Paulo Nelson Filho.

A limpeza mecânica, por meio da escovação e uso do fio dental, é um dos métodos mais utilizados para promoção de saúde bucal. Entretanto, em muitas situações clínicas, é necessária a utilização da profilaxia profissional, a qual pode ocasionar microdanos à estrutura do esmalte, dependendo do material e da técnica utilizada. Assim, o objetivo do presente estudo será avaliar, ex vivo, o efeito de diferentes sistemas de profilaxia sobre a superfície do esmalte hígido e com lesão de mancha branca, em dentes permanentes de humanos. Serão utilizados 40 pré-molares hígidos, obtidos do Biobanco da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto - USP. Em seguida, os espécimes serão aleatoriamente divididos em 4 grupos (n=10/grupo), submetidos aos diferentes sistemas de profilaxia: Grupo I: ClinproTM Prophy Paste (3MTM ESPETM ), com partículas abrasivas de perlita; Grupo II: pasta profilática Odahcam (DentsplyTM), com partículas abrasivas de pedra-pomes (controle); Grupo III: jato de aminoácido hidrossolúvel Glicina (Clinpro" Prophy Powder - 3MTM ESPETM); e Grupo IV: jato de Bicarbonato de Sódio (DentsplyTM)(controle). Os espécimes serão analisados em microscopia confocal a laser, quanto à rugosidade superficial e perfil de desgaste, em micrometros, e por meio de dispositivo de fluorescência a laser, para avaliação da desmineralização do esmalte, nos períodos pré e pós-profilaxia. Os dados obtidos serão submetidos à análise estatística, empregando testes apropriados, de acordo com a distribuição dos dados. O nível de significância adotado para todas as análises será de 5%.

O sistema imunológico atua diretamente na imunopatogenia da lesão periapical. Tendo em vista que a ²-Defensina 3 é um peptídeo antimicrobiano endógeno, ou seja, que participa regulando o sistema imunológico, o objetivo do presente estudo será comparar o tamanho radiográfico de lesões periapicais de dentes decíduos e permanentes de humanos com a intensidade da marcação para ²-Defensina 3 (hBD3). Serão avaliados cistos radiculares de origem endodôntica provenientes de lesões de cárie, sendo 15 de dentes decíduos e 15 de dentes permanentes, obtidos do Laboratório de Patologia da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo (FORP-USP), assim como os exames radiográficos. As imagens radiográficas serão transferidas para o programa Image J 1.28 u (National Institutes of Health - Califórnia - EUA) para mensuração das áreas radiolúcidas periapicais, em mm 2 . As lesões periapicais serão submetidas ao processamento histológico e análise imunohistoquímica pelo método do complexo avidina-biotina-peroxidade, para avaliação da imunomarcação para ² -Defensina 3. As lâminas serão analisadas e fotografadas em microcópio Axio Imager. M1 (Carl Zeiss Microimagin GmbH, Gottingen, Alemanha), para posterior quantificação de ²-Defensina 3, no aumento de 400x. Em seguida, será avaliada a correlação entre a área da lesão periapical, em mm 2 , e a intensidade de imunomarcação para ²-Defensina 3, em dentes decíduos e permanentes, por meio de testes estatísticos apropriados, com nível de significância de 5%.

