Maria Notomi Sato.

Na interface materno-fetal, os mecanismos de regulação são cruciais para o desenvolvimento e sucesso da gestação, contudo, na vigência de infecções virais, pode ocorrer um desequilíbrio da homeostase gerando graves danos ao feto. Vários fatores imunológicos podem estar envolvidos na regulação da resposta inflamatória e de mecanismos relacionados à tolerância. O entendimento destes mecanismos pode ser uma estratégia de regulação/inflamação deflagrados na infecção viral na gestação. Há inúmeras questões que ainda não estão plenamente determinadas na resposta viral durante a gestação, relacionadas à placenta. Qual o perfil de microRNAs nas placentas na vigência de uma infecção por Zika ou HIV? Haveria um desequilíbrio dos miRNAs envolvidos na regulação resposta antiviral, e/ou resposta inflamatória gerada pela infecção viral? A inflamação pré-existente materna por via ascendente em decorrência das infecções urinárias frequentes na gestação ou por outras infecções podem alterar a interface materna-fetal e favorecer risco às infecções virais? Entre os mecanismos que podem favorecer um processo inflamatório, o estresse de retículo endoplasmáticos capaz de gerar o acúmulo de proteínas mal enoveladas, que ocorrem em infecções virais, pode contribuir para a resposta inflamatória? O entendimento de regulação da resposta inflamatória, dos mecanismos envolvidos, e a busca de componentes epigenéticos reguladores como os miRNAs, podem ser estratégicos para controle de infecções na gestação.
Além da interface materno-fetal, as células do cordão umbilical, ou seja do recém-nato, possuem vários aspectos da resposta imune inata neonatal, como os macrófagos e neutrófilos, que carecem sobre informações dos mecanismos funcionais e precisam ser investigados no contexto de infecções virais. Considerando que as diferenças quantitativas e funcionais presentes nesse período da vida podem influenciar no desfecho da infecção especialmente no caso de patógenos que podem ser transmitidos verticalmente, como HIV e ZIKV. Além disto, é proposta avaliar a eficácia de uma vacina otimizada de DNA na prevenção da síndrome congênita associada ao Zika vírus (ZIKV).

Adenosina trifosfato (ATP) é uma molécula predominantemente intracelular que pode ser liberada para o meio extracelular durante ativação, estresse tecidual ou dano celular. O ATP extracelular pode ser rapidamente convertido em ADP, AMP e adenosina por ação de ectonucleotidases, como CD39 e CD73 que estão presentes na membrana de algumas células. A adenosina, por sua vez, pode induzir respostas anti-inflamatórias pela indução de AMP cíclico (cAMP). Alterações no metabolismo e sinalização purinérgica já foram observadas em casos de infecção viral com imunoativação crônica, como o HIV, e nossos dados preliminares sugerem que um cenário semelhante poderia estar ocorrendo na infecção pelo novo coronavírus que causa a COVID-19. Essa infecção pode levar a uma elevada produção de citocinas pró-inflamatórias, fenômeno conhecido como cytokine storm. Analisando a expressão de CD39 e CD73 em leucócitos de pacientes com COVID-19, de forma clinica moderada e grave, dos Ambulatórios do Hospital das Clinicas de São Paulo, observamos uma redução na frequência de neutrófilos e linfócitos T CD8+ que expressam CD73. Além disto, detectamos uma redução percentual de células CD19+CD39+CD73+ no sangue periférico de pacientes com forma severa de COVID-19, sugerindo que o metabolismo de ATP extracelular em células B pode estar alterado na doença. Dessa forma, nós acreditamos que a menor frequência de células CD19+CD39+CD73+ pode estar associada ao perfil pró-inflamatório observado em pacientes com COVID-19. Para testar nossa hipótese, linfócitos B CD19+ serão isolados de pacientes com COVID-19 e controles saudáveis e o metabolismo de ATP em adenosina será avaliado por cromatografia líquida de alta performance (HPLC). O papel imunomodulador da adenosina será verificado in vitro em culturas de células B isoladas e células mononucleares. Também será avaliado o papel imunomodulador de células B de pacientes com COVID-19 na ativação e proliferação de linfócitos T autólogos. Por fim, verificaremos ainda a expressão de outras ectonucleotidases e dos receptores de adenosina em amostras de pacientes com COVID-19 além das concentrações séricas de adenosina. Esses resultados poderão auxiliar na compreensão dos mecanismos envolvidos na patogênese da COVID-19 além de indicar possíveis estratégias para intervenções terapêuticas.

