Jorge Alberto Marques Rezende.

O Brasil cultiva maracujazeiro praticamente em toda a sua extensão territorial, e a doença predominante em quase todas as regiões produtoras é denominada endurecimento dos frutos, causada pelo potyvirus cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV). A sua ocorrência reduz a vida útil da cultura de 36 meses para aproximadamente 18 meses. A disseminação do vírus no campo ocorre principalmente por afídeos, sendo a relação vírus-vetor do tipo não persistente. O controle do endurecimento dos frutos é difícil, sobretudo porque as espécies de Passiflora exploradas comercialmente não são resistentes ao vírus ou tolerantes à doença. Acrescenta-se que o controle químico do inseto vetor não é eficiente. As alternativas de manejo hoje disponíveis geralmente são insuficientes, e apenas diminuem parcialmente os danos provocados pelo CABMV em maracujazeiro. Diante deste cenário, este trabalho propõe a implantação de plantios pilotos de maracujazeiros em pequena escala na região de Piracicaba, SP, para validar a estratégia da erradicação sistemática de plantas doentes (roguing) através de inspeções semanais, como forma eficiente, sustentável e economicamente viável para o manejo da doença no campo. Em dois plantios, as plantas serão individualizadas nas espaldeiras e todas aquelas infectadas serão imediatamente erradicadas e substituídas por mudas sadias. O terceiro plantio, conduzido sem individualização e erradicação de plantas doentes será o controle. A produção quantitativa e qualitativa será avaliada e comparada. Ao final do segundo ano pretende-se realizar um dia de campo para divulgação dos resultados aos produtores de maracujá. O objetivo final desse projeto é contribuir para a melhoria do sistema de produção do maracujá, que envolve pequenos e médios produtores, através do manejo adequado do endurecimento dos frutos. Espera-se aumentar a longevidade das plantações com consequentes ganhos quantitativos e qualitativos na produção de maracujá.

O tomateiro é uma hortaliça de grande importância econômica para o Brasil e para o mundo. A planta pode ser afetada por doenças viróticas causadas por espécies do gênero Begomovirus. Nas regiões produtoras de tomate no Brasil predomina o Tomato severe rugose virus (ToSRV). Este vírus é transmitido pelas moscas branca Bemisia tabaci MEAM1 e MED, de maneira persistente circulativa. O período mínimo de acesso à aquisição (PAA) e inoculação (PAI) dos begomovírus por B. tabaci pode ser variável entre os vírus. Recentemente, foi evidenciado que B. tabaci MEAM1 pode adquirir o ToSRV durante um minuto de alimentação em tomateiros infectados. Este curto período de alimentação para a aquisição do vírus sugere que o ToSRV tem a capacidade de colonizar, além dos vasos do floema, células mais superficiais do hospedeiro, como por exemplo, as células da epiderme e do parênquima foliar. O ToSRV tem uma ampla gama de hospedeiros, que tem importância epidemiológica. No entanto, não há o conhecimento se B. tabaci é capaz de adquirir o ToSRV durante um minuto de alimentação em outros hospedeiros, que podem influenciar parâmetros epidemiológicos da doença no campo e o manejo com base na remoção de fontes de inóculo. Assim os objetivos do trabalho serão analisar a aquisição do ToSRV por B. tabaci MEAM1 durante um minuto de alimentação em tomateiro (Solanum lycopersicum) (controle), Nicandra physaloides, pimentão (Capsicum annuum), feijoeiro (Phaseolus vulgaris), soja (Glycine max) e maria pretinha (Solanum americanum). Será também avaliada a concentração do ToSRV por q-PCR, para posterior correlação com os processos de aquisição e a posterior transmissão para tomateiro e a preferência de B. tabaci à oviposição nesses hospedeiros.

