Carla Romano Taddei.

O objetivo do trabalho é avaliar as expectativas e prática da amamentação em mulheres gestantes e nutrizes da Região da Zona Leste, em São Paulo, bem como identificar quais os principais fatores que influenciam o desmame precoce.

Por diferentes etiologias, a gestação pode vir acompanhada de doenças específicas do período gestacional, conhecidas como intercorrências obstétricas. Dentre as alterações hipertensivas associadas à gestação destaca-se a pré-eclâmpsia, uma das principais doenças responsáveis pelo aumento da morbimortalidade materna e neonatal. Estudos recentes apontam o papel da microbiota intestinal na modulação desta desordem gestacional. O objetivo deste estudo é caracterizar a microbiota fecal, vaginal e do leite materno em pacientes diagnosticadas com pré-eclâmpsia, em diferentes estágios, tanto durante a gestação quanto no puerpério. Além disso, busca-se analisar a evolução da microbiota fecal dos bebês em relação ao consumo de leite materno. A caracterização da microbiota do leite, bem como o conteúdo vaginal e fecal (materna e do lactente), além da avaliação do metaboloma destas amostas, serão analisadas por meio de sequenciamento de alta eficiência. Com esses resultados, esperamos contribuir para o conhecimento da fisiopatologia dessas doenças e, possivelmente, na busca de marcadores preditivos da microbiota relacionados com o desenvolvimento da pré-eclâmpsia, bem como com as possíveis consequências no aleitamento e na evolução da microbiota fecal dos seus recém-nascidos.

This project is an ambitious endeavour that integrates complementary research groups from the University of São Paulo (USP), Brazil. By integrating experts from different disciplines, we will track the development of 1000 infants from birth to 36 months of age at different levels of risk as part of a new cohort, the 1k Cohort. In addition, data from existing cohorts, some of them with new data collection conducted specifically for this project, others concluded, will also be used. Infants will be extensively characterized (from neurons to neighborhoods, as described below in Methods section and depicted in Figure 1). All data from multiple levels of analysis will be integrated into a model to predict executive functions (EF) and language skills (LS) at 36 months.

A colonização inicial da microbiota intestinal humana é de suma importância, desempenhando papel fundamental no desenvolvimento imunológico, nutricional, metabólico e neurológico. Com a amamentação, o recém-nascido recebe bactérias benéficas à microbiota intestinal, além de proteínas, células de defesa, entre outros componentes, que auxiliam na saúde neonatal. Recém-nascidos prematuros e de baixo peso ao nascimento, muitas vezes, precisam permanecer internados em unidades de terapia intensiva, e freqüentemente a dieta enteral trófica é limitada em consequência da imaturidade do sistema digestivo ou estado clínico do recém-nascido. Terapias estão sendo discutidas para melhorar a saúde de neonatos prematuros ou de baixo peso internados em unidade de terapia intensiva, com foco em diminuir quadros de sepses e tempo de internação. As evidências preliminares defendem o efeito da colostroterapia em reduzir o tempo de alimentação enteral total e incidência de sepses neonatais. Entretanto, pouco se sabe sobre o desenvolvimento da microbiota intestinal de prematuros submetidos a colostroterapia..

Tipagem capsular e análise de resistência a antimicrobianos de cepas de Streptococcus agalactiae isolados de mulheres gestante no Hospital Universitário da USP.

O epitélio intestinal de neonatos é uma superfície mucosa intestinal particularmente sensível e podem apresentar respostas inflamatórias exacerbadas tanto para bactérias comensais como patógenos. Bebês recém-nascidos graves internados em Unidades de Cuidado Intensivo são mais susceptíveis a influências ambientais, com consequente desordem da microbiota intestinal e possível proliferação de bactérias patogênicas. Gastrosquise e onfalocele são condições relacionadas a defeito no fechamento da parede abdominal durante o desenvolvimento intra-útero. A dismotilidae intestinal ou íleo adinâmico no pós operatório são complicação frequentemente presente nesses neonatos, levando ao uso de nutrição parenteral por longos períodos além do uso de antibióticos de amplo espectro, aumentando a predisposição à sepse. Pouco se sabe sobre a composição da microbiota fecal de bebês graves com alterações intestinais importantes como gastrosquise e onfalocele bem como a relação de bebês prematuros e o aparecimento de enterocolite necrotizante. A colangite esclerosante primária (CEP) é uma doença hepática colestática crônica, que se caracteriza por inflamação difusa, fibrose e estenoses dos ductos biliares intra- e extra-hepáticos. A etiologia da CEP ainda é desconhecida, mas existem evidências da importância de fatores ambientais, como composição da microbiota intestinal, e genéticos. Desta forma, os objetivos deste estudo são: avaliar a evolução da composição da microbiota intestinal de recém-nascidos graves internados em UTI neonatal, durante o período de internação e relacionar as eventuais intercorrências clínicas; avaliar a composição da microbiota fecal de crianças com colangite esclerosante primária. A verificação de que aumento ou diminuição de gêneros importantes da microbiota intestinal pode estar relacionado com intercorrências clínicas, como desordens intestinais, translocação bacteriana e consequentemente a sepse, trará ferramentas importantes no controle de tais desordens

