Maurício Yonamine.

O Projeto precursor INSPEQT: Investigação de Novas Substâncias Psicoativas em Química e ToxicologiaForense, contemplado no Edital 16/2020 da CAPES/PROCAD, possibilitou melhor compreensão do fenômenodas NSP no Brasil e, ao mesmo tempo, gerou conhecimento, proporcionou a formação de recursoshumanos de alto nível na área forense e permitiu a divulgação científica para a sociedade. Na vertente daQuímica Forense, juntamente com peritos criminais, pudemos acompanhar a evolução das apreensões dasnovas drogas, identificando a entrada de canabinoides sintéticos nos presídios, o aparecimento dosopioides nitazenos e o surgimento de novas versões de NSP que não constavam na Portaria 344/98, comoas pró-drogas de LSD ou as OXIZIDs. Também foi desenvolvido um novo método de purificação decanabinoides sintéticos impregnados em fragmentos vegetais (a forma de apresentação da droga maisprevalente no Brasil) por cromatografia líquida preparativa para posterior caracterização química por RMN.Na vertente da Toxicologia Forense, novos métodos targeted foram desenvolvidos com o emprego dosconceitos da Green Analytical Toxicology, na qual o uso de solventes orgânicos é minimizado, o tempo depreparo de amostras é reduzido e menos energia é gasta no processo. Contudo, é evidente que ainda hámuito para ser estudado. Temos acompanhado na mídia nacional, que desde o início de 2023, o abuso decanabinoides sintéticos, popularmente chamadas de drogas K (K2, K4, K9), cresceu exponencialmente.Assim, a presente proposta tem por objetivo avançar nas fronteiras do conhecimento para trazer luz aosproblemas de saúde e segurança pública trazidos pela NSP. Pretendemos aproveitar a construção e aconsolidação de toda a estrutura formada durante a primeira etapa do INSPEQT e aprimorar o modelo apartir da continuação dessa linha desta pesquisa. Na presente proposta (INSPEQT 2.0) incorporamos autilização de experimentos in vivo (zebrafish), in vitro (microssoma hepático e células HepaRG) e insilico para a alimentação de um sistema de Inteligência Artificial (IA) para predição do metabolismo deNSP em humanos. O emprego da IA também auxiliará no desenvolvimento de métodos analíticos rápidospor LC-MS/MS para detecção e quantificação de NSP, e métodos untargeted mais abrangentes (LC-IT/MS eLC-HRMS) com a possibilidade de identificar metabólitos que muitas vezes são biomarcadores maisadequados para serem detectados em amostras biológicas. Além disso, novos parceiros de Unidades dePerícia dos Estados se uniram à presente proposta, o que possibilitará uma visão mais ampla dessefenômeno no território brasileiro. Os conhecimentos obtidos do monitoramento das apreensões das NSP(como droga bruta), juntamente com a maior capacidade de detecção nas análises toxicológicas permitiráobter informações não somente do fluxo da entrada de NSP no Brasil, mas também de dadosepidemiológicos de populações vulneráveis e correlação com efeitos tóxicos de forma mais precisa.

O crescente surgimento de novas substâncias psicoativas (NSP) tem sido um desafio para os órgãos responsáveis pelo controle de substâncias e para os toxicologistas pois, constantemente, novas substâncias são incorporadas ao mercado, sendo comercializadas em formas que dificultam a identificação pelas fiscalizações. As NSP podem ser considerados de grande risco à saúde pública, uma vez que há um desconhecimento em relação à toxicidade, efeitos, prejuízos e disseminação. Em vista deste panorama foi criado o projeto INSPEQT, iniciado em 2021, que visa o desenvolvimento de estratégias de identificação de NSP tanto no âmbito químico como toxicológico. No entanto, ao longo do projeto foi observada certa desproporcionalidade entre as amostras biológicas que são analisadas pelos Núcleo de Toxicologia Forense do Instituto Médico-Legal de SP e Centro de Informação e Assistência Toxicológica de Campinas e as apreensões de NSP, pois diversas substâncias têm sido identificadas em droga bruta, enquanto relativamente pouco se tem detectado nas amostras biológicas. A maioria das determinações de NSP em material biológico existentes na literatura científica fazem uso de métodos 'targeted', que apesar de serem a abordagem ideal, limitam-se à necessidade da aquisição de padrões de referência. Contudo, por se tratar de drogas novas, nem sempre há o padrão disponível comercialmente e, quando existe, sua aquisição é cara e necessita de importação, levando meses para chegar ao Brasil. Dessa maneira, o presente projeto de doutorado propõe-se a desenvolver uma estratégia dinâmica de detecção de NSP usando, simultaneamente, métodos 'untargeted' e 'targeted' para se obter informações mais amplas em relação à disseminação de NSP no Brasil. Métodos 'untargeted' serão baseados em espectrometria de massas de alta resolução (HRMS) e cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS). Métodos 'targeted' serão baseados em cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas triplo quadrupolo (LC-MS/MS). Para permitir maior agilidade e capacidade analítica de detecção de uma gama crescente de compostos, padrões home made preparados a partir das apreensões das NSP pelo Núcleo de Exame de Entorpecentes da SPTC-SP serão utilizados para atualizar constantemente a metodologia, permitindo capacidade de detecção cada vez maior de compostos. Os métodos 'untargeted' e 'targeted' serão desenvolvidos levando em consideração os princípios da Toxicologia Analítica Verde (GAT, Green Analytical Toxicology), que priorizam a menor utilização de solventes orgânicos tóxicos, a maior praticidade e rapidez e menor consumo de energia. As metodologias desenvolvidas serão aplicadas em amostras biológicas obtidas do Instituto Médico-Legal de SP e de cinco diferentes regiões do Brasil, que possibilitarão uma análise mais abrangente de disseminação das NSP pelo país.

