Alice Maria Melville Paiva Della Libera.

Nos últimos anos, com o avanço das técnicas moleculares, tem havido uma busca crescente porcomunidades de microrganismos comensais, devido ao fato de muitas dessas populações terem a capacidade prevenir ou favorecer muitas doenças, com foco também na glândula mamária bovina. O anteriormente aceito o consenso sobre a esterilidade da glândula mamária foi contestado como resultado. Alguns autores assumem que a glândula mamária tem sua própria microbiota, enquanto outros argumentam que ela é estéril. Nesse sentido, o objetivo do presente projeto é: 1) investigar a relação entre o ápice da teta e o microbioma do leite; e 2) explorar a associação entre o rúmen emicrobiota fecal e saúde do úbere. Para tal, serão utilizados oito vacas primíparas, de raça holandesa, com sete dias em lactação (DEL). Destes animais, serão coletadas assepticamente de leite de cada quarto mamário para o exame microbiológico, metagenômico e contagem de células somáticas (CCS). Ademais, esses animais serão acompanhados durante o primeiro mês de lactação quanto àocorrência de mastite. Somado a isso, serão coletados swabs de ápice do teto, liquido ruminal e fezes os quais serão submetido ao sequenciamento de alto rendimento da análise de 16SrRNA. Assim, será possível determinar a relação entre a saúde da glândula mamária no período pós-parto - período de maior suscetibilidade a novas infecções intramamárias - com uma microbiota comensal. Alémdisso, a relação do microbioma do ápice do teto e do leite, e seu efeito na saúde do úbere podem ser estabelecidos. Por fim, uma possível relação entre a microbiota ruminal e fecal e a saúde do úbere também será determinada.

A saúde da glândula mamária bubalina pode ser influenciada por fatores diversos, inclusive pelas características edafolimáticas nas quais a fêmea se encontra, assim como o tipo de resposta imune frente aos patógenos causadores de mastite. Reconhecendo a preciosidade da espécie e as características intensivas e extensivas da atividade e a potencial contribuição que essas informações
podem agregar também aos demais sistemas de produção nacional. O aumento da capacidade natural de resistir às infecções pode ser uma importante estratégia na seleção de animais menos suscetíveis a desenvolver mastite. Um obstáculo no estabelecimento deste tipo de estratégia é a falta de compreensão quanto aos aspectos da interação patógenos-hospedeiro, principalmente na búfala. A
compreensão dos mecanismos de resposta imunológica contra os microorganismos invasores e a eliminação destes patógenos são essenciais, para também instituir medidas profiláticas e de tratamento para mastite. Neste cenário, os neutrófilos compõem a primeira linha de defesa frente às enfermidades, exercendo papel fundamental na resposta imunitária, logo este estudo objetiva avaliar a
resistência à fagocitose e atividade microbicida, comparar-se-á a viabilidade, produção intracelular de espécies reativas de oxigênio (ERO) e a capacidade fagocítica de neutrófilos sanguíneos em búfalas leiteiras frente aos distintos isolados viáveis do leite de búfalas.

S. aureus é um dos patógenos mais frequentemente isolados dos casos de mastite bovina, sendo responsável às maiores perdas econômicas entre todos os patógenos causadores de mastite. Assim, ainda no século XXI, este patógeno representa um grande problema para a indústria de laticínios em todo o mundo devido a sua patogenicidade, perfil contagioso, persistência da infecção e as
baixas taxas de cura associadas às terapias. Com isto, muitos estudos têm se esforçado para buscar alternativas, como o desenvolvimento de vacinas contra S. aureus, porém nenhuma das vacinas desenvolvidas até hoje foram capazes de induzir uma resposta imune eficiente, e uma provável causa para este evento está atrelado ao fato de que as vacinas desenvolvidas contra este
patógeno devem focar na resposta imune celular. Outro fator limitante é a falta de conhecimento sobre o poder protetivo de proteínas codificadas pelo genoma de S. aureus, tornando o desafio do desenvolvimento de uma vacina eficaz ainda maior. Dessa forma o presente estudo tem por objetivo avaliar a resposta imune induzida por seis diferentes proteínas recombinantes de S. aureus relacionados a cura bacteriológica e prevenção de novas infecções intramamárias causadas por S. aureus em vacas leiteiras.

Estudos voltados a glândula mamária demonstram incoerência de informações, onde, alguns autores supõem que a glândula mamária possui uma microbiota própria, enquanto outros defendem que a mesma é estéril. Baseado nessa literatura incoerente, o objetivo do presente projeto é definir qual a melhor técnica de coleta de material para o exame de microbioma, avaliar a relação da integridade do canal do teto com a microbiota da glândula mamária de novilhas e sua correlação com a saúde da glândula mamária no pós-parto e investigar a existência de microrganismos comensais em animais
nulíparos. Para tal, o estudo se divide em três fases, sendo que na fase um serão aplicadas três formas de coleta de leite em animais multíparos, para definir qual o melhor método de coleta de leite para a análise de microbioma, são elas: a coleta tradicional de acordo com NMC, a coleta através do uso de uma cânula, e a coleta com uma cânula intracânula, o material coletado passará por análise microbiológica e microbioma. Já para a segunda fase do projeto, as novilhas serão avaliadas quanto a abertura do canal do teto durante o período de pré-parto (21 dias), para isso, será feita uma avaliação visual para definir se o teto se apresenta aberto ou fechado e após, deverá ser realizado o exame ultrassonográfico, como exame comprovatório, quando considerado aberto, será realizada a coleta da secreção para análise de microbioma, contagem de células somáticas (CCS) e exame microbiológico, além disso, no pós-parto serão realizadas coletas de colostro e leite em quatro momentos (M1: dia do
parto; M2: sete dias após o parto; M3: 15 dias após o parto; M4: 30 dias após o parto), sendo o material coletado encaminhado para análise microbiológica do leite e CCS, tendo o intuito de avaliar a saúde da glândula mamária nesse período. Logo, na terceira fase, será investigada a existência de populações microbianas em animais nulíparos, através de biópsia mamária, que será encaminhada para exame de microbioma.