O projeto de pesquisa propõe dar continuidade aos estudos epidemiológicos, desta feita a nível regional, para identificar hospedeiros amplificadores (amplifier hosts) responsáveis por frequentes epidemias das doenças causadas por tomato severe rugose virus (ToSRV) e tomato chlorosis virus (ToCV) em cultivos de solanáceas em diferentes regiões produtoras do pais. Estudos básicos das características moleculares de begomovirus e crinivirus, bem como das interações vírus/vetores/plantas serão continuados, para ampliar a compreensão dos patossistemas. Ao final pretende-se estabelecer alternativas sustentáveis para o manejo dessas doenças principalmente em plantações de tomateiro, batateira e pimenteira. Para atingir esse objetivo a proposta é apresentada em cinco módulos com os seguintes objetivos específicos: (1) Biologia molecular ? detecção, caracterização molecular de begomovirus e fluxo gênico em Bemisa tabaci MEAM1; (2) Relações vírus-vetor-planta ? estudos populacionais e comportamentais de B. tabaci MEAM 1 e MED e relaçoes com vírus/plantas; (3) Epidemiologia regional? identificar a presença e atuação de hospedeiros amplificadores nas epidemias; (4) Fontes de inóculo: identificar a importancia de hospedeiros alternativos na epidemiologia das doenças; (5) O vetor ? estudar parâmetros biológicos; (6) Manejo ? estudar diferentes alternativas de manejo, tais como controle biológico do vetor, indição de resitência, resistencia genética, premunziação e manejo cultural.

O tomateiro no Brasil é suscetível a diversas espécies de vírus do gênero Begomovirus. O Tomato severe rugose virus (ToSRV) destaca-se por predominar nos cultivos das principais regiões produtoras desta hortaliça no país e causar danos econômicos à produção. O ToSRV é transmitido de maneira persistente circulativa pela mosca-branca Bemisia tabaci MEAM1. Além do tomateiro, o ToSRV possui uma ampla gama de hospedeiros, entre plantas cultivadas e daninhas. Estes hospedeiros alternativos podem atuar como reservatórios do vírus no campo. Embora não muito frequente, há begomovírus que pode ser transmitido para a progênie de B. tabaci, por via transovariana e também entre adultos, via acasalamento, como demonstrado para o Tomato yellow leaf curl virus. Isto pode ter importância na epidemiologia da doença, uma vez que o inóculo viral se mantém no vetor, mesmo na ausência de plantas hospedeiras do vírus. Apesar do uso de cultivares resistentes e da aplicação constante de inseticidas para o controle do vetor, a doença associada ao ToSRV ocorre em altas incidências em cultivos de tomateiro. Esses fatos justificam a busca por mais conhecimento sobre a epidemiologia da doença e das relações vírus-vetor para permitir o desenvolvimento de medidas alternativas de manejo dessa begomovirose. Os objetivos deste trabalho serão: avaliar o potencial de espécies suscetíveis ao ToSRV como fonte de inóculo do vírus; verificar a transmissão transovariana e via acasalamento do ToSRV por B. tabaci MEAM1; procurar por estirpes fracas do ToSRV e realizar testes de pré-imunização em tomateiro. Os resultados obtidos fornecerão informações importantes que poderão ser utilizadas para o manejo mais eficaz dessa begomovirose na tomaticultura.

O tomateiro (Solanum lycopersicum L.) é uma das hortaliças mais cultivadas no mundo e apresenta uma grande importância econômica e social no Brasil. Entre as diferentes viroses que ataca a cultura nos principais estados produtores dessa hortaliça no país, o crinivirus Tomato clorosis virus (ToCV) tem ganhado maior atenção na ultima década. O controle do vetor, o aleyrodideos Bemisia tabaci MEAM1 não tem sido eficiente para o controle da incidência de vírus. Tampouco existem variedades/híbridos resistentes a esse crinivirus. Alternativas de controle com enfoque nas fontes de inoculo são necessárias, para isto, precisa-se um melhor entendimento do papel das fontes de inoculo no desarrolho da virose causada pelo ToCV. Os objetivos deste trabalho são: a) avaliar diferentes espécies hospedeiras alternativas do ToCV como potenciais fontes de inoculo do vírus mediante a quantificação do título viral no tecido vegetal e em insetos aleyrodideos após aquisição em elas: b) avaliar a eficiência de transmissão e persistência do vírus no vetor após aquisição nas diferentes espécies suscetíveis; c) avaliar a suscetibilidade das diferentes espécies hospedeiras em condições de campo; d) avaliar a preferência das espécies suscetíveis a oviposição de Bemisia tabaci; e) avaliar a eficiência das espécies suscetíveis como fontes de inoculo em condições de campo; f) coletar e identificar plantas daninhas infectadas com o ToCV em cultivos de tomateiro na região de Sumaré, SP. Esses conhecimentos poderiam dar aos produtores de tomate mais ferramentas para o manejo da doença no campo, com uma redução significativa no uso de inseticidas, o que beneficiaria tanto aos produtores quanto aos consumidores e ao ambiente.