De acordo com a United Nations Office on Drugs and Crime (UNODC), as novas substâncias psicoativas (NSP) são definidas como novos narcóticos ou drogas psicotrópicas, apresentadas na forma pura ou preparadas, não controladas pela Convenção Única das Nações Unidas sobre Drogas Narcóticas de 1961 e a Convenção das Nações Unidas sobre Substâncias Psicotrópicas de 1971, mas que podem constituir ameaça à saúde pública, comparáveis a aquelas substâncias listadas nessas Convenções. É um fenômeno global e emergente, com 111 países tendo reportado a apreensão e a identificação de mais de 800 compostos, dentre os quais estão canabinoides sintéticos, estimulantes (incluindo anfetaminas, catinonas e piperazinas), alucinógenos (triptaminas e derivados da fenciclidina), opioides sintéticos (principalmente substâncias derivadas do fentanil), benzodiazepínicos e drogas baseadas em plantas. As NSP têm desafiado as abordagens tradicionais de monitoramento, vigilância, controle e medidas de proteção à saúde pública com relação ao tráfico e abuso de drogas. Dificuldades específicas incluem a grande quantidade e diversidade de substâncias classificadas como NSP, a velocidade com que elas entram e saem do mercado ilícito, as diferentes formas de apresentação das drogas, a dificuldade de identificação química das NSP e o desconhecimento da potência e gama de seus efeitos tóxicos em usuários. Desta forma, o presente projeto tem por objetivo principal o desenvolvimento de estratégias de identificação química destes compostos, tanto na droga bruta apreendida (em suas diversas apresentações) como em amostras biológicas de interesse toxicológico forense (urina, sangue e fluido oral). As análises químicas forenses da droga bruta serão aplicadas em amostras apreendidas e encaminhadas para exame pericial no Instituto Nacional de Criminalística, Polícia Federal (INC-PF, Brasília-DF), para o Núcleo de Exames de Entorpecentes (NEE) e para o Núcleo de Perícias Criminalísticas de Campinas (NPC-Campinas) da Superintendência da Polícia Técnico-Científica do Estado de São Paulo (SPTC). Os dados gerados e o constante monitoramento das análises químicas irão nortear a aquisição dos padrões de referência das NSP e o desenvolvimento de métodos bioanalíticos de análises toxicológicas forenses, utilizando técnicas cromatográficas (cromatografia gasosa e líquida) acopladas à espectrometria de massas. Os métodos bioanalíticos serão desenvolvidos levando-se em consideração técnicas recentes de preparo de amostras, baseadas em Química Analítica Verde (Green Analytical Chemistry), cujo princípio se baseia na economia de energia, tempo, praticidade e menor uso de reagentes tóxicos. Análises toxicológicas forenses serão aplicadas em amostras biológicas provenientes do Núcleo de Toxicologia Forense (NTF), do INC-PF, do Laboratório de Toxicologia Forense do Estado de Sergipe (LATOX) e do Centro de Informação e Assistência Toxicológica de Campinas (CIATox-Campinas) da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). No final do projeto, espera-se a construção de uma rede de conhecimento e de monitoramento robusta e integrada do fenômeno das NSP, com métodos analíticos e bioanalíticos desenvolvidos e validados, dados de incidência de NPS em diferentes regiões do Brasil e informações toxicológicas dos efeitos e níveis de concentração encontrados nas amostras biológicas. Esse conhecimento agregado poderá ser futuramente replicado para as outras regiões do país.

