Nathalie Cella.

Maspina é uma proteína ubíqua e muito abundante na células. Para investigar sua função biológica e seu mecanismo molecular, identificamos ligantes de maspina. Através de análise proteômico, verificamos que maspina pode ter um papel na resposta ao estresse celular e na comunicação intercelular. Esse projeto está testando essas hipóteses.

Bioimpressão 3D é uma abordagem emergente para a produção de modelos organotípicos que
recapitulam a interação entre células e célula-matriz in vivo. A engenharia tecidual recria modelos
3D de órgãos saudáveis ou de doenças humanas que podem ser aplicados em testes de segurança e eficácia de medicamentos, cosméticos e em transplantes com a bioimpressão de órgãos. Neste projeto, desenvolveremos modelos de pele, tumor de mama e pulmão que contribuirão na substituição do uso de animais na pesquisa.

Nesse projeto investigamos as vias de sinalização que regulam a fosforilação de maspina e a sua translocação para o núcleo. Além disso, investigamos a maquinaria de transporte nuclear e um possível sinal de localização nuclear na molécula envolvidos nesse transporte. Esse estudo está sendo conduzido em linhagens celulares através da expressão de diferentes mutantes e inibidores farmacológicos de vias específicas. Paralelamente, estamos investigando a função biológica de maspina na glândula mamária murina. Nessa abordagem, a expressão de maspina em células epiteliais mamárias primárias é silenciada através de shRNA. Essas células são então transplantadas no fatpad de um animal receptor e o desenvolvimento e morfogênese da glândula está sendo avaliado em whole mounts e cortes histológicos através de microscopia.

As vias de sinalização celular modulam os processos celulares responsáveis pelo crescimento, proliferação, migração, diferenciação e morte celular. Muitas das moléculas que regulam etapas-chave nessas vias de sinalização têm suas funções comprometidas nas neoplasias. Estamos investigando o mecanismo molecular responsável pelas atividades biológicas de maspina, um gene supressor de tumor e metástase cujo mecanismo molecular é desconhecido. Estudos recentes indicam que a atividade supressora de tumor de maspina só é observada quando está no núcleo, mas não quando está no citoplasma. Utilizando modelos in vitro, observamos que tanto a localização subcelular quanto os níveis proteicos de maspina na célula estão associados aos seus níveis de fosforilação. Os projetos em andamento têm os seguintes objetivos: (1) determinar o sinal de localização nuclear de maspina; (2) determinar as quinases e fosfatases que regulam a fosforilação de maspina e (3) investigar alterações desses componentes nos tumores de mama. Ainda, estamos estabelecendo um modelo para estudar o desenvolvimento e a transformação maligna do tecido mamário in vivo, em camundongos. Neste modelo o epitélio mamário endógeno de fêmeas pré-púberes é cirurgicamente removido e substituído por células geneticamente modificadas. Assim, o papel da modificação introduzida será investigado no desenvolvimento e na transformação maligna.