O leite humano é, reconhecidamente, o principal componente no crescimento, desenvolvimento metabólico e imunológico de lactentes e consiste importante recurso de micro-organismos comensais na construção da microbiota intestinal de neonatos, durante a lactação. Fatores relacionados à mãe têm sido associados à composição da microbiota do leite humano, entretanto, nenhum estudo avaliou a dieta materna como componente modulador da microbiota do leite humano. Os objetivos do presente estudo serão investigar o impacto da dieta materna na microbiota do leite humano de mães saudáveis, em aleitamento materno exclusivo e paralelamente, avaliar a influência da intervenção com fruto-oligossacarídeo na microbiota do leite humano, durante 14 dias de lactação. Para esta finalidade o estudo será dividido em duas partes, em que a primeira parte consistirá em um estudo transversal, com 150 lactantes atendidas no Hospital Universitário da cidade de São Paulo, a fim de investigar correlações entre consumo de macronutrientes (carboidratos, lipídios e proteínas) e fibras e micro-organismos no leite humano. A segunda parte consistirá em um ensaio clínico, placebo-controlado, com 60 lactantes, procedentes da primeira parte do estudo. As lactantes serão dividas em dois grupos (experimental e placebo). O grupo experimental receberá 6g de fruto-oligossacarideo + 2g de maltodextrina e o grupo controle receberá 2g de maltodextrina, suplementados por 14 dias. A avaliação do consumo alimentar será estimada por meio de inquéritos recordatórios de 24 horas (IR24H) e questionário quantitativo de frequência alimentar (QQFA) desenvolvido para gestação. Para análise da microbiota do leite humano, amostras serão coletadas assepticamente e o DNA extraído por QIAamp DNA Stool Mini kit. O DNA obtido será utilizado como molde para amplificação e sequenciamento em sequenciador Illumina MiSeq® System.

a) Detectar a presença dos genes de β-lactamases de amplo espectro (ESBL) em amostras de DNA fecal de 12 crianças ao longo do primeiro ano de vida:
	- blaTEM, blaSHV, blaOXA, blaCTX-M, blaKPC, blaVIM e blaIMP
	b) relacionar a presença de genes de resistência a alterações ambientais, sociais e alimentares as quais a criança foi submetida ao longo de seu primeiro ano de vida.

Estima-se que 11 milhões de pessoas sejam diabéticas no Brasil, com predomínio do DMT2. Sabe-se que a resistência insulínica (RI) e a diminuição na secreção de insulina são os mecanismos envolvidos no aparecimento da DMT2. Todavia, as causas dessas alterações não estão totalmente elucidadas. Nos últimos anos, estudos apontam a microbiota intestinal como um importante modulador da doença. Fatores ambientais e genéticos do hospedeiro interagem para controlar a microbiota intestinal, desencadeando desordens metabólicas como a obesidade e resistência à insulina. Outro mecanismo pelo qual a microbiota pode contribuir para desordens metabólicas é desafiando o sistema imunológico, com ativação de macrófagos e consequente produção de citocinas. Pouco se sabe sobre a composição e quantificação da microbiota nas porções proximais do intestino. Os objetivos do presente projeto são: i) identificar a microbiota fecal, do estômago, do duodeno e jejuno proximal de pacientes adultos diabéticos e avaliar as alterações na sua composição após a realização de cirurgia bariátrica; ii) avaliar o perfil de subtipos de macrófagos antes e depois da cirurgia e iii) avaliar o perfil inflamatório dos pacientes antes e depois da cirurgia. O conhecimento da composição da microbiota fecal, duodenal e do jejuno proximal, da ativação de macrófagos teciduais, do perfil inflamatórios dos pacientes e a relação com a diabetes mellitus tipo 2 pode ser o caminho para entender como a dieta afeta a regulação energética e a composição da microbiota individual.

