Gabriela Silva Bisson.

Portadores do câncer colorretal (CCR) comumente apresentam níveis elevados de depressão e ansiedade. Estas comorbidades interferem negativamente na adesão ao tratamento anti-neoplásico, na qualidade de vida e sobrevida a longo prazo desses sujeitos. Apesar das evidências de que as citocinas estejam envolvidas na fisiopatologia da depressão e ansiedade em pacientes com câncer, tais relações ainda são pouco compreendidas. No presente trabalho, utilizando modelo experimental de carcinogênese colorretal induzida por MNNG, estudaremos a influência de citocinas sobre a atividade cerebral, identificada pela imunomarcação da proteína sinalizadora de atividade neuronal c-Fos em regiões encefálicas relacionadas com a manifestação da depressão e ansiedade (amígdala, cortex pré-frontal e hipocampo). Alterações comportamentais serão avaliadas pelos testes de preferência por sacarose, labirinto em cruz elevado e nado forçado e a produção intestinal e cerebral das citocinas IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, TGF-beta e TNFalfa, além da quimiocina CX3CL1 (fractalcina), serão mensuradas por ELISA. Para avaliar o potencial prognóstico destas moléculas na identificação do risco de manifestação de alterações psicológicas, as análises serão realizadas 8 semanas (tumorigênese inicial) e 20 semanas (tumorigênese avançada) após a iniciação tumoral. Um melhor entendimento do funcionamento do sistema imune na patogênese da ansiedade e depressão em pacientes oncológicos permitirá a elaboração de intervenções inovadoras que levem à uma melhoria da qualidade de vida e sobrevida dos pacientes portadores de CCR.

O câncer de mama é o tipo de câncer mais comum em mulheres no Brasil e no mundo. Pacientes com câncer de mama frequentemente apresentam alterada resposta inflamatória após desafios imunes, bem como elevada prevalência de comorbidades psiquiátricas e disfunções cognitivas. As alterações na resposta imune de sobreviventes de câncer podem estar relacionadas aos tratamentos antitumoral, estresse associado ao câncer ou mesmo à fisiologia tumoral, uma vez que o processo inflamatório subjacente ao desenvolvimento tumoral, além de influenciar todas as etapas da carcinogênese, pode contribuir para o surgimento destes transtornos. Modelos animais de câncer indicam que os tumores por si só são suficientes para exacerbar as respostas neuroinflamatórias após um desafio imunológico. No entanto, tumores primários geralmente não estão presentes em sobreviventes de câncer, e as consequências comportamentais destas respostas alteradas permanecem desconhecidas. Respostas inflamatórias adequadas no cérebro são necessárias para comportamentos doentios adaptativos, incluindo fadiga, anorexia e febre. Portanto, no presente trabalho, utilizando modelo murino, foi estudada se a indução de tumor mamário exacerba respostas inflamatórias (tanto sistêmica quanto em estruturas cerebrais envolvidas com o controle da resposta ao estresse) e a extensão em que a ressecção do tumor influencia estas respostas. Ainda, avaliamos o comportamento doentio após desafio com lipopolissacarídeo (LPS). Por fim, investigamos se as alterações neuroimunoendócrinas induzidas por tumores influenciam parâmetros cognitivos, bem como o comportamento do tipo ansioso em repouso.
Projeto desenvolvido por Jéssica Cristina dos Santos sob supervisão da Dra Leah Pyter da Ohio State University.

