Daniela Bazan Palioto Bulle.

O objetivo do núcleo é fornecer atendimento periodontal e monitorar pacientes que tenham algum envolvimento sistêmico no qual a doença periodontal possa agravar ou ser agravada pelo processo inflamatório inerente às duas condições. Por exemplo, serão tratados pacientes com diabetes, doenças cardiovasculares, artrite reumatóide e alterações induzidas por tratamento quimio e radioterápico. Nesse sentido, o núcleo irá gerar pesquisa, orientação clínica a graduandos e pós-graduandos, e o caráter indissociável de extensão, gerando conhecimento, assistência e transferência de conhecimento e atenção qualificada para a sociedade e para a difusão de saberes na formação de novos especialistas. Uma característica marcante do Núcleo será o seu caráter de interdisciplinaridade, multidisciplinaridade e transdisciplinaridade

ResumoO objetivo desses estudos é analisar as diferenças na suscetibilidade à doença periodontal (DP) após desafio microbiano sistêmico em cepas conhecidas de camundongos suscetíveis (Balb/C) e resistentes (C57BL/6). Para o primeiro e segundo objetivos, foram utilizados 140 camundongos, divididos em 2 grupos (n = 70 Balb/C n = 70 C57BL/6). Cada grupo foi dividido em 3 subgrupos: Controle (C), Veículo Sham com 2 de carboximetilcelulose estéril (Sham), Porphyromonas gingivalis W83 Gavage (Gav). O desafio microbiano foi realizado semanalmente durante 3 semanas e, após esse período, os camundongos foram mantidos até completar 42 dias de experimento, quando foram então eutanasiados. Já foram avaliados: 1) microarquitetura do osso alveolar na região do 2 molar superior por meio da microtomografia computadorizada de raios X (Micro-CT); Estão sendo avaliados: 2) gravidade da inflamação presente na região interproximal do segundo molar superior por meio de análise histomorfométrica; 3) expressão de marcadores de metilação epigenéticos; (DNMT3b) e acetilação de histona acetil histona 3 (H3) e acetil histona 4 (H4) por imunofluorescência indireta no intestino e maxila; o scanner das placas para o Array de Metilaçao já foi realizado e agora é lido para bioinformática (análise proposta para realização do Research Internships Abroad (BEPE), por um ano). Os dados obtidos serão submetidos à análise estatística (p <0,05). (AU)

Resumo&#10;&#10;No processo de regeneração óssea, o sangue é o primeiro componente a entrar em contato com os biomateriais utilizados. Nesta pesquisa objetiva-se ver os efeitos de Aptamers (oligonucleotídeos curtos capazes de se ligarem seletivamente à proteína alvo) anti-fibronectina (FN) adicionados em arcabouços 3D (SCA), na formação do coágulo sanguíneo e, adicionalmente, na formação óssea. MTT testará a viabilidade celular in vitro de células pré-osteoblásticas (OSB) derivadas de rato (linhagem UMR-106) sobre os SCA com e sem Aptamers anti-FN. O coágulo fisiológico (PhC) será então desenvolvido em modelo animal (rato) sobre os SCA com ou sem Aptamers, caracterizando o estudo ex vivo. Ainda, a fenotipagem do PhC será caracterizada por citometria de fluxo e microscopia eletrônica de varredura. Em outro passo, OSB será cultivado sobre o substrato (SCA, Aptamers e PhC), objetivando observar o efeito do substrato sobre a formação e acúmulo de cálcio e a morfologia 3D dos OSB e PhC por ensaio de mineralização e microscopia confocal, respectivamente. As interações genéticas desencadeadas pela associação dos SCA, Aptamers e PhC sobre o OSB serão investigadas por análise transcriptômica pelo método RNA-seq. Já no estudo in vivo, verificaremos essa associação na formação óssea em ratas. Os grupos experimentais serão 1) controle negativo (sem biomaterial no defeito ósseo - C), 2) Controle (SCA), 3) SCA funcionalizados com Aptamers-anti-FN (SCA+APTantiFN). Todos serão investigados após 5 e 15 dias para observar a diferenciação osteoblástica e neoformação óssea, respectivamente. Dois defeitos críticos serão realizados na calvária: um destinado à análise da densidade e volume ósseo formado por Micro-CT e o outro para análise transcriptômica e processamento histomorfométrico. O perfil genético e a expressão de Runx2 e fosfatase alcalina serão investigados usando os métodos RNA-seq e imuno-histoquímica, respectivamente. Esses achados serão promissores para observar as sinalizações autócrinas e parácrinas do coágulo formado sobre esse biomaterial enriquecido com Aptamer anti-FN, sendo fundamental para desvendar, tanto in vitro como in vivo, os efeitos dessa associação na osteogênese.