A demanda por genética leiteira de origem zebuína, principalmente de gado Gir leiteiro e seus cruzamentos no Brasil vem crescendo acentuadamente nos últimos anos. Apesar disto, embora tenha havido um crescimento paralelo e contínuo em relação a genética do rebanho nacional, os sistemas de produção esbarram com problemas frequentes, como manejo nutricional e reprodutivo. No sentido de atender a demanda crescente não apenas é necessário o melhoramento genético, mas também a intensificação na sanidade dos animais nos sistemas de produção. Neste contexto, tornam-se imprescindíveis os estudos e entendimento da imunidade e metabolismo sérico destes animais, principalmente no que se refere ao período de periparto, uma vez que estas informações são
escassas na literatura. Desta forma, objetiva-se estudar e elucidar a dinâmica imunológica e metabólica, assim como o retorno da ciclicidade no período de periparto em nulíparas e pluríparas da raça Gir leiteiro.

O ensino da farmacologia em Medicina Veterinária e, em especial, do emprego de antibióticos, é um grande desafio para os docentes. Envolve memorização de informações associada a conhecimentos prévios de microbiologia. O uso prudente de antibióticos na medicina veterinária de produção tem grande impacto na saúde dos animais e na saúde pública; portanto, conceitos básicos são fundamentais na aquisição de conceitos complexos e no desenvolvimento de senso crítico dos futuros veterinários. Jogos didáticos podem ser importantes ferramentas de aprendizado, ao reforçar o papel ativo do aluno na construção do conhecimento e permitir simular uma situação em que o mesmo se enxergue em posição de tomada de decisão. Objetivo: desenvolvimento de jogo didático como instrumento auxiliar nas aulas expositivas de farmacologia e clínica. Público-alvo: alunos de graduação de Medicina Veterinária. O grupo multidisciplinar envolvido no desenvolvimento abrange buiatras, farmacologistas, veterinários de outras especialidades e alunos de graduação de veterinária. O jogo, de tabuleiro, lança mão do uso de cartas, dados e cubos. Trata-se de uma situação fictícia em que os jogadores possuem vacas, podendo perder ou adquirir animais, de acordo com seus conhecimentos na antibioticoterapia e o uso das cartas de antibióticos que têm em mãos. A partir da Taxonomia de Bloom, foram definidos os objetivos para cada conteúdo: a) conhecimento - relatar as características dos antibióticos e das bactérias, e responder corretamente a perguntas específicas sobre determinados antibióticos-; b) compreensão - identificar qual antibiótico capaz de conter as bactérias e qual antibiótico mais eficaz para determinada bactéria-; c) análise - comparando diferentes antibióticos, identificar o antibiótico mais eficaz reduzindo, se possível, a resistência bacteriana e/ou toxicidade com o mínimo de perda de vacas -; d) síntese - esquematizar o padrão para determinar o melhor antibiótico para cada caso. Embora se encontre na fase de testes, já se mostrou promissor no ensino de conceitos fundamentais da antibioticoterapia na medicina veterinária, aumentando o interesse dos alunos neste tema tão relevante na formação do profissional.

O presente estudo tem por proposta avaliar o desempenho das proteínas de fase aguda em bovinos frente à um estimulo com Mannheimia haemolytica. Delinear os diferentes perfis das proteínas de fase aguda frente a uma resposta inflamatória durante o quadro de mannheimiose, além de definir qual marcador seria mais vantajoso como indicador precoce da inflamação causada pela pneumonia por M. haemolyitica.

S.aureus é o patógeno mais frequentemente isolado dos casos de mastite, gerando
grandes prejuízos econômicos aos produtores de leite quando comparado com os demais
patógenos causadores de mastite. Ainda no século XXI não foi encontrado uma
alternativa para eliminar esta enfermidade de vez dos rebanhos, afetando os maiores
países produtores de leite mundial. Por ser uma doença de causa multifatorial que
envolve uma serie de esforços em vários patamares na tentativa de minimizar os danos
causados por ela. Com isto, muitos estudos tem se esforçado para buscar alternativas,
como o desenvolvimento de vacinas contra S. aureus, porém nenhuma das vacinas
desenvolvidas até hoje foram capazes de induzir uma resposta imune eficiente, e uma
provável causa para este evento está atrelado ao fato de que as vacinas desenvolvidas
contra este patogeno deverão focar na resposta de células T, tornado-as dessa forma,
efetivas. Outro fator limitante é a falta de conhecimento sobre o poder protetivo de
proteínas codificadas pelo genoma de S.aureus, tornando o desafio do desenvolvimento
de uma vacina ainda maior. Dessa forma o presente estudo tem por objetivo avaliar a
resposta imune induzida por estimulo com seis diferentes protéinas isoladas de S. aureus, relacionados a cura
bacteriológica e prevenção de novas infecções intramamárias causadas por S.aureus em
vacas leiteiras em diferentes perfis de produção (modelo multicêntrico), por meio de
citometria de fluxo com gates realizados em células B (CD21+), T (CD3+), T CD4+, T
CD8 +, e células T gama-delta (WC1), além de suas respectivas subpopulações de
linfócitos B (CD21+), T (CD3+), T CD4+, T CD8 +, B (CD21+) e células T gama-delta
(WC1) de memória (CD45RO+). As citocinas IL-17A e IFN-γ, serão mensuradas
utilizando kits comerciais. Espera-se com este estudo avaliar o potencial de proteínas
relacionados a cura bacteriológica e prevenção de novas infecções na indução de
resposta imune humoral.

Considerando o perfil oportunista da M. haemolytica, o maior obstáculo para a minimização da ocorrência da infecção por este patógeno recai na carência de estudos sobre os principais aspectos relacionados às alterações imunológicas locais decorrentes da infecção. Portanto, a melhor compreensão das alterações imunes decorrentes da pneumonia induzida experimentalmente por M. haemolytica, é fundamental para o entendimento da doença, e para se estabelecer uma conduta mais racional e eficaz em animais acometidos, pois quanto mais especializada a pecuária, maior será a demanda por estratégias que minimizem os efeitos adversos de fatores genéticos, fisiológicos e ambientais relacionados ao sistema de produção. Diante do supracitado, fica claro a importância da melhor compreensão da função desses macrófagos na defesa pulmonar, por meio de avaliação da resposta imune de bezerros.

