Italo Delalibera Júnior.

Brazil is a world leader in using bio-inputs in crops. This has promoted the transition fromchemical-based agriculture to more sustainable agriculture. The proposal to create the INCT of Innovative BioInputs aims to meet an important demand for coordinated actions between ICTs and industry geared towards the development of biological solutions through innovative and disruptive technologies and the formation of public policies for the sector. The main problems to be investigated in this proposal are i) the limited diversity of commercially available microorganisms as options, ii) a large number of targets (pests, ticks, phytopathogens, and plant nematodes) without biological options in the market, iii) the need for improvementsin microorganism production technologies. We intend to act within the entire development pipeline up to the pre-commercial phase of bio-inputs aimed at the agricultural and veterinary markets for microbial pest control, biofertilization, and bioinoculation of agricultural crops. The country has an arsenal of natural enemy options, due to its rich biodiversity, that has not yet been explored. Prospection will focus on species/strains not used commercially, including those with the potential to promote plant growth, fixation or better utilization of nutrients, and induction of systemic resistance to pests, diseases, water and salt stress. The primary technological demand to be addressed is the transition from production by solid fermentation to liquidfermentation of filamentous fungi. This requires change to the entire development pipeline, including drying and formulation. New formulations will be developed depending on target bioecology, application technology, and climatic conditions. We will rely on research groups with strong international insertion and partner companies to advance these issues, prioritizing more sustainable and economically viable products.

Trata-se de um Centro de Engenharia financiado pela Fapesp e pela Koppert, junto a ESALQ-USP, e que vigorará por 5 anos com possibilidade de renovação por mais 5, num total de 10 anos, com recursos de 20 milhões de reais complementado com igual quantia considerado pela Universidade, incluindo instalações e expertise. O Centro receberá o nome de SPARCBio (São Paulo Advanced Research Center) e terá com sede o Departamento de Entomologia e Acarologia da ESALQ. Farão parte do Centro pesquisadores de Universidades e Institutos de Pesquisa nacionais e internacionais e contará com um total de 50 pessoas envolvendo 25 pesquisadores e 25 alunos de diferentes níveis, desde iniciação até pós-doutorado. Processo n. 2018/02317-5

A unidade EMBRAPII (Empresa Brasileira de Pesquisa e Inovação Industrial) ? ESALQ é um centro de inovação com grande capacidade técnica para resolver as demandas de empresas por soluções tecnológicas e inovações, com agilidade, flexibilidade e risco reduzido. A Unidade oferece parceria em projetos de pesquisa e inovação para o desenvolvimento de produtos à base de microrganismos, parasitoides e predadores, substâncias naturais extraídas de plantas ou microrganismos, feromônios e processos biotecnológicos para o manejo de pragas, nematoides e doenças visando uma agricultura mais sustentável.

Neste projeto, pretende-se identificar através de transcriptoma os genes expressos durante a penetração de blastosporos de M. anisopliae pela cutícula da lagarta-da-soja (Anticarsia gemmatalis) para entender as informações biológicas requeridas pelo blastosporo que possam explicar a sua virulência. Comparativamente será caracterizada a infecção por conídios de M. anisopliae e por conídios e blastosporos de outra espécie de fungo, M. rileyi, que naturalmente produz estas estruturas em meio sólido, mas cuja infectividade ainda não foi comprovada. É possível produzir grandes quantidades de blastosporos por fermentação líquida num curto intervalo de tempo (< 4 dias), em pequeno espaço físico e com baixa dependência de mão-de-obra em relação ao método de fermentação sólida, com qualidade padronizada semelhante à forma que se faz com leveduras. Os genes responsáveis e os fatores potencialmente indutores do crescimento metacíclico leveduriforme ainda não são conhecidos e serão investigados neste projeto. A comparação destes genes em relação àqueles expressos somente durante o crescimento filamentoso e com genes expressos em leveduras poderá resultar em melhorias do sistema de produção e preparação para o stress da secagem e armazenamento desses fungos. Recentemente descobrimos que blastosporos produzidos em meio com alta osmolaridade embora sejam menores, são mais virulentos às pragas do que blastosporos produzidos sob baixo stress osmótico e do que conídios. Análises comparativas do transcriptoma de M. anisopliae e M. rileyi poderão resultar na identificação de genes superexpressos durante a penetração destes blastosporos em comparação com conídios que expliquem a maior virulência destas&#10;estruturas. No presente projeto, propomos ainda estudar estratégias de produção e formulação de blastosporos de Metarhizium com bioatividade contra cigarrinha-das-raizes, Mahanarva fimbriolata, e contra o carrapato do boi, Riphicephalus microplus. Metarhizium anisopliae é o fungo entomopatogênico mais utilizado no país, especialmente para o controle de cigarrinhas em cana-de-açúcar. Por outro lado, o carrapato do boi causa danos econômicos da ordem de dois bilhões de dólares no Brasil e não existem opções biológicas de controle. O carrapato-do-boi e a cigarrinha-das-raízes compartilham do mesmo habitat que são as pastagens e poderiam ser controlados simultaneamente com M. anisopliae. Recentemente, quatro novas espécies de Metarhzium foram identificadas no Brasil e ainda não descritas. Isolados de algumas destas espécies apresentam grande potencial e foram selecionados para também serem prospectadas quanto à produção em meio líquido e bioatividade contra as pragas.