Na reconstrução oral, biomateriais são comumente usados como arcabouços que possibilitam a restauração da integridade óssea. Arcabouços tridimensionais (3D) têm sido pesquisados, pois proporcionam uma distribuição celular homogênea e, consequentemente, melhor osteocondutividade. Diversos materiais têm sido elaborados para a preparação destes arcabouços 3D. Dentre eles, o hidrogel é um candidato ideal neste quesito. Esta pesquisa objetiva ver o efeito de arcabouços 3D de hidrogel (SCA) na formação do coágulo sanguíneo e, adicionalmente, na osteogênese. A viabilidade celular será testada em ensaio de MTT em células osteoblásticas (OSB) derivadas de rato (linhagem UMR-106) sobre os SCA. O coágulo fisiológico (PhC), criado em defeitos de calvária de ratos, caracteriza o estudo ex vivo. Para isso, utilizaremos ratos da raça Hannover, machos, com idade de 12 semanas. Assim, a fenotipagem do PhC será caracterizada por microscopia eletrônica de varredura, possibilitando verificar todos os principais componentes do PhC. Em outro passo, o OSB será cultivado sobre o substrato (SCA e PhC), para observar seu efeito sobre a formação e acúmulo de cálcio pelo ensaio de vermelho de Alizarina. Estes resultados serão promissores para observar os efeitos deste biomaterial na formação de coágulo e na osteogênese.

In Vitro: O estudo envolve a caracterização nas mudanças do sistema imune inato em resposta à infecção por P gigivalis em células epiteliais usando high throughput RNA-seq analysis&quot; e caracterização da metilação em CpG por imunoprecipitação (MeDIP) para determinar o papel da metilação do DNA. Uma investigação acerca da modificação de histonas será conduzida pra entender o mecanismo e a função das alterações epigenéticas provocadas pela inflamação que podem induzir desregulação em genes do sistema imune críticos na homeostase periodontal. Os experimentos utilizarão ChIP-Seq para determinar modificações em histonas na plataforma HiSeq 2500 Illumina, low throughput e ChIP para confirmar os dados ChIP-Seq na modificação de histonas. Juntamente com a ChiP-seq, será realizados também ChIP convencional em genes locus específicos para confirmar a extensão na modificação de histonas.Esse projeto se valerá de um modelo in vivo, em roedores, como uma prova de conceitos ligando epigenéticas à inflamação periodontal. Doença periodontal induzida por gavagem de P gingivalis será desenvolvida por acreditar que esse é o meio mais oportuno de se cronificar as lesões. Serão ainda realizados experimentos pra reverter de &quot;de novo methilation tratando os animais com Decitabine. Depois de completada a indução da doença e aplicação do tratamento proposto, biopsias gengivais serão realizadas e o o tecido epitelial será microdissecado e submetido a: análise da metilação de genes relacionados a TLR e sua sinalização, análise da expressão de TLR e sua sinalização. Em paralelo, na maxilla desses animais sera avaliada para verificação da perda óssea e e verificação clínica da perda óssea e imunohistoquímica sera realizada nos tecidos da maxila