A formação do biofilme é um processo contínuo iniciado por meio da adesão de bactérias planctônicas a uma superfície dentária, e o seu desenvolvimento conduzirá a estruturação de um biofilme maduro, ou seja, estruturalmente complexo. Por esta razão, muitos métodos têm sido estudados para detectar precocemente o acúmulo de biofilme e a sua avaliação. Estes métodos permitem determinar a distribuição da placa e o estágio de maturação, por meio do estudo de diferentes propriedades do biofilme. 
A fluorescência quantitativa, induzida por luz-digital (QLF) é um dispositivo óptico utilizado para detectar biofilmes e cárie dental por meio de luz fluorescente. Bactérias irradiam porfirinas endógenas fluorescentes que são captadas por luz azul e vermelha. 
Em ortodontia, este assunto está entre os principais tópicos de estudo. Os produtos ácidos ingeridos, a presença de acessórios que retém a placa dental, bem como o efeito da síntese de carboidratos pelas bactérias são os principais fatores que contribuem para formação de mancha branca e lesões de cáries. A detecção precoce de lesões de mancha branca ao redor de bráquetes ortodônticos é importante para o tratamento e prevenção. A câmera de fluorescência pode ser uma ferramenta de diagnóstico não invasiva, para lesões incipientes em superfícies lisas com avaliação quantitativa da desmineralização precoce. 
Pacientes submetidos a tratamento ortodôntico com colagem completa podem desenvolver lesão de mancha branca no primeiro mês de tratamento e apresentar lesão de cárie após seis meses.
A remissão destas lesões em estágios iniciais é possível com aplicação de materiais contendo flúor: enxaguatórios, pastas, gel, vernizes e selantes. 
Os pacientes com aparelho ortodôntico permanecem sob tratamento por um período médio de 3 anos, e as medidas de remissão são adotadas somente após o término do tratamento. Poucos estudos avaliaram medidas de prevenção e remissão de lesão de mancha branca em pacientes sob tratamento ortodôntico. 
Assim, o presente estudo tem como objetivo avaliar a efetividade de dois métodos de prevenção de lesões de mancha branca, em pacientes sob tratamento ortodôntico, Verniz fluoretado (Colgate Duraphat®) e Selante ionomérico (Clinpro XT Varnish - 3M) por meio de imagem de Fluorescência (IF).

A Fissura Oral (FO) é a anomalia craniofacial mais comuns nos seres humanos e é caracterizada por deformidades na região dento-facial. Trata-se de uma condição clínica heterogênea onde diversos fatores ambientais e moleculares contribuem com a sua etiologia. Apesar da FO ter sido uma das anomalias congênitas mais estudadas até o momento, o papel dos fatores ambientais, dos mecanismos moleculares e da interação de ambos durante a palatogênese ainda não é completamente conhecido. Um dos aspectos moleculares pouco explorados no contexto da FO, são os microRNAs, que são reguladores da expressão gênica (mRNA) e desempenham um papel fundamental em inúmeros processos biológicos. Fatores ambientais, como a hipóxia, são capazes de alterar os padrões de expressão dos microRNAs e dos mRNAs. Além disso, estudos sugerem que a hipóxia aumenta o risco para FO. Entretanto, o papel da condição de hipóxia na expressão gênica durante a palatogênese, bem como a interação de polimorfismos genéticos com fatores hipóxicos ainda foi pouco explorado. Desta forma, este projeto tem o objetivo de avaliar aspectos clínicos, moleculares e ambientais associados com a FO. Para tal, um modelo experimental hipóxico de zebrafish com fenótipo de FO será estudado. Técnicas de biologia molecular serão usadas na avaliação dos genes e dos microRNAs diferencialmente expressos no modelo hipóxico e no controle. Este projeto também irá avaliar amostras de duas populações humanas onde técnicas de PCR irão ser utilizadas na avaliação de genes e miRNAs diferencialmente expressos na saliva e tecido de pacientes portadores de FO e pacientes controles. Também será estudada a associação das variações genéticas nos genes HIF1A, VEGF, miR-210, miR-137 e miR-140 com o risco aumentado à FO. A associação dessas variações genéticas com os níveis de expressão na saliva será avaliada. Para a análise estatística, testes paramétricos e/ou não paramétricos serão utilizados. Esse projeto conta com a colaboração da Universidade de Pittsburgh e da Universidade Federal Fluminense.