Fadiga relacionada ao câncer tem sido descrita como o sintoma mais prevalente em crianças e adolescentes com câncer, com maior nível experimentado por aqueles submetidos a tratamento quimioterápico. Ainda, estudos têm apontado a fadiga como resposta adaptativa ao estresse, o qual pode ser gerado pelo próprio processo de hospitalização, somado ao da terapêutica oncológica, influenciando negativamente o sistema imune por vias psiconeuroimunoendócrinas. Para esses pacientes, outras modalidades de tratamento, tais como intervenções não farmacológicas podem ser necessárias para dirimir os efeitos da hospitalização e do tratamento. Este estudo tem por objetivo investigar correlações entre biomarcadores na saliva (cortisol, α-amilase, citocinas, melatonina e metaloproteinase de matriz) e a resposta à fadiga e ao estresse psicológico em crianças e adolescentes com câncer hospitalizados e em tratamento quimioterápico submetidos à intervenção dos clowns. Trata-se de um quase experimento tipo antes-depois, com grupo controle não equivalente que será conduzido na Oncopediatria do HCFMRP/USP e nos Núcleos de Saúde da Família de Ribeirão Preto, vinculados a USP. A amostra dos participantes de pesquisa seguirá uma proporção de casos e controles de 1:1, pareados por sexo e idade. A intervenção a ser avaliada será realizada por estudantes integrantes da Cia do Riso. O grupo experimental será composto por crianças e adolescentes de 2 a 18 anos de idade hospitalizados e com câncer e o grupo controle por crianças e adolescentes saudáveis da comunidade. Utilizaremos dois instrumentos, a Escala de Stress Infantil e a PedsQL-Escala Multidimensional da Fadiga. Cada criança e adolescente do grupo experimental doará 8 amostras de saliva (2ml), em dois dias distintos. Já as crianças do grupo controle doarão 4 amostras de saliva (2ml) em um dia (baseline). A análise das concentrações dos biomarcadores será determinada pela técnica de ELISA e CBA. A análise da medida da produção diária total dos biomarcadores será realizada pelo método da Área sob a Curva. Análises estatísticas descritivas e associações de análises bivariadas e multivariadas serão realizadas utilizando-se os programas SPSS v.17 e GraphPad Prism, v.5.

O câncer de mama é o tipo mais comum entre as mulheres na maioria dos países desenvolvidos e principal causa de mortalidade feminina relacionada ao câncer em todo o mundo. 
Há evidências que a prática regular de atividade física de intensidade moderada a vigorosa reduz o risco de desenvolver câncer de mama, além de melhorar a sobrevida após o diagnóstico da doença. No entanto, as vias metabólicas e moleculares envolvidas nessa relação entre a atividade física e carcinogênese ainda permanecem obscuras. Portanto, observa-se uma lacuna quanto ao entendimento da influência do exercício físico na tumorigênese mamária e dos mecanismos moleculares subjacentes. Não obstante, os benefícios da prática regular de exercícios físicos são cada vez mais alicerçados na literatura, e ainda que em número modesto, as investigações acerca das adaptações que ocorrem no organismo sob influência do exercício tem revelado vias de sinalização e moléculas reguladoras que coordenam as respostas adaptativas ao esforço físico. Na presente proposta de investigação, utilizando modelo experimental investigaremos a influência do exercício físico moderado na tumorigênese mamária estudando parâmetros imunológicos, bem como a atividade e dinâmica mitocondrial de células tumorais. O melhor entendimento destes aspectos mostra-se fundamental para a identificação de novas possibilidades de intervenção na tumorigênese da mama.

O câncer associado à colite (CAC - colitis-associated cancer) é um subtipo de câncer colorretal (CRC) precedido por doenças inflamatórias do intestino (IBD - inflammatory bowel disease). Pacientes com IBDs apresentam risco aumentado para o desenvolvimento de câncer colorretal, o que evidencia a complexa conexão entre inflamação e câncer. A microbiota intestinal possui papel central na patogênese de IBD. Há evidente aumento no interesse em investigar maneiras de contornar alterações da resposta imunitária do hospedeiro à disbiose microbiana utilizando suplementos à base de microrganismos vivos. Isso ocorre uma vez que estudos com probióticos têm demonstrado o seu grande potencial imunomodulador. A administração de probióticos tem sido associada à manutenção de períodos prolongados de remissão da doença e à ausência de resistência ao tratamento. No presente trabalho, utilizamos modelo experimental de câncer colorretal associado à inflamação e de colite para investigar os efeitos do probiótico Lactobacillus bulgaricus sobre a carcinogênese e a inflamação intestinal.

