Jorge Simão do Rosário Casseb.

Estudar a prevalência e incidência do HTLV-1 em crianças nascidas de pessoas convivendo com HTLV-1

Avaliação da incidência de HAM no Brasil

Determinar os achados em pessoas vivendo com HIV e infecção com COVID

Decifrando biomarcadores imunológicos da infecção

Os distúrbios neurocognitivos associados ao vírus da imunodeficiência humana (HIV-1, HAND) são de diagnóstico difícil, especialmente na primeira fase da doença, impedindo o tratamento precoce e a prevenção de formas mais graves. O HIV pode permanecer latente no SNC por muitos anos e a infecção subclínica associada às comorbidades (por exemplo, síndrome metabólica, uso de drogas e hepatite C), conduzem à ativação imune e inflamação crônica de baixo grau. Esses efeitos imunológicos e a possibilidade de desenvolver alterações neurocognitivas devidas à infecção pelo HIV podem ocorrer, mesmo com a supressão do RNA viral no sangue periférico e líquido cefalorraquidiano (LCR). Alguns autores argumentam que um índice mais alto de penetração de drogas (CPE) no SNC pode se associar a uma maior probabilidade de carga viral indetectável naquele órgão, bem como a um melhor funcionamento cognitivo. Esta proposta visa combinar vários estudos anteriores que descreveram fatores virológicos e imunológicos, considerados como marcadores potenciais para o diagnóstico precoce dos distúrbios neurocognitivos associados à infecção pelo HIV, além de outros fatores mais recentemente identificados.

Introdução: O HTLV-1 foi primeiramente descrito 1980, e tem sido relacionado principalmente com agente causal da ATL e a HAM/TSP, além de outras doenças inflamatórias. Estima-se que 15 a 25 milhões de pessoas em todo mundo estejam infectadas pelo HTLV-1, entretanto, a maioria delas permanece assintomática. Fatores imunológicos e genéticos do hospedeiro estão relacionados ao desenvolvimento de HAM/TSP, porém não existem estudos que avaliam a influências desses aspectos e a associação com desenvolvimento da mielopatia. Objetivo: Analisar se existe associação entre alguns polimorfismos genéticos relacionados à resposta imunológica, em pacientes infectados por HTLV-1 com HAM/TSP. Material e Métodos: Os voluntários serão recrutados a partir do ambulatório de HTLV do Instituto de Infectologia "Emílio Ribas" (IIER). Um total de700 voluntários serão recrutados para este estudo, e divididos em três grupos (200 assintomáticos, 200 HAM/TSP , 100 com sintomas menores e 200 familiares não infectados pelo HTLV-1). Os ensaios de genotipagem dos polimorfismos genéticos, carga proviral de HTLV-1 e linfoproliferação de células T, serão realizados em todas as amostras coletadas. Os dados serão tratados por meio de estatística descritiva, univariada e multivariada. Desfecho: Esses dados poderão contribuir para o entendimento da patogênese para o desenvolvimento da HAM/TSP e seu manejo clínico.

Esta pesquisa têm como objetivo: avaliar se o virus causador da AIDS (HIV) é mais infeccioso em pacientes infectados também pelos vírus linfotrópico de células T humanas (HTLV-I/II). Pesquisas no exterior mostram que o HIV na presença de infecção por outros vírus (HTLV-1/2 por exemplo) têm uma maior capacidade de transmissão (é mais infeccioso) em condições laboratório. Os resultados desta pesquisa nos ajudarão a avaliar se a forma como prevenimos ou tratamos a infecção pelo HIV-1 deve ser diferente em pacientes com infecção também pelo HTLV-I/II.

