliar a participação da CCK na síntese de NO em cultura de macrófagos peritoneais e em ratos submetidos ao choque endotoxêmico, através da medida indireta de seus metábolitos estáveis (nitrito e nitrato). Além disso, iremos avaliar o papel da CCK na expressão do gene e na síntese da iNOS. Deste modo, temos como objetivo demonstrar a comunicação e a interação entre os sistemas imune e endócrino.

O objetivo deste estudo será avaliar as concentrações plasmáticas de vasopressina, correlacionando-as aos valores de temperatura corporal, em intervalos de tempo pré-estabelecidos, em pacientes com sepse, sepse grave ou choque séptico, classificados de acordo com as definições do American College of Chest Physicians e a Society of Critical Care Medicine de 1992 (BONE; SIBBALD; SPRUNG, 1992 ), admitidos no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto.

O óxido nítrico é um radical livre produzido pela oxidação da L-arginina, podendo esta reação ser catalisada por três enzimas diferentes óxido nítrico sintase endotelial, neuronal e induzível. A isoforma induzível é encontrada em células do sistma imune como os macrófagos, células endoteliais, células do sistema nervoso, é estimulada por componentes microbianos, principalmente o lipopolissacarídeo (LPS) que compões a parede de bactéiras Gram-negativas. O reconhecimento do lipopolissacarídeo pelos macrófagos se dá através de um complexo de receptores que é composto por: proteína CD-14, rceptor Toll-like 4 (TLR4) e proteína mielóide de diferenciação-2 (MD-2), após este reconhecimento, os macrófagos são capazes de produzir grandes quantidades de citocinas e óxido nítrico. A atividade dos macrófagos durante a resposta imune sofre a ação de vários fatores, dentre eles o sistema endócrino. Estudos indicam que o peptídeo natriurético atrial inibe a produção de óxido nítrico pelos macrófagos. A vasopressina também tem mostrado um efeito modulador positivo aumentando a fagocitose de macrófagos. Com base nestes dados o objetivo deste trabalho é avaliar o efeito da vasopressina sobre a produção de óxido nítrico pelos macrófagos.

O NO é um importante encontrado em muitos tecidos, incluindo o endotélio vascular. Devido à relação entre NO e PA propomos testar a hipótese: a síntese de NO estaria diminuída em pacientes portadores da hipertensão do jaleco branco, quando comparado a pacientes normotensos?

O NO é um importante vasodilatador encontrado em muitos tecidos, incluindo o endotélio vascular. Devido à relação entre NO e PA propomos testar a hipótese :
1. A síntese de NO estaria diminuída em pacientes portadores da hipertensão do avental branco, quando comparado a pacientes normotensos.
Além disso, sabendo que em pacientes com hipertensão do avental branco os valores de PA verificados pela enfermeira são mais próximos dos valores encontrados na MAPA que quando obtidos por médicos, testaremos a hipótese: 
2. A síntese de NO não se altera em pacientes portadores da hipertensão do avental branco quando a PA é verificada pela enfermeira.

A Tc é um dos sinais monitorados continuamente em pacientes hospitalizados, juntamente com parâmetros respiratórios e cardiovasculares. A ênfase dada a Tc é fundamentada pela sua grande influência sobre as funções fisiológicas e pelo fato de que alterações da Tc são importantes sinalizadores de alterações nos estados de saúde. As alterações da Tc manifestam-se durante febre e anapirexia, e ainda durante o choque séptico, onde há alterações complexas da mesma. Febre e anapirexia são por definição, aumento e queda regulada na temperatura corporal, respectivamente, enquanto que choque séptico é uma resposta inflamatória sistêmica à infecção (sepse) acompanhada por hipotensão e manifestações clínicas secundárias à ativação inflamatória que incluem febre ou hipotermia. Existe um grande esforço da comunidade científica mundial na busca da identificação dos mecanismos responsáveis pelas alterações da Tc. Sabe-se que o SNC é um importante sítio de ação dos diversos hormônios e neuromoduladores envolvidos nas alterações da Tc. Sendo assim, o presente projeto enfocará o SNC como objeto de estudo. Dividir-se-á este projeto em oito subprojetos que tem os seguintes objetivos específicos: 
1) verificar o envolvimento dos receptores glutamatérgicos ionotrópicos na hiperventilação e na anapirexia induzidas por hipóxia;
2) verificar o envolvimento do óxido nítrico e monóxido de carbono na febre induzida pelo fator de crescimento derivado de plaquetas;
3) estudar participação do locus coeruleus na febre induzida por LPS;
4) analisar a participação da serotonina, no SNC, na anapirexia e hiperventilação induzidas por hipóxia;
5) verificar se a adenosina e/ou a dopamina são neurotransmissores endógenos da anapirexia induzida por hipóxia;
6) verificar se existe diferença entre as respostas anapiréxicas induzidas pela hipóxia durante as fases de claro e de escuro do ciclo circadiano e se a melatonina modula essa resposta;

Neste estudo avaliamos os valores de pressão arterial média em animais com hipertensão induzida por administração de inibidores da síntese do óxido nítrico antes e após a ingesta de elevadas concentrações de sódio na dieta.

A infecção bacteriana caracteriza-se por alterações na temperatura corporal com a ocorrência de febre ou hipotermia. A febre é a manifestação mais frequente e a hipotermia pode ocorrer em casos mais graves, como por exemplo, durante a infecção bacteriana (sepse). As alterações de temperatura ocorridas durante a sepse podem ser reproduzidas em animais experimentais com a administração de altas doses de endotoxina na circulação.
O óxido nítrico (NO) é uma substância gasosa que transmite sinais no interior do organismo. Essa transmissão de sinal se dá através de sua síntee em diferentes tipos celulares. Os pesquisadores responsáveis pela descoberta do NO, como uma molécula sinalizadora, foram agraciados com o Prêmio Nobel de Medicina e Fisiologia em 1998. Esta descoberta vem revolucionando a medicina dando origem a uma explosão de novos tratamentos clínicos. Além do NO, demonstrou-se, recentemente, que o monóxido de carbono (CO) pode ser produzido pelo organismo e que esses neurotransmissores gasosos atípicos participam de diferentes mecanismos regulatórios, como o controle da temperatura, e da síntese e liberação hormonal.

O objetivo deste estudo é avaliar as alterações na liberação do peptídeo natriurético atrial durante o choque séptico experimental e avaliar a participação do óxido nítrico nesta regulação hormonal.