Lucas Oliveira e Silva.

O presente projeto é composto de cinco experimentos com o objetivo de compreender como as concentrações circulantes de estradiol (E2) e progesterona (P4), moduladas exógena ou endogenamente, afetam a responsividade da hipófise e a liberação de LH e FSH, bem como compreender qual a influência da pulsatilidade de GnRH na via regulatória exercida por esses esteroides em fêmeas bovinas. O Exp. 1 avaliou a influência das concentrações circulantes de P4, promovidas pela inserção de um implante intravaginal, e do estágio de desenvolvimento do folículo (pré ou pós-desvio), no perfil de liberação de FSH e LH, e dinâmica ovariana de novilhas Nelore (n = 40) submetidas a uma estratégia de sincronização à base de E2 e P4. No Exp. 2, 16 vacas Holandesas foram pré-sincronizadas para estarem no sétimo dia do ciclo estral (com a presença de um folículo dominante e um corpo lúteo ativo), e submetidas a um pré-estímulo com cipionato de estradiol (CE) e/ou gonadotrofina coriônica equina (eCG) 2 dias antes da indução da ovulação com GnRH, para avaliação dos efeitos da elevação exógena ou endógena das concentrações de E2 na liberação de LH em resposta a um desafio com GnRH, sob alta concentração de P4. O Exp. 3 utilizou primíparas Nelore pós-parto (n = 50) como modelo experimental de supressão de pulsatilidade endógena de GnRH para avaliar os efeitos da manipulação exógena das concentrações de E2 e P4 na responsividade da hipófise e liberação de LH em resposta a um desafio com GnRH. No Exp. 4, novilhas Bos taurus (Hereford; n = 6), Bos indicus, (Brahman; n = 8) e cruzadas (F1 Braford; n = 7), previamente ovariectomizadas, foram submetidas a modelos experimentais de ausência, queda ou alta concentração de P4, por meio de manipulação exógena, para determinar o efeito das concentrações de P4 bem como do grupo genético na liberação de pulsos e pico de LH. No mesmo sentido, no Exp. 5, as novilhas Hereford e Brahman, sob altas concentrações de P4, foram submetidas a estímulos seriados com solução salina (controle), Kisspeptina ou GnRH i.v. a cada hora por 8 h para compreender o efeito da elevação da frequência de pulsos de GnRH, induzidas endógena ou exogenamente, na liberação de pulsos e pico de LH.

O crescimento folicular no ciclo estral das vacas se dá na forma de ondas e constitui-se das seguintes fases: 1) emergência da onda folicular (OF), na qual os folículos apresentam 4 mm de diâmetro; 2) desvio folicular (DF), com folículos medindo cerca de 8,5 mm de diâmetro nos taurinos e 6 a 7 mm nos zebuínos; 3) ovulação, na qual o folículo dominante atinge um diâmetro ideal e responde ao pico pré-ovulatório de LH. Estudos realizados especialmente em fêmeas da raça Holandês e taurinas de corte demonstraram efeito negativo da duração do período de dominância folicular na qualidade oocitária, desenvolvimento embrionário e fertilidade. Como pouco foi estudado sobre esse assunto em zebuínos, o presente estudo objetiva avaliar o impacto da idade do folículo ovulatório na fertilidade de vacas Nelore, além de comparar os efeitos na qualidade embrionária de vacas B. indicus e B. taurus. Para tanto, dois experimentos serão realizados, sendo que no primeiro, 600 vacas Nelore serão submetidas a um protocolo hormonal para pré-sincronização (D-13 ao D-6 = implante de 1 g de P4; benzoato de estradiol (BE) no D13); 0,5 mg de PGF2#945;, 300 UI de eCG e 0,5 mg de cipionato de estradiol (CE) no D-6; 20 g de acetato de buserelina (GnRH) e 0,5 mg de PGF2#945; no D-4. Após a pré-sincronização, os animais serão divididos em três tratamentos: FOL-5D: D0 = dispositivo de P4 (1 g); D2 = 0,5 mg de PGF2#945; e 2 mg de BE; D2,5 = 0,5 mg de PGF2#945;; D8 = retirada do dispositivo e 0,5 mg de PGF2#945;; D9,5 = 20 g de GnRH; D10 = IATF. FOL-7D: D0 = dispositivo de P4 (1 g) e 2 mg de BE. No D2 e D2,5 = 0,5 mg de PGF2#945;; D8 = retirada do dispositivo e 0,5 mg de PGF2#945;; D9,5 = 20 g de GnRH; D10 = IATF. O tratamento FOL-14d será semelhante ao anterior, contudo não será administrado 2,0 mg de BE no D0. No segundo experimento, de modo a testar a qualidade embrionária, 80 vacas (40 B. indicus ? Brahman e 40 B. taurus ? Aberdeen Angus) passarão por um protocolo de pré-sincronização: D-17 ao D-2 = implante de 1.38 g de P4; 0,5 mg de PGF2#945; no D-2; 200 g de gonadorelina (GnRH) e 0,5 mg de PGF2#945; no D0. Em seguida, receberão o seguinte protocolo, para gerar folículos persistentes: D4 = dispositivo de P4 (1,38 g, previamente utilizado); D6 e D6,5 = 0,5 mg de PGF2#945;; D12 = retirada do dispositivo e 0,5 mg de PGF2#945;; D13,5 = 200 g de GnRH; D14 = IATF. Sete dias após a IATF (D21), será realizada lavagem uterina não cirúrgica transcervical, para recuperação e avaliação dos embriões, além da administração de duas doses de PGF2#945;, com 12 horas de intervalo. A hipótese do experimento 1 é que tanto o período prolongado quanto o período curto de dominância folicular não afetarão a fertilidade de vacas Nelore. A hipótese do experimento 2 é que apenas vacas B. taurus terão comprometimento da qualidade embrionária ao ovularem folículos persistentes..

