Diego Villa Clé.

O lúpus eritematoso sistêmico (LES) é uma doença crônica causada pela produção anormal de autoanticorpos por linfócitos B, que causam danos cumulativos aos tecidos, como os rins. Cerca de 60 dos pacientes com LES evoluem com lesão renal e cerca de 20 são refratários aos tratamentos imunossupressores, permanecendo sem alternativas terapeuticas. Os onde linfócitos T sadios são modificados geneticamente para expressarem um receptor de membrana que reconhece e combate um determinado antígeno. No caso das células CAR-T anti-CD19, reconhecem e combatem linfócitos B doentes. Recentemente, as células CAR-T anti-CD19 têm mudado o paradigma e prognóstico da LLA e do Linfoma, duas doenças de linfócitos B, com potencial curativo em pacientes refratários. Alguns pesquisadores também observaram alta eficácia das células CAR-T anti-CD19 em doenças auto-imunes, como o LES. No Hemocentro de Ribeirão Preto, desenvolvemos uma plataforma para produzir as células CAR-T anti-CD19 com tecnologia 100 nacional. Este produto foi testado em 20 pacientes com LLA ou Linfoma com segurança e alta taxa de resposta. Pretendemos realizar um estudo clínico fase I/II investigando a segurança e eficácia das células CAR-T no LES e nefrite lúpica refratária ao tratamento convencional. Dezesseis pacientes serão tratados nos Hospitais das Clínicas de Ribeirão Preto e de São Paulo com uma única infusão endovenosa das células CAR-T anti-CD19 autólogas produzidas no Hemocentro de Ribeirão Preto, e serão acompanhados por um ano. Observaremos eventos adversos e a taxa de resposta da nefrite e do LES. Além de ser um potencial novo tratamento, com mecanismo inovador, para uma doença com uma necessidade médica não atendida, há um potencial de economia de recursos a todo o SUS. O custo de produção de nosso produto 100 nacional é cerca de 15-25 do valor de um produto similar com células CAR-T disponível comercialmente no mercado.

Otimização dos protocolos de produção das células CAR-TEspera-se, dessa forma, desenvolver um produto mais efetivo, com produção mais rápida e custos significativamente menores, permitindo acesso desta modalidade terapêutica a um maior número de pacientes.

Trata-se de um estudo clínico fase I/II, multicentrico, com 81 pacientes com linfoma não-Hodgkin ou leucemia linfóide aguda (LLA) recidivados/refratários, para determinar a segurança e resposta clínica ao tratamento com um produto acadêmico de células CAR-T anti-CD19 produzidas no Hemocentro de Ribeirão Preto.

A terapia com células CAR-T revolucionou o tratamento das neoplasias hematológicas. Apesar dos resultados impressionantes, a terapia com células CAR-T é cercada de várias limitações, dentre as quais o tempo para a manufatura do produto celular, elevado custo e a dificuldade de obtenção de células autólogas com boa funcionalidade e em número adequado em pacientes expostos a várias linhas de tratamento. Por essas razões, faz-se necessário ter à disposição alternativas terapêuticas, principalmente de uso imediato, como as células NK alogênicas. Neste contexto, nosso grupo de pesquisa desenvolveu um CAR de quarta geração, o CAR-NK CD19-IL15/IL15Ra, contendo a citocina IL-15 ligada artificialmente ao seu receptor RA. As células CAR-NK CD19-IL15/IL15Ra apresentam com forte atividade citotóxica in vitro e in vivo, alta secreção de citocinas pró-inflamatórias, e podem ser expandidas independentemente da IL-2, diminuindo o custo da produção. O presente estudo visa desenvolver a produção destas células CAR-NK em escala, e em condições de boas práticas clínicas (GMP) para estudo clínico posterior.

Apesar do tratamento quimioterápico e radioterápico, cerca de 20 a 50 dos pacientes com linfoma difuso de grandes células B (LDGB) serão refratários ou recairão após o tratamento. Infelizmente, até o momento, mesmo com o advento da tomografia por emissão de pósitrons (PET-CT), não há como se predizer com exatidão quais pacientes apresentarão recaída da doença. Testes moleculares, com capacidade de detectar precocemente respostas subótimas, podem ser ferramentas poderosas na otimização do tratamento e manejo destes pacientes. Neste sentido, o DNA tumoral circulante (ctDNA), o qual são pequenos fragmentos de DNA detectados no plasma que são oriundos da apoptose das células tumorais, tem-se mostrado extremamente promissor. Desta forma, este estudo será realizado com o objetivo de investigar o perfil mutacional dos linfomas agressivos B e avaliar a cinética da doença residual mensurável durante o tratamento, por meio da detecção de variantes com relevância clínica no ctDNA. O objetivo principal do estudo será a definição de um valor de ctDNA que seja capaz de prever uma resposta metabólica completa (RMC) no PET-CT durante e/ou no fim do tratamento. Para este fim, realizaremos um estudo observacional longitudinal prospectivo no qual será feita a análise molecular e radiológica de 50 pacientes portadores de linfoma B agressivo, virgens de tratamento ou com doença recaída/refratária, ao diagnóstico e durante o tratamento quimioterápico. Adicionalmente, ao diagnóstico, será realizada também a definição dos subtipos genéticos do LDGB por meio do algoritmo Lymphgen e a avaliação da quantificação do ctDNA com definidor de carga tumoral nos linfomas. No fim do estudo, esperamos definir o ctDNA como uma nova ferramenta na análise da biologia tumoral e da carga tumoral ao diagnóstico, assim como no acompanhamento dos pacientes em tratamento. Adicionalmente, por meio da definição da genômica dos linfomas agressivos da nossa população, talvez, seja possível se encontrar ao fim do estudo, novos alvos terapêuticos e/ou estratégias, os quais poderão tornar mais eficiente e preciso o tratamento dos pacientes do SUS com aquelas patologias.

Projeto de Iniciação Científica