Mariz Vainzof.

MCTI/CNPQ/Universal 14/2014 - Faixa C - até R$ 120.000,00
Os enfoques terapêuticos e preventivos podem ser direcionados para qualquer um dos quatro itens acima. Pesquisas com células tronco mesenquimais provenientes de medula óssea e de tecido adiposo, mostraram que, sob certas condições in vitro, podem proliferar indefinidamente e originar diversas linhagens celulares. Por outro lado, o tecido muscular degenerado apresenta diversas barreiras para o sucesso da terapia celular, dado ao ambiente celular hostil, e intensa infiltração de tecido conjuntivo e adiposo. Portanto, uma abordagem terapêutica eficaz provavelmente deverá utilizar mais de uma ferramenta, unindo a reposição ou estimulo a proliferação das células satélites musculares, com meios que melhorem as barreiras oferecidas pelo ambiente muscular distrófico.
	Neste sentido, os objetivos específicos deste projeto são: 
1-) Análise das alterações da matriz extracelular e sua correlação com a regeneração do músculo distrófico nas diferentes mutações: 
	- a caracterização do grau de substituição por tecido conjuntivo em músculo distrófico e da composição do tecido conjuntivo de substituição em diferentes distrofias musculares
	- a avaliação de possíveis correlações entre a composição do tecido conjuntivo de substituição e a capacidade regenerativa em diferentes modelos para distrofias musculares
	- avaliar possíveis correlações entre a composição do tecido conjuntivo presente no músculo distrófico e o potencial para sucesso de terapia celular e gênica em diferentes modelos para distrofias musculares. 
2-) Avaliação da presença quantidade e ação das metaloproteinases no músculo normal e distrófico.: Serão avaliadas diversas metaloproteinases no músculo distrófico, para verificar a melhor estratégia para beneficiar a terapia celular.
3-) Caracterização e estudo da capacidade regenerativa de células tronco mesenquimais de medula óssea e tecido adiposo, e células-satélite musculares, de camundongos distróficos com diferentes defeitos moleculares : avaliar as possíveis diferenças nos mecanismos de ativação e atuação das células-satélite no músculo distrófico dos modelos murinos Largemyd e Lama2dy-2J/J, que possuem padrão de degeneração bastante semelhante, mas com diferenças no padrão de regeneração.

Os nossos objetivo para o CEPID II se concentram no estudo de doenças do desenvolvimento e degenerativas, bem como no estudo do envelhecimento, utilizando as novas tecnologias de sequenciamento de última geração para o seqüenciamento do genoma completos. Alem disso, irmos expandir nossas investigações sobre o uso de células-tronco para a pesquisa básica e para sua utilização em terapias de transplante. Pretendemos identificar novos genes, investigar os mecanismos responsáveis pela variabilidade fenotípica em doenças mendelianas e complexas, bem como no processo de envelhecimento, utilizando o nosso banco de células tronco, de DNA e de tecidos de pacientes e controles normais, através da formação de um banco de dados e DNA de idosos saudáveis da nossa população. Vamos expandir nossos estudos básicos sobre células-tronco, e suas aplicações em pesquisas e pré-clínicas, e iniciaremos ensaios clínicos em pacientes gravemente afetados.

Será testado e comparado o potencial miogênico de células tronco mesenquimais de medula óssea, de tecido adiposo e de origem muscular, na reparação do processo de degeneração muscular em diferentes modelos murinos para distrofias musculares, incluindo os nossos recém criados duplo mutantes para proteínas musculares.
Os diferentes tipos celulares serão injetados nos modelos murinos por via endovenosa, e posteriormente estas células serão rastreadas através da detecção da proteína primariamente deficiente em cada modelo, ou através do rastreamento de marcadores moleculares da linhagem celular injetadas. Os camundongos tratados serão também avaliados clinicamente, histológicamente e geneticamente, para a identificação de benefícios terapêuticos.
Os objetivos específicos deste projeto são: 
1-) Caracterização e estudo da capacidade regenerativa de células tronco mesenquimais de medula óssea e tecido adiposo, e células-satélite musculares, de camundongos distróficos com diferentes defeitos moleculares : avaliar as possíveis diferenças nos mecanismos de ativação e atuação das células-satélite no músculo distrófico dos modelos murinos Largemyd e Lama2dy-2J/J, que possuem padrão de degeneração bastante semelhante, mas com diferenças no padrão de regeneração.
2-) Análise das alterações da matriz extracelular e sua correlação com a regeneração do musculo distrófico nas diferentes mutações: - a caracterização do grau de substituição por tecido conjuntivo em músculo distrófico e da composição do tecido conjuntivo de substituição em diferentes distrofias musculares (em modelos animais e em pacientes); - a avaliação de possíveis correlações entre a composição do tecido conjuntivo de substituição e a capacidade regenerativa em diferentes modelos para distrofias musculares; avaliar possíveis correlações entre a composição do tecido conjuntivo presente no músculo distrófico e o potencial para sucesso de terapia celular e gênica em diferentes modelos para distrofia