O surto em curso do COVID-19 representa uma grande ameaça à saúde pública e vem causando uma mortalidade devastadora. A rápida disseminação do vírus pelo mundo, destaca a sua transmissibilidade e significativas morbidade e mortalidade, com destaque aos indivíduos acima de acima de 60 anos, considerados de potencial risco. No entanto, os esforços para identificar medicamentos e tratamentos terapêuticos efetivos, ou de marcadores biológicos ainda limitados, dado o escasso conhecimento da resposta imune do hospedeiro ao COVID-19. Existe heterogeneidade de sintomas em pacientes infectados com o COVID-19, mas ressaltam-se os pacientes graves, que mostram maior ocorrência de comorbidades e alterações laboratoriais proeminentes. Dentre as alterações laboratoriais, destacam-se a eosinofilia, a linfopenia e os marcadores inflamatórios (proteína C reativa, citocinas pro-inflamatórias) sugerindo papel como indicadores de relevância da doença. A cytokine storm também pode estar relacionada aos pacientes com COVID 19, uma vez que o perfil pró-inflamatório dos indivíduos infectados com COVID-19 pode ser um fator preditivo relevante de risco à infecção. Salientamos, ainda, que tanto a imuno-senescência da faixa etária avançada, quanto o perfil de inflammaging (status pró-inflamatório de baixo grau, mas constante), devem ser considerados para o risco elevado dos idosos a infecções graves. 
A nossa proposta inclui (i) investigação dos polimorfismos genéticos do receptor ACE e de citocinas pró-inflamatórias, afinidade de anticorpos e vias de sinalização em amostras de pacientes infectados por COVID-19. Este projeto tem como abordagem principal a caracterização de fatores moleculares, vias de sinalização utilizadas pelo componente viral, análise de afinidade dos anticorpos comparativamente entre os grupos de infecção grave e de curados. É proposta também em colaboração com pesquisadores da Fiocruz-Pernambuco, realizar a análise de afinidade de anticorpos por termoforese em microescala, e obtenção da proteína S do COVID-19 para análise das vias de sinalização e indução de resposta pró-inflamatória. Esta questão é crucial para avaliar estratégias de potenciais fármacos naturais com ação antiviral e anti-inflamatória, que interfiram nessas vias de sinalização. Vale salientar que várias questões não são conhecidas, como a manifestação cutânea à infecção viral, assim a presença e componentes virais na pele, em parceria com a Patologia-FMUSP, irá avaliar presença de COVID-19 por microscopia eletrônica e caracterização da resposta imune cutânea (imunohistoquímica/PCR) ao vírus em amostras de autópsia de pele de indivíduos infectados. 
Além disto, pacientes com doenças inflamatórias crônicas que utilizam medicamentos imunossupressores podem ter maior risco para infecções respiratórias. Neste contexto, temos também como objetivo investigar os seguintes grupos de pacientes: (ii) pacientes com doenças inflamatórias crônicas dermatológicas, como a dermatite atópica e psoríase, que apresentam disfunção imunológica, pacientes com dermatoses crônicas com intensa imunoativação ou inflamação (colagenopatias), que fazem uso de imunosupressores. Ressaltamos ainda que a evidência do vírus na pele necessita de maiores investigações, pois pode atuar como porta de entrada e de contaminação, (iii) pacientes idosos com comprometimento pulmonar, como a doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), uma vez que podem mostrar maior risco ao COVID-19 em decorrência das complicações pulmonares prévias. Estes pacientes idosos podem exibir um status de inflammaging, e uso constante de imunossupressores; (iv) infecção crônica por HIV-1, em regime terapêutico de antirretrovirais, que podem ter ação antiviral ao COVID-19, ou que podem apresentar, em contrapartida, imunoativação (componente na patogênese da doença, com provável risco a co-infecções).

