Mario Taba Junior.

processo nº 2634/97

Porphyromonas gingivalis peptidilarginina deiminase (PPAD) é uma deiminase bacteriana não relacionada evolutivamente à PAD humana e tem sido de considerável importância para desvendar um mecanismo que liga a doença periodontal (DP), o início da artrite reumatóide e a citrulinação bacteriana. A DP, que leva ao aumento do número de P. gingivalis, é uma doença inflamatória crônica causada pela infecção dos tecidos de sustentação dos dentes, afetando o osso alveolar e causando perda dentária. Tem sido relatado que pacientes com AR têm maior prevalência de DP e que a peptidilarginina deiminase (PPAD) de Porphyromonas gingivalis gerada por infecção por P. gingivalis na doença periodontal foi implicada no início da AR por gerar neoantígenos citrulinados.Estudos sugerem que a Porphyromonas gingivalis pode estar envolvida no desencadeamento de respostas imunes autorreativas e no desencadeamento de doenças imunes como a AR. Portanto, o objetivo deste estudo é investigar a peptidilarginina deiminase (PPAD) de Porphyromonas gingivalis de P.g. CH2007 (RACH2007-PPAD) em amostras de soro de pacientes com artrite reumatóide (AR) e um PPAD peptídeo citrulinado (CPP) contendo o principal sítio de autocitrulinação como alvos potenciais para a reatividade de anticorpos na AR e para analisar a possibilidade de proteínas citrulinantes humanas nativas por PPAD no contexto da AR.Palavras-chave: Porphyromona gingivalis, microbiologia bacteriana, doença periodontal, artrite reumatoide, hospedeiro.

A cicatrização é um processo caracterizado por etapas sequenciais de hemostasia, inflamação, proliferação e maturação, para a qual vem sendo utilizado biomateriais com o objetivo de sua viabilização. Dentre esses se destaca a exploração e desenvolvimento de um novo recurso natural e sustentável, a membrana da casca de ovo de galinha (EMS), um biomaterial versátil e abundante com ótimas propriedades físicas, químicas, mecânicas e biológicas. Sabe-se que a EMS detém a capacidade de promover uma dinâmica de células progenitoras e uma diferenciação celular acelerada, devido ao aprimoramento, que induz as propriedades de vascularização e angiogênese, o controlado processo inflamatório e o estimulo à atividade de proteases. No entanto, o efeito da EMS na cicatrização de feridas extra e intra orais concomitante à condição de diabete tipo 1 ainda não foi elucidado pela literatura. Nossa hipótese é de que a EMS pode interferir positivamente no processo cicatricial associada ao seu enriquecimento com ácido hialurônico e, assim, o objetivo deste projeto é avaliar o efeito da EMS na cicatrização de feridas extra e intra orais na condição de diabete tipo 1. Protocolos de obtenção e processamento da EMS serão testados e caracterizados por ensaios de microscopia eletrônica de varredura, espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier, absorção de fluído e da membrana corioalantóide. A concentração de ácido hialurônico com maiores efeitos em fibroblastos cultivados sob a EMS será determinada por avaliação da adesão, viabilidade, proliferação e migração celular in vitro. E o efeito do uso da EMS associada ao ácido hialurônico sobre feridas extra e intra orais na diabete tipo 1 in vivo será determinado pelo (1) monitoramento das feridas por registros fotográficos, (2) análise histológica, (3) expressão de genes por PCR em tempo real e (4) proteínas envolvidas na cicatrização por Western blot. Os resultados desse estudo poderão contribuir para o estabelecimento de novas abordagens terapêuticas viáveis para o dia a dia clínico, favorecendo uma alternativa que induza de forma positiva o processo cicatricial de feridas na pele e na mucosa ou funcione como uma barreira de proteção pós-operatória de cirurgias bucais em pacientes com diabete tipo 1.