A ayahuasca é uma bebida indígena alucinógena usada com propósito xamânico e espiritual, cuja utilização data do período pré-colombiano na região da bacia amazônica. Esta bebida é normalmente preparada através da decocção das plantas Psicotria viridis e Banisteriopsis caapi. As beta-carbolinas presentes no cipó B. caapi são responsáveis pela inibição da enzima monoaminoxidase-A (MAO-A), permitindo que o alucinógeno DMT (dimetiltriptamina) presente nas folhas de P. viridis chegue ao seu sítio ativo e promova a ação alucinógena, sobretudo em receptores serotoninérgicos. Com uso disseminado no Brasil, América do Norte e Europa, o chá da ayahuasca tem despertado grande interesse no meio científico e é objeto de estudo de vários grupos de pesquisa no Brasil. Neste contexto, o desenvolvimento de metodologias analíticas que permitam a determinação dos principais alcaloides desta bebida em diversas matrizes representa grande importância e é demanda constante no Laboratório de Análises Toxicológicas da USP por pesquisadores provenientes de várias instituições no Brasil. Além disso, nossa equipe de pesquisa acredita na importância de promover o desenvolvimento de tecnologia analítica de extração de amostras que respeitem a tendência global de desenvolvimento sustentável através da aplicação de estratégias de 'química analítica verde' (Green Analytical Chemistry - GAC), a saber: minimização do consumo de solventes e energia, eliminação de agentes derivatizantes, baixo custo e facilidade de execução. Dessa forma, o objetivo deste trabalho é desenvolver e validar métodos de extração dos alcaloides da ayahuasca em amostras de chá, plasma, urina e cabelo, utilizando métodos baseados em GAC, com intuito de atender a demanda de grupos de pesquisa em ayahuasca de várias instituições do país.

Ao longo dos anos, toxicologistas foram mudando seu foco primário do tratamento de pacientes agudamente intoxicados para a identificação dos perigos e avaliação de riscos de exposições tóxicas ambientais e ocupacionais em seres humanos. De acordo com a Pan American Health Organization, para qualquer abordagem ser bem sucedida, especialistas de saúde, legisladores, administradores de programas e outros, necessitam de informações confiáveis. Eles precisam entender o escopo do problema e da população-alvo, o que pode ser almejado com o mapeamento e caracterização epidemiológica dos casos de intoxicações. As técnicas de análises multivariadas são métodos estatísticos apropriados para o estudo das relações entre variáveis que contêm intercorrelações. Entre as diversas técnicas destacam-se a análise hierárquica de cluster (HCA) e a análise de componentes principais (PCA). As análises multivariadas têm sido regularmente aplicadas em várias áreas como, por exemplo, engenharia e economia, no entanto em toxicologia clínica esta abordagem ainda é relativamente recente. Portanto, o objetivo deste trabalho é a aplicação de técnicas estatísticas multivariadas para o mapeamento dos casos de intoxicações agudas, passíveis de análise toxicológica, atendidos no Centro de Controle de Intoxicações da cidade de São Paulo (CCI?SP). Amostras de sangue e urina serão coletadas para posterior confirmação e quantificação da(s) substância(s) envolvida(s) nas intoxicações, utilizando métodos cromatográficos multianalitos, que serão otimizados e validados neste projeto. Concomitantemente, as Fichas de Atendimento Hospitalar são preenchidas para obtenção de informações como idade, sexo, via de exposição, manifestações clínicas e evolução do caso. As classes de substâncias de interesse elencadas neste estudo foram selecionadas de acordo com a maior incidência de casos de intoxicação registrada pelo CCI-SP, como analgésicos, ansiolíticos, antidepressivos, anticonvulsivantes, drogas de abuso e praguicidas. Com isso, pretende-se mostrar que essas técnicas estatísticas são ferramentas úteis para identificar e caracterizar grupos de risco, fornecendo embasamento científico para a criação de um banco de dados e para orientar as intervenções emergências e favorecer ações preventivas.