A vitamina A atua através de seu metabolito ativo, o ácido retinoico, sendo capaz de modular a resposta imune e manter a homeostase das mucosas, principalmente em sítios imunológicos como os tecidos linfoides associados à mucosa intestinal. O período neonatal é caracterizado por relativa imaturidade imunológica e maior suscetibilidade às infecções. Além disto, o neonato nasce com baixas concentrações de vitamina A e sua obtenção ocorre através da amamentação. Desta forma, propomos avaliar o efeito da suplementação materna com ácido retinoico durante o período de amamentação, na resposta imunológica e na mucosa e microbiota intestinal da prole de camundongos. Para tanto, serão avaliados na prole a presença de linfócitos T no baço e linfonodos mesentéricos com potencial migratório para o intestino, e a presença de células T reguladoras e/ou efetoras e células linfoides inatas no intestino delgado. Também será avaliado o perfil de produção de citocinas pró e/ou anti-inflamatórias e anticorpos IgA presentes no soro/fezes e a composição da microbiota intestinal da prole. Além disto, o efeito da suplementação materna será avaliado na resposta inflamatória intestinal da colite induzida por sulfato de sódio dextrano. O leite de mães suplementadas com ácido retinoico, será avaliado quanto a presença de anticorpos IgA e IgG e citocinas pró e/ou anti-inflamatórias, para maior compreensão do impacto da suplementação materna com ácido retinoico nesse compartimento. Utilizando um sistema de troca de proles, será avaliada a migração de células maternas do leite para linfonodos mesentéricos e placas de Peyer da prole e a capacidade funcional efetora e/ou reguladora dessas células. A avaliação do efeito da suplementação materna com o ácido retinoico durante a amamentação proporcionará a compreensão dos benefícios e/ou malefícios de uma dieta rica deste composto no desenvolvimento do sistema imune da prole e terá possível implicação na saúde humana. Palavras-chaves: interação materno-fetal, ácido retinoico, leite materno, mucosa intestinal, microbiota intestinal, colite e imunidade neonatal.

Estratégias para potencializar a resposta imunológica neonatal, induzidas por adjuvantes ou vacinas, em modelos murinos tem sido enfoque de investigação do grupo. A vacina de DNA quimérica LAMP/p55gag do HIV-1 que codifica a proteína associada à membrana lisossomal-1 (LAMP) direciona o tráfego da p55gag para os compartimentos MIIC, possibilitando a apresentação dos peptídeos virais via classe II do MHC, é imunogênica em camundongos neonatos e crucial para induzir resposta T e B de longa duração. A vacina DC-LAMP/gag, que codifica o DC-LAMP humano faz o direcionamento da Gag ao compartimento lisossomal/endossomal de células dendríticas (DCs). Esta estratégia de direcionar o antígeno para as DCs seria um importante parâmetro para ser avaliado no período neonatal. Além disto, o principal regulador gênico da expressão de moléculas de classe II do MHC, a proteína transativadora CIITa, pode ser uma combinação de interesse para ser associado à imunização com a vacina DC-LAMP-gag em camundongos neonatos. Desta forma, a proposta é avaliar se a vacina de DNA que codifica a proteína transativadora CIITa é capaz de potencializar a resposta à vacina quimérica DC-LAMP/gag no período neonatal de camundongos BALB/c. Para tal, será construído o plasmídeo expressando o gene CIITa, e após transfecção em DCs será avaliada a expressão de moléculas de classe II e após transfecção com DC-LAMP/gag em células HEK-293 será avaliada a expressão da proteína Gag. A cinética da expressão de moléculas de classe II do MHC, será avaliada após a transfecção com o plasmídeo CIITa em DCs ativadas por lipopolissacáride e/ou IFN-gama. A análise da imunogenicidade da co-imunização com a vacina de DNA CIITa e DC-LAMP/gag ou gag será avaliada em camundongos BALB/c neonatos (7 dias de idade) e adultos pela indução de células TCD4+ e TCD8+ polifuncionais, frequência de células secretoras de IFN-gama, resposta CTL e produção de anticorpos. Além disto, para avaliar a eficácia da vacina, será investigada a resp

