Fernando Barbosa Júnior.

O impacto geral da poluição por mercúrio (Hg) é indiscutível (Convenção de Minamata sobre Hg), e algumas populações são reconhecidas como particularmente vulneráveis e de alto risco. A Amazônia brasileira é uma das regiões mais afetadas pelo Hg no mundo. Nessa área, o Hg pode ser liberado nos ecossistemas aquáticos por processos antropogênicos (principalmente através da mineração de ouro) e naturais (como lixiviação do solo), levando a um aumento significativo nos níveis de Hg nos peixes amazônicos. Como resultado, as comunidades ribeirinhas, que consomem principalmente peixes, têm uma das maiores exposições de Hg do mundo atualmente. Por outro lado, o nível de selênio (Se) nessas mesmas comunidades varia de médio a muito alto, refletindo a ingestão de Se de fontes alimentares locais, como castanha-do-pará e peixes. O Se apresenta efeitos protetores contra a toxicidade do Hg, mas os mecanismos subjacentes às interações das espécies químicas do Se com as do Hg são pouco compreendidos. Assim, os efeitos toxicológicos antagônicos entre Se e Hg amplamente mencionados, mas não caracterizados até o momento, serão abordados no projeto SeMerAMAZON por uma equipe multidisciplinar de pesquisadores com conhecimentos diferentes e complementares sobre o comportamento de Hg e Se no meio ambiente e na saúde humana. O projeto SeMerAMAZON aprimorará o conhecimento em ecotoxicologia ambiental e ciências da saúde por meio de um projeto único multidisciplinar sobre Hg alinhado ao conceito de "Eco-Saúde". As habilidades complementares de equipes de pesquisa internacionais envolvidas em abordagens analíticas de ponta (especiação e assinatura isotópica estável) e biomarcadores de toxicidade do Hg (metaboloma/proteoma e epigenética) contribuirão para a compreensão dos mecanismos de interações Hg-Se benéficas para a saúde de populações ribeirinhas da Amazônia. Além disso, enfrentando desafios globais, a ação colaborativa BR-FR consolidará as sinergias induzidas para uma cooperação duradoura com base no interesse e benefício mútuos.

Fatores não genéticos, incluindo exposição a poluentes, explicam 70% das doenças crônicas. A medida cumulativa de
influências ambientais e respostas biológicas associadas ao longo da vida, incluindo exposições do ambiente, dieta,
comportamento e processos endógenos é definida como expossoma e vem ganhando grande destaque na ciência mundial,
tanto em estudos populacionais quanto modelos experimentais. As abordagens para caracterizar o expossoma incluem
monitoramento químico e biológico direcionado, e ômicas não direcionadas (como metabolômica e epigenômica), entre
outras. Setores governamentais na União Europeia e Estados Unidos vem financiando projetos de expossoma em larga
escala, mas eles se aplicam à população do Hemisfério Norte, que difere substancialmente das populações no
Hemisfério Sul. Nesse contexto, a população brasileira surge como modelo único de estudo de uma população
miscigenada e cultural e socialmente diversa. Com a expertise transdisciplinar de 76 pesquisadores e 21 Instituições
Brasileiras, este projeto propõe uma integração inovadora de medidas de multiexposição (expossoma interno e externo)
de milhares de produtos químicos (metais, contaminantes emergentes, farmacêuticos, pesticidas, metabólitos,
nutrientes, DNA metilado, biomarcadores de estresse oxidativo, e moléculas de resposta bioquímica de outras fontes
de exposição (como dieta e estilo de vida) para estudar diferentes desfechos na saúde. A estratégia combina estudos
experimentais e de biomonitoramento humano com análises de associação ampla do expossoma. Combinando eixos de forma
translacional (estudos em células, animais e epidemiologia humana e desfechos clínicos), impressões digitais
moleculares associadas ao expossoma serão reconhecidas, com base em mineração de dados. Como resultados adicionais,
um Instituto Brasileiro de Pesquisas em Exposômica será criado, aumentando a competitividade científica do grupo e
contribuindo para a formação de recursos humanos de alta qualidade.