A mastite é a enfermidade de maior impacto econômico na pecuária leiteira mundial, e está associada ao bem-estar animal e a saúde pública devido ao risco de resíduos antimicrobianos no leite e à resistência bacteriana aos antimicrobianos. Considerando que a completa eliminação do uso de antimicrobianos nos rebanhos leiteiros não é uma realidade, a redução do seu uso é recomendada. Diante deste ponto de vista, ferramentas que permitem o aumento da capacidade do animal de resistir as infecções intramamárias são cruciais. No entanto, o maior obstáculo para o estabelecimento deste tipo de estratégia é a carência de estudos dos aspectos da interação dos distintos patógenos causadores de mastite e o hospedeiro. Neste contexto, sabe-se que os neutrófilos são essenciais para a defesa da glândula mamária, apresentando importante funções como a fagocitose e a morte dos patógenos invasores. Dentre os patógenos causadores de mastite bovina, destaca-se as bactérias do gênero estafilococos que são divididas em estafilococos coagulase-positivos, sendo Staphylococcus aureus considerado o principal patógeno associado à mastite bovina, e estafilococos coagulase-negativos que compreendem as espécies bacterianas mais frequentemente isoladas de amostras de leite em novilhas e vacas leiteiras em várias regiões e países do mundo. Desta forma, o presente estudo buscar-se-á avaliar diferenças entre os distintos isolados de estafilococos associados aos bovinos de resistir à fagocitose e à morte bacteriana pelos neutrófilos. Além disto, a função neutrofílica (fagocitose, morte bacteriana e viabilidade dos neutrófilos, e a liberação de redes extracelulares por neutrófilos ativados - conhecidas como "neutrophil extracelular traps") em vacas primíparas e multíparas será investigada.

A artrite encefalite caprina (AEC) é uma virose que está distribuída mundialmente nos rebanhos, e as propriedades mais acometidas são aquelas de maior tecnificação, com práticas como estabulação dos animais, elevada densidade populacional e alta produção leiteira por cabeça. Dentre as consequências da doença, na clínica, as formas predominantes de AEC são: nervosa, artrítica, respiratória e mamária. Na forma mamária é predominante a mastite crônica, que pode causar assimetria e endurecimento do úbere, mais conhecido como mastite endurativa crônica. Esta última leva a redução na produção leiteira, e tem por característica apresentar hipertrofia da glândula mamária, gerando um aumento da espessura do parênquima e dos linfonodos. A ultrasonografia é uma boa forma de avaliação da glândula mamária, pois trata-se de uma técnica não invasiva e de fácil aplicação, que pode ser utilizada frequentemente sem causar efeitos colaterais. O projeto de pesquisa visa avaliar as características ultrassonográficas do parênquima mamário de 10 cabras sororreagentes ou e 10 não sororeagentes para AEC, e assim tornar possível mensurar o nível de acometimento da glândula e fornecer informações para a taxa de reposição do plantel ou sobre a produção de leite, visando à redução das perdas produtivas e econômicas nos rebanhos leiteiros.

O Complexo Doença Respiratória dos Bovinos é um importante problema de sanidade animal, dentre as doenças do complexo a mannheimiose pneumônica bovina (MPB) é a broncopneumonia de maior prevalência e impacto econômico. Estudos para o entendimento da doença têm sido feitos avaliando diversas alterações, entretanto, a avaliação do sistema imune durante a evolução da doença não estão esclarecidas. O objetivo do presente estudo é avaliar a dinâmica das células de defesa local e sistêmica de animais com MPB utilizando um modelo experimental de indução da doença, e também avaliar o efeito do medicamento in vitro, o tratamento em relação à função celular de fagócitos do sangue e de macrófagos do lavado broncoalveolar e a evolução da infecção e do tratamento por meio de exame físico e inspeção indireta das vias respiratórias por meio de broncoscopia. Para tal serão utilizados 12 bezerros da raça holandesa preto e branca com seis meses de idade, hígidos e divididos em dois grupos experimentais. Os animais serão submetidos à inoculação intrabronquial de Mannheimia haemolytica sorotipo A1 e terão suas amostras de lavado broncoalveolar e de sangue colhidas em momentos distribuidos entre antes da inoculação e após o término do tratamento. As amostras colhidas serão submetidas a ensaios para avaliação imune por meio de técnicas de citometria de fluxo, quantificação de citocinas, e estudo citológico da amostra de lavado broncoalveolar, além do hemograma e exame físico que serão realizados para monitoramento dos animais. A análise estatística dos dados obtidos na avaliação do sangue e dos lavados respiratórios será realizada utilizando o programa estatístico computadorizado MINITAB (1998). Para cada técnica e em cada semana de colheita, serão calculadas as medianas e percentis, como medida de tendência central, para as diferentes provas imunológicas no LBA e no sangue dos bezerros.Todas as variáveis serão submetidas ao teste de Kolgomorov & Smirnov para verificar se os dados aprese

Castração de bezerros machos é uma prática frequente adotada em muitos sistemas de produção e, que por envolver um importante segmento econômico, é constantemente questionada quanto a suas implicações na otimização do valor desses animais no abate. Influencia a qualidade da carcaça e o temperamento dos animais, porém o estresse do procedimento motiva a avaliação de inúmeras técnicas de castração associadas a diversos protocolos analgésicos para verificar a lesividade ao animal, dor e predisposição a doenças. Afecções como broncopneumonias enzoóticas, uma das principais causas de perdas econômicas na bovinocultura, são condições constantes após eventos estressantes. Com o intuito de verificar se há interferência da resposta imune sistêmica e do trato respiratório após a orquiectomia, a presente pesquisa pretende verificar dor, desconforto e estresse por meio da dosagem de cortisol, padrão de comportamento e postura e dosagem de haptoglobina. Para a verificação da imunocompetência serão avaliados o hemograma, prova funcional de leucócitos sanguíneos por mensuração de citocinas, porcentagem de fagocitose e produção intracelular de peróxido de hidrogênio por leucócitos sanguíneos; e análise citológica, porcentagem de fagocitose e produção intracelular de peróxido de hidrogênio de células da região broncoalveolar. Se o procedimento cirúrgico adotado produzir mínimo ou nenhum desconforto animal, não ocorrerá aumento de susceptibilidade a doenças, principalmente broncopneumonias. A biologia dos animais de produção será respeitada, melhorando seu bem-estar e as expectativas do mercado consumidor continuarão a ser atendidas.