A interface materno-fetal é o principal sítio de imunorregulação na gestação, mediado por células e fatores necessários para a manutenção e desenvolvimento do feto semi-alogênico.Na vigência de uma infecção crônica, como o HIV, estes mecanismos de tolerânciadevem desenvolver, um papel crucial para a proteção do feto e neonato, uma vez que uma grande parcela dos infantes (65-80%) nascidos de mães infectadas por HIV, que mesmo na ausência de tratamento, não adquire a infecção (CDC 2007).A investigaçãodo binômio mãe-RN na infecção por HIV é uma importante oportunidade para avaliar os mecanismos imunológicos, principalmente os relacionados com imunidade inata.A proposta do projeto é avaliar a resposta imune inata de mães infectadas por HIV-1 e seus recém-natos, pela expressão dos fatores antivirais e averiguar o potencial modulatório de agonistas de receptores Toll-like. Avaliar também a influência da expressão de retrovírus endógenos (HERV-K) na expressão dos fatores antivirais. Para tal, será analisadaa expressão transcricional de fatores antivirais (APOBEC3F e 3G, TRIM- 5alfa,TRIM22, alfa1 defensina, teterina, MxA, IFN-beta) e de fatores virais, Gag do HIV e Gag de HERV-K em células mononucleares (CMN) do sangue periférico da mãe, do cordão umbilical e tecido placentário. Será avaliada também a expressão proteica de fatores antivirais (APOBEC3F e 3G, TRIM- 5alfa) e virais(HIV e HERV-K).O potencial modulatório de agonistas de receptores Toll-like na expressão de fatores antivirais, será analisado em CMN estimuladas por agonistas de TLR3, TLR7 e TLR7/8 pela expressão de RNAm e proteica de fatores antivirais e viral da região Gag (HIV e HERV-K) e pela produção de quimiocinas/citocinas. Afrequência de células TCD4+ e TCD8+ naive, memória central e periférica que expressam APOBEC3G e IFN-alfa, TNF-alfa, MIP-1alfa serão avaliadas após estimulação por agonistas de TLR7/8, HERV-K e p24 da região Gag do HIV-1. A compreensão da resposta imune inata, com ênfase aos fatores anti

A vitamina A, abrange um grupo de componentes retinóides cujo retinol possui uma atividade biológica, importante para a manutenção de diversos processos fisiológicos, entre eles o desenvolvimento embrionário, função hormonal, manutenção e modulação da resposta imune, manutenção de tecidos epiteliais e mucosa. Sua deficiência, principalmente na infância, aumenta o risco de morbidade e mortalidade por doenças infecciosas, além de ocasionar cegueira, anemia e de está relacionada a complicações durante a gestação. Através da interação de suas formas ativas (all-trans, 9-cis e 13-cis) com seus receptores nucleares RAR e RXR é capaz de regular a transcrição de inúmeros genes, atuando na homeostase de sítios imunológicos, como no GALT, no qual o RA na presença de TGF- favorece um ambiente tolerogênico, pois promove a diferenciação de T naïve em linfócitos T CD4+CD25+Foxp3+ e inibe a geração de células Th17, presentes, principalmente em sítios inflamados. Além disso, O RA também é responsável pela promoção do tráfico de células T reguladoras e células efetoras para o GALT e mucosa intestinal, através do aumento da expressão de ligante de citocina CCR9 e da integrina 47, que ocorre durante a apresentação de antígeno mediada por células dendríticas CD103+, população prevalente no GALT e capaz de metabolizar o RA, gerando, desta forma, a imunidade regional. A atuação do RA também tem sido relacionada, de maneira, positiva, com a melhora na resposta antiviral, contudo, níveis elevados de RA são vinculados a piora de doenças alérgicas por polarizar o perfil Th2. Entretanto, muitos eventos mediados pela RA, não são conhecidos no período neonatal, onde há uma relativa imaturidade imunológica dependente de fatores maternos. Desta forma, a proposta é analisar o efeito da suplementação materna com o RA no período de lactação, na geração de DCs, células T reguladoras e Th17 da prole e da lactante. Para tanto, células do GALT e baço serão avaliadas quanto a car