O aumento no número de usuárias de drogas em idade fértil leva a preocupação crescente com relação à exposição da criança a drogas durante os períodos gestacional e lactacional devido aos acometimentos obstétricos, neonatais e na infância que podem ser decorrentes do uso agudo ou crônico por parte da mãe. O abuso de drogas como cocaína e maconha por gestantes e lactantes pode causar danos em curto e longo prazos no neonato, além de favorecer a negligência materna e aumentar as taxas de mortalidade fetal. Os dados epidemiológicos no Brasil a esse respeito são escassos e a avaliação deste tipo de exposição depende em grande parte do relato da própria mãe, que muitas vezes omite ou nega o consumo de drogas. Nesse contexto, a determinação de substâncias em matrizes biológicas que identifiquem a exposição da criança pode representar a melhor forma de caracterizar o problema e guiar as decisões da equipe de saúde de modo mais seguro. Alguns estudos com matrizes alternativas materno-fetais têm utilizado mecônio e, mais recentemente, cordão umbilical para o desenvolvimento de métodos de diagnóstico da exposição do feto. No que diz respeito à exposição durante o aleitamento, a determinação direta de compostos ativos no leite humano seria a melhor forma para se estimar o grau em que a criança está sendo exposta por esta via. Assim, um dos objetivos do projeto é investigar a aplicabilidade do tecido do cordão umbilical em comparação ao mecônio como alternativa de diagnóstico e comprovação da exposição in utero à cocaína e canabinoides. Um segundo objetivo é determinar as concentrações de substâncias ativas (cocaína, cocaetileno, norcocaína, tetraidrocanabinol, canabinol e canabidiol) que podem ser secretadas em leite materno humano. Para atingir os objetivos, métodos serão desenvolvidos visando à detecção dos analitos de interesse nas matrizes mecônio, tecido do cordão umbilical e leite materno, privilegiando-se o uso de técnicas recentes de preparação de amostras, como a extração acelerada por solvente (ASE) e a microextração em fase líquida (LPME). A identificação e quantificação das substâncias psicoativas serão realizadas através de cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS). Os métodos desenvolvidos e validados serão aplicados em amostras de leite coletadas no Hospital Municipal Dr. Arthur Ribeiro de Saboya e amostras de mecônio e cordão umbilical coletadas no Hospital Universitário-USP.

As análises toxicológicas envolvem a aplicação de ferramentas e conhecimentos de Química Analítica para a identificação e quantificação de substâncias que podem exercer efeitos nocivos nos seres vivos. Em Toxicologia Forense, as análises toxicológicas são aplicadas em diferentes contextos, como na investigação médico-legal para se determinar a causa da morte, no monitoramento do uso de álcool e drogas por motoristas, na avaliação da exposição fetal a drogas ilícitas e no controle antidoping no esporte. Diferentes grupos de compostos químicos são de interesse, como etanol, drogas de abuso (cocaína, canabinoides, anfetaminas, opiáceos) e medicamentos. Frequentemente, as análises são realizadas em espécimes biológicos, que consistem de fluidos ou tecidos coletados da vítima ou do indivíduo a ser avaliado. As diferentes propriedades físico-químicas das substâncias envolvidas e a natureza das matrizes biológicas constituem um desafio analítico constante para o toxicologista forense. Desta forma, nosso grupo de pesquisa propõe o desenvolvimento de novos métodos analíticos para detecção de diversos agentes tóxicos de interesse forense em matrizes biológicas convencionais (como urina e sangue total) e alternativas (como cabelo, humor vítreo, saliva, suor e vísceras). Nestes métodos, privilegiaremos a utilização de técnicas recentes de preparação de amostras como a microextração em fase sólida (SPME, do inglês, solid phase microextraction), a microextração em fase líquida (LPME, do inglês, liquid phase microextraction), a extração acelerada por solvente (ASE, do inglês, accelerated solvente extraction) e a extração em fase sólida modificada com ponteiras descartáveis (DPX, do inglês, disposable pipette extraction) para posterior análise cromatográfica (cromatografia em fase gasosa ou cromatografia líquida, acoplada ou não à espectrometria de massa). Estas técnicas têm como característica maior praticidade, rapidez e menor utilização de solventes orgânicos do que as técnicas convencionais de extração, sendo consideradas como pouco destrutíveis. Para o desenvolvimento dos métodos também utilizaremos ferramentas estatísticas de tratamento dos dados gerados, como a metodologia de superfície de resposta (RSM) para otimização de diversos parâmetros analíticos. A validação e análise de incerteza também serão aplicadas nos métodos desenvolvidos, de acordo com guias internacionais. Após o desenvolvimento dos métodos, estes são aplicados em amostras provenientes de casos reais do Instituto Médico Legal de São Paulo.

Em todo o mundo, a adição dolosa de ativos farmacêuticos em suplementos nutricionais é um problema comum e permanente. Inúmeros são os relatos disponíveis na literatura científica mundial de suplementos adulterados com fármacos sintéticos escondidos em formulações aparentemente inofensivas ao consumidor, sem qualquer indicação da sua presença na embalagem e sendo comercializados com alegações de perda de peso, aumento da capacidade intelectual e/ou física e estímulo sexual. No Brasil, a disponibilidade de dados sobre a adulteração de suplementos nutricionais é escassa. Na literatura científica dos últimos cinco anos, apenas dois estudos brasileiros contemplando a segurança de tais produtos foram encontrados. Dessa forma, o presente projeto de pesquisa visa o desenvolvimento e aplicação de métodos analíticos empregando técnicas cromatográficas para a detecção, identificação e quantificação de substâncias ativas não declaradas nas etiquetas de suplementos alimentares. Os protocolos terão como objetivo a identificação de estimulantes e/ou anorexígenos, hormônios anabolizantes e diuréticos. As técnicas extrativas mais comumente usadas são a extração dos analitos em metanol ou metanol/água. No entanto, estes procedimentos apresentam algumas desvantagens como utilização de grandes volumes de solventes e a obtenção de extratos com muitos interferentes. Sendo assim, a avaliação da técnica de extração acelerada por solvente (ASE), seguida da extração em fase sólida (SPE) e a técnica denominada QuEChERS serão levadas em consideração. Com isso, almeja-se o melhoramento dos protocolos de extração existentes e a obtenção de extratos livres de interferentes, utilizando o menor volume possível de solventes orgânicos. Serão alvo do estudo suplementos nutricionais comercializados com as alegações de perda rápida de gordura, estímulo cerebral, aumento do desempenho físico, ganho de massa muscular e melhora do desempenho sexual. Os produtos serão adquiridos em lojas especializadas localizadas no Estado de São Paulo e na internet (sites brasileiros).