Este trabalho tem como objetivo o estabelecimento de uma metodologia padronizada para a caracterização do padrão de degeneração muscular de diferentes modelos animais para distrofias musculares através de imagens e espectroscopia por RMN.

Esta proposta visa estabelecer um centro de referência para criação de banco de células tronco humanas e desenvolvimento de pesquisa em Genética Humana com base nessas células, no Instituto de Biociências da Universidade de São Paulo. 
Para alcançar esses objetivos, planejamos: 
?Estabelecer um banco de células tronco e de DNA, obtidos de indivíduos portadores de diferentes doenças genéticas e de indivíduos normais da população geral, como grupo controle. Amostras de DNA e tecidos de pessoas idosas, gozando de boa saúde serão também armazenadas. Essas linhagens celulares e amostras de DNA serão utilizadas pelos investigadores do CETGEN em seus projetos de pesquisa. Investigadores de fora poderão obter células depositadas no banco, para uso em projetos de pesquisa, após aprovação do projeto pelo Comitê Consultivo do CETGEN. O banco de células representará a core facility do CETGEN e dará apoio para os projetos de pesquisa desenvolvidos por pesquisadores do centro e externos. 
?Expandir nossa investigação básica e pré-clínica, utilizando células tronco em diferentes modelos experimentais, visando aumentar o conhecimento sobre o crescimento e a diferenciação celular e contribuir para potenciais terapias.

Pesquisador Principal e membro do comité Gestor

A nossa proposta é de estabelecer infra-estrutura para produção de células tronco humanas de acordo com as boas práticas de manipulação e com os padrões vingentes da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). A produção destas células poderá contribuir para garantir a qualidade das pesquisas a serem desenvolvidas tanto em relação a projetos da área básica como aqueles que envolvem ensaios pré-clínicos em modelos animais e em humanos. A produção destas células será para uso não só dos pesquisadores vinculados a esta proposta, mas também para qualquer pesquisador da rede nacional de terapia celular (RNTC), sendo que o projeto deverá estar previamente aprovado em comitês de Ética locais e/ou CONEP.
Em um primeiro momento, nos propomos a produzir células tronco a partir de tecido adiposo e de polpa de dente decíduo de indivíduos saudáveis. Tendo em vista que já dispomos de experiência no estabelecimento de células tronco a partir de vários tecidos (parede de cordão umbilical, sangue menstrual e músculo), a nossa proposta quanto ao tipo celular a ser produzido poderá ser modificado a depender da demanda da RNTC. 
Será também introduzida a tecnologia de células tronco pluripotentes induzidas (iPS)

Coordenadora do auxílio CNPq 500105/2007-3. Edital MCT/CNPq 01/2007.

Coordenadora do Biotério do CEGH - Projetos que obtiveram verbas da Pró Reitoria de Pesquisa.