A beterraba (Beta vulgaris L.) é uma das principais hortaliças cultivadas no Brasil, sendo o estado de São Paulo uns dos principais produtores com 7.148,37 hectares. O Beet necrotic yellow vein virus (BNYVV) é um patógeno economicamente importante de beterraba, é transmitido pelo protozoário habitante do solo Polymyxa betae e causa a doença denominada rizomania. Em 2014, o BNYVV foi detectado pela primeira vez no Brasil em amostras de beterraba de mesa provenientes da região de São José do Rio Pardo, SP. Devido a que o vetor infectivo sobrevive no solo por muitos anos, a principal medida de controle é evitar a entrada do patógeno em áreas ainda livres do vírus e limitar sua disseminação em áreas já infestadas. Diante disso, o principal objetivo deste trabalho será o mapeamento da ocorrência do BNYVV nas áreas cultivadas com beterraba no estado de São Paulo, para fornecer subsídios para prevenir a disseminação do patógeno para áreas indenes. Além disso, pretende-se identificar a gama parcial de hospedeiros e avaliar a reação de diferentes genótipos comerciais de beterraba à infecção com BNYVV. As inoculações serão feitas usando solo seco e peneirado e mecanicamente. As avaliações das plantas inoculadas serão feitas mediante a observação de sintomas, e nested-RT-PCR. Também será determinada a variabilidade genética dos isolados de BNYVV infectando beterraba no estado de São Paulo.

O projeto de pesquisa ora proposto compreende sete módulos que possibilitarão uma melhor compreensão da estrutura e do comportamento de fitoviroses causadas por begomovirus e crinivirus em solanáceas no Brasil, condição sine qua non para a elaboração de sistemas mais racionais de manejo integrado dessas doenças. Os módulos têm os títulos e objetivos seguintes: (1) Biologia molecular ? detecção e caracterização de begomovirus e crinivirus em solanáceas em importantes áreas de produção no Brasil; (2) Relações vírus-vetor-planta ? determinação dos períodos de aquisição, inoculação e retenção dos vírus e efeitos dos vírus sobre os parâmetros biológicos do vetor; (3) Epidemiologia espacial e temporal ? compreender a estrutura e o comportamento de epidemias de fitoviroses que têm Bemisia tabaci como vetor; (4) Fontes de inóculo: primária e secundária ? quantificar a importância relativa das infecções primária e secundária e o papel de hospedeiros secundários na epidemiologia das fitoviroses; (5) Danos ? quantificar os danos à produção causados por begomovirus e crinivirus em condições brasileiras; (6) O vetor ? monitorar a dinâmica populacional de B. tabaci em condições de campo e quantificar sua influência na incidência das doenças; (7) Manejo ? determinar o efeito de inseticidas na transmissão de begomovirus e crinivirus e avaliar bancos de germoplasma de solanáceas para identificar fontes de resistência aos vírus e ao vetor. O objetivo geral deste projeto é controlar racionalmente as doenças causadas por begomovirus e crinivirus por meio de táticas combinadas, tendo como base conceitual o manejo integrado de pragas e doenças.