O câncer colorretal (CCR) é uma das principais causas de mortalidade por câncer no mundo. Depressão e ansiedade são os distúrbios psicológicos mais prevalentes em pacientes com CCR. A ocorrência destes sintomas interfere negativamente na adesão ao tratamento do câncer, na qualidade de vida dos pacientes e aumenta o ônus dos serviços de saúde. O manejo adequado desses distúrbios é, portanto, uma questão importante da prática de enfermagem oncológica. As evidências sugestivas de um papel de citocinas na fisiopatologia da depressão, combinadas com a presença de altos níveis dessas moléculas em pacientes com câncer sugerem que estas podem desempenhar um papel importante na etiologia e na fenomenologia da depressão e ansiedade nesses sujeitos. A compreensão holística desses fatores permitirá a elaboração de intervenções de enfermagem que levem a uma melhoria da qualidade de vida e sobrevida global dos pacientes com CCR. O presente estudo tem como objetivo investigar se existe uma correlação entre ansiedade, depressão e níveis séricos de citocinas de pacientes com câncer colorretal em diferentes momentos de tratamento quimioterápico adjuvante ou paliativo. Para tanto, serão convidados a participar do estudo pacientes adultos submetidos à ressecção cirúrgica e em início de tratamento quimioterápico adjuvante ou paliativo com capecitabina e oxaliplatina, em atendimento no Serviço de Oncologia Clínica do HCFMRP/USP. A depressão e ansiedade serão analizadas utilizando a escala HADS (Hospital Anxiety and Depression Scale) e os níveis séricos das citocinas IL-1, IL-6, INF-&#947;, TNF-&#945;, TGF-&#946;, IL-10 e fractalcina (CX3C) serão mensurados por ELISA. A comparação entre os grupos amostrais será realizada pelos testes ANOVA-F e Kruskal-Wallis, sendo considerados estatisticamente significantes os valores de p < 0,05.

Estudos têm demonstrado efeitos anti-tumorais promissores da fosfoetanolamina, um alquil fosfatado sintético, mas os mecanismos pelos quais eles ocorrem são desconhecidos. Utilizaremos modelos experimentais de tumores para estudarmos a atividade da fosfoetanolamina no processo oncogênico, avaliando particularmente como a molécula afeta elementos do microambiente tumoral e modula a resposta imune. O delineamento dos mecanismos moleculares envolvidos na progressão da oncogênese é essencial para que se interfira de maneira efetiva nesse processo.

O câncer colorretal (CRC) é altamente prevalente e está associado com uma significativa morbi-mortalidade. Dentre os fatores de risco para esta doença, destaca-se a inflamação crônica. Embora as associações entre inflamação e câncer sejam amplamente aceitas, os mecanismos através dos quais a inflamação promove o desenvolvimento do câncer são pouco compreendidos. As modificações da glicosilação celular são alterações fenotípicas comuns de neoplasias malignas. Alterações semelhantes ocorrem no epitélio colônico no CCR, em pólipos adenomatosos e em condições inflamatórias. Elas incluem o aumento da expressão de antígenos como o TF. Lectinas podem interagir com glicanas aberrantes de células tumorais e interferir na biologia dessas células. Essas moléculas têm sido adotadas em terapias alternativas de tumores na Europa. A jacalina é uma lectina de A. integrifolia que reconhece antígenos TF e que apresenta efeito anti-proliferativo sobre células de câncer de cólon humanas. No presente trabalho, utilizando modelos experimentais de carcinogênese de cólon, associada ou não à inflamação, estudaremos a atividade de jacalina nas etapas iniciais e tardias do desenvolvimento tumoral. Investigaremos o balanço entre proliferação e morte de células epiteliais colônicas, a expressão/ativação de COX-2, NF-kB e STAT3 por células do estroma e transformadas, a presença de infiltrado de células inflamatórias em associação às lesões pré-neoplásicas e ao tumor e a produção intestinal de citocinas pró- e anti-inflamatórias durante o processo carcinogênico. Os conhecimentos gerados contribuirão para o delineamento dos fatores envolvidos na progressão da tumorigênese colorretal, vital para a identificação de novos alvos terapêuticos.