O objetivo do presente estudo será avaliar lesões periapicais induzidas em ratas osteoporóticas submetidas ou não ao tratamento com bisfosfonato (alendronato - ALD) ou com inibidor da catepsina K (odanacatib - ODN). Serão utilizados 50 animais aleatoriamente divididos em 6 grupos: I - Sham (cirurgia fictícia); II - Sham e lesão periapical; III - ovariectomia (OVX) e lesão periapical; IV - OVX, lesão periapical e ALD; V - OVX, lesão periapical e ODN; Grupo VI - OVX, lesão periapical e água destilada. Após 4 semanas da realização da OVX ou da cirurgia fictícia, os animais dos grupos IV, V e VI começarão a receber medicação ou água destilada e os primeiros molares inferiores dos grupos II, III, IV, V e VI serão submetidos à indução de lesões periapicais. Após 21 dias, será realizada colheita microbiológica dos canais radiculares para a quantificação de micro-organismos e os animais serão submetidos à eutanásia. Tíbias de todos os grupos serão analisadas para registro da densidade mineral óssea. As hemimandíbulas do lado esquerdo serão submetidas ao processamento histotécnico e os cortes serão corados com hematoxilina e eosina e analisados em microscopia óptica convencional. Paralelamente, será realizada a análise morfométrica da extensão das lesões periapicais, histoenzimologia para a atividade da TRAP e coloração de Brown e Brenn. Também será realizada imunohistoquímica para avaliação de marcadores da osteoclastogênese e da catepsina K. As hemimandíbulas do lado direito serão submetidas à detecção da expressão gênica de citocinas, marcadores da osteoclastogênese e de metaloproteinases da matriz, por meio da reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR). Os resultados obtidos serão submetidos à análise estatística apropriada, com nível de significância de 5%.

O presente projeto de pesquisa tem como objetivo caracterizar biomarcadores envolvidos na reabsorção óssea inflamatória associada às doenças periapicais e periodontais, visando estabelecer possíveis parâmetros de diagnóstico, bem como avaliar a possível repercussão sistêmica dessas doenças. Serão realizados estudos em humanos, utilizando amostras de saliva, sangue e biopsias de tecido de pacientes saudáveis ou portadores de doença periapical ou periodontal e em animais, utilizando modelos de indução experimental de doença periapical e periodontal. A expressão de diferentes proteínas (IL-1α, TNF-α, IFN-, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, MIP-1 α, RANK, RANKL, OPG, MMP-8, MMP-9, TIMP-2, MPO) e do infiltrado inflamatório (neutrófilos, macrófagos e linfócitos), será avaliada por meio de citometria de fluxo e imunoistoquímica. Adicionalmente será realizado o processamento histotécnico para obtenção de cortes histológicos que serão corados com hemotoxilina e eosina (HE), para análise histopatológica do infiltrado inflamatório presente nas lesões periapicais e periodontais e para imunomarcação. Os eventuais resultados poderão fornecer bases imunopatológicas para a maior compreensão dos fatores celulares e moleculares envolvidos nas doenças periapicais e periodontais, suas possíveis repercussões sistêmicas, bem como gerar dados com potencial aplicabilidade no desenvolvimento de novos instrumentos para o diagnóstico ou de novos alvos terapêuticos.

Os mini-implantes vêm sendo amplamente utilizados na clínica ortodôntica como dispositivos de ancoragem. No entanto, há casos em que ocorre sua perda precoce durante o tratamento. Inúmeros aspectos têm sido analisados com o intuito de detectar as causas do insucesso, porém estas ainda não estão totalmente esclarecidas. Portanto, os objetivos do presente estudo serão avaliar, in vivo: 1) a contaminação de mini-implantes ortodônticos, com e sem estabilidade, empregando sondas de DNA para 16 espécies de bactérias periodontopatogênicas Gram-negativas, por meio da técnica de biologia molecular Checkerboard DNA-DNA Hybridization (CDDH); 2) quantificar a endotoxina bacteriana presente nos mini-implantes por meio do teste Limulus Amebocyte Lysate (LAL); e 3) quantificar as citocinas pró-inflamatórias IL-1±, IL-6, IL-17 e TNF-± e proteínas marcadoras da osteoclastogênese (RANK, RANL e OPG), por meio da reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR). Processo nº 2011/23822-0. Vigência: 2012-2014

