Adriane Maria Ferreira Milagres.

Este projeto combina os talentos dos pesquisadores Dr. David Cannella da Université libre de Bruxelles (CPBL-BioCat), Dr. USP), para desenvolver um coquetel enzimático para adaptar a hemicelulose do bagaço da cana-de-açúcar para produzir biomoléculas que possam atuar como bioestimulantes para a autodefesa das plantas. O coquetel incluiria uma mistura de enzimas hidrolíticas e oxidativas de vários fungos filamentosos que já foram expressos heterólogamente e fazem parte de uma biblioteca de proteínas gerada no SyMBLab. O bagaço de cana seria pré-tratado com ácido diluído visando a extração de polímeros de xilanas e esta biomassa seria moldada por reações enzimáticas hidrolíticas-oxidativas em cascata. Na BioCat, foram estabelecidos os protocolos para avaliação da proteção de plantas contra Botrytis cinerea e Pseudomonas syringae usando plantas modelo Arabidopsis thaliana e as culturas.

I am currently participating in the international cooperation project, Fondecyt Fondo Nacional de Desarollo Cientifico yTecnológico / CHILE, in Proyecto 1200504, with the aim of studying the diversity of Morchella species and the microenvironmental factors associated with their fruiting in environments with different degrees of anthropization in Central-South Chile, to understand the trophic state and biotic relationships of the fungus under field and laboratory conditions, providing information for crop management and conservation. My collaboration with this proposal is in the evaluation of the enzymatic profile produced by basidiomycete strains.

Desenvolver um novo conceito para a sacarificação dos polissacarídeos do bagaço de cana-de-açúcar baseado na hidrólise enzimática de uma nova geração de plantas com conteúdo reduzido de lignina. O objetivo é preparar modelos de bagaço com diferentes teores de lignina através de um método de deslignificação seletiva. Com estes modelos, serão estudados porosidade, conteúdo e distribuição da lignina na parede celular para se identificar as características superficiais do material que restringem a hidrólise enzimática. A hipótese do projeto é que estas plantas com conteúdo reduzido de lignina possam ser pré-tratadas em condições mais brandas, gerando menos produtos de degradação e menores perdas de carboidratos. Dados obtidos neste estudo serão validados utilizando-se plantas geneticamente modificadas apresentando menor teor de lignina. Valor: R$ 516.320,53 e US$238,568.34

O presente projeto tem por meta, preencher lacunas e avançar na pesquisa de aspectos que tangem: o isolamento e caracterização de enzimas para uma maior eficiência hidrolítica da biomassa disponível no bagaço; avaliar o comportamento da hemicelulose obtida do bagaço de cana-de-açúcar frente a enzimas; usar compostos redutores de Fe3+, na presença ou não de enzimas ligninolíticas, visando a oxidação da lignina residual presente nos polissacarídeos extraídos do bagaço. Valor: R$ 83.881,87

Responsãvel para o projeto "Enzimas para Saccarificação de Biomassa" dentro o Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia (INCT/CNPq) do Bioetanol, coordenadores Prof. Dr. Marcos Silveira Buckeridge (IB/USP) e Profa. Dra. Gláucia Mendes Souza (IQ/USP). A matriz da parede celular é uma estrutura complexa e, assim, nenhuma enzima é capaz de hidrolisar completamente os polissacarídeos constituintes, sendo previsível a necessidade de uma mistura de enzimas, com diferentes especificidades, para alcançar este objetivo. O subprojeto tem objetivo avaliar como as condições de pré-hidrólise do bagaço de cana-de-açúcar (concentração ácida, temperatura e tempo de residência) influenciam a composição e a digestibilidade enzimática da celulignina resultante.

O projeto proposto pretende avaliar o papel dos compostos quelantes de metal produzidos por basidiomicetos de decomposição branca em conjunto com fenoloxidases na degradação dos compostos de natureza recalcitrante. Como modelos serão empregados: azure B, Poly-R , Remazol Brilliant Blue (RBBR), lignina, celulose e hemicelulose.

Responsãvel pelas etapas do projeto referentes ara o projeto "Enzimas para Saccarificação de Biomassa" dentro o Instituto do Milenio coordenado pelo Prof. Dr. Marcio H.P. Barbosa (UFV) cujo objetivo é produzir substratos celulósicos a partir dos clones selecionados pelas características diferenciadas de fibra, Caracterizar a susceptibilidade dos materiais pré-tratados à hidrólise por celulase e avaliar a fermentabilidade dos hidrolisados de bagaço oriundos de sua hidrólise enzimática para a produção de etanol Valor R$ 570.682,00

O presente projeto se insere na linha de pesquisa: Biodegradação da madeira : uma abordagem química, bioquímica e tecnológica, em desenvolvimento no Departamento de Biotecnologia da Faenquil. Especificamente propõe-se estabelecer uma metodologia para purificar as isoformas de peroxidases dependentes de manganês produzidas pelo fungo Ceriporiopsis subvermispora durante a biodegradação de cavacos de Eucalypus grandis. O domínio desta metodologia permitirá avaliar e comparar o perfil das isoenzimas produzidas em condições de expressão diferenciada (na presença ou ausênciua de co-substratos) e proverá subsídios para realização de estudos futiroa

O objetivo desse projeto é avaliar a produção de hemicelulases e celulases por Ceriporiopsis subvermispora após 30 dias de biopolpação da madeira, caracterizá-las bioquimicamente e testá-las como agente de branqueamento em polpas celulósicas provenientes do processo kraft.