Na busca da excelência da qualidade de laboratórios analíticos, a incerteza de medição, que é a dispersão dos valores de um resultado, é uma ferramenta de fundamental importância utilizada no processo de validação. De acordo com a ISO 17025, os laboratórios devem ter e aplicar procedimentos para a estimativa de suas incertezas de medição como exigência mínima para sua implantação. Embora seja um conceito adotado há alguns anos por laboratórios de prestação de serviços, o estudo de incerteza de medição ainda é relativamente recente na descrição de novos métodos de análise toxicológica reportadas na literatura científica. Diante do exposto, este projeto tem a finalidade de estudar a incerteza de medição das análises toxicológicas confirmatórias de substâncias psicoativas em urina pela técnica de cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massa (GC-MS). Os métodos serão desenvolvidos (otimizados e validados) e suas fontes de incerteza identificadas e mensuradas. Portanto, o desenvolvimento e implantação de um procedimento que expresse essa incerteza fornecerão às análises toxicológicas maior confiabilidade e qualidade nos seus resultados, podendo servir de referência para as demais instituições de pesquisa no país na aplicação de recursos de estatística no controle de erros associados à medição.

O abuso de cocaína e maconha é grave problema de saúde pública em todo o mundo. Atualmente observa-se aumento no número de usuárias em idade fértil, levando a preocupação crescente com relação à exposição fetal a drogas, devido aos efeitos obstétricos e neonatais decorrentes. Alterações como diminuição do peso e do crescimento fetal, parto prematuro, síndrome da abstinência neonatal, déficits neurológicos e de comportamento, estão associados ao uso de substâncias ilícitas, álcool e tabaco durante a gestação. Portanto, é importante obter informações acerca do consumo de drogas durante a gravidez, permitindo com isto intervenções médicas e psicológicas adequadas. Os relatos fornecidos pela gestante são relevantes, porém muitas vezes resultam em dados subestimados devido a omissão de informações por medo de ações punitivas. Desta forma, a confirmação por meio de análises toxicológicas em amostras biológicas se faz necessária. O mecônio, primeiras fezes do recém-nascido, tem sido proposto como matriz adequada para avaliação da exposição fetal, pois apresenta coleta não invasiva, fácil obtenção e fornece informações de longo prazo (2º e 3º trimestre de gestação). Entretanto, é uma matriz complexa, exigindo diversas etapas de purificação para posterior análise. As técnicas mais comumente utilizadas são homogeneização da amostra em metanol ou outro solvente orgânico (extração sólido-líquido ? SLE) seguida por extração líquido-líquido (LLE) ou extração em fase sólida (SPE). No entanto, estas técnicas apresentam algumas desvantagens como utilização de grandes volumes de solventes orgânicos, formação de emulsões e extração em múltiplas etapas. Desta forma, o presente trabalho visa o desenvolvimento de um método utilizando a extração acelerada por solvente (ASE), que permite menor manipulação da amostra e apresenta maior eficiência se comparada às técnicas convencionais, além da possibilidade de uso de volumes menores de solvente orgânico e maior praticidade. Em associação, será utilizada a análise de superfície de resposta, conjunto de técnicas estatísticas e matemáticas que permitem a otimização racional de métodos analíticos. Os analitos serão identificados por cromatografia em fase-gasosa acoplada a espectrometria de massas (GC-MS). Após o desenvolvimento dos métodos, as análises serão aplicadas em amostras de mecônio de neonatos com suspeita de exposição fetal à cocaína e maconha, provenientes do Hospital Universitário-USP.