avaliação de resposta imune de pessoas infectadas pelo HTLV-1

Mesmo após a disponibilização dos anti-retrovirais no Brasil, a taxa de mortalidade entre pessoas co-infectadas pelo HIV/Aids e tuberculose (TB) continuam elevadas. Apesar dos vários estudos já consagrados, indicando a isoniazida (INH) como meio profilático para diminuir a incidência de TB na população infectada pelo HIV, essa medida não é amplamente atendida em todos os serviços de saúde especializados no Brasil.
O presente estudo visa dispor INH profilática de forma sistemática para todos os pacientes que apresentarem indicações de uso, avaliar a incidência de TB em indivíduos infectados pelo HIV, a adesão a quimioprofilaxia, assim com sua eficácia comparada com uma série histórica do Ambulatório de Imunodeficiências Secundárias ? ADEE 3002 LIM56 - FMUSP. Esses dados podem contribuir no incremento da indicação de INH como medida profilática para TB.
Enfatizando sua relevância, pode subsidiar o Programa Nacional de Controle da Tuberculose, ao corroborar a recomendação do PNCT com dados nacionais, estímulo com vistas a tornar mais incisiva uma diretriz para dispor o INH a apoiar a definição do tempo de uso da INH bem como a proteção oferecida pela quimioterapia, visto que a TB no Brasil continua a ser a doença oportunista mais incidente na população infectada pelo HIV.
As baixas sensibilidade e especificidade do Teste Tuberculínico na população estudada indicam que novos marcadores de infecção por tuberculose devam ser desenvolvidos para avaliação de indivíduos infectados pelo HIV.

Introdução: Recentemente, o perfil do polimorfismo da IL28b tem importância na resposta do tratamento anti-HCV , porém no contexto da coinfecção entre HCV/HTLV não foi avaliada em nosso meio. Objetivo geral: Avaliar a associação entre o perfil do polimorfismo da IL28B e a a evolução clínica de indivíduos coinfectados HCV/HTLV-1 atendidos no ambulatório de HTLV e de Hepatologia do IIER-SP. Objetivos Específicos: 1)Avaliar o perfil de haplótipos do polimorfismo nesta população; 2) Relacionar a resposta virológica sustentada ao polimorfismo do gene da IL28-b; 3)Relacionar os tipos de polimorfismo do gene da IL28B a coinfecção com o vírus HTLV-1. Material e Métodos: Um total de 450 indivíduos foi confirmado como positivos para o HTLV-1, sendo 20 deles também estavam com coinfectados pelo HCV, e um grupo controle de 152 pacientes com HCV que estão em acompanhamento no Serviço de Ambulatório de HTLV e de Hepatologia do Instituto de Infectologia ?Emílio Ribas? serão analisados retrospectivamente e prospectivamente. Será feita entrevista diretamente com os pacientes convidados a participar voluntariamente depois da leitura e assinatura do TCLE. Os dados clínicos serão obtidos a partir dos prontuários, e as análises laboratoriais serão realizadas a partir de soroteca e coleta específica. Este estudo terá impacto no prognóstico clínico desses pacientes.

Os antagonistas de CCR5 são uma nova classe de drogas que bloqueiam o correceptor CCR5, impedindo a entrada do HIV na célula, levando a uma diminuição significativa da viremia. Porém, a administração desta classe de drogas implica na determinação do tropismo viral e o monitoramento da possível mudança de tropismo ao longo da infecção. Os ensaios padrão-ouro para a determinação do tropismo são pouco acessíveis, mas a difusão dos softwares preditores de tropismo a partir de sequências da região V3 representam uma alternativa mais viável para a triagem dos candidatos ao uso dos antagonistas de CCR5. Além disso, faz-se necessário o monitoramento de mutações que possam levar a resistência a essa classe de drogas. A alça V3 da gp120 do envelope do HIV-1 é considerada o principal determinante do tropismo e também o principal alvo de mutações de resistência, porém outros fatores como diferenças intrísecas entre as variantes do HIV-1, o número de sítios de N-glicosilação, variações da extensão de determinadas regiões e a carga elétrica global da gp120 também podem estar relacionadas com estas alterações virais. No presente estudo, a análise destes fatores associada à utilização de ferramentas de bioinformática, permitirá a caracterização de alterações genotípicas virais que possam estar relacionadas com o prognóstico clínico dos indivíduos infectados pelo HIV-1.