De um lado, as usinas hidrelétricas (UHE) são um dos maiores recursos econômicos da Amazônia e algumas dessas usinas abastecem outras regiões do país. Por outro lado, essas UHEs podem impactar desproporcionalmente comunidades tradicionais, entre elas, a de ribeirinhos. O Estado do Pará acolhe a quinta maior UHE do mundo, a UHE Tucuruí, e constitui um modelo único para a geração de dados imprescindíveis para sustentar ações de minimização do impacto em populações vulneráveis como as crianças. Nesse contexto, a contaminação mercurial é um dos problemas mais graves na Amazônia, amplificado pelas UHEs ao interferir nos ecossistemas. Embora não exista mineração que use mercúrio na região, constata-se que a exposição de ribeirinhos adultos em Tucuruí é significativamente maior que aquela encontrada em regiões garimpeiras, atingindo o nível de 75 vezes acima daquela recomendada pela OMS. Tendo em vista as crianças, é completamente desconhecida a situação. Dessa forma, a partir de uma abordagem multidisciplinar, isto é; ambiental, nutricional, comportamental, bioquímica e genética, será analisada: 1) a contaminação e a toxicocinética do metal no ambiente objeto de estudo com o foco e nas crianças ribeirinhas; 2) o estado de neurodesenvolvimento, saúde geral e possíveis consequências em longo prazo associados à exposição. Com esses dados, teremos pela primeira vez, um panorama sobre a exposição ambiental ao mercúrio, via dieta, em crianças da região da UHE Tucuruí, constituindo a base para estratégias de intervenção precoce e o desenvolvimento de políticas de saúde pública direcionadas à identificação e adequado manejo de indivíduos de risco que vivem sob as áreas de influência desses grandes projetos. Vale ressaltar a potencial contribuição da presente proposta, especialmente na região Norte, considerando o escasso número de estudos epidemiológicos disponíveis sobre o impacto dos projetos em grande escala, e as características diferenciadas (miscigenação, hábitos alimentares, intoxicação mercurial) e de vulnerabilidade (isolamento geográfico, reduzido nível econômico e educacional) dessas comunidades tradicionais.

In everyday life man is exposed to a large number of compounds coming from different sources (diet, environment, the use of drugs), some are essential and others harmful to life. Most of them interact with each other and with our organism, directly or indirectly, promoting simultaneous, dynamic and complex reactions of attack and defense. This process stimulates the formation of many molecules in the human body that sustains intimate relation with the health of an individual. Also, throughout the life, this process can be modified several times, due to the dynamic change of our environment or lifestyle (ex. stress, diet modification, smoke, altered sleep, noise, physical activity, pollution), which may lead to a higher predisposition to specific pathologies. It should also be noted that these uncertain environment variables (lifestyle/diet/pollution) may anticipate specific adverse effects in some individuals due to individual genetic variations in the genome (SNPs for example) or by direct interaction with DNA (epigenome). Consequently, studies on the adverse effects of human exposure to environmental contaminants only based on the exposure relationships-effect for a single or few substances, without considering lifestyle variables are very restricted. In this sense, a new vision to investigate the relationship between environmental exposure and linked effects, that considerably expand the concept of exposure to an overall set of external (e.g. diet, supplements, water, air, drugs, social events) and internal sources (e.g. expression of proteins or generated metabolites) and defined as the exposome has been proposed. Thus, the science of exposure advanced on an Environment-Wide Association Perspective, which should exhibit a much stronger relationship with the health and disease conditions of an individual (phenotype). Thus, this project aims to establish and apply the innovative perception of exposome in Brazil (based on Environment-Wide Association Studies and Environment-Genome-Wide Association Studies). Six different plans that contemplate cross-sectional population studies: (i) PREGNANT; (ii)-AMAZOMICS; (iii)-CARDIOGENES e (iv)-ObESE; (v)-MICROPEST; (vi)-METROPOLIS are proposed as the proof-of-concept. With this in mind, patterns or profiles associated with outcomes (biomarkers of effect or specific diseases) in different Brazilian populations will be established.Thus, data obtained on the levels of toxic substances and nutrients in the body, habits, and lifestyles (diet, physical activity, stress), genomic, epigenomic, proteomic and metabolomic profiles, as well as the microbiome will be integrated by applying supervised or unsupervised data mining tools. As additional goals, the present proposal will consolidate a Brazilian research networking in human biomonitoring and exposome studies, contributing to the formation of high-quality human resources. On the other hand, the data obtained may evidence populations at risk (high exposure to contaminants and deficiency of nutrients) to public policy actions and establish molecular mechanisms that can be used to prevent (predict) future health problems. Finally, with the constant technological development (internet of things, IoT) and increasing use of smartphones and point-of-care systems, new intelligent apps for generating individualized external exposure data and miniaturized detection systems for biomarkers (internal exposure) can be developed, which will stimulate startup proposals (future PIPE-FAPESP projects).