Estudos sugerem que a periodontite possa ser um fator de risco para o início, desenvolvimento e desfecho da aterosclerose, por meio de mecanismos bacterianos e imunoinflamatórios. Objetivo: Avaliar a influência do tratamento periodontal (TP) em pacientes com doença arterial obstrutiva periférica (DAOP) e periodontite, correlacionando o perfil inflamatório apresentado por esses pacientes após o TP. Materiais e Métodos: Parâmetros clínicos periodontais (índice de placa ? IP, índice gengival ? IG, profundidade de sondagem ? PS, nível clínico de inserção ? NCI), e os marcadores imunológicos IL-1&#946;, TNF, IL-6, IL-17, IFN-&#947;, MMP-8, V-CAM-1 e E-selectina foram analisados em fluido crevicular gengival (FCG) e soro desses pacientes (DAOP/DP) (n=25) após TP completo. As amostras de FCG foram coletadas em 3 tempos: no baseline, 45 e 90 dias após o tratamento e de soro nos tempos: baseline e 90 dias. Após reavaliação do tratamento periodontal não cirúrgico, aos 45 dias, foi realizado a o tratamento cirúrgico nos pacientes que apresentaram bolsas residuais &#8805; 5 mm. Os parâmetros hematológicos de glicemia em jejum, hemoglobina glicada, triglicérides, colesterol total e frações em sangue periférico foram obtidos no baseline e aos 90 dias. Um grupo com DAOP, mas sem doença periodontal (DAOP) (n=15) foi conduzido, em paralelo, para verificação do padrão de melhora. Resultados: Não foram encontradas reduções significativas no perfil lipídico, glicêmico e inflamatório após o TP nos períodos analisados (p > 0.05). No entanto, observou-se correlação moderada positiva aos 45 dias, do NCI em relação aos níveis de 1L-1&#946; (r=0,532; p=0,0157) e aos 90 dias, entre o NCI e IL-17 (r=0,501; p=0,0243), ambas no FCG. No soro também foi observada correlação positiva moderada entre a redução do NCI e diminuição da MMP-8 (r=0,621; p=0,0035) aos 90 dias. Conclusão: O TP repercutiu na redução local das citocinas inflamatórias relacionadas à doença periodontal e na redução sistêmica da MMP-8, que é um mediador importante no processo de ruptura das placas ateroscleróticas.

Resumo&#10;&#10;O objetivo deste estudo é avaliar o potencial regenerativo do Aspirado Concentrado de Medula Óssea (ACMO) em defeitos periodontais de fenestração criados cirurgicamente em um lado da mandíbula de ratos. Os animais (72 ratos) serão aleatoriamente divididos em 3 grupos: 1) Grupo C (Controle): o defeito será preenchido com coágulo sanguíneo 2) Grupo APG (Alginato de Propileno Glicol: o defeito será preenchido com APG, 3) Grupo ACMO-APG: o defeito será preenchido com APG associado à ACMO. Os animais serão divididos em 3 subgrupos para a eutanásia aos 15, 30 e 60 dias de pós-operatório. A hemi-mandíbula será fixada em formaldeído a 4% para análise microtomográfica com a finalidade de avaliar medidas lineares dos eixos coronal, transaxial e sagital, bem como, a definição linear do defeito ósseo original no sentido mesio-distal e a extensão linear do defeito ósseo original sem novo tecido ósseo pelo programa DataViewer. As análises volumétricas serão realizadas para medir o volume do osso alveolar neoformado a partir da medida da área total do defeito ósseo e área de osso neoformado utilizando o programa de análise 3D (CTAn v.1.10). Os dados obtidos serão submetidos à análise estatística, adotando-se nível de significância de 5%.

O objetivo do presente estudo é avaliar o potencial regenerativo do aspirado concentrado de medula óssea (ACMO) e de células tronco mesenquimais cultivadas derivadas de medula óssea (CTMMO) no tratamento de defeitos periodontais de fenestração criados cirurgicamente em ratos. As CTMMO cultivadas e isoladas CD105+, CD34- e CD45- serão obtidas de 2 ratos isogênicos por separação celular magnética. Para avaliar a pureza das células separadas a citometria de fluxo e imunomarcação para STRO-1 serão realizados. Amostras serão submetidas a diferenciação osteogênica e adipogênica para verificar por análise genética, ensaio de Von-Kossa e Adipogênico a capacidade de diferenciação das CTMMO separadas. Defeitos periodontais de fenestração serão criados bilateralmente na mandíbula de outros 168 ratos. Os animais serão aleatoriamente divididos em 7 grupos: 1) Grupo C (Controle): o defeito será preenchido com coágulo sanguíneo, 2) Grupo APG: o defeito será preenchido com Alginato de Propileno Glicol, 3) Grupo PDME: o defeito será preenchido com Proteínas Derivadas de Matriz de Esmalte, 4) Grupo ACMO-APG, 5) Grupo ACMO-PDME, 6) Grupo CTMMO-APG e, 7) Grupo CTMMO-PDME. Os animais serão divididos em 3 subgrupos para a eutanásia aos 15, 30 e 60 dias de pós-operatório. Em uma hemi-mandíbula serão avaliados o volume e medidas lineares dos tecidos neoformados por análise microtomográfica, o tipo e qualidade dos tecidos neoformados por análises histológicas e histomorfométricas, e presença de osteocalcina, osteopontina, osteonectina, RANK-L, RUNX-2, TRAP e sialoproteína óssea por análise imunohistoquímica. Na outra hemi-arcada o ensaio imunoenzimático irá determinar os níveis das citocinas IL-6, TNF-a, MCP-1, IL-10, IL-1ß, TGF-b, RANKL, OPG, IL-8 e M-CSF. Os dados obtidos serão submetidos à análise estatística, adotando-se nível de significância de 5%.