Citocinas são polipeptídeos secretados por linfócitos e vários outras células do organismo em resposta a estímulos fisiológicos e patológicos. Controlam a diferenciação de diversas linhagens celulares e são responsáveis pela regulação da resposta imune. Na glândula mamária não é diferente, uma vez que estas apresentam grande importância na regulação das defesas frente a um estímulo que pode mobilizar a resposta imune a assumir um padrão Th1 ou Th2. A partir da tendência da sinalização celular, a evolução da doença poderia ser delineada. As principais citocinas consideradas marcadores de defesa da glândula mamária são as Interleucinas (IL-2, IL-4, IL-5,IL-6 e IL-10) Fator de Necrose Tumoral-alfa (TNF-±) e Interferon-gama (IFN-³). Sendo assim esse projeto visa avaliar o comportamento das citocinas na mastite, as variações de seus níveis após o tratamento, bem como a capacidade em demonstrar a cura clinica e o prognóstico da doença. Para isso, serão avaliadas 60 vacas positivas para o teste da caneca de fundo escuro e CMT, divididas em três grupos de 20 animais (T1, T2 e T3), a saber: T1: receberá tratamento antibiótico sistêmico (enrofloxacina); T2: receberá antibiótico intramamário (sulfato de cefquinoma); T3: será submetido ao tratamento com os dois princípios (T1+T2). Os grupos C1 e C2, formados respectivamente por animais negativos para as duas provas (CMT e fundo escuro) e negativos para a prova de fundo escuro e positivos para CMT serão grupos controles do estudo. As amostras serão colhidas antes e no segundo, quinto e décimo segundo dia após o término do tratamento e submetidas a exame bacteriológico, antibiograma e dosagem de citocinas e imunoglobulinas que serão realizadas pelo método ELISA. A análise estatística dos dados obtidos na avaliação de todos os componentes do leite será realizada utilizando o programa estatístico computadorizado.

O presente estudo objetiva avaliar as mudanças metabólicas e no período de transição e associá-las a alterações na resposta imune e a incidência da mastite, assim como avaliar a adoção de medidas de controle da mastite dada pela terapia de vaca seca e o uso de selantes internos de tetos na incidência da mastite no período pós-parto. Desta forma, serão utilizadas 30 vacas que serão divididas uniformemente em três grupos, a saber: animais que receberão terapia de seca a base de cefalônio anidro, animais que receberão selante de tetos a base de subnitrato de bismuto e animais que não receberão nenhum tratamento (controle). Amostras de colostro e de leite serão coletadas para o exame bacteriológico, contagem automática de células somáticas, contagem diferencial de leucócitos, California Mastitis Test, e dos constituintes do leite - proteínas, lactose, gordura, sólidos totais. Ademais, serão coletadas amostras de sangue para a avaliação do metabolismo oxidativo de neutrófilos, quantificação de imunoglobulinas, mensuração das concentrações plasmática de glicose e sérica de uréia, creatinina, insulina, alanina amino transferase, aspartato amino transferase, gama glutamil transferase, de cálcio, fósforo, colesterol, triglicerídeos, lipoproteína de baixa densidade, lipoproteína de alta densidade, ²-hidroxibutirato, ácidos graxos não esterificados e albumina. Serão coletadas também amostras de urina para avaliação da sedimentoscopia, avaliadas quanto ao volume, cor, odor, aspecto e densidade, e quanto ao pH, e presença de proteína, glicose, corpos cetônicos, presença de sangue, leucócitos, pigmentos biliares e nitrito.

O vírus sincicial respiratório bovino (BRSV) pode causar doença respiratória severa em bezerros além de estar envolvido no Complexo Doença Respiratória dos Bovinos. A vacinação com BRSV vivo modificado é uma das estratégias utilizadas para a prevenção da doença. No entanto, devido a imaturidade do sistema imunológico dos bezerros, a resposta destes animais a esse tipo de vacina nos primeiros meses de vida ainda não está bem esclarecida. O objetivo deste trabalho é contribuir para o esclarecimento da importância etária para a reposta imunológica do sistema respiratório de bezerros. Serão utilizados 12 bezerros, incluídos nesse estudo logo após o nascimento. Estes serão alocados em três grupos de quatro animais cada, sendo o grupo 1 o controle (G1), cujos animais não serão imunizados e os grupos 2 (G2) e 3 (G3) serão compostos por animais que receberão a vacina. O experimento será realizado num total de cinco momentos (M1-M5), nos quais serão realizadas as colheitas de sangue e de lavado broncoalveolar (LBA). Amostras do G1 serão obtidas nos cinco momentos. Os bezerros do G2 receberão intranasalmente 1 mL da vacina contendo BRSV vivo modificado, nos M1 e M2, quando estiverem com duas e quatro semanas de idade respectivamente, enquanto que o mesmo acontecerá com os bezerros do G3, porém nos M3 e M4, quando estiverem com seis e oito semanas de vida. As amostras de soro sanguíneo e de LBA servirão para a determinação da presença de imunoglobulinas específicas (IgG, IgG1 e IgM) bem como IgA total através da utilização de kits comerciais de ELISA. Será realizado o teste de virusneutralização em todos os momentos de coleta. De todas as variáveis verificar-se-ão se os dados apresentam distribuição paramétrica e os que apresentarem distribuição paramétrica serão inicialmente avaliados por meio de teste F (análise de variância). Quando significativo, as médias serão confrontadas pelo teste de Tukey. Quando os dados apresentarem distribuição não-paramétrica, as variáveis serão

O objetivo deste projeto é avaliar a influência da vacinação materna para o vírus da diarréia viral bovina (VDVB) na resposta imune mediada por células no colostro e sangue de bezerros neonatos por meio da realização das seguintes provas imunológicas: quantificação de anticorpos específicos para o VDVB e citocinas por meio de teste imunoenzimático; detecção das populações de linfócitos CD4, CD8 e células gama delta TCR utilizando a técnica de citometria de fluxo; determinação da contagem total de leucócitos do sangue e colostro por contagem automática e microscópica direta; e exame diferencial de leucócitos sanguíneos pela verificação da morfologia leucocitária em esfregaços sanguíneos. Serão constituídos dois grupos experimentais, compostos por cinco animais: Grupo1 (G1) bezerros receberão colostro de mães não vacinadas para o VDVB; Grupo2 (G2) bezerros receberão colostro de mães imunizadas para o VDVB. A distribuição dos dados será avaliada pelo Teste de Kolgomorov-Smirnov. Caso os dados tenham distribuição paramétrica serão submetidos à análise de variância e suas médias confrontadas pelo teste de Duncan. As variáveis com distribuição não-paramétrica serão comparadas pelo teste de Mann-Whitney.