O Tomato chlorosis virus (ToCV, gênero Crinivirus, família Closteroviridae) é constituído por RNA de fita simples, senso positivo, transmitido de maneira semi-persistente por pelo menos três espécies de mosca-branca (família Aleyrodidae). Possui ampla gama de hospedeiros que inclui plantas domesticadas e ervas daninhas das famílias Solanaceae, Amaranthaceae, Apiaceae, Asteraceae, entre outras. No estado de São Paulo, Brasil, foi descrito pela primeira vez por Barbosa et al. (2008), causando clorose internerval nas folhas do terço inferior das plantas e perda de vigor dos tomateiros. A importância desta doença emergente tem incrementado nos últimos anos e, no entanto, até o momento não existem estimativas do dano causado nem conhecimento sobre variedades resistentes ou tolerantes à doença. Por tudo isso, foi proposto o presente trabalho para (i) avaliar a resistência de genótipos de tomateiro à infecção com o ToCV em casa de vegetação, (ii) avaliar a tolerância dos mesmos genótipos à doença e (iii) estimar o dano produzido, em campo protegido. Para atingir o primeiro objetivo mais de 30 genótipos de espécies selvagens, híbridos e cultivares comerciais de tomateiros disponíveis serão produzidos em bandejas de isopor para obter mudas distribuídas ao acaso, visando obter 10 repetições por genótipo. As mudas produzidas serão devidamente etiquetadas e mantidas numa estrutura protegida com tecido a prova de insetos. Entre 30 e 40 dias após a semeadura ou quando a maioria das mudas apresentarem as primeiras folhas verdadeiras serão realizadas liberações massais diárias de aleirodídeos virulíferos. No décimo dia, quando tenham sido liberadas em media 15 aleirodídeos por muda, serão suspendidas as inoculações e 24 horas depois as plantas serão tratadas com inseticida e transplantadas em vasos de alumínio com substrato de terra, areia e matéria orgânica (2:1:1) esterilizada. A partir de 30 dias após a última liberação de insetos virulíferos será determinado o número de planta

O vírus do mosaico amarelo da abobrinha (Zucchini yellow mosaic virus -ZYMV) é provavelmente um dos mais dinâmicos e prejudiciais vírus emergentes de plantas. Desde sua primeira detecção na Itália e na França em 1973 e 1979, respectivamente, o ZYMV tem sido reportado em mais de 50 países variando de condições climáticas tropicais a temperadas em todos os continentes, exceto na Antártida. No Brasil esse potyvirus foi constatado primeiramente nos Estados de São Paulo e Santa Catarina, no início da década de 90 e posteriormente nos Estados do Ceará, da Bahia, do Rio Grande do Norte, do Pará, do Mato Grosso do Sul e do Maranhão. É provável que atualmente ocorra em todos os estados brasileiros onde se cultivam cucurbitáceas. Embora ocorra no Brasil há quase 20 anos, pouco se conhece sobre as características biológicas, sorológicas e moleculares dos isolados até então encontrados no país. Conhecimentos sobre a variabilidade de isolados de um vírus são fundamentais para o estabelecimento de estratégias duradouras de controle, particularmente nos trabalhos de melhoramento genético para desenvolvimento de variedades resistentes ou de premunização com estirpes fracas do vírus. Esse projeto de pesquisa tem por objetivo cobrir parcialmente essa lacuna para fornecer subsídios para programas de melhoramento genético e de premunização. Pretende-se ainda avaliar a interação entre uma estirpe fraca e outras severas do vírus na transmissão por afídeos Myzus persicae e Aphis gossypii.

Zucchini lethal chlorosis virus (ZLCV) é um vírus do gênero Tospovirus, causador da clorose letal da abobrinha de moita (Cucurbita pepo L. cv. Caserta). O vírus é transmitido pelo tripes Frankliniella zucchini. O desenvolvimento de um programa de manejo integrado para a clorose letal requer a compreensão de informações epidemiológicas básicas sobre o patossistema. Isso inclui conhecimento das fontes de infecção primária, os mecanismos de como o vírus é transmitido de planta para planta, como o vírus é introduzido para novos locais, como o vírus sobrevive entre estações de culturas, e identificação de fatores que favorecem a epidemia. Algumas destas informações são conhecidas para os tospovírus em geral, embora as informações existentes até o momento sobre o ZCLV são poucas e fragmentadas e não permitem estabelecer estratégias de manejo da doença. Diante disso, os principais objetivos deste trabalho são identificar os hospedeiros alternativos do ZCLV mediante testes sorológicos (PTA-ELISA, DOT-BOLT, tissue printing), biológicos (inoculação mecânica, exposição de plantas a infecção natural no campo) e moleculares (RT-PCR), e confirmar sua identidade mediante sequenciamento; e estabelecer a criação de Frankliniella zucchini para posterior estudo das relações vírus/vetor. As plantas que fossem identificadas como hospedeiras alternativas do ZLCV serão usadas para fazer ensaios de transmissão usando o tripes vetor.

