Aparecida Maria Fontes.

O objetivo da presente proposta foi desenvolver um material didático junto aos alunos do ensino médio contendo as informações básicas sobre vacina genética para prevenção de SARS-CoV-2. Para tanto, o projeto foi organizado em quatro módulos: 1) conjunto de aulas teóricas para embasamento sobre o assunto; 2) construção do jogo; 3) aplicação do jogo nas Escolas participantes do projeto e 4) desenvolvimento de um mini- projeto científico por meio de análises in silico, em substituição a proposta inicial sobre a realização de experimentos no laboratório. Nesses primeiros 9 meses de projeto cumprimos os objetivos propostos nos módulos de 1 a 3. Como será apresentado no relatório, após o conjunto de aulas teóricas, preparo de textos e discussões de questões abertas propostas para as alunas do ensino médio, iniciamos o segundo módulo que foi a construção do jogo. Após discussões de diferentes idéias optou-se pela construção de um jogo de tabuleiro que envolve a conquista de domínios. O jogo foi desenvolvido utilizando o programa power point e é constituído por 68 slides. Ao jogador são sorteadas cartas contendo questões sobre Genética, Imunologia e Virologia. Vence o jogador que primeiro conquistar todos os domínios. Como parte do jogo, foi elaborado um questionário com 10 questões testes e que é aplicado antes e após o jogo. Desta maneira podemos ter uma avaliação quantitativa do aprendizado após o jogo. Participaram do projeto duas alunas da Escola Estadual Sebastião Fernandes Palma e bolsistas do CNPq, uma aluna da Escola particular Albert Sabin e não bolsista, uma professora da Escola Estadual, três alunos de graduação e uma aluna de pós-graduação da USP.

Tendo como base o livro: BioBuilder - Synthetic Biology in the Lab publicado por Natalie Kuldell, Rachel Bernstein, Karen Ingram & Kathryn M. Hart - nossa proposta é traduzir para Português e aplicar junto a nossos alunos do ensino básico.

Foi desenvolvido um folder explicativo e um clip: http://youtu.be/TJB1NvTxqDo. Esse material tem sido aplicado em diversas Escolas do Ensino Basico de São Paulo e Minas Gerais.

Extensão do Projeto anterior de geração de uma biblioteca de linhagens celulares humanas produtoras dos fatores VIII e IX da coagulação sanguinea para conclusao do mesmo.
Convênio: 01.05.0691.00
Reference: 2556/05
Valor: RS 370.000,00

Catálogo das Atividades 2001 ? 2003 do Projeto Educacional: As Células, o Genoma e Você Professor.

A Bioengenharia Tecidual utiliza técnicas de descelularização, recelularização e bioimpressão 3D para permitir a produção de biomateriais funcionalizados para transplantes. A descelularização de órgãos produz biomateriais acelulares com preservação da composição e estrutura 3D da matriz extracelular (MEC). Esses biomateriais, quando recelularizados e aplicados in vivo, podem proporcionar estímulo local para migração e proliferação de células-tronco e/ou progenitoras, bem como diferenciação celular e/ou modulação da resposta imune inata no sítio de implantação. A bioimpressão 3D pode ser utilizada para otimizar a bioatividade do scaffold descelularizado, tanto pela customização estrutural, quanto por sua associação com outras moléculas e materiais, permitindo, assim, ampliar seu leque de aplicações. Este projeto baseia-se na hipótese de que as estratégias de descelularização, recelularização, bioimpressão 3D e implantação do tecido funcionalizado podem ser utilizadas para entender a quimiotaxia in vivo de células endógenas para estes biomateriais funcionalizados e validá-los para uso na Medicina Regenerativa Veterinária. Para testar esta hipótese, modelos de injúria tecidual in vivo e in vitro serão utilizados. Uma das fontes de diversos biomateriais são os tecidos placentários, que compartilham com tumores diversos mecanismos associados à oncogênese da MEC. Portanto, os Objetivos deste projeto são: a) otimizar o protocolo de descelularização de diferentes tecidos, visando à geração de scaffolds que possam ser associados a diferentes tipos celulares (recelularização) e biopolímeros, dando origem a tecidos funcionalizados a serem utilizados para o reparo de tecidos e órgãos e para o transplante em modelos animais; b) investigar os efeitos de biomateriais placentários na gênese, progressão tumoral. Uma equipe multidisciplinar envolvendo anatomistas, biologistas celulares, cirurgiões e imunologistas e o acesso a tecnologias e facilidades no estado da arte garantem a viabilidade desta proposta. Os resultados obtidos deverão contribuir para melhor compreender não só as interações celulares e moleculares que ocorrem no sítio de injúria tecidual e de tumores, mas, também, permitir o desenho de novas estratégias terapêuticas para o reparo tecidual e a intervenção no crescimento e na disseminação tumoral.