Diversos fatores predisponentes são descritos para as afecções mamárias ou distúrbios secundários que comprometem a qualidade do leite de fêmeas de diversas espécies. As características fenotípicas do úbere são consideradas na avaliação econômica de uma fêmea caprina por serem associadas ao potencial de produção destas fêmeas. O presente estudo visa correlacionar a conformação de úbere e a saúde deste avaliando a contagem de células somáticas em caprinos. Serão submetidas 30 cabras da raça Saanen ao exame clínico e à medição de parâmetros da conformação de úbere no período que antecede a ordenha. Posteriormente, será colhido leite de cada animal para avaliação da celularidade por Califórnia Mastitis Test (CMT) e contagem de células somáticas. Esses dados serão correlacionados com a conformação do úbere.

A maturação do sistema imunológico é uma assunto amplamente pesquisado. Em bovinos, este tópico vem sendo estudado e é alvo de discordâncias em relação ao momento em que este sistema imune responde com máxima eficiência, já que a sua imaturidade esta relacionada com a susceptibilidade destes animais à doenças, como broncopneumonias. Afecções do pulmão são umas das principais causas de prejuízos econômicos na bovinocultura, sendo mais comum até o quinto mês de idade em bezerros, havendo maiores taxas de mortalidade após o segundo mês de vida dos mesmos. Desta forma, o objetivo do presente estudo é avaliar a maturação imunológica inata do sistema respiratório de bezerros entre 90 a 120 dias de vida. Para tal serão acompanhados por três meses, 10 bezerros da raça holandesa, sadios, sendo avaliados em seis momentos experimentais. As amostras de sangue e de lavado broncoalveolar (obtido por endoscopia) serão submetidas a provas de fagocitose, metabolismo oxidativo, quantificação de imunoglobulinas, expressão da proteína CD14 e quantificação das citocinas produzidas (INF gama, IL4, IL10, IL12). A análise estatística dos dados obtidos na avaliação de todos os componentes do soro sanguíneo e dos lavados respiratórios será realizada através de comparação entre as médias, confrontadas pelo teste de Tukey ou Mann-Whitney e Kruskal-Wallis.

A eletrocardiografia é um procedimento de baixo custo e não invasivo muito utilizado na medicina veterinária com a finalidade de diagnosticar principalmente arritmias cardíacas e alterações eletrolíticas na condução do estímulo cardíaco. Para executar tal diagnóstico, é necessário conhecer os valores dos achados eletrocardiográficos que indicam normalidade para a espécie estudada. O potencial do uso do ECG em bovinos é bem reconhecido, entretanto existem poucas informações referentes à evolução da eletrocardiografia em bezerros e poucos estudos referentes ao padrão eletrocardiográfico. Dessa forma, existe uma grande demanda de informações para a evolução do diagnóstico de cardiopatias e distúrbios fisiológicos cardíacos em bezerros, e para futuros estudos eletrocardiográficos nos mesmos. O presente estudo tem como objetivo estabelecer o perfil eletrocardiográfico de bezerros holandeses durante os três primeiros meses de vida. Serão avaliados 10 bezerros durante os primeiros três meses de vida, da raça Holandesa Preta e Branca, provenientes de propriedades leiteiras localizadas no Estado de São Paulo. Para o ECG, será utilizado o aparelho TEB®, modelo C10. Serão avaliados estatisticamente a duração e a amplitude das ondas P, T, e do complexo QRS, e também a duração dos intervalos PQ, QT e ST pelos valores da média, mediana e desvio padrão por meio do programa Minitab 14 (Windows, Minitab Inc., State College, Pennsylvania 16801, USA)

Nos primeiros meses de vida os bezerros passam por muitas alterações necessárias a adaptação à vida extrauterina, que tendem a se estabilizar com o avanço da idade. Para diagnosticar alguma doença neste período é necessário padronizar quais as características comuns aos animais sadios, assim, qualquer mudança no quadro esperado pode ser identificada e analisada. Nas vias respiratórias um dos métodos de diagnosticar doenças é a análise citológica. O objetivo da pesquisa foi caracterizar o perfil celular do lavado broncoalveolar (LBA) do pulmão de dez bezerros durante os três primeiros meses de vida, por meio da broncoscopiacomcoletas de amostras em oito momentos. A análise dasamostras de lavados das vias respiratórias foi realizada por meio da citologia. O perfil celular do LBA de bezerros hígidos durante os primeiros 90 dias de vida apresentou maior proporção de macrófagos, com média e desvio padrão de 63,17 ± 5,71%, porém entre os momentos de coleta não se observou diferença (P>0,05), sendo esses valores influenciados por fatores ambientais e manejo.

A artrite encefalite caprina (AEC) é uma enfermidade ocasionada por um lentivírus que apresenta tropismo pelas células da série monócitos/macrófagos. A importância da doença se reveste de prejuízos à produção pois dissemina-se com facilidade por nossos rebanhos onde pode causar diversas manifestações clínicas, geralmente de evolução crônica. Dentre as alterações causadas pelo vírus da AEC, são bem conhecidos seus efeitos sobre a glândula mamária como a mamite endurativa. Para identificar eventuais alterações sistêmicas e/ou mamárias que possam identificar maior susceptibilidade à mastite nos animais infectados pelo vírus da AEC, ou mesmo o efeito direto do vírus, quer no aspecto inflamatório, quer no aspecto infeccioso, serão triados 100 caprinos, onde serão selecionados 10 animais negativos e 10 positivos no sorodiagnóstico da AEC. Destes animais será realizada no leite a prova de fundo escuro, o Califórnia Mastitis Test (CMT), o exame bacteriológico, a contagem de células somáticas, e as seguintes provas imunológicas: fagocitose, metabolismo oxidativo, morte celular, fenotipagem dos leucócitos, quantificação das citocinas IL-4 e IFN-³, e quantificação das imunoglobulinas IgG, IgM e IgA. Estas últimas também serão realizadas no sangue.