A histamina é uma amina biogênica com ampla ação em vários tipos celulares incluindo os que exercem relevantes funções imunológicas. É capaz de polarizar as funções efetoras como induzir células dendríticas do tipo 2 e promover resposta Th2 por distintos sinais intracelulares. O bloqueio dos receptores histamínicos conjuntamente à adjuvantes pode potencializar as funções imunológicas. Adjuvantes como os ligantes sintéticos de receptores Toll-like têm sido amplamente explorados pelo seu potencial imunomodulatório. No período neonatal, há uma ativação sub-ótima do eixo IL-12/IFN-g, que resulta em uma inadequada ativação das células dendríticas e da função Th1, o que salienta a busca de estratégias para potencializar a resposta imunológica. Desta forma, a proposta é analisar o efeito da histamina nas células dendríticas e células TCD4+ do recém-nato (cordão umbilical humano) comparado com adultos. Além disto, avaliar o potencial modulatório de antagonistas dos receptores histamínicos e dos agonistas de TLRs. Para tal, o efeito da histamina e receptores (H1R-H4R) será avaliado na secreção de citocinas pró-inflamatórias e quimiocinas induzidas por agonistas de TLR4, TLR7/8 e TLR9 em células mononucleares do cordão umbilical e de adultos. A ação da histamina e receptor H4R será avaliada em células dendríticas derivadas de monócitos ativadas por agonistas de TLR4 e TLR7/8 na secreção de citocinas, expressão de moléculas, sinalização via AP1 e NF-kB e na geração de células T heterólogas secretoras de IL-4 ou IFN-g. Será avaliado também o potencial modulador da histamina e receptor H4R em células TCD4+ polarizadas em Th1/Th2 pelo perfil de secreção de citocinas, expressão de receptores histamínicos e genes relacionados com a função Th1/Th2 por PCR array. A busca de estratégias para potencializar a resposta imunológica pode contribuir para compreender a imunologia neonatal e para desenvolver novas formulações vacinais.

O Líquen plano (LP) é considerado uma doença inflamatória crônica, mucocutânea de etiologia ainda desconhecida. Estima-se que o LP acometa aproximadamente 1% da população mundial, sendo que o acometimento cutaneomucoso pode envolver pele/anexos e mucosas, separadamente ou simultaneamente. Vários parâmetros imunológicos relacionados à resposta imune inata podem influenciar o desenvolvimento da resposta adaptativa, que necessitam ser investigadas para melhor compreensão da imunopatogênese da doença. A proposta do Projeto é avaliar no LP a participação da resposta imune inata pelas células dendríticas mielóides (mDC) e plasmocitóides (pDC) e sua influência na geração de células pró-inflamatórias, reguladoras ou efetoras citotóxicas. Desta forma, é proposta avaliar o potencial de resposta aos ligantes TLR 2-9 e na ativação de inflamassoma na produção de citocinas (TNF-alfa, IL-1beta) de células mononucleares; analisar a influência da ativação dessas vias em mDC e pDC, quantificá-las no sangue e nas lesões de pele. Além disto, avaliar o impacto das mDC diferenciadas de monócitos ou pDC purificadas na geração de células alogênicas. A resposta mediada por células TCD4+ será avaliada pelo equilíbrio entre as células T CD4+ polifuncionais secretoras de citocinas (IL-17, TNF-alfa, IFN-gama, IL-21) e as células reguladoras TCD4+CD25+Foxp3+. A resposta citotóxica será avaliada pelos subtipos de células NK e linfócitos TCD8+, pela análise do perfil fenotípica e polifuncional. Além disto, células T CD8+ purificadas serão avaliadas quanto à expressão de citocinas/quimiocinas e receptores pelo método de PCR array.