MERFISH brings together international experts from cross-sectorial research areas (fish nutrition, analytical
chemistry, environmental science, communication, toxicology & aquaculture) at industry and academia, with a long-term
goal of furthering the understanding of the source, transport, fate and effects of mercury (Hg) from fish to humans
and the detoxification role of selenium (Se). The project will help establish new guidelines for aquaculture feeding
practices to avoid fish contamination with Hg toxic forms and to insure proper bio-assimilation of its antagonist, Se. The
project also aims to establish a more realistic mercury toxicity assessment for fish and seafood consumption which is
currently limited to methylmercury content. The development of sustainable aquafeeds probably requires the use of
fishmeal produced from recycling by-products besides the increasing use of plant ingredients.
MERFISH aims to encourage, boost and facilitate permanent collaboration between academic (CNRS, INRAE, IMR,
USP, JSI) and non-academic (PSA, AIA, EFB, MBP) centres enhancing transfer of knowledge, innovation, culture of
work, experience and mutual collaboration. MERFISH promotes the international (FR, SL, UK, NO, BR, MA) and crosssectorial exchange of researchers from EU and Third Countries participating institutions in the project leading to the
development of their professional careers and building lasting research collaborations. The research activity is supported
by on-going R&D and Innovation projects funded by regional, national and international institutions. The secondments
within the framework of MERFISH constitutes a wide array of benefits and provides external and complementary expertise
and concerting actions to achieve common goals. The planned R&D and innovation activities and results dissemination
and engagement are in direct accordance with aquaculture development preconized by the H2020 European program to
provide sustainability, exploit and manage aquatic living resources.

A quantificação de um elemento químico em uma determinada matriz, em sua forma total, já não traz mais informações relevantes para um completo entendimento da maneira pela qual este elemento afetará os organismos vivos ou um ambiente, tendo em vista que além da toxicidade, a biodisponibilidade e a mobilidade de um elemento estão diretamente relacionados às diferentes espécies/formas químicas existentes deste elemento. Assim, é fundamental determinar as espécies nas quais estes elementos são encontrados e quantificá-las apropriadamente. As análises feitas com esta finalidade são denominadas análises de especiação ou simplesmente especiação química. Atualmente a cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas com fonte de plasma acoplado indutivamente (LC-ICP-MS), vem sendo a técnica de escolha para a especiação química em diversos tipos de amostras em concentrações num intervalo de ng L-1 a µg L-1. Entretanto, apesar do grande avanço em instrumentação analítica nos últimos anos na área de especiação química utilizando o sistema LC-ICP-MS, metodologias de pré-concentração e/ou separação são ainda frequentemente necessárias, principalmente devido à baixa concentração dos analitos na amostra e à presença de interferentes na matriz, objetivando a simplificação e miniaturização dos procedimentos, com redução do uso de solventes e de resíduos gerados. Dentro deste contexto, técnicas convencionais como extração em fase sólida (SPE) e extração líquido-líquido (LLE) vêm sendo modificadas de forma a eliminar as desvantagens a elas associadas. Dentre estas, a microextração em fase sólida (SPME) e a microextração em sorvente empacotado (MEPS) são os dois formatos miniaturizados mais bem sucedidos e utilizados atualmente, com número crescente de aplicações em diversas áreas, mas ainda com limitada aplicação em especiação química. Neste sentido, este projeto tem como objetivo avaliar novos métodos para diferenciar as espécies químicas de arsênio e mercúrio presentes em amostras ambientais (águas) e clínicas (plasma) utilizando técnicas hifenadas de cromatografia líquida e espectrometria de massa com fonte de plasma acoplado indutivamente (LC-ICP-MS), e preparo das amostras por sistema MEPS. Como resultados são esperados melhoras em diversas características analíticas em relação a procedimentos existentes na literatura, com redução de tempo de preparo de amostras e volume de reagentes, bem como melhoras em sensibilidade e seletividade dos métodos. Para a validação dos métodos serão analisados diversos materiais de referência. Finalmente, os novos procedimentos poderão ajudar as diversas pesquisas em toxicologia e avaliação toxicológica de Hg e As que são realizadas em rotina pelo Laboratório de Toxicologia de Metais da Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo.

ver the years, it became also clear that tobacco use in pregnant women increases the risk of different health problems not only in mother but also the fetus. Nevertheless, few studies have examined the influence of environmental tobacco smoke (ETS) during pregnancy on the newborn health. The present study aims to assess the damage in DNA and changes in patterns of DNA methylation and histone modifications in newborns resulting from in utero exposure to ETS. Study population will include pregnant women and newborns of Porto district being analyzed different samples in order to obtain information concerning the consequences of transplacental exposure to ETS on newborns DNA. In order to address simultaneous exposure to other DNA-damaging chemicals, a wide number of chemicals will also be analyzed in biological matrices. A deep characterization of early-life exposure to a wide range of chemicals and its association with genetics and epigenetics in the newborn is the main purpose of this study. The information collected can provide relevant information to awareness campaigns and provide scientific support for the possible implementation of coherent measures for disease prevention in early stages of life. Moreover, the results provide scientific support for the possible implementation of coherent and effective health promotion and disease prevention in early stages of life in order to optimize the current and future health not only of women but also their children.