Estima-se que 16 milhões de brasileiros vivem sem os dentes, sendo que 41,5 das pessoas com mais de 60 anos já perderam todos (IBGE). Esse dado reforça a grande necessidade de tratamentos reabilitadores avançados com implantes e procedimentos regenerativos, em adultos portadores de comorbidades. Histórico de doenças crônico inflamatórias, mudanças epigenéticas, perfil disbiótico, fumo e condições sistêmicas como o diabetes são situações que podem comprometer o resultado do tratamento. Adicionalmente, o conhecimento acumulado com os estudos preliminares desenvolvidos ao longo da existência do programa tem fornecido subsídios para a customização de terapias convencionais como os enxertos e técnicas de preservação alveolar, bem como os tratamentos associados com engenharia tecidual, por exemplo, a utilização de biomateriais e fatores de crescimento. Processo: 403706/2022-0

Recessão gengival é uma condição caracterizada pela exposição oral da superfície da raiz devido a um deslocamento da margem gengival apical à junção cemento-esmalte. As consequências mais comuns da recessão gengival são a deterioração da estética dentária, bem como a hipersensibilidade da dentina e até mesmo a perda do dente. Atualmente, um dos procedimentos mais utilizados para o recobrimento radicular é o que é utilizado enxerto do tecido conjuntivo mais retalho posicionado coronalmente (CTG + CAF). Porém, cirurgias que envolvem a coleta de enxerto são demoradas e podem ter uma alta morbidade, devido à necessidade de um segundo local cirúrgico, além de aumentar o desconforto do paciente, sangramento pós-cirúrgico e suprimento limitado de tecido doador. Por esses motivos, são propostas técnicas cirúrgicas alternativas ao CTG + CAF e também o uso de alguns produtos para obter redução das recessões gengivais. Diferente de todos os produtos encontrados no mercado, desenvolvemos um bioenxerto baseado em terapia celular que é composto por um scaffold de ácido hialurônico (AH) e que contém células mesenquimais (CM) incorporadas. Essa biotinta é bioimpressa em uma bioimpressora 3D o que confere escalonabilidade a produção que é totalmente baseada em conceito GMP (Good Manufacturing Practice). Durante a primeira fase de desenvolvimento do bioenxerto foi estabelecido o protocolo de obtenção do biomaterial a base de AH que apresentou textura e condições de bioimpressão e de manuseio. Assim que foram determinadas as condições do biomaterial, foi demonstrado que esse scaffold e o processo de bioimpressão não prejudicam a viabilidade das CMs contidas. Além disso, foi verificado in vitro que o bioenxerto não é citotóxico para células pertencentes a mucosa oral como os queratinócitos gengivais e que promove a proliferação de fibroblastos gengivais humanos (FGH) de maneira dose dependente, sendo, portanto, o bioenxerto com 1,5x105 CMs o que possui maior capacidade de estimular a multiplicação dos FGHs. Somado ao efeito proliferativo do bioenxerto, verificamos in vitro que este produto também é capaz de promover maior migração de FGH. Uma vez que a quantidade de CMs para a obtenção dos resultados biológicos foi determinada e que propriedades biológicas favoráveis foram demonstradas durante a prova de conceito, estudos posteriores são necessários para que seja verificado o efeito terapêutico dos bioenxertos no tratamento de modelos de recessão gengival in vivo, focando as análises nos parâmetros exigidos pela ANVISA para a liberação dos testes em humanos futuramente. Além disso, também objetivando a entrada deste produto no mercado é necessário estabelecer as condições adequadas para armazenamento e transporte dos bioenxertos para que os mesmos sejam configurados como produtos viáveis. (AU)

A integridade dos tecidos duros e moles, comprometida por mudanças fisiológicas e estruturais após a perda dentária, é um grande desafio da implantodontia moderna. A influência da cicatrização de tecidos moles em locais pós-extração e sua contribuição para a modelagem óssea tem ganhado atenção. Assim, a hipótese nula deste trabalho é que não há diferença na qualidade de tecido mole, preenchendo espaços do alvéolo com substituto ósseo deixando esse material exposto ou cobrindo a área com matriz de colágeno, ou hidrogel. Serão selecionados 28 pacientes com indicação de exodontia flapless em dentes posteriores, que receberão implante imediato tendo o gap do alvéolo preenchido com biomaterial xenógeno no nível do cicatrizador e gengiva circundante. Serão divididos dois grupos de forma randomizada onde a variação da técnica cirúrgica será o enxerto ósseo exposto ou coberto com matriz colágena selando a região do alvéolo ao redor do implante. A quantidade e qualidade do tecido ceratinizado na região do alvéolo, durante o processo de cicatrização serão avaliados nos dias 02, 07, 30; por meio de solução evidenciadora (azul de metileno 0,05%), fotografia padronizada e análises imunoenzimáticas dos níveis de VEGF, IL-1² e FGF-1. Também serão realizadas imagens de tomografia computadorizada de feixe cônico para a avaliação da espessura de tecido mole e tecido duro imediatamente após a instalação do implante e após 4 meses de cicatrização. Para complementar os achados em pacientes, a cicatrização também será estudada em alvéolos de incisivo da maxila de ratos. Nesse modelo experimental, 05 grupos de alvéolos serão preenchidos com coágulo, osso xenógeno exposto ao meio oral, osso xenógeno coberto com matriz de colágeno e osso xenógeno coberto com hidrogel enriquecido com produto à base de amelogeninas ou ácido hialurônico. Após 2 semanas serão realizados o processamento histológico e as análises histomorfométricas em cortes corados com Hematoxilina e Eosina, Tricrômio de Masson e Sirius Red para evidenciar as fibras colágenas e estruturas mineralizadas, distinguindo a área, densidade e a porcentagem dos colágenos tipo I e III. O teste-t de Student e ANOVA ou complementares não paramétricos serão usados para identificar diferenças entre os grupos. Diferenças com valor de p<0,05 serão considerados estatisticamente significantes.