O objetivo da presente proposta é desenvolver um material didático junto aos alunos do ensino médio contendo as informações básicas sobre o genoma viral e as particularidades do desenvolvimento de uma vacina de RNA. Esse material didático poderá ser apresentado na forma de uma cartilha ilustrativa ou dramatização.

O objetivo do projeto é realizar o alinhamento dos genomas das cepas de SARS-CoV-2 presentes nos Bancos de Dados Internacionais como NCBI (National Center for Biotechnology Information) e GISAID (Global Initiative on Sharing All Influenza Data) para o mapeamento de epítopos antigênicos para três proteínas estruturais do genoma viral.

A doença de Gaucher, bem como a maior parte das doenças lisossomais apresentam baixa prevalência e baixa incidência no Brasil e em todo mundo, com exceção em alguns países com elevada incidência de casamentos consanguíneos. Em nosso país há a carência de estudos voltados para o desenvolvimento de tratamentos para doenças raras. O presente projeto visa a geração de uma linhagem celular humana produtora da #946;-glucocerebrosidade humana sintética e mutante para terapia de reposição para Doença de Gaucher. A estratégia proposta é inovadora e utiliza conceitos básicos de biologia sintética, a qual constitui uma tecnologia mais eficiente e rapída para geração de vetores virais portadores do cDNA relativo à proteína terapêutica quando comparada à tecnologia clássica do DNA recombinante. Ao final da pesquisa espera-se a geração de uma patente relativa à produção de uma proteína para Terapia de Reposição para Doença de Gaucher. Convém ressaltar que Doença de Gaucher representa o protótipo das Doenças do Erro Inato do Metabolismo e abre perspectivas para outras doenças do erro inato do metabolismo, como por exemplo, doença de alfa-manosidose; lípase ácida lisossomal; doença de Pompe, mucopolissacaridose entre outras.

Esse projeto tem duas naturezas: uma científica e uma educacional. Ambas estão sendo desenvolvidas em colaboração com o Departamento de Engenharia Biológica do Massachusetts Institute of Technology, School of Engineering, Cambridge USA. A científica está sendo desenvolvida em colaboração com o laboratório do Prof. Dr. Ron Weiss ? diretor do Centro de Biologia Sintética (SBC) e a educacional com a Fundação BioBuilder Educational sob. a coordenação da Profa. Dra. Natalie Kuldell.

Meduloblastoma representam um grupo de tumores genética e epigeneticamente heterogêneos que surgem no cerebelo. Histologicamente são classificados em meduloblastoma clássico, meduloblastoma desmoplásico/nodular, meduloblastoma com extensa nodularidade, meduloblastoma anaplásico e medulobastoma de grandes células. A nível molecular é classicado em 4 subtipos: WNT, SHH, Grupo C e Grupo D. A terapia anti-tumoral envolve diversas modalidades de tratamento, como cirurgia, quimioterapia e radioterapia e muitas vezes a resposta não é obtida, ou resulta em lesões no sistema nervoso central com diversos graus de comprometimento do mesmo. A compreensão da biologia desses tumores torna-se necessária e permitirá explorar estratégias terapêuticas alternativas com o objetivo de aumentar a taxa de cura e redução das sequelas associadas ao protocolo terapêutico. Os genes HOX são críticos para o desenvolvimento embrionário do cérebro e não são expressos no cérebro adulto. Os genes MLL2 e MLL3 regulam os genes HOX e são inativados em meduloblastoma. A elucidação dos mecanismos epigenéticos que regulam os genes HOX e ativam genes alvos associados com o fenótipo maligno é objetivo desse projeto e podem constituir novos alvos terapêuticos.