Nosso grupo de pesquisa vem estudando os efeitos da imunização materna com alérgenos na regulação da resposta alérgica da prole de camundongos, indicando como um dos mecanismos de regulação o envolvimento da formação de imunocomplexos de anticorpos maternos com o alérgeno combinado ao aumento da expressão dos receptores inibidores FcgRIIb nos linfócitos B da prole (VICTOR e cols, 2010). Neste projeto, é proposta avaliar a influência de receptores inibidores FcgRIIb e aspectos funcionais mediados por células e citocinas com potencial regulador, como potenciais mecanismos de regulação da resposta alérgica. Para averiguarmos averiguarmos o envolvimento dos receptores FcgRIIb, camundongos geneticamente deficientes (KO) deste receptor serão submetidos aos protocolos de imunização materna com OVA e suas proles serão avaliadas quanto ao desenvolvimento de respostas alérgicas, ou seja quanto a produção de anticorpos IgE anafiláticos, citocinas intracelular em linfócitos e indução antígeno-específica da secreção de citocinas. Previamente, também foi observado que a produção de citocinas das proles de mães imunizadas com OVA, mostraram diminuição de IL-4 e IFN-g. Além disto, averiguando o papel dos anticorpos maternos, quando as IgG são injetadas durante a gestação em mães não imunes ocorreu uma aumento da IL-10 nas proles. Já que estas citocinas são potenciais candidatas será avaliado na modulação da expressão dos receptores FcgRIIb nos linfócitos B ativados por anti-IgM da prole, o efeito in vitro das citocinas recombinantes IL-4, IL-10, IFN-g e IL-17A. Para avaliar a função da IL-10 nas proles será avaliada a influência in vivo com o uso de camundongos KO na imunização materna com OVA. Além disto, entre os mecanismos de regulação das proles de mães imunizadas será avaliada quanto ao fenótipo e função a participação das células T CD4+CD25+Foxp3+, como já sugerido anteriormente pelo nosso grupo (VICTOR e cols, 2003). A influência das células dendríticas das proles na geração

O HIV-1 é o agente etiológico da síndrome da imunodeficiência adquirida (aids), cuja pandemia se constitui em um importante problema de saúde pública. Uma parcela de indivíduos é exposta ao HIV-1, mas não desenvolve a infecção, representados por pares sorodiscordantes (homo ou heterossexuais), trabalhadores (as) do sexo, trabalhadores de saúde expostos e mãe-criança infectada. O estudo de correlato imunológico de proteção destes indivíduos poderá contribuir na compreensão da patogênese da doença como também para estabelecer formulações vacinais. O sistema imunológico inato é crucial para a proteção natural a vários patógenos extra e intracelulares. As células que compõem o sistema inato expressam receptores que reconhecem os padrões moleculares de patógenos que são vitais para a produção de citocinas e na qualidade da resposta adaptativa. Desta forma, devido a resistência natural dos indivíduos expostos e não infectados pelo HIV, é importante estudar o perfil de resposta imune inata e aregulkação da resposta imune pelas células T reguladoras. A estratégia será utilizar ligantes para receptores Toll-like (TLR) para verificar a capacidade de produção de citocinas/quimiocinas e do potencial em gerar a resposta citotóxica, seja mediado pelas células NK e T CD8+. A proposta deste Projeto é avaliar nos indivíduos expostos ao HIV e não infectados e seu respectivo companheiro (a) o potencial de resposta das células mononucleares aos ligantes de TLR-2 (Pam3CSK4), TLR-3 (poly I:C), TLR-4 (lipopolissacáride), TLR-5 (flagelina bacteriana), TLR-7 (Imiquimod), TLR-7/8 (composto R848) e TLR-9 (CpG tipo A) na produção das citocinas e beta-quimiocinas. A influência da ativação via TLR-7/8 e TLR9 será avaliada na geração de células T CD8+ secretoras de CD107a, MIP-1alfa, TNF-alfa e IFN-alfa aos peptídeos de GAG do HIV e na ativação e desgranulação das células NK. O grau de ativação das células dendríticas plasmocitoides via TLR-7/8 e TLR9 será avaliada pela expressão de moléculas de