PEEG 21904

A doença periodontal (DP), a artrite reumatoide (AR) são doenças imunoinflamatórias caracterizadas pela reabsorção óssea induzida pelo processo inflamatório (Mercado F, et al, 2000; Preshaw PM, 2017). Embora essas doenças tenham fatores etiológicos diferentes, todas compartilham fatores de risco e mecanismos patogênicos semelhantes (Preshaw PM, 2017; Potempa J, et al 2017; Redman RS, et al 2016). Embora a etiologia exata da AR permaneça desconhecida até o momento, a produção de citocinas pró-inflamatórias e ativação de linfócitos são cruciais nos eventos da doença, assim como ocorre na doença periodontal (de Aquino, S. G. et al., 2014; Lubberts, E. 2010; Lundy, S. K., et al., 2007). Sendo assim, dentro das novas estratégias terapêuticas, a modulação da resposta imune do hospedeiro parece ter grande potencial. A interleucina 6 (IL-6) é um estimulador potente da diferenciação dos osteoclastos e da reabsorção ósseas. Quantidades excessivas de IL-6 são produzidas oralmente em pacientes com periodontite. O tocilizumab, anteriormente conhecido como anticorpo de receptor de mieloma (MRA), é um anticorpo monoclonal humanizado do receptor da IL-6 que inibe a dimerização do complexo IL-6 / IL-6R, evitando a sinalização. Assim, levando-se em consideração os avanços na patogêneses da doença periodontal, suas interações com doenças sistêmicas e as novas técnicas para modulação da resposta inflamatória do hospedeiro, este estudo tem como objetivo avaliar o papel do anticorpo do receptor da IL6 em ratos com AR induzida e expostos à doença periodontal induzida por ligadura. Serão utilizados 60 ratas Winstar Hannover, divididas em 6 grupos (n=10): Grupo Naive (controle negativo), Grupo DP (doença periodontal induzida por ligadura), Grupo AR (artrite reumatóide induzida por colágeno bovino, Grupo AR/DP (AR induzida por colágeno bovino e DP), Grupo AR-Sham/DP (Procedimento Sham no lugar da AR e DP induzida por ligadura), Grupo AR/DP/TCZ4 (AR induzida por colágeno bovino e DP, mas que receberão 4mg/kg de Tocilizumab). Os animais serão submetidos à eutanásia no 28º dia. Os desfechos serão avaliados através de análises histométrica, histoquímica, micro-tomográfica, de expressão gênica (PCR array) e imunoenzimática. Palavras Chave: Artrite Reumatóide, Expressão Gênica, Doença Periodontal, Modulação do hospedeiro, Citocinas

PUB 776

PUB 1600

A detecção precoce da doença não é apenas vital para reduzir a sua gravidade e&#10;prevenir complicações, mas também é essencial para aumentar a taxa de sucesso da&#10;terapia. A saliva tem sido extensamente estudada como uma ferramenta de diagnóstico&#10;potencial na última década, devido à sua facilidade e acessibilidade não invasiva,&#10;juntamente com a abundância de biomarcadores, como material genético e proteínas. A coleta de amostras de saliva é não invasiva, segura e barata. &#10;Edital CNPq Universal 2018

Desenvolvimento de aplicativo móvel para análise previsora de recobrimento radicular. Proposta PIPE/FAPESP #2019/22959-4 em análise.