As anfetaminas compreendem uma série de compostos com estrutura química semelhante à feniletilamina e que apresentam atividade estimulante do sistema nervoso central. Além de fármacos anorexígenos como o femproporex e a dietilpropiona, também estão incluídas nessa classe drogas ilícitas como a metanfetamina (ice, speed) e a metilenodioximetanfetamina (MDMA, ecstasy). Essas substâncias apresentam grande potencial de abuso, podendo ser utilizadas por diversos grupos sociais como motoristas profissionais (onde são conhecidas por esses "rebite"), estudantes, jovens (utilizando ecstasy em festas denominadas "raves") e pessoas que abusam de moderadores de apetite para o controle de peso. Interessantemente, há também a possibilidade de alguns indivíduos utilizarem anfetaminas em associação com benzodiazepínicos. Embora essa associação seja proibida no Brasil, é de conhecimento que algumas pessoas que utilizam anorexígenos recorram a esse recurso como forma de controlar a insônia provocada pelas anfetaminas. Outra situação de uso concomitante, seria a de motoristas profissionais, usuários de "rebite", que também tentariam controlar os ciclos de sono utilizando benzodiazepínicos. Em vista dessa situação, seria interessante o monitoramento do uso desses grupos de fármacos através de análises toxicológicas. As análises toxicológicas convencionais (realizadas sobremaneira em sangue e urina) geralmente fornecem uma pequena janela de detecção, o que faz com que o uso intermitente possa não ser detectado. Quando se deseja informação de uso em longo prazo ou ainda sobre os padrões de uso de determinada droga, a matriz mais eficiente para realização das análises é o cabelo. Muitos são os métodos para identificação das mais variadas substâncias psicoativas em cabelo. Entretanto, a quantidade de amostra disponível ainda pode ser um fator limitante, principalmente nos casos em que várias substâncias são de interesse toxicológico. Desta forma, um grande interesse nos últimos anos tem si

É indiscutível que o abuso de cocaína/crack represente atualmente um dos principais problemas de saúde pública a ser enfrentado no Brasil. O grande potencial de abuso dessa droga associado com as graves conseqüências da sua dependência justificam que medidas sejam urgentemente tomadas com o objetivo de minimizar os efeitos indesejáveis para o ser humano e para a sociedade. Podemos observar que alguns grupos populacionais são ainda mais vulneráveis, propagando-se os efeitos deletérios inclusive à sua descendência. É o caso da dependência de cocaína/crack verificado em mulheres grávidas, situação em que não há uma política de assistência social e saúde pública bem definida, o que acaba tornando o problema de difícil solução. Um dos grandes desafios dessa área é saber uma estimativa de sua real dimensão, uma vez que as ferramentas de medida são muitas vezes baseadas em questionários que dependem da confiabilidade dos relatos. Entretanto, estudos demonstram que essa forma de avaliação, embora importante, pode ter limitações, uma vez que as mulheres nessas circunstâncias tendem a omitir o fato, devido ao sentimento de culpa e medo de ações punitivas. Desta forma, o presente projeto tem o objetivo de se avaliar, de forma mais precisa, a prevalência de uso de cocaína/crack de uma amostragem significativa (n=685) de uma população de gestantes atendidas pelo Hospital Universitário-USP pelo período de um ano, através da análise toxicológica de mecônio dos neonatos. Do mesmo modo, o projeto também terá cunho tecnológico, pois se pretende desenvolver um novo método de análise, empregando-se uma técnica recente de preparação de amostra, a extração acelerada por solvente (ASE). Com os resultados do estudo, teremos um perfil mais bem definido dessa população e que poderá servir de base para novos estudos populacionais. Ao mesmo tempo, poderá gerar dados para se fazer uma adequada avaliação da aplicação dessa ferramenta diagnóstica de forma rotineira nos hospitais, em casos de susp

A concentração de agentes tóxicos encontrada em amostras postmortem é complexa e afetada não só pela condição de deterioração do corpo, mas também por um processo conhecido como redistribuição postmortem, em que substâncias são transferidas, após a morte, de áreas de alta concentração para áreas de baixa concentração. Em geral, concentrações mais elevadas são encontradas no sangue situado nos sítios centrais (como o sangue coletado da cavidade cardíaca) em comparação aos níveis verificados nos vasos periféricos (como a veia femoral). Em outros casos, o tempo entre a morte e o exame postmortem é suficiente para que algumas substâncias que normalmente estariam presentes no sangue não estejam mais disponíveis neste fluido biológico. Exemplos incluem corpos exumados, casos de suicídio em que se levaram dias para encontrar o corpo e cadáveres já em processo de decomposição. Assim, quando amostras sanguíneas não estão disponíveis para coleta, os médicos legistas têm poucas alternativas além de coletar amostras de tecidos não convencionais, para análise toxicológica. Nesses casos, para interpretação dos resultados das análises, é fundamental que existam na literatura científica informações a respeito. Infelizmente, tais informações ainda são escassas e há necessidade de mais estudos sobre esse assunto. Desta forma, no presente projeto, será estudada a redistribuição postmortem de substâncias psicoativas (cocaína, opiáceos e barbitúricos) através da análise de espécimes biológicos (sangue, humor vítreo, encéfalo, fígado e medula óssea) coletados de vítimas atendidas pelo Instituto Médico Legal de São Paulo (IML-SP). Métodos analíticos serão desenvolvidos visando a detecção dessas substâncias nas diversas amostras citadas. Inicialmente, técnicas mais recentes de preparação de amostras como a extração acelerada por solvente (ASE) e a microextração em fase líquida (LPME) serão levadas em consideração. Os analitos serão identificados por cromatog