O tema do projeto é a purificação de enzimas hidrolíticas produzidas por Ceriporiopsis subvermispora e o estudo do seu modo de ação em substratos presente na madeira, a fim de melhor entender o processo tecnológico da biopolpação. O tema de estudo será abordado utilizando os extratos obtidos após 30 dias de cultivo em cavacos de eucalipto e pinos, que anteriormente já demonstraram êxito no processo tecnológico da biopolpação. 
	O estudo da biodegradação de madeira se justifica com base na importância tanto acadêmica quanto tecnológica do tema. A aplicação da biodegradação de madeira, sob condições controladas e com fungos pré-selecionados, como pré-tratamento aos processos de polpação tem demonstrado grande êxito, principalmente quando utilizada previamente à polpação mecânica. Essa combinação tem sido denominada de polpação biomecânica e a aplicação desse bioprocesso permite reduzir em até 40% o consumo de energia no refinamento mecânico posterior. Adicionalmente, as biopolpas apresentam resistência mecânica significativamente melhor que as polpas convencionais. De fato, esse processo já foi testado em escala ampliada (degradação de 50 toneladas de cavacos) e está em vias de implementação industrial em vários países, inclusive no Brasil.
Embora o processo de biopolpação já se encontre em vias de implementação industrial, os mecanismos químicos e bioquímicos envolvidos na biodegradação de madeira ainda são pouco conhecidos e restritos ao que está estabelecido para um pequeno número de fungos decompositores da madeira. O entendimento desses mecanismos pode certamente levar ao melhor desenvolvimento e otimização desse processo biotecnológico.

"Estudio de hongos ectomicorrícicos e identificación de los posibles sistemas enzimáticos y no-enzimáticos de detoxificación in vitro y ex vitro y su relación con el crecimiento de plantulas de Pinus radiata D.Don en suelos"

OBJETIVOS 
1.- Implementar y aplicar en el Laboratorio de Microbiología de Suelos los ensayos específicos para determinar la naturaleza química de los agentes quelantes de metal producidos por hongos ectomicorrícicos. A través de los ensayos se determinará el tipo de estructura química, catecol y/o hidroxamato, de los agentes quelantes de metal. 

2.- Perfilar nuevas líneas de acción conjuntas en el estudio de los agentes quelantes de metal producidos por hongos degradadores de madera (saprófitos) y hongos micorrícicos (simbiontes)

Composición Química de Madera Biodegradada: Comparación de Métodos Químicos Tradicionales y Métodos de Espectroscopia Drift-Análisis Multivariado",

Cepas constituem obstáculos para o homem, pois permanecem por longos períodos no solo. Sua estrutura radicular resiste a ventos, aos tratores, serrotes, dinamites e a enxada, que invariavelmente deixam algumas raízes para brotar ou produzir cogumelos. Cepas e raízes com mais de 20 anos de idade têm sido encontrados intactos em áreas de plantio e colheita de Eucalyptus, na região de São Paulo.
Atualmente, as empresas florestais empregam plantio e colheita mecanizados para otimizar o trabalho. No entanto, a presença de cepas e restos culturais na área de colheita dificulta a locomoção das máquinas. Para o aproveitamento da área, o plantio é realizado nas entrelinhas. Entretanto, após a segunda colheita, é necessário que o plantio seja realizado no sentido diagonal às linhas, para que haja o seu realinhamento.A remoção de cepas em grandes áreas é um processo economicamente inviável e antiecológico uma vez que ocorre o revolvimento profundo do solo, alterando sua estrutura e microbiota. Além disso, não há um método adequado para a eliminação dos resíduos que não agrida o meio ambiente, bem como existe a dificuldade da disponibilidade de áreas exclusivas para depositar as cepas removidas. A cepa é um material único, forte e durável, que é decomposto por limitado número de microrganismos.
Objetivos:· Isolar, selecionar e identificar fungos inócuos às plantas de eucalipto capazes de acelerar a degradação biológica das cepas após o corte raso.
· Isolar, selecionar e identificar fungos com potencial de utilização em processos de biopolpação em indústrias de celulose e papel.

BENEFÍCIOS AO SETOR FLORESTAL

· Aceleração da degradação de cepas no campo após o corte raso;
· Redução do problema ambiental proveniente do descarte de restos de colheita;
· Redução dos custos, uma vez que não haverá a necessidade de remoção das cepas;
· Utilização de método de degradação biológica de cepas sem a introdução de microrganismos exóticos;
· Utilização de microrganismos efi

Auxílio a Pesquisa

Neste projeto aborda os aspectos distintos da fisiologia celular e bioquímica de fungos com interesse econômico como o Ceriporiopsis subvermispora (utilizado em biopolpação de cavacos), Lentinula edodes (produção de cogumelos), Wolfiporia cocos e Perenipora medula-panis (produtores de sideróforos).

Fungos decompositores de madeira foram selecionados visando a obtenção de sideróforos com atividade oxidativa. Os fungos de decomposição poarda Pora cocos e Laetiporus sulfureus produziram reação CAS correspondente a 68% e 46% de sideróforos. Os extratos de 35 dias de incubação foram concentrados e ultrafiltrados e os compostos de baixa massa molar com capacidade de oxidar ABTS em meio ácido e que reduziram Fe(III) a Fe (II) deslignificaram polpas kraft de eucalipto

Auxílio Pesquisa

Auxílio a Pesquisa - Proc. FAPESP 1995/3497-3
Projeto desenvolvido em colaboração com a Escola Politécnica da USP - Coordenação Prof. Beatriz V. Kilikian