Introdução: O Papilomavirus Humano (HPV) é um vírus de DNA que inclui mais de 180 genótipos, sendo o HPV-16 responsável por 80% dos casos de câncer cervical nas mulheres. Entretanto, os homens são considerados importante reservatório de HPV e resultados apresentados anteriormente por nosso grupo mostrou que cerca de 30% dos pacientes infectados pelo HIV-1 apresentaram o DNA do HPV em amostras de urina. Pouco estudos avaliaram a resposta imunológica (Th1 e Th2) apresentada pelo hospedeiro e sua relação com progressão para o câncer genital nos indivíduos infectados pelo HPV. Objetivo: Avaliar a prevalência e resposta imune específica in vitro ao HPV nos homens portadores de HIV-1, com lesão sugestiva de HPV e sem lesão por HPV. Material e Métodos: Serão coletadas 300 amostras de urina de homens adultos infectados pelo HIV proveniente do ambulatório de imunodeficiências secundárias Adee3002 do HC/FMUSP e do Centro de Referência e Treinamento em DST/AIDS, a fim de avaliar a prevalência de HPV. As amostras serão submetidas a uma PCR em tempo real utilizando-se Sybr Green® com um set de primers PGMY09/11 para detecção de HPV DNA. As amostras que apresentarem o HPV DNA, então, serão submetidas a um Polimorfismo de Fragmento de Restrição (RFLP), para determinar os tipos de HPV. A resposta celular será avaliada pelo uso da vacina quadrivalente do HPV para o estímulo da cultura de células mononucleares, em ensaios in vitro e detectada por PCR array e citometria para identificar o perfil Th1-Th2, em homens com e sem lesão para HPV. Deste modo, os resultados deste estudo poderão contribuir para o entendimento da resposta imune contra o HPV e lesões genitais em homens.

A elucidação de muitas das etapas do ciclo de replicação do Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) e o desenvolvimento de novas tecnologias aplicadas a saúde propiciaram o desenvolvimento de novas estratégias para contornar as falhas terapêuticas. A disponibilização de novas drogas anti-retrovirais como os antagonistas de co-receptor e inibidores de integrase implica na seleção dos candidatos a utilizarem essas novas estratégias terapêuticas. Instrumentos de bioinformática podem representar uma alternativa mais acessível para a triagem dos pacientes, quando comparada aos ensaios atualmente estabelecidos. Nosso estudo se propõe a identificar o padrão de uso dos co-receptores CCR5 e CXCR4 pelas cepas do HIV-1 através da análise do seqüenciamento da região V3 da gp120 do envelope do HIV-1 pelo uso de ferramentas de bioinformática e a verificação da presença de polimorfismos naturais capazes de conferir resistência ao uso de inibidores de integrase, através a análise do sequenciamento da região da integrase do HIV-1.

Introdução: Apesar do Vírus Linfotrópico de Células T Humanas do tipo 2 (HTLV-2) ser considerado pouco patogênico, o diagnóstico sorológico é importante para aconselhamento e acompanhamento. Os testes confirmatórios mais usados são o Western-Blot (WB) e a PCR. Entretanto, em populações de alto risco, cerca de 50% dos resultados indeterminados pelo WB quando testadas pela PCR, em nossa experiência, confirmaram infecção pelo HTLV-2. Resultados preliminares revelaram elevada homologia na região imunogênica do envelope viral quando alinhadas com a seqüência de aminoácidos da proteína MTA4 (HTLV-1) do kit WB. Entretanto, novos estudos serão realizados para a confirmação desta homologia em uma região especifica do HTLV-2 do envelope viral. Objetivos: Este estudo visa avaliar a seqüência genética do envelope, quantificar a carga proviral do HTLV-2 por PCR em tempo real e o grau de ativação imunológica dos indivíduos infectados pelo HTLV-2. Casuística: Grupo I: amostras de pacientes soropositivos para o teste de WB; e Grupo II: Pacientes soro-indeterminados pelo teste. Métodos: Técnicas que serão usadas; ELISA, WB, PCR convencional PCR em tempo real e citometria de fluxo. As hipóteses a serem testadas seriam de que a insensibilidade do WB em detectar anticorpos anti-HTLV-2 seria pelo uso de proteínas recombinantes procedentes de cepas que não circulam em nosso país; que o nível de imunossupressão, poderia acarretar uma menor produção de anticorpos anti-HTLV-2 circulantes; e/ou a carga viral do HTLV-2 pode ser também um fator da pouca estimulação do sistema imune, o que resulta baixa quantidade de anticorpos circulantes.