Macrófagos e neutrófilos associados a tumores (TAMs/TANs) exercem papéis complexos e ambíguos no processo de carcinogênese, uma vez que os fenótipos dessas células podem ser modulados pelo microambiente tumoral. Diversos fatores estão envolvidos nas interações existentes entre TAMs/TANs e células cancerosas, como citocinas, quimiocinas e fatores de crescimento e angiogênicos. No presente trabalho, estudamos a modulação de funções de TAMs e TANs por lectinas. Um melhor entendimento dos mecanismos moleculares que regulam as funções destas células é de fundamental importância para podermos interferir em sua diferenciação, direcionando-as para fenótipos anti-tumorais.

A literatura demonstra com clareza a importância dos neutrófilos na homeostasia do organismo, principalmente no que tange aos processos inflamatórios. As observações recentes sobre a capacidade de neutrófilos de responderem a uma grande variedade de citocinas e a moléculas quimiotáticas, de alterarem seu fenótipo sob circunstâncias específicas, de participarem da resolução da inflamação, e de regularem a angiogênese e o destino tumoral, tem evidenciado que neutrófilos representam mais do que células de vida curta destituídas de atividade transcricional, que somente liberam mediadores pré-formados e eliminam patógenos. Os neutrófilos foram ?redescobertos? como células versáteis que constituem um importante fonte de citocinas. Galectina-3, membro da grande família de lectinas ligantes de &#946;-galactosídeos, tem sido apontada como uma molécula reguladora do processo inflamatório, aumentando ou ativando diretamente o repertório funcional de neutrófilos. Entretanto, os mecanismos moleculares implicados na ativação de neutrófilos por galectina-3 não são completamente conhecidos. O presente trabalho tem como objetivo investigar a ativação de neutrófilos induzida por galectina-3, associando os aspectos revelados no estudo com processos fisiopatológicos. Para tanto, buscaremos responder a questões concernentes a: exigência de priming de neutrófilos para os efeitos de gal-3; sinalização disparada por gal-3, na condição de existência ou inexistência de priming e os papéis de CD43 e CD66 como potenciais ligantes de Gal-3.

As modificações da glicosilação celular constituem alterações fenotípicas comuns observadas em neoplasia malignas humanas. Estas alterações são frequentemente utilizadas na clínica como marcadores tumorais. Além da sua utilidade na clínica, as modificação da glicosilação interferem em mecanismos de reconhecimento célula-célula, célula-matrix extracelular, importantes nos processos de estabelecimento do tumor e sua metastatização. As glicanas são reconhecidas por moléculas do tipo lectinas, endógenas e exógenas. De fato, vários estudos demonstram que as glicanas desempenham um papel importante em processos fisiológicos como o reconhecimento de células do sistema imunitário através de galectina, Siglecs, no extravasamento de leucócitos através de selectinas, dentre outros. As lectinas podem interagir com as glicanas aberrantes expressas nas células tumorais e interferir na biologia de células transformadas, de maneira a modificar a proliferação celular, promover a morte celular, assim como interferir com o processo de invasão e metastatização. O presente projeto tem como objetivo caracterizar o papel de lectinas no reconhecimento de glicanas expressas em células neoplásicas e avaliar o efeito destas lectinas na interação célula-célula e célula-matriz extracelular.