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O objetivo principal do presente projeto consistiu em estudar o possível potencial miogênico de células tronco mesenquimais e embrionárias na reparação do processo de degeneração muscular em diferentes modelos com deficiências de proteínas musculares diversas. Para tal, foram realizados experimentos in vivo e in vitro, através da detecção da proteína primariamente deficiente em camundongos distróficos injetados com células tronco normais e em experimentos de co-cultura. 
Na Dissertação de mestrado de Danielle Guerrieri, estudamos o potencial terapêutico de células tronco murinas mesenquimais e embrionárias no tratamento da Distrofia Muscular de Duchenne, utilizando o modelo murino mdx. No trabalho de mestrado de Paula Onofre-Oliveira, foi feita a quantificação da expressão de diversos fatores que estão implicados nos processos de degeneração e regeneração muscular, em tecido muscular de modelos murinos distróficos com diferentes defeitos nas proteínas musculares, para elucidação dos mecanismos fisiopatológicos envolvidos, visando terapias. Alem disso, foi estudado o potencial terapêutico de células-tronco mesenquimais de medulas óssea, nos modelos Lama2dy-2J/J (deficiente para a proteína α2-laminina) e Large-myd (defeito de glicosilação). 
Alem disso, os resultados destas pesquisas e correlatas foram apresentadas em 14 comunicações em congressos, sendo 5 congressos internacionais, e 3 congressos nacionais. A convite, participamos também de 4 cursos/simpósios/ mesas redondas abordando o tema modelos animais e estudos com células tronco. Foram ministradas 8 palestras/conferencias sobre o tema. Foram também publicados 3 capítulos de livros. Quanto à formação de alunos, foram concluídas 2 dissertações de mestrado, estão atualmente em andamento duas dissertações de mestrado, e 4 teses de doutorado. Alem disso, estão também em andamento 4 monografias de conclusão de curso.

As distrofias musculares constituem um grupo heterogêneo de doenças caracterizadas por uma degeneração progressiva e irreversível da musculatura esquelética, e que têm sido objeto de muitas pesquisas. A deficiência da proteína muscular distrofina é o defeito primário das formas de distrofias humanas de Duchenne (DMD) e Becker (BMD), e é também observada no camundongo mdx, que tem uma mutação de ponto no exon 23 do gene da distrofina. Essa proteína, localizada no citoesqueleto de músculos esqueléticos e cardíacos, tem como função manter o tráfego de informações através da membrana da célula muscular, além de manter a sua estabilidade. 
Pesquisas a respeito de células tronco provenientes de medula óssea, principalmente as do tipo mesenquimal, mostraram que, sob certas condições in vitro, podem proliferar indefinidamente, sendo capazes de originar quase todas as linhagens celulares de diferentes funções. Além disso, o caráter totipotente das células tronco embrionárias oferece um enorme potencial para o repovoamento do músculo e expressão de proteínas deficientes.
Baseado nisso, será testado o possível potencial miogênico das células tronco mesenquimais e embrionárias na terapia da DMD, no modelo murino mdx in vivo e in vitro, através da detecção da proteína distrofina em camundongos distróficos implantados com células tronco e em experimentos de co-cultura

Projeto CNPq- Universal

O principal objetivo do Centro de Estudos do Genoma Humano é ampliar nossa compreensão a respeito da função e controle gênico, com um maior enfoque no desenvolvimento neuromuscular, craniofacial e cerebral através do estudo de doenças genéticas. Uma parte fundamental de nossa missão é de contribuir para o desenvolvimento de novas estratégias para tratamento de condições genéticas ou adquiridas. A principal ferramenta para atingir estes objetivos é primeiramente identificar os genes e fatores que produzem e modulam os fenótipos das doenças. A identificação dos genes associados às doenças que apresentam padrões atípicos de herança ou hereditariedade complexa é um desafio. Estudos em modelos animais, tais como camundongos e cães já foram implantados em nosso Centro, e modelos como o zebrafish para estudo de anomalias craniofaciais, serão introduzidos. Por outro lado, utilizaremos mapeamento para a identificação de genes de susceptibilidade a doenças multifatoriais, que requer a caracterização da população com marcadores de ancestralidade. Esta estratégia vai permitir o estudo de doenças complexas na população brasileira, que é altamente miscigenada. A investigação de variação no número de cópias de segmentos de DNA é uma ótima estratégia para revelar micro-rearranjos genômicos que podem causar um grande espectro de fenótipos clínicos e iremos investir em plataformas de alta-resolução. Por fim, a possibilidade futura de tratar pacientes afetados é um de nossos principais objetivos que está sendo pesquisado através de terapia celular e gênica em diferentes modelos animais. 
As duas principais linhas de pesquisas consistem em:
?Definir os fatores genéticos responsáveis por doenças genéticas humanas ? incluindo a identificação de novos genes responsáveis por doenças genéticas, estudo dos mecanismos que modulam a expressão genotípica, análise funcional, o estudo das doenças complexas e a variação genética da população, estudos cromossômicos
?Desenvolvimento de ab

Programa de apoio a jovens pesquisadores em centros emergentes - FAPESP.