Reduzir a temperatura da amostra oferece várias vantagens para a luminescência molecular ( fluorescência e/ou fosforescência). A Análise em temperaturas criogênicas, muitas vezes melhora a resolução espectral, aumenta rendimentos quânticos de emissão e minimiza - ou até elimina - complicações com o "quenching" de oxigênio e a transferência de energia. Embora a melhoria da resolução espectral é quase sempre observada com o abaixamento da temperatura a 77 K ou abaixo disso, os efeitos da temperatura sobre o estreitamento espectral são particularmente visíveis na espectroscopia Shpol'skii. Esta técnica combina a sensibilidade inerente da fluorescência e fosforescência com a seletividade de espectros vibracionais resolvidos. Neste sentido, o objetivo desta proposta é a generalização dos métodos de espectroscopia de Shpol'skii para uma variedade de compostos polares, utilizando solventes polares. O trabalho inicial é proposto aqui para investigar o comportamento Shpol'skii de metabólitos monohidroxi de PAHs (OH-PAHs ) em álcoois orgânicos congelados, fornecer um modelo mais geral para a espectroscopia Shpol'skii e permitir uma utilização mais generalizada da metodologia. Devido ao tempo curto de eliminação no corpo, a determinação quantitativa de OH-HPAs em amostras de urina fornece informação precisa sobre a recente exposição ambiental/ocupacional aos HPAs. Apesar de técnicas cromatográficas fornecerem limites adequados de detecção para OH-HPAs em amostras de urina, em geral os procedimentos experimentais destas técnicas são demorados e de alto custo. A pesquisa aqui apresentada fornecerá metodologia fácil de usar e de baixo custo, além de adequada para a coleta de dados com tamanhos amostrais maiores para estudos toxicológicos em grandes populações.

Hidrocarbonetos policíclico aromáticos (HPAs) são poluentes ambientais importantes de fontes diversas naturais e antropogênicas. Eles são em geral formados durante a combustão incompleta de matéria orgânica contendo carbono e hidrogênio. Logo, a sua presença no ambiente, em matrizes como água, solos e material particulado, é cada vez mais comum.Sendo assim, a determinação de HPAs é de grande relevância toxicológica e ambiental. Além disso, estudos toxicológicos mais recentes atribuem uma porção significativa das atividades tóxicas de amostras contaminadas com HPAs, a presença de HPAs com elevado peso molecular (HMW), i.e. HPAs com massa molecular e 300. O primeiro grupo destes HPAs, de peso molecular 300 e isômeros de peso molecular 302, estão presentes nos produtos da combustão de carvão mineral, Black carbon e combustíveis de origem fóssil. Entretanto, o coroneno é em geral o único isômero de peso molecular 300 monitorado em matrizes de interesse ambiental entre vários outros existentes. Isto ocorre principalmente devido à inexistência de técnicas e/ou métodos capazes de determiná-los.Neste sentido, o principal objetivo deste projeto é o de desenvolver métodos e instrumentação com habilidade de determinar eficientemente a presença de HPAs de alto peso molecular em amostras de água e material particulado. A metodologia proposta é baseada na espectroscopia de Shpol'skii, uma importante área de pesquisas da química analítica, mas praticamente desconhecida no Brasil. Nossa atenção se focará em 23 isómeros de peso molecular 302, que estão entre os mais tóxicos agentes químicos ao homem. Esta nova linha de pesquisas será implementada na Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo. O projeto será executado em parceria com o Prof. Dr. Andres Campíglia do Departamento de Química da Universidade da Flórida Central, EUA, um dos maiores especialistas mundiais nesta técnica. Talvez uma das principais limitações do uso da Espectroscopia de Shpol'skii no Brasil seja, além do desconhecimento dos avanços recentes da técnica, um relativo elevado custo de instrumentação. Nossa proposta eliminará esta limitação pelo desenvolvimento de uma metodologia à baixa temperatura em instrumentação comercial de relativo baixo custo. Isto possibilitará analistas com acesso a um simples espectrofluorímetro resolverem interferências espectrais para a análise direta de fluoróforos em matrizes complexas sem necessidade de separações cromatográficas.