The project combine expertise in the area of biological processes (pest biology, crop protection and pesticide risk), social processes (farm profits, consumer demand and policy analysis), and technologies to contribute to sustainable agriculture (new crop protection technologies). The project has a value chain approach as it studies tools and instruments for increased IPM adoption by farmers, increased availability of existing IPM-tools and the role of IPM for wholesalers, retailers and consumers. We will deliver hands on innovative approaches and tools that should lead to an environmentally, societal and economically sustainable increase in food production. This is within the following themes of the call: 1) Increased production 2) Sustainable intensification of profitability and 3) Increased innovation/ value creation through improved management.

IMBICONT tem o objetivo de fornecer soluções futuras para o Manejo Integrado de Pragas sustentável (IPM) em frutas e morango por uma série de estudos sobre as opções de controle biológico no Estado de São Paulo, Brasil, e na Dinamarca. IMBICONT é interdisciplinar desde que a pesquisa envolve áreas ciências relacionadas a biologia molecular, entomologia aplicada, microbiologia, controle de pragas, tecnologia de aplicação, e micro-economia. Estreita colaboração entre a equipe brasileira e a equipe dinamarquesa garante que a tecnologia e métodos, entendimento conceitual, bem como resultados específicos serão trocados. Liderança conjunta de todos os três (WP) pacotes de trabalho e supervisão conjunta de alunos de doutoramento irá contribuir para alcançar essas metas. Três culturas foram escolhidas: morango nos dois países, além de citrus no Brasil e maçã na Dinamarca. Dois grupos de agentes de biocontrole foram selecionados: fungos patogênicos e insetos predadores. Nosso objetivo é explorar a biodiversidade não conhecida de entomopatógenos. Além disso, novas estratégias para melhorar as interações benéficas com inimigos naturais serão desenvolvidas. Novos métodos de produção, formulação e técnicas de aplicação também serão desenvolvidas para fungos entomopatogênicos inexplorado. Finalmente, uma avaliação microeconômica do valor do controle biológico será realizado em frutas e morango. Atividades conjuntas, incluindo workshops e disciplinas de doutorado estão sendo planejadas. Além dos aspectos aplicados, IMBICONT também irá fornecer novos dados significativos sobre a biodiversidade, coevolução e interações entre populações.

O sucesso do uso de fungos entomopatogênicos, especialmente os do complexo Metarhizium anisopliae para o controle de pragas no Brasil é representado pelo grande volume de produção e comercialização destes agentes de controle por várias empresas de biopesticidas privadas e laboratórios ligados às usinas de cana-de-açúcar que produzem os fungos para consumo próprio.&#10;A produção atual de fungos entomopatogênicos no Brasil é de aproximadamente 3.000 toneladas de massa fúngica (fungo + substrato) por ano, sendo este volume utilizado mais de 600.000 ha, principalmente para o controle das cigarrinhas da cana-de-açúcar (Alves et al., 2008). Um dos problemas enfrentados na utilização destes agentes de controle microbiano é a inconstância dos resultados obtidos quanto à eficiência de controle e as dificuldades na produção.&#10;Há alguns anos se tem conhecimento de que os fungos entomopatogênicos são hospedeiros de vírus de RNAfd (RNA de fita dupla), entretanto, somente nos últimos anos com a evolução de técnicas moleculares esta área do conhecimento tem avançado. Estudos recentes têm demonstrado que a presença de RNAfd em algumas espécies de fungos entomopatogênicos como Beauveria bassiana, Isaria fumosoroseus e M. anisopliae resultam em alterações morfofisiológicas como redução na produção de conídios, redução do crescimento micelial, alteração de coloração e, em alguns casos, redução da virulência do entomopatógeno (Melzer & Bidochka, 1998; Tiago et al., 2004; Macedo, 2005; Schrank et al., 1992; Giménez-Pecci et al., 2002). &#10;Poucos estudos sobre os efeitos destes vírus em M. anisopliae foram realizados no Brasil, especialmente sobre a importância destas viroses em isolados cultivados continuamente em sistemas de produção comercial. Devido à importância que estas viroses podem representar na produção e na eficiência de M. anisopliae esta proposta tem como objetivos principais a realização de pesquisas básicas sobre a riqueza dos vírus de RNAfd em isolados desta espécie de fungos, bem como, as interações dos vírus com o fungo e a elaboração de um protocolo de eliminação destas viroses nos sistemas de produção do fungo, caso sejam detectados efeitos negativos.