Os mastócitos são células imunoreguladoras que participam de processos inflamatórios, de doenças atópicas como asma, rinite, eczema e alergias alimentares, e dos mecanismos de defesa do organismo. Além disso, desempenham importantes papéis no reparo de tecidos, na angiogênese e na cicatrização. Estes fenômenos estão diretamente relacionados com a liberação de mediadores químicos que ocorre com a ativação e a desgranulação dos mastócitos. A via mais comum de ativação destas células é resultante da interação entre o antígeno multivalente (alérgeno) e a imunoglobulina. E que está ligada ao receptor de alta afinidade para a imunoglobulina e (FcERI). Interações lectina-carboidrato são capazes de induzir a ativação de mastócitos. A lectina KM+, ligante de D-manose, induz a desgranulação destas células. Os mediadores liberados pelos mastócitos atuam em processos inflamatórios, e funcionam como uma alça ampliifcadora da capacidade da KM+ de recrutar neutrófilos para a cavidade peritoneal de ratos. Além disso, KM+ apresenta a propriedade regeneradora de tecidos e de proteção contra parasitas como Leishmania major e P. brasiliensis, fenômenos onde o recrutamento de células e a presença de mediadores desconhecidos. Nossos estudos preliminares sugerem que KM+, através de seus CRDs, se ligure ao FcERI ou ainda, a IgE ligada ao FcERI. O presente trabalho tem como objetivos identificar o (s) ligante (s) de KM+ presente (s) na superfiície de mastócitos e estudar os eventos de ativação celular decorrentes de tal interação. Os conhecimentos gerados poderão contribuir para o delineamento de intervenções terapêuticas no processo de regulação da liberação de mediadores por mastócitos, importante em diversos fenômenos biológicos.

A migração direcionada de leucócitos é um evento fundamental para que ocorra a resposta inflamatória e galectina-3 apresenta um importante papel nesse processo, como demonstrado pela diminuição no recrutamento de leucócitos inflamatórios em camundongos geneticamente deficientes do gene da galectina-3, submetidos a modelo experimental de peritonite. A participação da galectina-3 na inflamação tem sido atribuída a características dessa molécula como a capacidade de ativar células, de modular a adesão celular e atividade anti-apoptótica. Estudos prévios demonstraram que a galectina-3 é capaz de promover a adesão de neutrófilos à laminina, glicoproteína que tem um papel importante na transmigração de neutrófilos através da membrana basal. Demonstrou-se também que galectina-3 apresenta potente atividade quimioatraente sobre monócitos e macrófagos, não se conhecendo completamente os mecanismos envolvidos neste processo. O presente trabalho tem como objetivos identificar o(s) ligante(s) de galectina-3 expresso(s) na superfície de monócitos e estudar eventos de ativação celular decorrentes de tal interação, bem como os mecanismos envolvidos na migração de monócitos induzida por galectina-3, incluindo a participação de glicoproteínas da matriz extracelular. Os conhecimentos gerados poderão contribuir para a melhor compreensão do processo de migração de células inflamatórias, fundamental para o delineamento de novas abordagens terapêuticas que se contraponham aos efeitos deletéreos de processos inflamatórios patológicos, não controlados.

TL1A, um novo membro da família TNF, inicialmente descrito como um co-estimulador de linfócitos T derivado de células endoteliais e ligante de membros da superfamília de receptores para TNF, como DR3 e DcR3, despertou interesse para o estudo do mecanismo de morte celular por apoptose. Logo após a sua primeira descrição, observou-se que TL1A estaria envolvido, como citocina indutora de resposta imune do tipo Th1, em doenças inflamatórias intestinais como Crohn?s e colite ulcerativa. Observamos que monócitos isolados do sangue periférico humano, quando estimulados por imuno-complexos, produziam TL1A, fato particularmente interessante que suscitou a hipótese de um envolvimento da molécula em doenças auto-imunes causadas pela deposição de complexos imunes, como artrite reumatóide e lupus eritematoso sistêmico. De fato, observamos que TL1A encontrava-se em concentrações elevadas no soro de pacientes que sofriam de artrite reumatóide, particularmente daqueles caracterizados como positivos para fator reumatóide e que apresentavam, portanto, uma maior propensão ao desenvolvimento de uma forma mais severa da doença. O trabalho, além de estudar a associação com artrite reumatóide, constituiu-se na caracterização da produção de TL1A.