A irrigação do sistema de canais radiculares é um passo extremamente importante na terapia endodôntica. A irrigação tradicional não consegue levar a solução irrigadora além de 1mm da ponta da agulha, sendo relativamente ineficaz na limpeza do terço apical das paredes dos canais radiculares. Recentemente, foi introduzido um método alternativo de irrigação do sistema de canais radiculares por meio de pressão apical negativa (EndoVac; Discus Dental, Culver City, CA) que, segundo a literatura específica, apresenta maior potencial de limpeza, segurança e grande capacidade de eliminação do conteúdo microbiano dos canais radiculares, destacando-se pela sua característica de promover menor extrusão de solução irrigadora para os tecidos periapicais. Assim, o objetivo do presente trabalho será avaliar, in vivo, por meio de estudo histopatológico, imunohistoquímico e histoenzimológico, o processo de reparo dos tecidos apicais e periapicais, após o uso da irrigação por pressão apical negativa (EndoVac), em comparação à irrigação convencional, em dentes de cães com rizogênese incompleta e lesão periapical. Processo nº 2011/23790-1

Processo nº 2010/16757-5.

O objetivo do presente estudo será quantificar, in vivo, a endotoxina (LPS) presente em canais radiculares de dentes decíduos e permanentes de humanos, portadores de necrose pulpar e lesão periapical crônica visível radiograficamente, pré e pós-preparo biomecânico e pós-utilização de curativo de demora à base de hidróxido de cálcio, por meio do teste ?Limulus Amebocyte Lysate? turbidimétrico. Processo FAPESP nº 2010/16608-0

Processo 2010/20482-1.

O objetivo do presente estudo clínico randomizado e placebo-controlado será avaliar, in vivo, por meio da técnica PCR em tempo real: 1) a contaminação em bráquetes e arcos de aparelhos ortodônticos fixos, por 2 espécies de microrganismos cariogênicos e 4 espécies de microrganismos periodontopatogênicos do complexo vermelho; 2) a eficácia do gluconato de clorexidina a 0,12% (Periogard®), sob a forma de bochechos, 2 vezes por semana, durante 30 dias e 3) a eficácia do ozônio na redução destes microrganismos. Participarão do estudo 30 pacientes de 12 a 20 anos de idade, os quais terão a saliva coletada antes da montagem do aparelho para quantificação dos microrganismos e posteriormente receberão bráquetes metálicos e cerâmicos e arcos de níquel-titânio e de fibra de vidro que serão utilizados por um período de 30 dias e não farão uso de solução antimicrobiana para bochecho ou do ozônio. Decorrido esse período, será removido 1 bráquete cerâmico e 1 bráquete metálico da região de pré molares, um arco de níquel-titânio e um arco de fibra de vidro e processados para análise (Baseline). Posteriormente, os mesmos pacientes receberão novos acessórios
ortodônticos, serão divididos aleatoriamente em 3 grupos e seguirão um protocolo ?crossover? randômico. Dez pacientes (Grupo I) farão uso de bochechos com solução placebo, 2 vezes por semana, durante 30 dias, 10 pacientes (Grupo II) serão orientados da mesma
forma, porém os bochechos serão realizados com solução antimicrobiana com gluconato de clorexidina a 0,12% e 10 pacientes (Grupo III) utilizarão ozônio como agente antimicrobiano. Os bráquetes e arcos obtidos após 30 dias serão processados (T1). Após um
período de washout de 3 meses, os pacientes receberão novos acessórios ortodônticos (bráquetes e arcos), sendo que os pacientes que participarão do Grupo I serão submetidos ao protocolo do Grupo II e vice-versa, assim como os outros pacientes que participarão do
Grupo I serão submetidos ao protocolo do Grupo III. Os bráquet

Proc. nº 2009/54013-0 Auxílio Pesquisa - Programa Equipamentos Multi-Usuários 3