Apoio a Congresso Científico

Apoio a Realização de Congresso Internacional

O Food Research Center (FoRC) - Centro de Pesquisas em Alimentos - é uma iniciativa de cientistas da Universidade de São Paulo de criação do primeiro centro de pesquisas focado em alimentos e nutrição no Brasil. Ele baseia-se no conceito que estudos em alimentos e nutrição têm um caráter multidisciplinar e profissionais com diferentes formações podem estudar diferentes aspectos de um mesmo tema. O objetivo principal é abordar os principais desafios globais e desenvolver pesquisa fundamental, estratégica e aplicada, a nivel internacional, beneficiando o agronegócio brasileiro, consumidores, responsáveis por políticas públicas e agências reguladoras, causando um grande impacto sócio-econômico no país. Os projetos de pesquisa podem ser agrupados em quatro pilares. No Pilar 1 (Sistemas Biológicos em Alimentos), os alimentos são caracterizados quanto à sua biodiversidade e composição em macro e micronutrientes e outros compostos com efeito benéfico potencial à saúde. Os mecanismos moleculares que regulam a biossíntese e catabolismo destes compostos são elucidados utilizando-se ferramentas ômicas avançadas. No Pilar 2 (Alimentos, Nutrição e Saúde), os impactos dos componentes dos alimentos sobre o estado nutricional de grupos populacionais e seu potencial na redução do risco de doença são avaliados. Aplicações da nutrigenômica, metabolômica, novos princípios físicos e ensaios clínicos são exploradas para estudar as relações entre dieta e saúde. No Pilar 3 (Segurança e Qualidade dos Alimentos), a segurança e qualidade dos alimentos são mensuradas através de avaliações de risco em relação à patógenos microbianos e contaminantes químicos ao longo de toda a cadeia de produção de alimentos, em uma abordagem do tipo "campo à mesa". Por último, no Pilar 4 (Novas Tecnologias e Inovação), tecnologias inovadoras de processamento são desenvolvidas, com foco em novos ingredientes com funcionalidades específicas e de novos alimentos nutrititivos e seguros, e embalagens que atendam as demandas dos consumidores por alimentos seguros e promotores de saúde. O plano de ação de educação e difusão do conhecimento atende o desafio de comunicar as realizações do FoRC a todos os segmentos da sociedade, através de uma série de atividades. O papel educativo do FORC é cumprido empregando-se ferramentas apropriadas (cursos, web, TV, imprensa) para disseminar o conhecimento gerado pelas pesquisas realizadas para a comunidade científica, profissionais da área de alimentos e nutrição, responsáveis por políticas públicas e a sociedade em geral. Para atingir este objetivo, o FORC estabeleceu parcerias com vários especialistas em comunicação e está desenvolvendo um site interativo, que disponibilizará o acesso aos bancos de dados, em diferentes níveis de complexidade e detalhes, e também material didático para estudantes de cursos básicos e intermediários. A formação de recursos humanos altamente qualificados está assegurada, pois a maioria dos projetos de pesquisa e outras atividades são realizadas com a participação de alunos de graduação, mestrado e doutorado e pós-doutorandos. A transferência de tecnologia é uma meta importante do FoRC, visto que a conversão dos resultados das pesquisas e do conhecimento acadêmico gerado em aplicações práticas trará benefícios substanciais para o país, impactando a saúde, a indústria, o comércio, o desenvolvimento, e, por fim, a qualidade de vida da população. A cooperação com a indústria de alimentos, governo e outros setores da sociedade é realizada com o apoio da Agência USP de Inovação, também responsável pelo marketing e comercialização da Propriedade Intelectual gerada no FoRC. Workshops, seminários, open-houses, e outras atividades organizadas em conjunto com as partes interessadas, proporcionarão oportunidades para novas parcerias benéficas, agregando valor à pesquisa realiza