O objetivo deste projeto é avaliar as condições periodontais em mulheres com câncer ginecológico, sob tratamento quimioterápico, e monitorar o efeito do tratamento periodontal nas condições clínicas e sistêmicas dessas pacientes. Serão avaliadas pacientes com idade variando entre 35 e 70 anos, diagnosticadas como sendo portadoras de câncer ginecológico e que serão tratadas por quimioterapia no Hospital das Clínicas de Ribeirão Preto. As pacientes serão divididas em 4 grupos: pacientes com câncer e sem doença periodontal que receberão terapia preventiva (CA +Tprev) (n=16); pacientes com câncer e com doença periodontal que receberão tratamento periodontal (CA + DP + T) (n=16); pacientes controles saudáveis tanto do ponto de vista sistêmico quanto periodontal (Controle) (n=16); e pacientes controles que não tenham câncer porém que tenham doença periodontal e portanto receberão tratamento (DP + T) (n=16). Os parâmetros clínicos periodontais: Índice de Placa (IP), Índice Gengival (IG), Profundidade de Sondagem (PS), Nível Clinico de Inserção (NCI), os parâmetros radiográficos, os parâmetros inflamatórios: proteína C reativa (PCR), colesterol total, colesterol LDL e HDL, leucograma, triglicérides e a avaliação do fluxo salivar serão realizados no baseline, aos 45 dias, aos 6 meses em todos os grupos. Os dados serão testados quanto a sua normalidade e analisados estatisticamente.

Resumo&#10;&#10;O objetivo do presente estudo será avaliar comparativamente in vivo a taxa de sucesso, sobrevivência e falha de implantesinstalados ao longo de 3 anos. Todos os pacientes que receberam implantes entre 2010 e 2013 na clínica de Implantodontia do Departamento de Periodontia da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo serão incluídos nesse estudo. Os seguintes critérios serão avaliados: idade; sexo; presença de doença sistêmica; história de fumo; área em que o implante foi instalado; diâmetro e altura do implante; necessidade de cirurgia adicional; intervalo entre a primeira e a segunda cirurgia; tipo de prótese instalada; reabsorção óssea (determinado através de radiografias periapicais). A taxa de sucesso e sobrevivência dos implantes será analisada baseando-se nos critérios do Consenso de Pisa do Congresso Internacional de Implantodontistas Orais (ICOI), através dos seguintes parâmetros: dor; mobilidade; índice de placa (IP); índice de sangramento (IS); profundidade de sondagem (OS); sangramento à sondagem (SS) e exsudato. As medidas de IP, IS, PS e SS serão aferidas em quatro aspectos por implante: mesial, vestibular, distal e lingual/palatino. Para a avaliação da perda óssea radiográfica será realizada uma radiografia periapical convencional no momento da rechamada dos pacientes. As radiografias serão digitalizadas e analisadas utilizando o software Image Tool para verificar e determinar a distância linear resultante entre o ombro do implante e a crista óssea (OI-CO). A média do valor mesial e distal será utilizada como medida única para cada implante. A partir desta análise os implantes serão divididos nas seguintes categorias: perda óssea < 2 mm; 2-4 mm; > 4 mm, porém menor que a metade do corpo do implante; e maior que a metade do comprimento do implante. De acordo com esses critérios os implantes serão classificados como sucesso, sobrevivência satisfatória, sobrevivência comprometida ou falha.

O objetivo deste projeto é avaliar as condições periodontais em mulheres com câncer ginecológico, sob tratamento quimioterápico, e monitorar o efeito do tratamento periodontal nas condições clínicas e sistêmicas dessas pacientes.