Esse projeto tem como objetivo principal desenvolver um vetor lentiviral portador do cDNA relativo ao fator VIII da coagulação sanguínea humana por meio da biologia sintética. Em colaboração com Daniel Gibson e John Craig Venter, após o desenvolvimento do vetor lentiviral semi-sintético portador do cDNA do FVIII sintético e mutante iremos investigar a funcionalidade do mesmo quanto a expressao do gene terapêutico, bem como, o potencial de formação de partículas virais. Em seguida, será examinada se a proteína terapêutica sintética é funcional. Por fim, tendo sido obtido resultados positivos nessa primeira parte, iremos partir para o desenvolvimento de uma linhagem celular humana com produção permanente de FVIII sintético e mutante da coagulação.

Nos últimos 10 a 15 anos tem-se reconhecido que o desenvolvimento é a chave para o entendimento da evolução tumoral. Muitos genes que controlam o desenvolvimento estão alterados na célula cancerígena e têm implicações na transformação neoplásica. Nesse aspecto, os genes homeobox são primordiais para o desenvolvimento e sua desregulação epigenética envolvendo os RNAs longos não codificadores está sendo progressivamente associada com a progressão tumoral em vários tipos de câncer (leucemia, câncer de mama e colon uterino). Entretanto, pouco é compreendido, sobre os mecanismos de regulação dos genes HOX em meduloblastoma. Esse projeto tem como objetivo investigar o papel do lncRNA Evf-2 que regula genes HOX no desenvolvimento do meduloblastoma.

O projeto de pesquisa tem dois objetivos principais: desenvolver linhagens celulares humanas portadoras em genoma dos fatores recombinantes VIII e IX da coagulação sanguinea humana e desenvolver protocolos de terapia celular para hemofilia A e B utilizando celulas-tronco mesenquimais ou progenitoras endoteliais.

Nessa nova etapa do projeto os principais objetivos são: realizar a avaliação em modelos murinos hemofílicos sobre a atividade biologica dos fatores VIII e IX recombinantes gerados previamente em linhagens celulares humanas. Escalonar a producao em biorreatores e desenvolver novas moleculas sinteticas do fator VIII da coagulação em linhagens celulares humanas utilizando o sistema lentiviral

A Hemofilia B é uma doença genética ligada ao cromossomo X que resulta na deficiência do fator de coagulação sangüínea IX no plasma sangüíneo. Os pacientes podem ser atingidos desde a primeira infância causando danos importantes no aparelho locomotor, comprometendo a qualidade de vida do portador e acarretando um pesado impacto social e econômico sobre o paciente e a sociedade em geral.
Forma de tratamento mais comum: Reposição do fator de coagulação deficiente obtido a partir do plasma humano (pdFIX). 
Embora nesse novo milênio a expectativa de contaminação pelo vírus Hepatite ou HIV utilizando o pdFVIX é mínima, o maior problema atual sobre o uso do mesmo é o risco de infecção pelo vírus B19 resistente a elevada temp, vírus do Nilo Ocidental (WNV), a nova forma variante do ?vírus lento? ou ?prion? causador da doença de Creutzfeldt-Jakob (?Doença da Vaca Louca?) ou ainda novos vírus.
Como alternativa, em países desenvolvidos fatores de coagulação recombinantes vêm sendo a opção terapêutica mais promissora.
Nesse sentido, esse projeto visa a produção do fator recombinante IX de coagulação sanguinea humano para futuras aplicações terapêuticas.