a cítricos, se realiza principalmente mediante agroquímicos, no existiendo una oferta de bioinsumos para este fin. Esto impone una dificultad para quienes desarrollan algún tipo de agricultura limpia, que restringe el uso de químicos, privilegiando el uso de bioinsumos. Para abordar este problema, el proyecto tiene por objetivo la elaboración de un micoinsecticida comercial para el control de conchuela negra, en base a cepas de Hongos Entomopatógenos (HEP) locales (autóctonas y/o naturalizadas). Para ello se recolectará y aislará material local desde huertos con presencia de la plaga y se evaluará su virulencia y su adecuación a los requisitos comerciales como potencial producto micoinsecticida. Se transferirán metodologías de trabajo desde el Laboratorio de Patología y Control Microbiano de la Escuela Superior de Agricultura ?Luiz de Queiroz? (Universidad de Sao Paulo), entidad que posee larga experiencia en la producción de formulados HEP, especialmente para plagas de cítricos. Se postula que la recolección de material autóctono arrojará aislamientos con características apropiadas a la producción de un micoinsecticida en cuanto a virulencia sobre la conchuela negra y adecuación a la manipulación tecnológica, además con la ventaja de adaptabilidad al clima de la zona centro-norte del país (donde se concentra la superficie nacional de cítricos). Estos aislamientos, una vez probados bajo condiciones controladas y a campo, servirán de base para el desarrollo de formulados comerciales, experimentando diversos tipos de formulaciones, y combinaciones con aditivos inertes. La metodología contemplará la recolección de material autóctono, transferencia de metodologías, evaluación de los aislamientos, selección, evaluación de aditivos y validación en ambientes diversos de la zona centro-norte de Chile.

O presente projeto objetiva avaliar a segurança ambiental das microalgas, cepas S8695 E S8885, geneticamente modificadas para produção de diesel. A avaliação de risco será feita levando em consideração a natureza da transformação e a escala das operações e usos do MGM. Os estudos serão elaborados considerando que o MGM será produzido em sistema de contenção e o efluente do processo de produção será liberado no ambiente após tratamento de degradação. Os experimentos delineados objetivam avaliar o risco de liberação não intencional do organismo vivo no ambiente seja na água ou no solo a partir do sistema de contenção. Esse risco leva em consideração a capacidade de sobrevivência, multiplicação e dispersão do MGM no ambiente. Serão analisados os efeitos potenciais do MGM e do efluente nas interações de microrganismos e da mesofauna e macrofanuna do solo.

O presente projeto objetiva avaliar o risco ambiental da cepa Y5056 de Saccharomyces cerevisae geneticamente modificada para produção de diesel e do uso do efluente (vinhaça) em plantios de cana-de-açúcar.

A identificação de isolados promissores é a primeira etapa no desenvolvimento de um produto microbiano a base de fungos. Dentre as características desejáveis de um isolado as mais importantes são alta virulência e alta produção em meio de cultura, para os fungos entomopatogênicos, e a produtividade e agressividade para os fungos antagonista de fitopatógenos. Desta forma, a seleção de isolados é essencial no desenvolvimento de uma formulação que seja altamente efetiva em condições de campo. O presente contrato tem por objeto a seleção de isolados fúngicos para o controle de pragas e doenças baseada no rendimento produtivo em meio de cultura e da potência na mortalidade de Tenebrio molitor (M. anisopliae e B. bassiana) ou no antagonismo de Sclerotinea e Rizoctonia (Trichoderma).

Pesquisa em redes temáticas para ampliação do conhecimento sobre a biota, o papel funcional, uso e conservação da biodiversidade Brasileira.