Os vírus pertencentes ao subgrupo do Sugarcane mosaic virus (SCMV, gênero Potyvirus, família Potyviridae infectam e causam mosaico em diferentes espécies botânicas da família Poaceae, como milho e sorgo, porém apenas o SCMV e o Sorghum mosaic virus (SrMV) infectam naturalmente a cana-de-açúcar. A doença causada pelo SCMV resulta em grandes perdas econômicas na produtividade de cana-de-açúcar e no desenvolvimento genético de novos clones. As perdas atingem de 30-40%, e em alguns casos, há perdas de 60-80%.
No Brasil, SCMV parece ser a única espécie causal da doença, e vem sendo controlada pela substituição das variedades suscetíveis por híbridos resistentes. Porém, embora a maioria das variedades comerciais de cana-de-açúcar seja considerada resistentes ou tolerante ao SCMV, há relatos de incidência de mosaico em tais variedades no campo, e os sintomas variam de forma a sugerir diferentes estirpes do SCMV.
Amostras com sintomas fraco, intermediário e severo de diversos clones e variedades, serão coletadas em campos experimentais de Assis, Piracicaba e Ribeirão Preto, SP, a fim de avaliar biológica e molecularmente os diferentes isolados do SCMV. Também será avaliada a transmissão desses isolados através dos afídeos Rhopalosiphum maidis e Melanaphys sacchari
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A família Passifloraceae encontra-se largamente distribuída pelos trópicos, com mais de 580 espécies. Dentre as comestíveis do gênero Passiflora, encontram-se Passiflora edulis, P. edulis f. flavicarpa e P. alata como as mais cultivadas no Brasil. O país é o principal produtor mundial de maracujá azedo e recentemente, a espécie P. alata (maracujá-doce) vem ganhando destaque no mercado de frutas frescas. Com o aumento da área cultivada, uma série de problemas fitossanitários tem prejudicado produção e qualidade dos frutos de maracujá. Dentre eles, o Cowpea aphid borne mosaic virus (CABMV), agente causal da doença denominada endurecimento dos frutos do maracujazeiro, tem se destacado, pois está disseminado por todas as áreas produtoras de maracujá no país. Esse vírus reduz a longevidade das plantas e provoca danos quantitativos e qualitativos na produção. Até o momento não se dispõe de alternativas duradouras e eficazes para o controle da doença. Diante disso, este projeto tem como objetivos estudar alternativas para o controle da doença: i) uma primeira proposta, com resultados a médio e longo prazo, propõe a continuidade dos estudos com as linhagens transgênicas, expressando o gene da proteína capsidial do vírus e que se revelaram resistentes ao patógeno. Nesse caso pretende-se avaliar as progênies R2 em casa de vegetação e futuramente em campo. Nessa mesma linha pretende-se avaliar novas linhagens transgênicas de maracujás azedo e doce recentemente obtidas com as construções antisense e hairpin do gene da proteína capsidial do CABMV; ii) uma segunda proposta, com o objetivo de proporcionar uma alternativa de controle da doença em um prazo mais curto, pretende-se estudar a viabilidade prática e econômica de uma nova prática de condução e manejo do plantio de maracujazeiro, associada com a erradicação sistemática das plantas com mosaico; iii) terceiro, reavaliar as possibilidades de seleção de estirpes fracas com maior poder invasivo e estáveis que possam ser utiliza