A Leucemia Mielóide Crônica (LMC) é uma doença mieloproliferativa resultante da expansão clonal de uma célula progenitora hematopoética transformada. Essa neoplasia representa cerca de 20% de todos os casos de leucemia, apresentando uma incidência anual média de 1-1,5 casos por 100.000 habitantes, sendo mais frequente em idades acima de 60 anos. Embora, casos de cura da doença vêm sendo relatados com o uso da droga sintética STI571 ou com o transplante alogênico de células tronco hematopoéticas, esses índices são inferiores a 25-30% devido a aquisição de resistência a essa droga ou a falta de um doador de MO compatível. Nesse sentido, o objetivo desse projeto consiste em desenvolver vetores retrovirais portadores de antígenos BCR-ABL e em seguida modificar as células dendríticas com os mesmos para a formação de células de memória anti-tumoral.

De acordo com dados do Ministério da Saúde de dezembro de 2002, a AIDS no Brasil atingiu aproximadamente 260 mil casos, sendo 71% em homens e 29% em mulheres. O conhecimento do sistema imunológico, associado a caracterização molecular do HIV-1 vêm permitido a cada ano a elaboração de estratégias mais promissores de imunização contra a AIDS, entretanto, o sucesso ainda não foi obtido. O objetivo deste projeto consiste em desenvolver um vetor portador da proteína recombinante P24 de HIV-I, através de técnicas de engenharia genética, que poderão ser transfectados em células humanas e utilizados em testes diagnóstico de AIDS.

A infecção pelo HTLV-I é endêmica no Brasil, sendo encontrada em maior prevalência nas cidades de Salvador, Belém, São Paulo e Porto Alegre. As infecções por HTLV-I são diagnosticadas sorologicamente. Em 1993, foi estabelecido, aqui no Brasil, que de toda doação de sangue fosse realizada triagem sorológica para o HTLV-I. Entre as diversas proteínas estruturais de HTLV-I a proteína gag P24 é a mais antigênica. Deste modo, a clonagem e expressão da proteína recombinante P24-HTLV-I pode consistir em um alvo importante para futuras aplicações no desenvolvimento de Kits de diagnóstico de HTLV ou no desenvolvimento de estratégias terapêuticas que visam a ativação da resposta imunológica no controle da infecção pelo vírus. O objetivo é desenvolver um vetor de expressão recombinante portador desse gene pCDNA/P24 e obter uma linhagem recombinante produtora do antígeno P24 de HTLV-I.

Esse projeto é dividido em duas fases. A primeira fase consiste em caracterizar as Células-Tronco Mesenquimais também denominadas células estromais mesenquimais multipotentes de diferentes tecidos adultos e fetais, entre eles, veia umbilical, arteria umbilical, fígado, pulmão entre outros e comparar suas similaridades e diferenças entre elas e com as células perivasculares também conhecidas como pericitos utilizando vários parâmetros: análise morfológica, imunofentípica, perfil de expressão e potencial de diferenciação. A segunda fase é investigar seu potencial uso em modelos de lesão tecidual e investigar o papel das mesmas em modelos tumorais.

A Hemofilia A é uma doença genética ligada ao cromossomo X que resulta na deficiência do fator de coagulação sangüínea VIII no plasma sangüíneo. Os pacientes podem ser atingidos desde a primeira infância causando danos importantes no aparelho locomotor, comprometendo a qualidade de vida do portador e acarretando um pesado impacto social e econômico sobre o paciente e a sociedade em geral.
A forma de tratamento mais comum consiste na reposição do fator de coagulação deficiente obtido a partir do plasma humano (pdFVIII). 
Embora os avanços tecnológicos de purificação do FVIII a partir do plasma de indivíduos saudáveis tenham permitido um risco mínimo de contaminação pelo vírus Hepatite ou HIV, o maior problema atual sobre o uso do mesmo é o risco de infecção pelo vírus B19 resistente a elevada temp, vírus do Nilo Ocidental (WNV), a nova forma variante do ?vírus lento? ou ?prion? causador da doença de Creutzfeldt-Jakob (?Doença da Vaca Louca?) ou ainda novos vírus.
Como alternativa, em países desenvolvidos fatores VIII de coagulação recombinantes vêm sendo a opção terapêutica mais promissora.
Nesse sentido, esse projeto visa a produção do fator recombinante VIII de coagulação sanguinea humano para futuras aplicações terapêuticas