Experimentos serão realizados para auxiliar a esclarecer aspectos fisiológicos relacionados à ovulação e manutenção da gestação em fêmeas bovinas submetidas à inseminação artificial (IA) ou transferência de embriões (TE). Além disso, estudos avaliarão estratégias para elevar a eficiência e/ou simplificar o uso de protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) ou de produção de embriões. O projeto propõe a realização de 26 experimentos balanceados dentro de seis temas principais, sendo três sobre fisiologia reprodutiva (1 - Mecanismos envolvidos na manutenção da gestação; 2 - Alterações ovarianas, uterinas e endócrinas em resposta a diferentes tratamentos ou concentrações hormonais; 3 - Dinâmica ovariana e qualidade embrionária em protocolos de IATF) e outros três voltados às biotecnologias reprodutivas (4 - Eficiência reprodutiva em vacas e novilhas da raça Nelore submetidas a protocolos de IATF; 5 - Eficiência reprodutiva em vacas leiteiras submetidas a protocolos de IATF; 6 - Produção in vivo de embriões em vacas superovuladas inseminadas com espermatozoide sexado refrigerado), tanto em bovinos de corte quanto leiteiros. Nesses experimentos, aproximadamente 20.000 animais serão usados, onde haverá avaliações espermáticas do sêmen utilizado, exames ultrassonográficos ovarianos e uterinos transretais, colheitas de sangue para dosagens hormonais e lavados uterinos (quando pertinente) para estudar as dinâmicas e funções ovarianas e uterinas, qualidade embrionária e fertilidade.

O projeto desenvolvido teve o objetivo de estabelecer programas reprodutivos inovadores que aumentassem a fertilidade de vacas leiteiras de alta produção. O primeiro experimento visava implementar programas reprodutivos para a primeira IATF pós-parto. Para isso, estabeleceu-se uma pré-sincronização inovadora, à base de estradiol (E2) e progesterona (P4), usada antes do início de protocolos de IATF iniciados com GnRH. Além disso, foi comparado três estratégias de indução da ovulação ao final do protocolo, sendo uma com cipionato de E2 (CE), outra com GnRH e uma terceira combinando ambos hormônios. Os resultados demonstraram que o programa reprodutivo estabelecido foi eficiente em proporcionar uma adequada dinâmica luteal e concentrações de P4 durante o desenvolvimento folicular nos protocolos, e a fertilidade foi notável, principalmente em fazendas bem manejadas. As três estratégias de indução da ovulação promoveram fertilidade semelhantes aos 30 dias pós inseminação, no entanto, os resultados sugerem a necessidade da inclusão de CE no objetivo de diminuir a perda gestacional. No experimento 2, comparou-se 2 estratégias para iniciar o protocolo de ressincronização da IATF, uma com benzoato de E2 (BE) mais GnRH e uma somente com GnRH. Vacas começando o protocolo com BE apresentaram maior regressão do corpo lúteo durante o protocolo e menos vacas e número de corpo lúteo no momento da PGF dos protocolos, no entanto, a fertilidade não foi comprometida. Portanto, as estratégias de iniciar o protocolo de ressincronização promoveram fertilidade similares, porém, o uso de GnRH no início do protocolo, com alta taxa de ovulação promove boa fertilidade, e sua inclusão é necessária em protocolos iniciados com BE.

O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito da administração de complexos de vitaminas, minerais e aminoácidos na dinâmica folicular e na fertilidade de fêmeas Bos taurus taurus da raça Girolando submetidas ao protocolo de sincronização de ovulação. Os animais serão divididos em dois grupos (n = 50) semelhantes. O grupo tratamento receberá duas aplicações (D-20 e D0) de vitaminas, minerais e aminoácidos antes de ser submetido a um protocolo de sincronização da ovulação a base de estradiol e progesterona. O grupo controle será submetido simultaneamente ao protocolo de sincronização, no entanto, sem receber tratamento prévio. O protocolo de sincronização iniciará no D0, com administrações também no D8, D9 e finalmente a inseminação artificial no D10. O ECC de todos os animais será avaliado no D-20 e D0. Os animais serão submetidos a exames ultrassonográficos ao longo do protocolo (D-20, D0, D8, D10, D15 e D30) para avaliação da dinâmica folicular, taxa de crescimento do folículo dominante, taxa de ovulação e diagnóstico de gestação. A análise estatística será realizada com auxílio do software Statistical Analysis System for Windows SAS®. Será considerado como diferença significativa entre as variáveis testadas, o P <0,05. As variáveis contínuas serão expressas em média e erro padrão da média (média ± EPM) e as binomiais em porcentagem.

Análise do formato da cabeça do espermatozoide de touros Bos taurus indicus da raça Nelore pelo método de Descritores Hermônicos de Fourier e sua relação com a fertilidade do sêmen submetido à FIV.

Utilização do teste de penetração de espermatozoides em muco cervical bovino como método de avaliação de viabilidade e fertilidade do sêmen bovino.