Desenvolvimento de aplicativo para dispositivo móvel para auxiliar na avaliação do risco periodontal, sugerir abordagens clínicas e tempo de retorno do paciente. Processo INPI 918739420, concessão em 14 de julho de 2020.

PUB 1976

PUB 2396

PEEG 18524

A interleucina 6 (IL-6) é um estimulador potente da diferenciação dos osteoclastos e da&#10;reabsorção óssea (Irwin and Myrillas 1998). Quantidades excessivas de IL-6 são produzidas&#10;oralmente em pacientes com periodontite crônica, sendo expressas por muitas células na lesão&#10;periodontal, sugerindo papel imunológico no desenvolvimento de respostas imunológicas&#10;anormais e destruição tecidual na doença periodontal (Fujihashi et al. 1993).&#10;Assim, levando-se em consideração os avanços na patogêneses da doença periodontal e as&#10;novas técnicas para modulação da resposta inflamatória do hospedeiro. Este estudo tem como&#10;objetivo avaliar o papel do inibidor especifico da IL-6R em ratos expostos a doença periodontal&#10;induzida por ligadura.

O objetivo central deste estudo será avaliar o efeito da terapia periodontal, seja o tratamento periodontal intensivo em uma&#10;única sessão ou o tratamento periodontal convencional por quadrantes espaçados em diferentes sessões, com foco no potencial risco&#10;sistêmico que o paciente pode ser exposto após deixar o consultório. Utilizando-se de duas abordagens terapêuticas rotineiramente aplicadas&#10;na prática diária da periodontia, nosso desafio será mostrar, através do monitoramento de biomarcadores, o potencial risco sistêmico que o&#10;tratamento periodontal intensivo pode induzir.

A periodontite é uma doença inflamatória crônica, multifatorial, altamente prevalente na população, que compromete os tecidos de suporte dos dentes gerando sequelas de difícil resolução, mesmo com as mais modernas técnicas regenerativas. A terapia celular parece ser uma alternativa promissora e as células indiferenciadas do ligamento periodontal (PDLSC) e polpa dentária (DPSC) têm demonstrado grande potencial terapêutico. No entanto, estímulos adequados de biomodificadores pode aumentar o potencial de diferenciação celular. A proteína derivada da matriz do esmalte (EMD) é um tipo de biomodificador que promove a regeneração do periodonto através da formação de novo cemento, porém a sua associação com células frescas do ligamento periodontal e da polpa dentária ainda não foi explorada. Sabe-se que EMD pode estimular a diferenciação odontoblástica e osteoblástica das células da polpa dentária em cultura. Assim, o objetivo deste estudo é identificar marcadores de superfície para células mesenquimais indiferenciadas imediatamente após coleta destes tecidos, através de citometria de fluxo, e avaliar o potencial osteogênico do ligamento periodontal e da polpa dentária obtidos de dentes recém extraídos, assim como observar os efeitos da associação destes tecidos com EMD, através da análise da expressão gênica e protéica. Além disso, através de modelo experimental em calvária de ratos, será avaliado o potencial osteogênico destes tecidos associados a EMD.

PUB 1268

O objetivo do estudo é avaliar a remodelação das paredes do alvéolo após extração dentária com ou sem elevação de retalho após a utilização de biomateriais.

O propósito deste estudo será avaliar o efeito dos agentes probióticos Bifidobacterium animalis subsp. lactis HN019 e Bdellovibrios bacteriovorus HD100 na periodontite induzida por ligadura em ratos. Serão utilizados 96 ratos divididos em 2 grupos: C (controle) e DP (doença periodontal). Cada um desses 2 grupos será subdividido em 6 subgrupos, de acordo com a terapia probiótica recebida (Subgrupo HN019 - Bifidobacterium animalis subsp. Lactis; Subgrupo HD100 - Bdellovibrios bacteriovorus) e modo de administração (Tópico - T e Sistêmico - S). A DP será induzida por meio da colocação de ligaduras durante 14 dias nos primeiros molares inferiores de cada animal. Na administração sistêmica, as cepas probióticas serão adicionadas diariamente à água dos animais durante 28 dias. Na administração tópica, serão realizadas três aplicações orais das cepas probióticas. Todos os animais serão submetidos à eutanásia 28 dias após o início do experimento. Serão avaliados: i) microbiota bacteriana (checkerboard DNA-DNA hybridization e qRT-PCR; ii) expressão de citocinas pró e anti-inflamatórias, peptídeos antimicrobianos, proteínas transmembrânicas, receptores de superfície celular e fatores de transcrição por meio de imunoensaios enzimáticos (ELISA e LuminexTM xMAP®), reações imunoistoquímicas (estreptavidina-biotina-peroxidase) e análise da expressão gênica (qRT-PCR); iii) níveis de perda óssea alveolar e de inserção por meio de análise histomorfométrica; e iv) área, densidade mineral e volume ósseos (micro-CT). Os dados obtidos serão submetidos à análise estatística (p < 0,05).