O mercúrio (Hg) é um metal não essencial, encontrado em diferentes espécies químicas, com propriedades bastante diferentes, entretanto todas são tóxicas. O Hg possui grande afinidade por grupos tióis e se liga covalentemente aos resíduos de cisteína de várias proteínas, alterando assim inúmeras vias metabólicas. Dentre os efeitos tóxicos da exposição ao Hg, tem grande relevância a toxicidade sobre os tecidos cerebral e renal. Vários trabalhos reportam a associação da exposição ao Hg e efeitos como alteração na permeabilidade de membrana, rupturas no DNA e apoptose em células neuronais. No tecido renal as principais alterações são decorrentes da produção de espécies reativas de oxigênio e consequente estresse oxidativo, modificando a funcionalidade da membrana celular e a polaridade tubular renal. A exposição aos metais, de uma maneira geral, ativa um mecanismo que inclui a produção alterada de proteínas na tentativa de manter a homeostase e de proteger ou reparar macromoléculas que são alvos diretos ou indiretos de xenobióticos. Proteômica é o método direto para identificar, quantificar e estudar as alterações na expressão das proteínas em um organismo, perante determinado estímulo. Neste caso, poderão ser identificados candidatos a marcadores biológicos que poderão ser utilizados para diagnosticar a exposição ao Hg de forma precoce. Neste sentido, os objetivos do trabalho são: (i) estudar o perfil de expressão de proteínas no tecido renal e cerebral de ratos tratados com diferentes espécies de mercúrio e em ratos controle, por meio de mapas protéicos obtidos por eletroforese bidimensional, (ii) identificar possíveis ligações de proteínas diferencialmente expressas com Hg e (iii) identificar e caracterizar proteínas diferencialmente expressas com uso de espectrometria de massas (ESI-MS e MALDI-TOF).

O mercúrio (Hg) é um dos metais mais tóxicos presentes no ambiente, causando diversos efeitos adversos à saúde. Sua eliminação é feita de forma lenta, através da conjugação com glutationa através de enzimas detoxificadoras, as glutationas-S-transferases (GSTs). Sendo assim, uma das hipóteses a ser examinada neste projeto é a de que polimorfismos genéticos relacionados às GSTs, GSTM1 (nulo), GSTT1 (nulo) e GSTP1 (Ile105Val), possam exercer influência no processo de eliminação do metilmercúrio (MeHg), em indivíduos expostos ambientalmente a este metal. Outra hipótese a ser examinada é a de que a exposição ambiental ao mercúrio, possa interagir com o variante genético "Leu" do polimorfismo Pro198Leu da glutationa peroxidase (GPx-1), aumentando o estresse oxidativo. Neste sentido, em uma primeira etapa, pretende-se avaliar os efeitos da interação entre os níveis deste metal em biomarcadores de exposição, tais como sangue e cabelo, com as variantes alélicas dos genes GSTM1, GSTT1 e GSTP1. Em uma seguinte etapa, pretende-se avaliar os efeitos da intoxicação ambiental ao mercúrio, sobre os níveis de espécies reativas de oxigênio (EROs), bem como os efeitos da interação entre os níveis deste metal em biomarcadores de exposição, com os variantes genéticos do polimorfismo Pro198Leu da GPx-1, no estresse oxidativo. Para tal, em amostras de sangue, plasma e urina de indivíduos expostos ambientalmente ao mercúrio na região do Rio Tapajós no Estado do Pará serão determinadas as concentrações de mercúrio, (utilizando a técnica de espectrometria de emissão atômica com plasma acoplado) e o de marcadores de estresse oxidativo, como o de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), glutationa (GSH), glutationa dissulfeto (GSSG), isoprostano (F2), 8-oxo-2-deoxiguanosina e 8-oxoguanina utilizando a técnica de HPLC com detecção por UV-Vis ou Fluorescência Molecular e cromatografia gasosa com detector de massa (CG/MS). Posteriormente, será realizada genotipagem para o polimorfismo d

Os metais, tipicamente definidos pelas propriedades físico-químicas dos elementos no estado sólido, podem ser divididos em essenciais e tóxicos. Os elementos essenciais são aqueles necessários ao organismo para manter suas funções fisiológicas normais como Zn, Fe, Co, Mg, Se. Os elementos tóxicos são aqueles que não possuem função no organismo como Cd, Pb, Hg e As. Como exemplo, o As é um composto amplamente distribuído no ambiente sendo considerado pela ATSDR (EUA) o composto mais tóxico ao homem. Ele está ligado a causa de diversas doenças cardíacas, vasculares periféricas, anemia e câncer. As formas inorgânicas, As(III) e As(V), são as mais tóxicas sendo metiladas no organismo a ácido monometilarsônico (MMA) e o ácido dimetilarsínico (DMA), principalmente. Essa metilação não é constante, variando de acordo com idade, sexo, etnia, concentração da dose de exposição, gravidez, estado nutricional e polimorfismo genético, provocando divergências quanto à toxicidade das espécies. No homem, os compostos de As são empregados como medicamentos para tratamento de leucemia, em animais como medicamentos para crescimento e antiparasitários e em praguicidas. A exposição via oral é a mais comum. Países como Japão, EUA , Austrália e a Comunidade Européia estão dirigindo esforços cada vez maiores associados a leis mais restritivas para a importação de alimentos. No exterior, muitos grupos de pesquisa utilizam a HPLC-ICP-MS para especiação de As por ser uma ferramente versátil de alta sensibilidade e seletividade. Vários métodos de extração e quantificação das espécies de As em matrizes como fígado, rins, sangue, soro, urina, cabelo, arroz e maçã foram desenvolvidos. No entanto, muitos destes métodos são laboriosos e além disso, no Brasil, ainda há uma deficiência de laboratórios aptos a realizar a especiação de As em rotina. Neste sentido, este projeto tem como principal objetivo o de desenvolver e validar métodos de extração e quantificação de espécies de As (AS(III), As(V), DMA