A Morte Súbita dos Citros (MSC) foi identificada em 2001, no município de Comendador Gomes, Minas Gerais, e desde então, foi responsável pela perda de 4 milhões de plantas na região sul do Triângulo Mineiro, e no norte e noroeste do estado de São Paulo. É uma doença de combinação copa/porta-enxerto afetando principalmente laranjeira doce sobre limoeiro ?cravo?, e que culmina na morte das plantas. Apresenta como principal sintoma o amarelecimento dos tecidos internos da casca do porta-enxerto, na região do floema funcional. Passados oito anos do seu relato, até hoje não se tem conhecimento exato do agente causal e dos possíveis vetores. Sugere-se que, pela forma de distribuição das plantas doentes nos pomares, pelos sintomas da doença e pela associação constante nas plantas afetadas, os possíveis agentes patogênicos sejam o vírus da tristeza dos citros (Citrus tristeza virus - CTV) e um vírus da família Tymoviridae, denominado Citrus Sudden Death associated Virus (CSDaV). Como os dois vírus ocorrem simultaneamente em todas as plantas afetadas, há a necessidade de separá-los para a comprovação dos postulados de Koch. A presente proposta de pesquisa visa a separação desses vírus, por meio de inoculações em plantas indicadoras e a subseqüente reintrodução do CSDaV em plantas cítricas. A disponibilidade do CSDaV isolado, livre de CTV, é essencial para os testes de patogenicidade que indicarão se a doença é causada por esse vírus ou pela ação sinérgica entre ele e o CTV. Também será útil análise de possíveis vetores bem como purificação do vírus e conseqüente produção de anti-soro específico para diagnose da doença.

Diversas espécies de cucurbitáceas exploradas economicamente no Brasil são afetadas por diferentes vírus, que causam danos quantitativos e qualitativos na produção. Nos últimos anos tem chamado a atenção uma espécie do gênero Tospovirus, denominada Zucchini lethal chlorosis virus (ZLCV) pela alta incidência e danos severos a produção, especialmente de abobrinha de moita que é altamente susceptível ao patógeno. Avaliações de danos nessa espécie revelaram que plantas que exibiram sintomas até os 23 dias após a emergência (DAE) não produziram frutos. Plantas infectadas mais velhas produziram frutos comerciais, porém com redução de 78,5% na produção. Há evidência de que esse vírus é transmitido pelo tripes Frankliniella zucchini. Como se pode notar as informações existentes até o momento sobre o ZLCV são poucas e fragmentadas e não permitem estabelecer estratégias de manejo da doença. Diante disso, os principais objetivos dessa proposta são: a) estudar a distribuição temporal e espacial da doença em campo e identificar a importância das disseminações primária e secundária na epidemiologia da doença em campo; b) identificar hospedeiros naturais do vírus e c) estabelecer a criação de Frankliniella zucchini para posterior estudo das relações vírus/vetor. Além disso, propõe-se identificar o tipo de resistência encontrada na moranga var. Exposição de tal sorte a fornecer subsídios para futuros trabalhos de melhoramento.

Nos últimos anos a incidência da clorose letal, causada pelo Zucchini lethal chlorosis virus (ZLCV), vem aumentando em plantios de cucurbitáceas e preocupando produtores pelos danos causados na produção. O ZLCV pertence ao gênero Tospovirus, família Bunyaviridade, e tem como vetor o tripes Frankliniella zucchini (Thysanoptera: Thripidae). Devido a poucas informações sobre esta virose em cucurbitáceas, somente algumas medidas profiláticas de controle têm sido recomendadas para minimizar a incidência da doença. A resistência genética, seja da forma tradicional ou por meio da transgenia, é considerada a melhor e mais eficiente forma de controle de viroses em geral. Para isto fontes de resistência ou tolerância são necessárias. Estudos recentes sobre a reação de espécies de curcubitáceas ao ZLCV indicaram que a moranga (Curcubita maxima) cv. Exposição foi altamente resistente à infecção natural e a inoculação mecânica com o ZLCV. Observações complementares a este estudo indicaram que a infecção com o PRSV-W parece quebrar a resistência da moranga cv. Exposição ao tospovírus. Essa proposta de pesquisa visa realizar análises complementares para melhor caracterizar a resistência da moranga cv. Exposição ao ZLCV, para que esta variedade seja utilizada em programas de melhoramento vegetal e estudar a interferência do Papaya ringspot virus ?type W (PRSV-W) e do Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV) na resistência dessa cucurbitácea ao ZLCV.