A periodontite é uma doença multifatorial que envolve biofilmes bacterianos e a geração de respostas inflamatórias. Recentemente, tem sido estudada uma nova abordagem para o tratamento dessa doença, embasada no conceito de ?modulação da resposta do hospedeiro?. A acupuntura é uma modalidade de tratamento baseada na aplicação de agulhas em determinadas regiões do corpo, os acupontos. Depois de aplicadas, as agulhas podem ser estimuladas manualmente ou eletricamente. Foi demonstrado que a acupuntura possui efeito anti-inflamatório, por meio de ação via sistemas nervosos simpático, parassimpático e sistema endocanabinoide (SEC). Recentemente, descobriu-se que o SEC pode estar envolvido na inflamação e cicatrização periodontais. Não há estudos analisando a aplicação da acupuntura ou da eletroacupuntura (EA) na periodontite. O objetivo deste estudo é avaliar os efeitos da EA na perda óssea alveolar e na resposta inflamatória em um modelo de periodontite (DP) induzida por ligadura em ratos. Serão utilizados 72 ratos (Rattus norvegicus, albinus,Wistar) adultos machos, divididos em 3 grupos: DP, DP/EA e DP/EA-sham. No dia 1, uma ligadura será colocada na região cervical dos 1os molares inferiores direitos de todos os animais. Nos grupos DP/EA e DP/EA-sham, a EA ou EA-sham será iniciada no dia anterior ao da colocação da ligadura. A terapia será realizada durante 30 minutos, em dias alternados, nos pontos IG4, IG11, E36 e E44 para o grupo DP/EA, e em pontos sham, localizados 5 mm lateralmente e 5 mm caudalmente ao ponto VB30, para o grupo DP/EA-sham. Cada grupo de animais será dividido em três subgrupos para eutanásia aos 3, 11 e 15 dias após a colocação da ligadura (n=8). Análises microtomográfica e histomorfométrica serão realizadas. A atividade de mieloperoxidase será analisada por meio de espectrofotometria. Será realizada análise imunohistoquímica para verificação da presença dos mediadores inflamatórios IL-6 e IL-1&#61538; nos tecidos periodontais. Os dados obtidos ser

O estudo tem como objetivo monitorar os efeitos do tratamento e caracterizar a progressão da doença periodontal, em sítios ativos com perda de inserção progressiva, através da análise de expressão gênica e de proteínas presentes em diferentes amostras (saliva, fluido gengival e tecido gengival) do mesmo sítio/indivíduo. Trinta pacientes serão agrupados em dois grupos. Grupo controle (C; n=10) com pacientes saudáveis e grupo teste (DP; n=20) com diagnóstico de periodontite. Os pacientes selecionados serão submetidos ao exame periodontal completo, a coleta das amostras e ao tratamento periodontal. Após dois meses os pacientes serão reavaliados e nova coleta de amostras será realizada. Os parâmetros clínicos (biofilme, sangramento a sondagem, profundidade de sondagem e nível clínico de inserção) serão utilizados para diagnóstico do quadro clínico e, através do método de tolerância, para a identificação dos sítios ativos com perda de inserção progressiva. As amostras serão analisadas através da reação em cadeia da polimerase em tempo real (Real-time PCR) e do ensaio imunoenzimático (ELISA) para se determinar a expressão gênica e de proteínas de interesse, relacionadas aos processos inflamatório, imune-regulador, destruição de colágeno, perda óssea e cicatrização. Os dados serão agrupados e submetidos à análise estatística para verificar diferenças entre os grupos C e DP e entre os sítios ativos e inativos, e ainda estabelecer correlações com o perfil molecular e entre as diferentes amostras