A transmissão vertical do vírus da imunodeficiência adquirida (HIV) pode ocorrer durante a gestação, parto ou amamentação e causar a infecção de 20 a 45% dos infantes na ausência de tratamento anti-retroviral. A terapia é altamente eficiente para reduzir a carga viral das gestantes e conseqüentemente a transmissão vertical do vírus, como tem sido observado em nosso país desde 2000 (Ministério da Saúde, DST-AIDS). Entretanto, o fato de que mais do que 65% dos infantes de mães infectadas que são expostos ao vírus e não se infectam na ausência de tratamento salienta a necessidade de estudo dos fatores relacionados ao hospedeiro, neste binômio mãe-filho. A ocorrência da exposição precoce ao vírus, onde o sistema imune fetal pode encontrar-se em desenvolvimento e a capacidade de resposta imune materna ao HIV são aspectos que podem ser determinantes no estabelecimento de imunidade protetora tanto no feto quanto no recém-nato. Vários aspectos imunológicos relacionados à interação mãe-infante na transmissão vertical do HIV e no impacto da exposição precoce ao vírus, mesmo sob tratamento anti-retroviral, necessitam de maiores investigações. Uma das primeiras linhas de defesa do organismo contra infecções virais é mediada por componentes do sistema imune inato, o que enfatiza a importância de estudar os aspectos iniciais da resposta imune, como a ativação das células dendríticas através de receptores Toll-like (TLR) relacionados à resposta anti-viral e sua influência no desenvolvimento da resposta adaptativa, em face ao déficit imunológico encontrado no período neonatal. A proposta deste projeto é avaliar o potencial de resposta aos agonistas de TLR 7 e/ou TLR8 e o seu efeito na resposta celular de mães infectadas pelo HIV e seu neonato (cordão umbilical) não infectado. Para tal, serão utilizados agonistas sintéticos como o imiquimode para ativar TLR 7, o composto CL097 ligante das vias TLR7/8 para analisar a produção de interferon tipo I (IFN-a) e TNF-a , a freqüência de cél

A urticária crônica idiopática (UCI) é de complexa caracterização, sendo que em 30-50% dos pacientes têm caráter autoimune, sub-dividindo-se em pacientes que apresentam autoanticorpos contra o FceRI e em menor frequência pacientes com autoanticorpos contra a molécula IgE. A caracterização dos pacientes com urticária crônica que desenvolvem estes autoanticorpos pode beneficiar não só o tratamento como trazer informações relevantes sobre os mecanismos imunopatogênicos da doença. Considere-se também a escassez de informações sobre o perfil de produção de citocinas e de agentes imunomodulatórios nesta patologia. Este projeto tem como objetivo inicial avaliar nos pacientes com urticária crônica idiopática a frequência dos que desenvolvem autoanticorpos IgG anti-IgE e anti-FceRI. Para tal, será analisada a presença de autoacs IgG e subclasses reativos a molécula IgE por ELISA e autoacs reativos ao FceRI por ensaio de liberação de histamina de basófilos. A partir da evidência dos sub-grupos de urticária positiva e negativa aos autoanticorpos IgG anti-IgE e anti-FceRI, além do grupo controle, serão avaliados os seguintes parâmetros: a expressão do FceRI e marcadores de ativação em basófilos por citometria de fluxo; mediadores lipídicos e citocinas no soro, produção de citocinas em sobrenadante de cultura de células mononucleares e por reação de PCR em tempo real, e a capacidade modulatória de oligonucleotídeos CpG sintéticos na ativação de basófilos, na liberação de histamina e na secreção de citocinas.

O Projeto tem como objetivo avaliar em modelos experimentais se no período gestacional e pós-natal é possível ocorrer a transferência do alérgeno ao feto, e sensibilizar a prole. Desta forma, diferentes protolocos de exposição materna ao alérgeno durante a gestação e no período de amamentação serão analisados para verificar a passagem de antígeno em fluidos amnioticos ou pelo leite materno. Também é previsto estudar se a imunização materna pré-concepcional pode modular o desenvolvimento da resposta alérgica da prole.