A farinha de banana verde (FBV) tem sido estudada como ingrediente funcional, principalmente como fonte de carboidratos não disponíveis, sendo o amido resistente o componente mais expressivo. Estudos de fermentação da FBV in vitro têm mostrado sua alta fermentabilidade e consequente capacidade de produção de ácidos graxos de cadeia curta. Estes compostos têm sido associados a várias propriedades benéficas para a saúde intestinal, bem como efeitos sistêmicos no metabolismo de glicose e lipídios. Os ensaios clínicos de média duração (duas semanas) realizados pelo presente grupo, em voluntários saudáveis mostraram efeito positivo sobre a saciedade, resposta glicêmica e melhoria do funcionamento intestinal, indicando que a FBV possui atributos positivos para auxiliar na redução do risco de doenças crônicas não transmissíveis (DCNT). Entretanto, pouco se sabe sobre a capacidade da FBV em estimular seletivamente o crescimento e/ou atividades de uma ou mais bactérias intestinais benéficas, associadas com a saúde e o bem-estar, ou seja uma possível ação prebiótica. Assim, o objetivo deste trabalho é
avaliar o impacto da FBV, consumida por voluntários saudáveis durante seis semanas, na
microbiota intestinal, através de técnicas de biologia molecular, e a interação com a melhoria no funcionamento intestinal e efeitos na fome/saciedade.

A sequência de eventos bacterianos que ocorre durante a colonização do trato gastrointestinal pode afetar o futuro da saúde do hospedeiro, particularmente no que diz respeito à regulação do sistema imunológico. Um entendimento claro do processo de colonização do intestino humano neonatal nos países em desenvolvimento está faltando, porque os poucos estudos disponíveis foram, em sua maioria, realizados utilizando técnicas de cultura. O objetivo deste estudo foi detectar e quantificar as bactérias dos gêneros Bifidobacterium, Lactobacillus, Eubacterium e Lactococcus, importantes componentes anaeróbios da microbiota intestinal usando PCR em tempo real. O grupo de estudo foi composto por 10 crianças, acompanhadas durante o primeiro ano de vida, vivendo em baixas condições sócio-econômicas em São Paulo, Brasil. Amostras de fezes foram avaliadas em períodos de 24 horas, 7 dias, 30 dias, 3 meses, 6 meses e 1 ano.

A microbiota intestinal compreende aproximadamente 1000 espécies, das quais 80% não são cultiváveis. Tendo em vista a importância de se conhecer a microbiota humana e a utilização da ferramenta da construção da biblioteca metagenômica 16S rRNA ser relativamente recente, esse estudo tem como objetivo avaliar diferentes protocolos para validação do uso desta ferramenta para o estudo da microbiota intestinal humana. As amostras fecais das crianças foram coletadas nas primeiras 48 horas, sete dias de vida e mensalmente do primeiro ao décimo segundo meses de vida. Para a realização dos ensaios experimentais, o DNA extraído de seis amostras de diferentes crianças, em diferentes faixas etárias, foi utilizado para a criação de um pool, o qual foi utilizado nos ensaios de PCR. As bibliotecas 16S rRNA foram construídas utilizando 2 pares de iniciadores bactéria-específicos 27F - 1492R e 63F- 1387R, variando o tempo de desnaturação inicial de cada reação de amplificação do gene 16S rRNA e 1 par de iniciadores 341F ? 518R. Os clones foram selecionados aleatoriamente, parcialmente sequenciados e analisados com base em banco de dados do gene 16S rRNA.

A microbiota intestinal, adquirida no período pós-natal é composta por uma grande diversidade de bactérias e desempenha diferentes funções no hospedeiro humano. O conteúdo bacteriano intestinal, ainda não totalmente conhecido, é influenciado por fatores internos e principalmente externos que modulam sua composição e função. A composição e atividade da microbiota intestinal tem uma enorme importância nos processos imunológicos, nutricionais e patogênicos no ser humano, em conseqüência na manutenção da saúde do indivíduo. O conhecimento da microbiota permite a utilização de diferentes estratégias com o intuito de manipular as populações bacterianas e promover a saúde. A microbiota intestinal humana tem sido tradicionalmente comparada pela análise de isolados a partir de métodos de culturas de anaeróbios estritos e facultativos. As técnicas moleculares têm revelado uma grande diversidade da microbiota nas amostras analisadas. Análises filogenéticas baseadas em PCR (clones estratégicos) têm sido utilizadas para caracterizar microbiota de fezes humana. A biblioteca de 16S rDNA vem demonstrando uma ótima técnica molecular para evidenciar a composição da microbiota intestinal. O objetivo deste projeto é acompanhar a instalação da microbiota intestinal na criança, desde o primeiro mês de vida, até os doze meses de vida através da técnica de sequenciamento da biblioteca genômica 16S rDNA.

análise comparativa de proteínas de membrana externa e das proteínas periplasmáticas das EPEC típicas e atípicas, pela análise em del bidimensional e identificação por MALDI-TOF, com o objetivo de melhor estudar as proteínas envolvidas na adesão das mesmas na célula hospedeira.