O projeto teve o objetivo desenvolver um bioproduto à base de fungo entomopatogênico para controle de Diaphorina citri. Os estudos resultaram no registro dos produtos Challenger e Octane a base do fungo Isaria fumosorosea ESALQ1296.

Várias espécies de ácaros tetraniquídeos, em especial o ácaro rajado, Tetranychus urticae Koch, são pragas importantes de plantas ornamentais em cultivos protegidos e de muitas espécies de culturas anuais e perenes. Em diversas partes do mundo o controle biológico de ácaros é uma realidade, principalmente no controle de tetraniquídeos em estufas. Uma alternativa para o controle de ácaros é o uso do fungo Neozygites floridana. Várias metodologias foram desenvolvidas nos últimos anos por Delalibera e colaboradores abrindo novas perspectivas para os estudos com espécies de Neozygites. Entretanto, muitos estudos são ainda necessários para demonstrar a viabilidade técnica da utilização de N. floridana em programas de controle biológico e as mais importantes serão abordados no presente projeto de pesquisa. Dentre estas, é fundamental caracterizar as populações destes fungos através da utilização de técnicas moleculares para explicar a especificidade de hospedeiros e diferenças fisiológicas entre isolados provenientes de diferentes tetraniquídeos. Será determinada a variabilidade genética dos isolados de N. floridana através do sequenciamento da região 18S do rRNA e serão testados outros marcadores moleculares para estes fungos. Os estudos propostos objetivam ainda viabilizar a produção in vitro de isolados de N. floridana, além de criar uma metodologia viável para a produção massal in vivo do fungo para uso em controle biológico de T. urticae. Os isolados que hoje são preservados na forma de ácaros mumificados (in vivo) poderão ser mantidos in vitro em temperaturas ultra-baixas para preservação deste patrimônio genético. A estratégia a ser usada neste projeto para produção in vivo será adaptar o sistema de criação do ácaro rajado que vem sendo utilizado na empresa Promip® Manejo Integrado de Pragas (para produção de ácaros predadores) para produzir ácaros mumificados por N. floridana e determinar a viabilidade da inoculação do fungo em plantios comerciais.

The use of high tunnels in strawberry production solves a majority of the problems with plant pathogenic fungi, with a major exception of powdery mildew. Tunnels often increases the problems with spider mites and certain other pests, however, and this may result in increased use of acaricides and insecticides. The interactions between pest insects and mites, plant pathogenic fungi and natural enemies are numerous and complex, and therefore often studied separately. To understand how we can manage a complex plant protection problem in a specific crop, a system approach is needed. The two-spotted spider mite (Tetranychus urticae) and powdery mildew (Podosphaera macularis) are two of the most serious problems in strawberry production in Norway and internationally. The mite pathogenic fungus Neozygites floridana and the phytoseiid predatory mites Phytoseiulus persimilis and Neoseiulus californicus are important natural enemies of T. urticae. Further, T. urticae may also be affected by powdery mildew directly or indirectly. In this project we will study the interactions of these organisms and how they can be manipulated in a way that results in less problems powdery mildew and T. urticae. The focus will be on Norwegian growing conditions, but through our Brazilian co-workers we will also benefit from the experience they get from a similar system under different climatic conditions. The project also aims to develop a large-scale production to market N. floridana as a biocontrol agent through our collaboration with Koppert Biological Systems in The Netherlands.

O presente projeto objetivava avaliar a segurança ambiental da levedura, Saccharomyces cereviseae, geneticamente modificada (MGM) para produção de diesel. A análise de risco é feita levando em consideração a natureza da transformação e a escala das operações e usos do MGM. Os estudos foram elaborados considerando que o MGM será produzido em sistema de contenção e o efluente do processo de produção será liberado no ambiente após tratamento de degradação. Os experimentos delineados objetivam avaliar o risco de liberação não intencional do organismo vivo no ambiente seja na água ou no solo a partir do sistema de contenção. Este risco leva em consideração a capacidade de sobrevivência, multiplicação e dispersão do MGM no ambiente. Serão analisados os efeitos potenciais do MGM e do efluente nas interações de microrganismos e da meso e macrofauna do solo.