A partir da constatação de que lectinas como o KM+ são capazes de atrair neutrófilos in vivo e in vitro e de provocar sua transmigração através do endotélio vascular e movimentação através do tecido perivascular, obedecendo gradiente haptotático do atraente, ligado a substrato dos tecidos vascular e perivascular, passou-se a investigar o papel das interações proteína-carboidrato nesse fenômeno. Mais especificamente, o trabalho teve como objetivos estudar os eventos de ativação celular decorrentes da interação de KM+ com glicoconjugados da superfície de neutrófilos humanos. Observou-se que glicanas de um dos receptores para a interleucina-8, o CXCR2, são possivelmente reconhecidas por KM+ e que a interação assim estabelecida - transdutora de sinais intracelulares através de proteína G - é uma das principais responsáveis pelos fenômenos de ativação e migração neutrofílica decorrentes do estímulo pela lectina. os eventos gerados são comparáveis aos que ocorrem pela ligação de atraentes de neutrófilos conhecidos, como fMLP e quimiocinas, aos seus receptores de superfície específicos

MNCF é uma lectina endógena, produzida por macrófagos, capaz de induzir a migração de neutrófilos in vivo e in vitro. Tal fenômeno apresenta a peculiaridade de não ser inibido na presença de glicocorticóides. O trabalho teve como objetivos a caracterização da produção de MNCF por macrófagos e o estudo das respostas de ativação de neutrófilos e mastócitos pela lectina. Os conhecimentos gerados, além de evidenciarem os importantes papéis desempenhados por lectinas animais na inflamação, possibilitaram a expansão da caracterização das propriedades inflamatórias da lectina macrofágica MNCF, contribuindo para a elucidação dos processos de ativação neutrofílica por outros atraentes endógenos, como, por exemplo, as quimiocinas. Contribuiram ainda para um maior esclarecimento do processo de ativação de mastócitos por lectinas.&#10;Situação: Concluído Natureza: Pesquisa

A migração de neutrófilos para o sítio inflamatório é um processo complexo e finamente regulado. Um melhor entendimento do processo de migração dos leucócitos para os tecidos e da modulação do estado funcional destas células poderá contribuir para o delineamento de intervenções terapêuticas na regulação da inflamação. Especificamente no caso de lectinas, a participação de açúcares como receptores de ligação da superfície leucocitária abre novas formas de se potenciar ou inibir as reações inflamatórias. A lectina KM+, de sementes de Artocarpus integrifolia, induz migração de neutrófilos in vivo e in vitro. A migração induzida por KM+ ocorre por mecanismo haptotático, através da interação do sítio de reconhecimento de carboidratos da lectina com componentes glicosilados presentes no endotélio e na superfície de neutrófilos. O trabalho teve como objetivos o isolamento e a caracterização do(s) ligante(s) de KM+ expressos na superfície de neutrófilos humanos.

Baseados nas descrições da literatura de que a atividade atraente de neutrófilos da interleucina-8 (IL-8) estaria relacionada com a formação de um gradiente haptotático, através da interação desta quimiocina com proteoglicanas da matriz extracelular, estudou-se a interferência da heparina ou heparan sulfato sobre a migração neutrofílica induzida pela IL-8 in vivo. Utilizando o modelo de bolha de ar dorsal em ratos, observou-se que a heparina, mas não o heparan sulfato, potencializou em mais de 100% a atividade da interleucina-8. Foram investigados então, os papéis exercidos por mastócitos, como células cujos grânulos são ricos em heparina, na atração de neutrófilos induzida pela IL-8. Para tanto, estudou-se a migração neutrofílica em resposta ao estímulo por IL-8 em animais previamente depletados de mastócitos peritoneais. A migração de neutrófilos foi então reduzida nestas condições, sendo reconstituída quando a quimiocina foi previamente incubada com heparina. Sugeriu-se, baseados nas observações, que o efeito potencializador da heparina sobre a migração neutrofílica poderia ser atribuída a sua capacidade de induzir a expressão de heparan sulfato por células endoteliais, permitindo, desta forma, a formação de um gradiente haptotático da IL-8 que direcionaria o movimento de neutrófilos.