Os praguicidas compreendem uma ampla gama de substâncias químicas utilizadas para controlar desde a população de insetos até o aparecimento de doenças em plantas. No ambiente de trabalho, os indivíduos são expostos freqüentemente a diversos praguicidas ou misturas diferentes de praguicidas simultaneamente ou em série. A aplicação dos praguicidas, sem utilização de equipamentos proteção individual (EPI), pode causar envenenamento, além do desenvolvimento de várias doenças devido à exposição crônica. Estimativas da Organização Mundial de Saúde (OMS) indicam que, anualmente, cerca de 1 milhão de pessoas são envenenadas involuntariamente e que 2 milhões de pessoas são hospitalizadas em decorrência da ingestão voluntária de praguicidas. As razões para as elevadas taxas da exposição aos praguicidas, principalmente em países em desenvolvimento, são muitas, incluindo a falta de um sistema de leis eficaz, poucas informações nos rótulos dos recipientes que contêm praguicidas, falta de orientação e insuficiente conhecimento dos fatores de risco, além dos custos elevados dos EPI? s. Adicionalmente, ocorre a utilização de quantidade maior de praguicidas mais tóxicos devido aos baixos preços destes compostos no varejo. Vários estudos avaliam a exposição ocupacional indoor aos praguicidas, e especificamente a exposição ocupacional em estufas. Em estufas, qualquer infestação é controlada usando produtos químicos que, devido ao enclausuramento e ajustes das condições do clima, podem prolongar e intensificar a exposição ocupacional ? as condições climáticas são projetadas para otimizar o crescimento da planta, e não necessariamente para proteger a saúde do trabalhador. Alguns estudos sugerem que os trabalhadores de estufas de flores e plantas ornamentais estão expostos a níveis mais elevados de praguicidas durante o carregamento, mistura e aplicação dos praguicidas, bem como pelo contato contínuo com as flores e plantas ornamentais, quando comparados a outros trabalhadores que entram em contato com essa classe de compostos. De acordo com o ministério da agricultura, o cultivo de flores é uma atividade que emprega cerca de 125.000 trabalhadores no país. O mercado brasileiro das flores e de plantas ornamentais gera aproximadamente US$ 1 bilhão, e vem crescendo 20% ao ano. As exportações do setor acumularam US$17,3 milhões no primeiro semestre de 2007, segundo os dados da Secretaria de Comércio Exterior, do Ministério do Desenvolvimento, Indústria e Comércio Exterior (SECEX-MDIC). O crescimento apresentado foi de 5,4% em relação ao mesmo período de 2006. O Estado de São Paulo é o maior produtor de flores do Brasil, responsável por 60% da produção nacional. O cultivo de flores e de plantas ornamentais ocupa 4000 hectares, 56% da área cultivada nas estufas. A fim de atender a demanda crescente para grandes quantidades e produtos de elevada qualidade, o número de colheitas protegidas (estufas) tem aumentado 15% ao ano, nos últimos 5 anos. A despeito da importância econômica de tal atividade, não há orientações específicas para utilização de praguicidas em ambientes protegidos (estufas). Além disso, dados relativos às práticas de Segurança e Saúde do Trabalho (SST), relacionadas ao uso de praguicidas em estufas de flores, são muito escassos. Em função do quadro descrito acima, este projeto destina-se a avaliar as condições de trabalho, localizar possíveis fontes de exposição, e quantificar a potencial exposição aos organofosforados em estufas de flores nos pólos de produção do estado de São Paulo. Para tanto, planeja-se desenvolver e validar métodos analíticos para determinar praguicidas organofosforados presentes nesses ambientes e em amostras biológicas a fim de coletar dados importantes para se avaliar qualitativa e quantitativamente o grau de exposição de trabalhadores a esses agentes.