O Papilomavirus Humano (HPV) é um vírus DNA, que inclui cerca de 100 distintos genótipos. A associação da infecção pelo HPV e o aparecimento do câncer cervical vem sendo muito bem estabelecido, o tipo 16 é a causa de cerca de metade do câncer cervical reportado, enquanto o HPV-18 é responsável por 17% dos casos. A expressão de dois oncogenes, o E6 e o E7, são responsáveis pela carcinogênese cervical. Como o epitélio cérvico-vaginal, o epitélio da bexiga também é susceptível a infecção pelo HPV. Portanto, a urina é uma fonte alternativa em potencial de HPV. A prevenção da infecção em homens é um outro caminho para eliminar o câncer cervical e reduzir câncer anal e lesões genitais. A prevalência das lesões pelo HPV é significante entre pacientes infectados com o Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV). O HIV-1 pode influenciar diretamente na patogênese da doença causada pelo HPV. Apesar do sucesso do desenvolvimento da vacina anti-HPV, uma quadrivalente para HPV-6, 11, 16 e 18, ainda é desconhecido o impacto como pessoas infectadas pelo HIV. Devido a ausência de estudos sobre as regiões imunodominantes dos tipos de HPV circulantes. O objetivo principal do nosso estudo é verificar a prevalência do HPV (HPV-DNA) e os tipos circulantes em homens soropositivos para o HIV-1 em amostras de urina e determinar a diversidade da região imunodominante L1 dos tipos HPV 6, 11, 16 e 18.

As quimiocinas RANTES, MIP-1α e MIP-1β são ligantes naturais para o receptor CCR5 e medeiam à quimiotaxia e ativação celular. A quimiocina SDF-1 é a única ligante conhecida para CXCR4; capaz de modular a baixa expressão de CXCR4 nas células, bloqueando a infecção por vírus T-trópicos, mas não M-trópicos. As β-quimiocinas derivadas de células T CD8+, têm demonstrado ser capazes de inibir a replicação de HIV. Apesar da substancial queda no número de pessoas que evoluíram para aids ou mesmo mortes após a introdução dos anti-retrovirais, cerca de 50% dos pacientes apresentam falha de falência virológica na prática clinica. Vários fatores podem estar relacionados com esses achados. Uma possibilidade seria que indivíduos não respondedores aos anti-retrovirais, produziriam uma menor quantidade de quimiocinas in vivo. Assim, pretendemos avaliar a hipótese de que a produção das quimiocinas possa implicadar na não resposta aos anti-retrovirais em indivíduos sob controle viral (respondedores) e naqueles com replicação (não respondedores) em uma coorte de pessoas infectadas pelo HIV em acompanhamento há vários anos

Padronização e desenvolvimento de mesuração da PVL de HTLV-1

Na cidade de São Paulo, cerca de 50 mil pessoas são portadoras do HTLV-I. O HTLV-I é o agente causador da paraparesia espástica tropical/mielopatia associada com o HTLV-I (TSP/HAM) e os mecanismos desta patogênese são obscuros. A TSP/HAM é considerada uma doença imuno-mediada e algumas citocinas, podem estar associadas com a lesão na membrana de mielina da coluna espinhal, provavelmente, estimuladas pela presença de antígenos virais. A PCR em tempo real pode ser utilizada para a detecção de citocinas e apresenta maior sensibilidade para quantificação de citocinas e carga proviral, pela detecção do mRNA específico. Objetivos: Detecção de citocinas pelas técnicas sorológicas e de biologia molecular (PCR em tempo real) que auxiliaram no aconselhamento e avaliação de pacientes infectados pelo HTLV-I, HIV-1 e na co-infecção, além de uma avaliação da carga proviral e de mRNA dos pacientes com infecção pelo HTLV-I. Casuística: Grupo I: indivíduos soronegativos para HCV, HIV-1 e HTLV-I (Controle); Grupo II: pacientes HTLV-I assintomáticos; Grupo III: pacientes com TSP/HAM pelo HTLV-I; Grupo IV: pacientes com HIV-1; Grupo V: pacientes com HIV-1 e HTLV-I; Grupo VI: pacientes com HTLV-I, TSP/HAM e HIV-1. Assim, propomos a quantificação das citocinas pela PCR em tempo real, a partir de cultura celular pela detecção da expressão do mRNA, pois novos trabalhos indicam que a carga viral mensurada no mRNA da região Tax poderia elevar essa sensibilidade.