Entre as hospedeiras de invasão sistêmica do vírus do mosaico do mamoeiro ? estirpe mamoeiro (PRSV-P) encontram-se espécies de cucurbitáceas, cuja suscetibilidade à transmissão experimental, mecânica e com afídeos, é variável. A literatura nacional e internacional apresenta resultados distintos quanto à recuperação do PRSV-P a partir de cucurbitáceas presentes próximas ou no interior de plantios de mamoeiros infectados com esse vírus. O presente projeto tem como objetivo estudar a infecção natural em campo de abobrinha de moita (Cucurbita pepo cv. Caserta), moranga (Cucurbita maxima cv. Exposição), pepino (Cucumis sativus) e melancia (Citrullus lanatus) com o PRSV-P presente em plantas de mamoeiro, com a finalidade de esclarecer o papel dessas espécies na epidemiologia do mosaico. Visa também avaliar em casa de vegetação a suscetibilidade das mesmas espécies de cucurbitáceas a seis isolados do PRSV-P obtidos de diferentes regiões do Brasil, em testes de transmissão mecânica e por afídeos. Para o desenvolvimento do trabalho em campo se realizará um total de três plantios contínuos das cucurbitáceas, nas regiões de Piracicaba, Rinópolis - São Paulo e Linhares ? Espírito Santo, nas entrelinhas de parcelas de mamoeiros já infetados com o PRSV-P. A partir dos 50 dias depois da semeadura se coletará amostras compostas dos ponteiros das folhas das plantas, que serão avaliadas segundo a sintomatologia. Em seguida se realizará o teste de recuperação biológica do PRSV-P, inoculando mudas de mamoeiro em casa de vegetação com macerados das amostras compostas. Os mamoeiros inoculados serão avaliados com base nos sintomas e testados pelo PTA-ELISA. No ensaio em casa de vegetação se avaliará sintomatologicamente e por PTA-ELISA a transmissão mecânica e por afídeos dos diferentes isolados do PRSV-P nas quatro espécies de cucurbitáceas. Também será feita a recuperação biológica dos isolados em plantas de mamoeiro, a partir dos cotilédones inoculados e dos ponteiros das cucurbitáceas

O endurecimento dos frutos do maracujazeiro, causado pelo Passionfruit woodiness virus (PWV), é responsável por reduções significativas na produção quantitativa e qualitativa dessa frutífera. Até o momento não se dispõe de medidas permanentes de controle dessa doença, apesar dos esforços empreendidos. Mais recentemente, todavia, estudos realizados por um grupo de pesquisa do estado de São Paulo na tentativa de obter plantas das variedades comerciais FB-100 (Maguary), IAC-275 e IAC-277 trangênicas resistentes ao PWV, obtiveram resultados parciais bastante satisfatórios e promissores. Os transformantes primários T2 (IAC-277) e T8 (IAC-275) obtidos com a inserção do gene da proteína capsidial do PWV, apresentaram resistência a este vírus. Assim sendo, este trabalho propõe: i) a obtenção de clones de maracujazeiros FB-100 resistentes ao PWV, transformados via Agrobacterium, já que FB-100 é uma variedade elite de grande importância comercial e os ensaios de transformação desta variedade por biobalística e agro-biobalística não apresentaram resultados satisfatórios; ii) multiplicação e auto-fecundação dos transformantes primários T2 e T8, obtidos com a inserção do gene da proteína capsidial do PWV para avaliação das gerações futuras para seleção de plantas homozigóticas e 100% resistentes, que poderão posteriormente ser utilizadas para a reconstituição da variedade comercial, portando o transgene para resistência ao PWV; iii) avaliar se o alto nível de resistência constatada no transformante primário T2 é devida a resistência à infecção ou imunidade ao vírus; iv) avaliação da resposta do transformante primário T2 à infecção pelo Cucumber mosaic virus (CMV), já que normalmente em plantas não transformadas de maracujazeiro, este vírus fica restrito a porções sintomáticas dos ramos, não sendo considerado um problema para a cultura; v) análise da expressão do gene de resistência no transformante T2, ao antibiótico canamicina, já que a expressão de um gene de resistência a ant