Os metais, tipicamente definidos pelas propriedades físico-químicas dos elementos no estado sólido, podem ser divididos em essenciais e tóxicos. Os elementos essenciais são aqueles necessários ao organismo para manter suas funções fisiológicas normais como Zn, Fe, Co, Mg, Se. Os elementos tóxicos são aqueles que não possuem função no organismo como Cd, Pb, Hg e As. Como exemplo, o As é um composto amplamente distribuído no ambiente sendo considerado pela ATSDR (EUA) o composto mais tóxico ao homem. Ele está ligado a causa de diversas doenças cardíacas, vasculares periféricas, anemia e câncer. As formas inorgânicas, As(III) e As(V), são as mais tóxicas sendo metiladas no organismo a ácido monometilarsônico (MMA) e o ácido dimetilarsínico (DMA), principalmente. Essa metilação não é constante, variando de acordo com idade, sexo, etnia, concentração da dose de exposição, gravidez, estado nutricional e polimorfismo genético, provocando divergências quanto à toxicidade das espécies. No homem, os compostos de As são empregados como medicamentos para tratamento de leucemia, em animais como medicamentos para crescimento e antiparasitários e em praguicidas. A exposição via oral é a mais comum. Países como Japão, EUA , Austrália e a Comunidade Européia estão dirigindo esforços cada vez maiores associados a leis mais restritivas para a importação de alimentos e introdução de legislação para espécies de arsênio em alimentos. Também, devido às crescentes exigências do mercado externo e interno por uma melhor segurança alimentar aumenta a necessidade pela produção de materiais de referência (RMs) contendo diferentes espécies de cada metal. Os RMs são produzidos em países desenvolvidos (Japão, Canadá, EUA) em pequenas quantidades e a elevado custo e em geral devido a restrições sanitárias brasileiras são de difícil importação. Os RMs são importantes para controle laboratorial aplicados para validação e controle de qualidade de resultados analíticos. No exterior, muitos grupos de

Pretende-se fomentar e dar continuidade a atividades de pesquisa em andamento voltadas à avaliação de parâmetros e produção de materiais de referência de amostras agrícolas para contaminantes inorgânicos e nutrientes, assim como a organização de ensaios de proficiência, essenciais para a operacionalização e produção dos materiais. Estudos atualmente em desenvolvimento, que visam a produção de materiais de referência que serão distribuídos para diferentes laboratórios, entre os quais os pertencentes ao Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) serão fomentados, incluindo ainda aspectos relacionados ao preparo das amostras e análise a níveis traço. A Embrapa Pecuária Sudeste apresenta experiência como provedor de ensaios de proficiência visando o controle de resultados analíticos, entre os quais o Ensaio de Proficiência para Laboratórios de Nutrição Animal, programa com 13 anos de existência e atualmente contando com a participação de 73 laboratórios representantes de outros centros da Embrapa, de Universidades e do setor privado. As atividades estão inseridas em projeto aprovado junto ao CNPq, coordenado pela Profa. Dra. Elisabete de Nadai Fernandes, do Centro de Energia Nuclear na Agricultura (Edital 64/2008- CRM-Agro: Materiais de Referência para Agricultura, Pecuária e Toxicologia). O Centro Colaborador conta com a participação, além do CENA e da Embrapa Pecuária Sudeste, da Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo. Também está inserido nas atividades coordenadas pela proponente junto ao Instituto Nacional de Ciência e Tecnologias Analíticas Avançadas (INCTAA), sob a coordenação do Prof. Dr. Celio Pasquini, da Universidade de Campinas A rede aqui proposta congrega pesquisadores provenientes de 12 centros de pesquisa: Embrapa (Embrapa Pecuária Sudeste), Laboratório Nacional Agropecuário (LANAGRO SP), três Institutos Estaduais de Pesquisa Agropecuária - OEPAs (Instituto de Zootecnia-APTA, Nova Odessa; Institut