O tubo digestivo é a maior região de contato dos insetos com o meio externo e por isso é alvo de várias estratégias de controle de pragas como por exemplo os inseticidas químicos e microbianos e o melhoramento genético de plantas. Os microrganismos presentes no tubo digestivo compreendem uma grande parte da biomassa do inseto e desempenham importantes funções na biologia destes organismos como nutrição, detoxificação de compostos de defesas das plantas, prevenção da entrada de patógenos e a produção de semioquimicos importantes nas interações entre insetos. O primeiro passo para entender as funções da microbiota do trato digestivo na biologia dos insetos consiste na identificação dos membros destas comunidades. Neste trabalho, os microrganismos presentes no tubo digestivo de diferentes instares larvais da broca da cana-de-açúcar, Diatraea saccharalis e da lagarta-do-cartucho-do-milho, Spodoptera frugiperda, serão identificados usando métodos microbiológicos tradicionais e técnicas moleculares que independem do cultivo dos microrganismos. As comunidades de bactérias serão caracterizadas por DGGE (Denaturating Gel Gradiente Electrophoresis) e seqüênciamento de biblioteca de clones de genes da região 16S ou 18S do RNA ribossômico. Testes enzimáticos serão conduzidos para identificar microrganismos decompositores de celulose e o seu papel na nutrição dos insetos. Um melhor conhecimento das interações entre estes insetos e os microrganismos presentes em seu trato digestivo pode resultar em novas estratégias de controle. Os resultados gerados nesta etapa do projeto serão vitais para numa segunda fase identificar aspectos da funcionalidade da microbiota e aplicações dos microrganismos isolados e dos conhecimentos gerados nesta primeira etapa do projeto.

T. evansi era considerado praga de tomateiro no Brasil, mas não tem tido a mesma importância neste cultivo. As observações de que T. evansi é raramente uma praga no Brasil tem levado cientistas a sugerir que esta seja a área de origem da espécie. A importância dos inimigos naturais na regulação de T. evansi no Brasil ainda não foi quantificada, mas é possível que P. longipes e N. floridana tenha papel fundamental. Explorações extensivas são necessárias para determinar se outros inimigos naturais podem estar associados a este ácaro no Brasil. A proposta deste projeto é identificar novos strains de N. floridana e viabilizar a introdução deste patógeno para o controle de T. evansi reduzindo desta forma as perdas causadas e reduzindo o uso de acaricidas.

Uma das alterações genéticas com maior aplicação atualmente é a inserção de genes da bactéria Bacillus thuringiensis que produzem toxinas inseticidas em plantas. Espera-se com os estudos propostos neste projeto abordar importantes questões científicas sobre o impacto do algodão geneticamente modificado para resistência a insetos (algodão Bt) em ácaros predadores generalistas e na diversidade de bactérias e ácaros do solo. Estes grupos bioindicadores foram selecionados pelas funções que exercem no agroecossistema, pelos riscos potenciais elevados que apresentam devido à exposição direta a estas toxinas e por serem organismos pouco representados nas análises de impacto de transgênicos.

The gut bacterial communities of the southern pine beetle, Dendroctonus frontalis Zimmermann, and pine engraver, Ips pini (Say), were characterized by molecular methods and culture-dependent methods. 16S rRNA genes were directly amplified from DNA extracted from the guts and cloned, and the clones were compared by sequence analysis. The diversity of phylotypes were compared across all stages and between insect species

The gut bacterial communities of the asian longhorned beetle, Anoplophora glabripennis (Motschulsky) and linden borer, Saperda vestita Say, were characterized by molecular methods. Five bacterial 16S rRNA gene libraries from larvae of each insect species were generated using bacterial primers directly from total genomic DNA extracted from the guts. Cloned bacterial DNA was compared by sequencing. Cellulose digestion by the gut microbial community of larvae and adults of the longhorned beetle, Saperda vestita was assessed by solubilization of filter paper in selective liquid medium. This is the first description and enumeration of the gut microbial community of S. vestita and A. glabripennis and the first documentation of association between cellulolytic microbes and a wood boring beetle

Desenvolvimento de sondas moleculares para identificação de isolados do fungo N. tanajoae provenientes do Brasil e liberados na África

Isolados do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana foram selecionados em laboratório para serem usados no controle biológico do moleque da baneira Cosmopolites sordidus. Os isolados mais eficientes foram testados em plantios de bananeiras nas regiões do recôncavo e sul da bahia

Subprojeto de pesquisa visando fornecer subsídios ao programa de melhoramento de mandioca da Embrapa Mandioca e Fruticultura Tropical. Variedades de mandioca foram testadas quanto a resistência ao ácaro verde em condições de sequeiro e irrigada em Petrolina-PE