A artrite encefalite caprina (AEC) é uma enfermidade ocasionada por um lentivírus que apresenta tropismo pelas células da série monócito/macrófago. A importância da doença está associado aos prejuízos à produção por disseminar-se com facilidade por rebanhos e causar diversas manifestações clínicas, geralmente de evolução crônica. Dentre as alterações causadas pelo vírus da AEC, são bem conhecidos seus efeitos sobre a glândula mamária como a mamite endurativa e a queda na qualidade do leite. Para identificar eventuais alterações sistêmicas e/ou mamárias que possam ser associadas a maior susceptibilidade à mastite nos animais infectados pelo vírus da AEC, ou mesmo o efeito direto do vírus, quer no aspecto inflamatório, quer no aspecto infeccioso, serão triadas 100 cabras, e destas selecionadas 10 fêmeas negativas e 10 positivos para pesquisa de anticorpos séricos da AEC. O leite colhido destes animais será submetido a prova de fundo escuro, ao Califórnia Mastitis Test (CMT), ao exame bacteriológico, a contagem de células somáticas, e as seguintes provas imunológicas: fagocitose, metabolismo oxidativo, morte celular, fenotipagem dos leucócitos, quantificação das citocinas IL-4 e IFN-³, e quantificação das imunoglobulinas IgG, IgM e IgA. Estas últimas também serão realizadas no sangue.

O sistema imune passa por uma evolução gradual após o nascimento e, em bezerros, soma-se ao estresse natural do início da vida extra-uterina, a necessidade de transferência de imunidade passiva e a aquisição da imunidade própria nos primeiros meses de vida. O objetivo do presente estudo é avaliar a maturação imunológica inata do sistema respiratório de bezerros do período neonatal ao período de imunidade própria. Para tal serão acompanhados por três meses, 10 bezerros da raça holandesa, incluídos nesse estudo imediatamente após o nascimento. Serão feitas avaliações que garantam que os animais mamaram adequadamente o colostro (proteinograma, determinação das imunoglobulinas e da atividade sérica da GGT) após as quais os mesmos serão seguidos em oito momentos experimentais, divididos entre a primeira semana de vida e os noventa dias de idade. Os animais serão examinados diariamente, e, conforme o momento experimental, submetidos a colheita de amostra para realização do hemograma, hemogasometria, endoscopia para inspeção indireta das vias respiratórias e para colheita de amostras de lavado que serão encaminhadas à avaliaçào citológica, recuperação de macrófagos alveolares, provas de fagocitose, burst oxidativo quantificação de imunoglobulinas e expressão da proteína CD14. A análise estatística dos dados obtidos na avaliação de todos os componentes do soro sanguíneo e dos lavados respiratórios será realizada calculando-se para cada técnica e para cada momento experimental as medianas e percentis, como medida de tendência central, para os diferentes constituintes imunológicos dos lavados do trato respiratório e séricos de bezerros neonatos. De todas as variáveis verificar-se-ão se os dados apresentam distribuição paramétrica e os que apresentarem distribuição paramétrica serão inicialmente avaliados por meio de teste F (análise de variância). Quando significativo, as médias serão confrontadas pelo teste de Tukey. Quando os dados apresentarem distribuição não-paramétrica,

A apoptose, como força oposta à mitose e à proliferação celular é essencial para o controle da homeostase tecidual de qualquer organismo multicelular. Em processos inflamatórios como a mastite bovina, o desequilíbrio dessa homeostase pode levar a uma inflamação crônica. Assim, a apoptose é um mecanismo crucial na resolução da inflamação, sobretudo no que diz respeito a um tipo celular específico, os leucócitos polimorfonucleares (PMN). Essas células fagocitam microorganismos invasores e para destruí-los, produzem substâncias que podem ser lesivas ao tecido mamário. Assim, a morte dessas células por apoptose minimiza danos teciduais e, ao contrário do que ocorre na necrose, não aumenta o processo inflamatório. Além disso, durante a mastite, os PMN migram em grande número para o lúmen da glândula mamária, provocando um aumento da CCS. Assim, o estudo da apoptose de PMN em mamas com alta e baixa CCS ajuda a esclarecer se a apoptose de neutrófilos fica alterada nessas condições e se essa alteração tem relação com os danos teciduais e com a mudança da qualidade do leite observados durante a mastite.

A morte celular programada ou apoptose é um processo caracterizado pela condensação e marginalização da cromatina e quebra do DNA por ação de endonucleases. É considerada uma destruição celular de forma ordenada e caracterizada por não acarretar reação inflamatória, o que diferencia da necrose. Com a finalidade de verificar a apoptose dos leucócitos da glândula mamária de vacas em condições normais, o objetivo deste estudo é avaliar o processo de apoptose dos leucócitos sanguíneos e lácteos de vacas com glândula mamária sadia. Para isso, serão selecionadas 10 vacas da raça holandesa, em lactação, sem antecedentes de mamites, mantidas em sistemas de produção localizadas no Estado de São Paulo. Na primeira fase do experimento serão colhidas amostras de leite para o exame bacteriológico e serão utilizadas as vacas que apresentarem em todos os quartos mamários amostras de leite negativas no exame bacteriológico. Posteriormente, estes animais serão avaliados pelo exame físico, pela prova do fundo escuro e pelo CMT. Na segunda fase do experimento as amostras de sangue e de leite serão colhidas para as avaliações anteriormente descritas e para avaliação funcional das células leucocitárias sanguíneas e lácteas. Os resultados obtidos serão avaliados pelo programa Graphpad Instat ? 1990 ? 1993. Todas as variáveis serão submetidas ao teste de kolgomorov e Smirnov para verificar se os dados serão inicialmente avaliados por meio do teste F (análise de variância), e quando significativo, as médias serão confrontadas pelo teste de Tukey (Sampaio, 1998). Se a distribuição for não paramétrica, as variáveis serão analisadas pelos testes não paramétricos de Mann-Whitney e Kruskal-Wallis.