Álcool e tabaco são as duas principais drogas consumidas mundialmente e seu uso por mulheres em idade reprodutiva, em particular, têm representado uma grande preocupação por parte de especialistas e da sociedade em geral. Apesar dos efeitos adversos associados ao ato de fumar e ingerir bebidas alcoólicas durante a gestação serem bastante documentados e conhecidos sabe-se que uma parcela de mulheres grávidas tem dificuldades em abandonar o hábito. A exposição fetal aos constituintes do tabaco tem sido associada com aumento do risco de aborto espontâneo e nascimentos prematuros, incidência de neonatos com baixo peso, síndrome de morte súbita infantil e desordens cognitivas e neurocomportamentais. O consumo de álcool durante o início da gravidez pode levar a alterações do crescimento e da morfogênese do feto. Até mesmo um consumo moderado de álcool (30 a 60g por dia) pode produzir efeitos da chamada síndrome fetal pelo álcool (FAS), caracterizada por crianças com dificuldades comportamentais e de aprendizado. Entretanto, devido ao sentimento de culpa e medo de ações punitivas, mulheres raramente admitem terem utilizado álcool e tabaco durante a gestação. Como resultado, uma série de marcadores biológicos tem sido estudada para se diagnosticar a exposição fetal aos constituintes do tabaco e ao álcool. Dentre os marcadores utilizados estão os ésteres etílicos de ácidos graxos (para verificar a exposição ao etanol) e a nicotina e a cotinina (para verificar exposição aos constituintes do tabaco), que podem ser detectados em amostras de mecônio de neonatos. No presente projeto, métodos analíticos serão desenvolvidos visando a detecção desses marcadores em amostras de mecônio. Inicialmente, serão consideradas as técnicas mais recentes de preparação de amostras, como a microextração em fase sólida por headspace (HS-SMPE) e a extração acelerada por solvente (ASE). Os analitos serão identificados por cromatografia em fase-gasosa acoplada a espectrometria de massas (GC-MS). Após

A ayahuasca é uma bebida preparada pela infusão de plantas nativas da região da Bacia Amazônia, originariamente utilizada por indígenas em rituais xamânicos. Ela combina a ação alucinogênica da dimetiltriptamina (DMT), um agonista serotoninérgico de receptores 5-HT2A/2C com beta-carbolinas, que são inibidores da monoaminoxidase-A (MAO-A). As principais beta-carbolinas encontradas na ayahuasca são a harmina, a harmalina e a tetraidro-harmina. Essa bebida também tem sido utilizada como parte de cerimônias em alguns movimentos sincréticos religiosos do Brasil como o Santo Daime e a União do Vegetal (UDV). Nos últimos anos, esses grupos religiosos têm se espalhado na Europa e Estados Unidos, chamando a atenção de pesquisadores internacionais quanto aos efeitos da ayahuasca. Entretanto, relativamente poucas informações pré-clínicas e clínicas foram acumuladas no sentido de fornecer uma base científica consistente para afirmar que o uso da ayahuasca é seguro ou não. Essa falta de informação tem aberto margem para especulações e controvérsias sobre os possíveis efeitos indesejados da exposição aos alcalóides presentes nessa bebida. No presente projeto, alguns estudos serão realizados em humanos e animais de experimentação, visando contribuir para um melhor entendimento dos efeitos da exposição aos alcalóides da ayahuasca. Estudos de farmacocinética serão realizados em voluntários com experiência no uso desse chá. Estudos com animais de experimentação serão dirigidos para um aspecto pouco tratado na literatura com respeito a essas substâncias: a toxicologia do desenvolvimento.

Uma das classes químicas de herbicidas que merece particular atenção é a dos bipiridílicos, representada pelo paraquat e diquat. Atualmente, muitos países têm banido ou restringido o uso destes herbicidas devido à grande quantidade de casos de intoxicação acidental, suicídio e envenenamento (tentativa de homicídio) ocorridos no passado. Em contrapartida, o paraquat ainda é bastante utilizado em cerca de 130 nações, com prevalência em países subdesenvolvidos ou em vias de desenvolvimento. Desta forma, o presente trabalho tem por objetivo o estudo e o desenvolvimento de métodos analíticos qualitativos e quantitativos em amostras biológicas (plasma e urina) para posterior aplicação no diagnóstico e investigação da intoxicação aguda por paraquat e diquat. Análises qualitativas de triagem serão realizadas pela técnica enzimática colorimétrica, principalmente por ser de fácil execução e aplicável em campo. Análises confirmatórias serão realizadas pela técnica de cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG/EM). Após o desenvolvimento e validação dos métodos, as análises serão aplicadas em amostras de pacientes suspeitos de intoxicação aguda por paraquat/diquat na região do Vale do Ribeira (SP), tida como área de grande prevalência de intoxicações por estes herbicidas. Serão avaliadas a efetividade dos testes rápidos qualitativos e a correlação das concentrações sangüíneas e urinárias do paraquat/diquat com o grau de intoxicação e o prognóstico de sobrevida dos pacientes após o diagnóstico e tratamento.