Luis Lamberti Pinto da Silva.

Este Projeto Temático, composto por 3 grupos de Sub-Projetos, inclui 29 Sub-Projetos de Pesquisa envolvendo 3 pesquisadores principais e cerca de 55 colaboradores brasileiros e internacionais. Terá duração de 4 anos. O projeto tem por foco Bunyaviridae de 3 gêneros:Orthobunyavirus, Phlebovirus e Hantavirus, todos eles zoonóticos e emergentes, ou potencialmente emergentes no Brasil. Quanto aos Orthobunyavirus,realizaremos diagnóstico sorológico de infecções por vírus Oropouche (OROV) por ELISA utilizando uma proteína N recombinante de OROV como antígeno. Com este teste, realizaremos inquérito soro-epidemiológico para OROV em soros de pacientes com doença febril aguda, cavalos, pequenos mamíferos e pássaros. Como informação preliminar para uma vacina, testaremos a proteína N recombinante de OROV, como imunógeno em camundongos. Também, testaremos a ação anti-OROV de 10.000 compostos com base no efeito citopático em células e sua inibição pelas drogas. Produziremos um OROV fluorescente para estudos in vivo e estudaremos sua proteína NSs. Estudaremos a filogenia e a epidemiologia molecular dos Orthobunyavirus com base em genomas virais completos determinados por sequenciamento de nova geração. Ainda, desenvolveremos RT-PCR em tempo real para Orthobunyavirus brasileiros com evidência no sorogrupo C e no sorogrupo Simbu.Quanto aos Phlebovirus, estes serão estudados quanto à filogenia e a epidemiologia molecular. Desenvolveremos RT-PCR em tempo real para Phlebovirus. Buscaremos detectar infecções por Phlebovirus em amostras clínicas de pacientes com doença febril aguda. Também, testaremos a ação contra vírus Candirú (CANDV) de 10.000 compostos. Desenvolveremos um modelo experimental de infecção por CANDV. Quanto aos Hantavirus, diagnosticaremos e pesquisaremos o vírus infectante em doentes com a Síndrome Pulmonar e Cardiovascular por Hantavirus (SPCVH). Analisaremos aspectos da fisiopatologia da SPCVHcom base em teores de citocinas séricas. Caracterizaremosgeneticamente e morfologicamente o Hantavirus Araraquara (ARQV).Avaliaremos a capacidade imunogênica da proteína N recombinante do ARQV em camundongos. Testaremos a ação contra Hantavirus de 10.000 compostos. Realizaremos captura de pequenos mamíferos no campo e pesquisaremos a infecção por Hantavírus nestes animais e em seus ectoparasitas.Analisaremos a infecção por Hantavirus em Necromys lasiurus infectados em laboratório e em suas excretas. Realizaremos estudo de epidemiologia molecular, com base em análises computacionais, sobre a evolução e a distribuição geográfica dos Hantavírus brasileiros. Ainda, esperamos com nossos estudos de bilogia celular, reconhecer detalhes da montagem e do brotamento dos Hantavirus em sua replicação.

Os processos de memória e aprendizagem envolvem modificações nas sinapses neuronais, um processo chamado de plasticidade sináptica. As modificações de longo prazo podem ser de reforço (LTP) ou enfraquecimento das sinapses (LTD). A disponibilidade dos receptores AMPA nas membranas pós-sinápticas e seu tráfego intracelular são mecanismos reguladores da plasticidade neuronal. O número de receptores AMPA disponíveis é determinado pelos processos de endocitose, degradação e reciclagem nas sinapses neuronais. O entendimento dos mecanismos pelos quais esses receptores são transportados e tornam-se disponíveis nas sinapses é fundamental para esclarecer as bases moleculares da plasticidade neuronal e dos processos de formação de memória e aprendizagem, já que funções alteradas de receptores AMPA têm sido descritas em várias doenças neurológicas e psiquiátricas, como na doença de Alzheimer. Esse projeto visa identificar proteínas que controlam o trafego intracelular de receptores AMPA durante a LTD. Esse projeto é desenvolvido em colaboração com o grupo da Dra. Sonia AL Correa ? Universidade de Bradford, Inglaterra.

A modulação dos níveis de CD4 e de outras proteínas da superfície da célula hospedeira por Nef, tem papel importante na progressão da AIDS. Entretanto os mecanismos moleculares utilziados por Nef para este fim são ainda pouco conhecidos. Recentemente descrevemos um mecanismo pelo qual a proteína acessória do HIV-1, Nef, induz o redirecionamento de co-receptores CD4 da superfície celular para a degradação em lisossomos, por meio da rota dos corpos multivesiculares (daSilva et al., 2009, J.Virology). No momento estamos testando o envolvimento dos complexos adaptadores de clatrina e de proteínas ESCRT (Endosomal Sorting Complexes Required for Transport) nesse processo, a fim de dissecar o mecanismo pelo qual Nef direciona CD4 para os lisossomos. Outros projetos relacionados incluem: 1) a identificação de novas proteínas da célula hospedeira que interagem fisicamente com Nef; 2) a influência de Nef em vias celulares de exocitose.

Chamada Pública MCT/FINEP/Ação Transversal - Rotas Biotecnológicas