A Leucose Enzoótica Bovina (LEB) é causada por um deltaretrovírus oncogênico, e encontra-se disseminada mundialmente principalmente em rebanhos leiteiros mais especializados. Por muito tempo a LEB foi considerada como uma enfermidade que apresentava inexpressivo impacto econômico na saúde bovina. Porém, atualmente devido às evidências de imunossupressão e recentes descrições de alterações na atividade oxidante de leucócitos em retroviroses, surgiram motivações para a investigação do equilíbrio entre as atividades oxidantes e antioxidantes e suas intersecções com o sistema imune. Desta forma, o presente estudo busca elucidar o envolvimento do metabolismo oxidativo no desencadeamento das alterações da resposta imune, enfocando o processo apoptótico de bovinos naturalmente infectados pelo vírus da LEB nos diferentes estágios da doença. Para tal, serão empregadas 50 fêmeas adultas da raça holandesa divididas em grupos segundo o diagnóstico da LEB, e subdivididos conforme o resultado do leucograma, em animais com diagnóstico negativo, com diagnóstico positivo alinfocitóticos e animais com diagnóstico positivo apresentando linfocitose persistente, onde buscar-se-á um mínimo de cinco animais por grupo. Destes animais realizar-se-á a análise hematológica, o sorodiagnóstico, avaliação da morte celular, e a determinação do índice de peroxidação lipídica e da glutationa reduzida. Assim, os resultados desse estudo poderão apontar para codições de maior susceptibilidade a outras enfermidades ou mesmo para a necessidade de posterior avaliação desses pacientes.

A Leucose Enzoótica dos Bovinos (LEB) é uma enfermidade neoplásica, infecto-contagiosa, pluri-sintomática, de evolução crônica, que compromete os órgãos linfopoiéticos e está associada ao desenvolvimento de linfocitose persistente e linfossarcoma. Acarreta diminuição na produção, quer por seus efeitos danosos diretos, quer pelos indiretos. Apesar da bem pesquisada linfocitose persistente decorrente da infecção, seu efeito na função e na quantidade das diferentes subpopulações celulares, assim como seu papel no estabelecimento de outras doenças oportunistas, ainda não está claro. Baseando-se na hipótese de que o vírus da LEB altera qualitativa e quantitativamente as subpopulações celulares circulantes dos bovinos, influenciando na qualidade da resposta imunológica destes animais, o presente estudo avaliará as alterações qualitativas da resposta inata avaliação funcional de células da série monócito-macrófago de vacas da raça Holandês Preto e Branco naturalmente infectadas pelo vírus. Serão coletadas amostras sangüíneas de 100 fêmeas adultas, oriundas de rebanhos destinados à produção de leite, localizados no Estado de São Paulo. Os animais serão divididos em grupos, segundo o resultado da sorologia e subdivididos, conforme o resultado do leucograma, em animais com sorodiagnóstico negativo, com sorodiagnóstico positivo alinfocitóticos e animais com sorodiagnóstico positivo apresentando linfocitose persistente (confirmada por leucogramas seriados). Proceder-se-á a feitura do leucograma, a detecção dos anticorpos séricos específicos anti-VLB, o cálculo dos índices de fagocitose, de espraiamento, de liberação de peróxido de hidrogênio e de produção de óxido nítrico. Para a avaliação das diferenças entre as médias dos resultados obtidos, após verificação da normalidade da distribuição dos resultados pelo teste de Anderson-Darling, e da igualdade das variâncias, pelo teste F (para dados que apresentarem distribuição normal) ou pelo teste de Lavene (para dados que não a.

A mastite é uma enfermidade inflamatória da glândula mamária, geralmente de origem infecciosa, que altera o seu perfil secretório qualitativa e quantitativamente. Vários são os protocolos criados para o seu tratamento e essa diversidade se explica pela freqüência com que essas mamas manifestam refratariedade à terapia, mesmo nos casos de comprovada sensibilidade do agente etiológico presente ao antimicrobiano empregado. O presente estudo tem o objetivo avaliar a influência de medicamentos indicados para o tratamento de mastite no período seco, disponíveis no mercado, sobre a função fagocítica. Serão utilizadas vinte amostras de leite negativas ao exame microbiológico do leite, colhidas de dez cabras que não tenham sofrido tratamento para mastite nos últimos trinta dias. O leite será coletado em PBS refrigerado e centrifugado, o sobrenadante será desprezado e o botão formado será desprendido e ressuspendido em RPMI, para melhorar as condições de sua preservação. As células recuperadas serão desafiadas em presença de soluções contendo medicamentos disponíveis no mercado e indicadas para o tratamento no período seco, em sistema de duplo cego randomizado. Serão calculadas as concentrações de células viáveis por exclusão do Azul de Tripan. Após, serão realizadas as provas de fagocitose.

A Diarréia Viral Bovina abrange uma série de manifestações clínicas causadas pelo vírus da diarréia viral bovina ( bovine viral diarrhea virus, BVDV ), sendo responsável por perdas econômicas em rebanhos de corte e leite em todo o mundo. Há dois biótipos de BVDV baseados na presença de citopatologia visível em cultivos celulares infectados: citopático e não citopático. No Brasil, inquéritos epidemiológicos revelaram que a infecção está amplamente difundida e que as amostras brasileiras de BVDV apresentam uma grande variabilidade entre elas e são diferentes das estirpes padrão deste vírus. Apesar de alguns relatos de proteção heterotípica conferida por vacinas contendo BVDV-1, contra o BVDV-2 a eficácia da proteção deve ser determinada caso a caso. A detecção dos anticorpos neutralizantes contra BVDV tem aplicações que incluem a avaliação nos mecanismos de defesa de bovinos bem como a mensuração da resposta humoral de animais vacinados. Deve-se verificar se os diagnósticos disponíveis detectam BVDV-1 e BVDV-2 e se há diferenças entre estas estirpes comumente utilizadas em diagnóstico e entre isolados regionais. Além disso, a utilização de estirpes de BVDV-1 nos testes de vírus-neutralização (VN) certamente resulta na falha de detecção de anticorpos em amostras com títulos baixos a moderados contra o BVDV-2, o que sugere a inclusão de isolados locais dos dois genótipos nos testes de VN como forma de minimizar este impacto negativo. Este trabalho visa comparar a reatividade cruzada dos anticorpos neutralizantes frente a quatro estirpes citopáticas do vírus da Diarréia Viral Bovina, BVDV-1 NADL, BVDV-1 isolado IBSP-11, BVDV-2 VS-253 e BVDV-2 IBSP-1020, em amostras provenientes de bovinos naturalmente infectados com BVDV e soropositivos para o biótipo NADL. O título de anticorpos será expresso como a maior diluição do soro que inibe completamente a infectividade em ambas as cavidades de cada diluição, sendo a menor diluição detectada pela prova 1:10. Para validação da pr