Ed 642008 MAPA L-2

Nos últimos anos a especiação química de metais tornou-se imprescindível nos estudos que envolvem toxicologia de metais e/ou nutrição humana, pois os efeitos tóxicos e/ou benéficos dos elementos estão diretamente relacionados às formas químicas nas quais se encontram nos seres vivos, nos alimentos e/ou no ambiente. Na especiação química, são empregadas técnicas de separação (geralmente técnicas cromatográficas, como a cromatografia gasosa(GC), a cromatografia líquida (LC), a cromatografia com fluído supercrítico ou eletroforese) acopladas à técnicas de detecção de alta sensibilidade, como a espectrometria de fluorescência atômica (AFS) e a espectrometria de massa com fonte de plasma acoplado indutivamente (ICP-MS), sendo que atualmente esta última tem sido a técnica de escolha para a determinação de elementos em diversos tipos de amostras em concentrações num intervalo de ng L-1 a µg L-1. A versatilidade da ICP-MS em termos de especificidade e sensibilidade a torna idealmente apropriada para o uso como detector cromatográfico. As principais vantagens desta sobre outros possíveis métodos de detecção, incluem o amplo intervalo dinâmico linear, alta velocidade de análise, capacidade multielementar, espectro simples e habilidade para análises isotópicas. Este projeto tem como proposta diferenciar as espécies químicas de selênio (selenocisteína, selenometionina, selenito, selenato, selenoproteína P) e mercúrio (metilmercúrio, mercúrio inorgânico e etilmercúrio) presentes em amostras clínicas (sangue e plasma) utilizando técnicas hifenadas de cromatografia líquida e espectrometria de massa com fonte de plasma acoplado indutivamente (LC-ICP-MS). Para tal, serão desenvolvidos novos métodos que possam simplificar a especiação química desses elementos. Pretende-se também, estabelecer a relação entre esses dois elementos visando à compreensão da ação do selênio numa possível redução dos efeitos tóxicos do mercúrio em seres humanos. Neste sentido, espera-se que as informações o

Edital MCT/CNPq 14/2008 Universal-Faixa C, Processo 478801/2008 4

PQ 10/2007 CNpq

hipótese a ser examinada neste projeto é a de que a exposição ambiental ao mercúrio orgânico (metilmercúrio) possa interagir com o variante genético ?C? do polimorfismo T-786C da eNOS, potencializando o grau de comprometimento funcional do sistema do NO e aumentando o risco a doenças coronárias. Em uma primeira etapa, será desenvolvido um método simples e automatizado para especiação química de mercúrio em sangue e cabelo utilizando a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) acoplada a um detector de espectrometria de massas com plasma acoplado (ICPMS) para que apenas o metilmercúrio possa ser determinado nas amostras biológicas. Para tal, as amostras de sangue e cabelo serão previamente incubadas a temperatura ambiente com hidróxido de tetrametilamônio (TMAH) durante 2 horas em tubos Falcon de 15 mL como descrito anteriormente por Barbosa Jr e colaboradores e em seguida as espécies de Hg serão extraídas em solvente de acordo com método proposto por Liang e colaboradores. Após a eluição por uma coluna de fase reversa, as frações de amostra serão diretamente introduzidas em fluxo contínuo no ICPMS. Para a validação do método proposto serão analisados Materiais de Referência e Referência Certificada da ?National Institute of Standards and Technology? e de Referência do Departamento de Saúde do Estado de Nova Iorque nos Estados Unidos e do Programa de Intercomparação de Laboratórios do INSP-Quebec no Canadá, ambos contendo mercúrio inorgânico e metilmercúrio. Em uma segunda etapa, pretende-se avaliar os efeitos da exposição ambiental ao metilmercúrio sobre a biodisponibilidade sistêmica de NO, bem como os efeitos da interação entre os níveis de metilmercúrio no sangue total e cabelo com os variantes genéticos do polimorfismo T786C da eNOS, sobre a biodisponibilidade sistêmica de NO. Para tal, em amostras de sangue e cabelo de adultos expostos ambientalmente ao metilmercúrio na região amazônica (Itaituba-Pará), serão determinados os níveis desta forma orgânica do

Auxílio Regular Fapesp 2006/00919-0

Este Projeto se propõe a desenvolver uma série de estudos de natureza clínica para avaliar impactos da poluição atmosférica gerada por veículos e queima de biomassa.