O tratamento da Periodontite Agressiva (PA) representa um desafio para os clínicos, pois não existem protocolos padronizados para um controle eficiente da doença. O objetivo deste estudo será avaliar o efeito de múltiplas aplicações da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) como adjuvante ao tratamento periodontal não cirúrgico (TPnc) em pacientes diagnosticados com PA. Utilizando um modelo de estudo do tipo boca dividida, 30 pacientes com diagnóstico clínico de PA serão tratados com TFDa associada à raspagem e alisamento radicular (RAR) ou apenas RAR

Alguns aspectos que devem ser observados na tentativa de reduzir a perda de estrutura óssea após a instalação de implantes imediatos são o tipo de retalho realizado, o defeito ósseo horizontal ao redor do implante (gap) e o biotipo periodontal. O objetivo do presente estudo é avaliar a influência da espessura da mucosa queratinizada nos parâmetros clínicos periodontais, na presença ou ausência de retrações gengivais, na extensão do infiltrado inflamatório e na preservação da tábua ósseo vestibular e lingual, em implantes imediatos instalados na mandíbula de cães, sem retalho. Serão utilizados 8 cães. Inicialmente, em cada animal, em um lado da mandíbula será realizado um peeling gengival para diminuição da espessura gengival. Serão executadas as cirurgias para extração do primeiro ao quarto pré-molares mandibulares, sem a realização de acesso cirúrgico e em seguida a instalação imediata de implantes (Bone Level SlActive - Strauman: 3,3 x 8,0 mm e 3,3 x 10 mm) nos seguintes alvéolos: mesial do P2, mesial e distal do P3 e distal do P4, totalizando 4 implantes de cada lado. No dia seguinte à cirurgia, próteses de resina acrílica serão instaladas. As suturas serão removidas após 10 dias e os cães se alimentarão com ração pastosa e profilaxia semanal por 4 semanas. Quatro e doze semanas após a instalação dos implantes, os seguintes critérios clínicos serão avaliados: índice de placa; sangramento a sondagem; profundidade de sondagem; altura e largura das retrações gengivais e espessura da mucosa queratinizada. O sacrifício dos animais acontecerá após o período de 12 semanas. Os espécimes serão seccionados no sentido buco-lingual e submetidos a análise histomorfométrica e imunohistoquímica. Imagens radiográficas digitais e padronizada serão realizadas de todos os implantes seccionados no sentido buco-lingual, e as análises serão feitas usando o programa Image Tool.

A busca por novas terapias com o intuito de restaurar a integridade estrutural do periodonto destruído pela doença periodontal tem ganhado novas perspectivas com os avanços das pesquisas na área de engenharia tecidual, que se baseiam na terapia celular envolvendo culturas de células e tecidos, associadas ou não a biomateriais. Contudo, tais culturas são normalmente feitas sobre superfícies bidimensionais, diferentes da estrutura tridimensional em que as células vivem no organismo. O presente projeto tem como objetivo analisar a expressão dos fenótipos fibroblástico e osteoblástico em culturas tridimensionais na presença ou não de partículas de vidro bioativo, por meio de métodos de biologia celular e molecular. Células derivadas do ligamento periodontal humano e células osteoblásticas de calvária de rato serão plaqueadas em arcabouços bidimensionais (Thermanox - controle 1; Thermanox revestido por colágeno tipo I - controle 2; Thermanox revestido por colágeno tipo I e acrescido de vidro bioativo - controle 3) e tridimensionais (Gel de colágeno tipo I; Gel de colágeno tipo I acrescido de vidro bioativo). Serão avaliados: viabilidade celular (MTT), proliferação celular (BrdU), análise histológica, expressão quantitativa dos genes Periostina (PRT), Periodontal Ligament Specific 17 (PDLs17), Calcium-Binding Protein (S100A4) e Fibromodulina (FBM), marcadores do fenótipo fibroblástico, e Fosfatase Alcalina (ALP), Osteopontina (OPN), Sialoproteína Óssea (BSP), Osteocalcina (OC), Colágeno I (COL I) e Runx2, marcadores osteoblásticos, por PCR em tempo real, atividade de ALP normalizada pela proteína total, localização de proteínas da matriz não-colágena (ALP, OPN e BSP) por imunofluorescência indireta e mineralização (vermelho de Alizarina). A análise estatística será realizada por meio de teste paramétrico ou não-paramétrico, a depender da normalidade dos dados, para dados independentes e mais de duas amostras.