A artrite encefalite caprina a vírus (CAE) e a linfadenite caseosa são doenças infecciosas, crônicas e que acometem caprinos de todas as idades, sexos e raças. Responsáveis por prejuízos importantes resultantes de queda de produção, morte e descartes dos animais acometidos do rebanho, possuem ocorrência mundial, sendo a primeira causada por um retrovírus do gênero Lentivirus, caracterizada por artrite, e a segunda causada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis, caracterizada pela formação de abscessos em linfonodos superficiais e órgãos internos com conteúdo purulento, sendo considerada zoonose. As duas enfermidades possuem um importante fator em comum: ambos agentes etiológicos possuem tropismo por células da linhagem monócitos-macrófagos. A CAE, em especial, causa imunossupressão nos animais acometidos e seu papel no estabelecimento de outras doenças oportunistas ainda não está claro. Dessa forma, o presente estudo pretende avaliar a função de células da série monócito-macrófago sangüíneos de cabras hígidas e naturalmente infectadas com o vírus da CAE frente à bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis, baseando-se na hipótese de que a CAE possa alterar a susceptibilidade a outras infecções, entre elas a linfadenite caseosa, por alterar as funções qualitativas desse tipo celular como já demonstrado em viroses semelhantes que acometem outras espécies. Para tanto, serão triados e acompanhados 12 caprinos do rebanho experimental do Hospital Veterinário da Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade de São Paulo, dos quais serão coletadas amostras sangüíneas que os categorizarão segundo o resultado da sorologia para CAE, além de serem realizados o leucograma e o isolamento de monócitos circulantes. Destes leucócitos isolados, serão mensurados os índices de fagocitose, liberação de peróxido de hidrogênio e produção de óxido nítrico. Para a avaliação das diferenças entre as médias dos resultados obtidos, após verificação da normalidade da distribuição d

O período seco é considerado uma fase da lactação muito vulnerável à mastite e os mecanismos de fagocitose são especialmente importantes nessa etapa. Para avaliar a influência de medicamentos indicados para o tratamento de mastite no período seco, disponíveis no mercado, sobre a função fagocítica de leucócitos obtidos do leite de vacas, foram utilizadas amostras de leite pareadas, negativas ao exame bacteriológico. As células foram submetidas à prova de fagocitose in vitro , após serem expostas à solução contendo os seguintes medicamentos: Cefalônio anidro (M1), Gentamicina (M2), Benzilpenicilina procaína em associação com Naficilina e Dihidroestreptomicina (M3) e Cloxacilina benzatina (M4). A média dos índices de fagocitose das amostras controle e das células submetidas aos tratamentos M1 e M3 foram respectivamente 58,88% ( 12,04), (64,87%  15,36) e (65,14%  17,96) e não apresentaram diferenças entre si, bem como em relação ao controle. A média dos índices de fagocitose das células submetidas ao tratamento M4 (46,90%  22,08) foi menor que o controle, assim como foi menor que aquela obtida das células submetidas aos tratamentos M1 e M3. Por sua vez, a média dos índices de fagocitose das células submetidas ao tratamento M2 (0,68%  1,63) foi menor que aquela encontrada no controle, e nos demais tratamentos. Tais resultados indicam a possibilidade do emprego de medicamentos comercializados para o tratamento de mastite no período seco não ser completamente inócuo ao hospedeiro.

Com o objetivo de avaliar as técnicas de conservação da amostra de leite de ovinos para exame microbiológico e identificar os microrganismos mais prevalentes no leite de ovelhas da raça Santa Inês, foram executados dois experimentos. No primeiro experimento 122 amostras de leite foram submetidas a três tratamentos de conservação onde, uma alíquota foi semeada a fresco, outra alíquota foi incubada a 37º por 24 horas e a ultima alíquota foi congelada por 24 horas. No segundo experimento, 480 amostras de leite foram submetidas ao exame bacteriológico. Obteve-se 21 (17,21%), 60 (49,18%) e 36 (29,51%), nas amostras semeadas a fresco , após pré-incubação e congelamento , respectivamente. O isolamento bacteriano foi maior na pré-incubação em relação ao congelamento (p = 0,02) e ao tratamento a fresco (p < 0,001). Por sua vez, obteve-se maior freqüência de isolamento no congelamento que no tratamento a fresco (p = 0,023). Nos três tratamentos o microrganismo mais isolado foi Staphylococcus coagulase negativo representando 79,17%, 74,32% e 91,89%, respectivamente nos tratamentos a fresco , pré-incubado e de congelamento . O segundo microrganismo com maior freqüência de isolamento nos tratamentos a fresco e pré-incubado foi Bacillus sp., com, respectivamente, 12,5% e 18,92%. Sendo que a freqüência de isolamento deste microrganismo no congelamento foi de 2,7%. A freqüência de isolamento de Streptococcus sp. no tratamento a fresco foi de 8,34%, no tratamento pré-incubado , de 4,05% e, no congelamento , de 5.4%. Somente no tratamento pré-incubado houve isolamento de Staphylococcus coagulase positiva (2,7%). Dentre as 480 amostras de leite analisadas, houve isolamento bacteriano em 98 amostras (20,42%) sendo que Staphylococcus coagulase negativa foi o gênero mais isolado (94%) seguido por Streptococcus sp. (5%) e Staphylococcus hyicus (1%). Concluiu-se que a pré-incubação aumenta a eficiência do isolamento e que as bactérias classificadas como Staphy