Cleni Mara Marzocchi Machado.

Desde 2018, atua como docente colaboradora no Projeto Migrar, uma iniciativa farmacêutica social desenvolvida por graduandos da FCFRP-USP, sendo responsável pelas capacitações e atividades de Análises Clínicas.

Programa Universidade Aberta à Terceira Idade

Projeto Mestrado - Pietra Perondi Sater - Programa de Pós-graduação em Biociências e Biotecnologia - Área Imunologia e Fisiopatologia - FCFRP-USP. Bolsista Capes Finance Code 001. Resumo - As neoplasias mieloproliferativas (NMP) Philadephia (Ph) negativas são doenças que cursam com complicações trombóticas, vasculares e hemorrágicas como as causas mais comuns de morbidade e mortalidade. Os glóbulos vermelhos, leucócitos, plaquetas e células endoteliais vasculares apresentam anormalidades determinadas por mutações. A mutação JAK2V617F no gene JAK2 está presente em mais de 50 dos pacientes com NMP, sendo uma alteração somática, que parece proporcionar vantagens proliferativas e de sobrevivência aos precursores hematopoiéticos. A JAK2 é uma tirosina quinase intracelular da família das Janus quinases, que associada aos receptores de citocinas, participa do processo de transdução de sinal e ativação celular. Nas NMP, as interações celulares criam um ambiente pró-trombótico na circulação, que predispõe tais pacientes à trombose venosa e arterial. A avaliação do risco trombótico é de grande importância para o tratamento das NMP e inclui, além da mutação JAK2V617F, o envelhecimento e o estado inflamatório sistêmico. A mutação JAK2V617F foi associada ao aumento da liberação de redes de DNA liberadas por neutrófilos (NETs, neutrophil extracelular traps) e à ocorrência de trombose venosa em NMP. A adesão dos neutrófilos às plaquetas pode ser mediada pela molécula CD11b expressa nestas células como parte do heterodímero CD11b/CD18 e o receptor nas plaquetas GPIIb/IIIa. Uma superexpressão de CD11b nos neutrófilos e monócitos de pacientes com NMP portadores da mutação JAK2 foi associada à ativação da coagulação e à trombose. A molécula CD11b é parte do receptor para complemento tipo 3 (CR3; CD11b/CD18), esta subunidade é codificada pelo gene ITGAM (Integrin alpha M) e um polimorfismo de nucleotídeo único (G230A; rs1143679) altera uma arginina para uma histidina na posição 77 (R77H). A variante rs1143679 está associada ao risco de lúpus eritematoso sistêmico e de manifestações clínicas específicas, como nefrite e a presença de anticorpos antifosfolipídios. Estes anticorpos estão associados à tromboinflamação, incluindo ativação de plaquetas, monócitos e células endoteliais, produção de citocinas e quimiocinas pró-inflamatórias, ativação do sistema complemento e liberação de NETs. Esses resultados levam à hipótese de que o polimorfismo rs1143679 da cadeia CD11b pode estar associado com a trombose nas NMP. Nesse contexto, o objetivo desse estudo é identificar marcadores inflamatórios relacionados à presença do polimorfismo rs1143679 da cadeia CD11b do CR3 e à ocorrência de trombose em pacientes com NMP. Palavras-chave: Neoplasias mieloproliferativas; neutrófilos; polimorfismo da cadeia CD11b; trombose; sistema complemento; mediadores inflamatórios.

Projeto Doutorado - Neutrófilos e sistema complemento: prospecção de atividade biológica do óleo de copaíba como estratégia terapêutica para doenças inflamatórias modelo de imunocomplexos insolúveis em suspensão. Leticia de Oliveira Maciel, Programa de Pós-graduação em Biociências e Biotecnologia, área Imunologia e Fisiopatologia, FCFRP-USP; Projeto Mestrado - Caracterização de vesículas extracelulares de neutrófilos: modelo in vitro de deposição de imunocomplexos imobilizados para a prospecção de atividade biológica da oleorresina de copaíba. Mariana de Souza, Programa de Pós-graduação em Imunologia Básica e Aplicada - FMRP-USP. Resumo - As doenças inflamatórias crônicas representam um problema de saúde pública mundial e envolvem questões que vão desde a limitação da capacidade laboral até a dificuldade de acesso a medicamentos. Em diversas comunidades ao redor do mundo, o uso de plantas medicinais é parte integrante dos cuidados primários de saúde. A oleorresina (OR) de copaíba, extraída da espécie amazônica Copaifera sp., tem aplicação etnofarmacológica como anti-inflamatório. Esta propriedade é pouco explorada quanto aos seus efeitos sobre células e mediadores solúveis da inflamação. O objetivo deste estudo é investigar o efeito da OR de copaíba, suas frações e/ou substâncias isoladas sobre a ativação dos neutrófilos e do sistema complemento. Os neutrófilos e o sistema complemento atuam em sinergismo como efetores da inflamação aguda, o que é importante para a homeostase. Em contrapartida, ambos estão frequentemente associados aos mecanismos fisiopatológicos nas doenças inflamatórias crônicas. Com esse estudo, busca-se identificar efeitos significativos da OR de copaíba, suas frações e/ou substâncias isoladas sobre a modulação das funções dos neutrófilos e do sistema complemento, que possam ter potencial de aplicação para o tratamento de doenças inflamatórias crônicas. A coleta da OR de copaíba, identificação botânica, análises físico-químicas, obtenção de frações (destilação) e isolamento de substâncias (cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa) serão realizadas na UFOPA. Os ensaios biológicos com os neutrófilos e o sistema complemento, bem como a caracterização das vesículas extracelulares dos neutrófilos, serão realizados na FCFRP-USP. As análises dos lipídios de membrana e secretados pelos neutrófilos serão realizadas na FFCLRP-USP por espectrometria de massas. Amostras da OR extraída de Copaifera reticulada, bem como suas frações e/ou substâncias purificadas serão avaliadas quanto à capacidade de modular a ativação de funções dos neutrófilos e do sistema complemento ambos obtidos de amostras de sangue periférico humano - frente à estimulação com complexos antígeno-anticorpo insolúveis, em suspensão e imobilizados, como modelos de inflamação crônica mediada por precipitação e deposição de imunocomplexos. O efeito da OR, frações e/ou substâncias isoladas sobre os neutrófilos será avaliado por ensaios in vitro pela medida da produção de espécies reativas de oxigênio, liberação de armadilhas extracelulares, quimiotaxia, marcadores de ativação celular e perfil lipídico de membranas e secretório. Enquanto o efeito sobre o sistema complemento será avaliado pela determinação da sua atividade hemolítica e da geração de peptídeos quimiotáticos. Assim, espera-se que os resultados contribuam para a fundamentação científica de pesquisas adicionais, as quais poderão ser aplicadas à geração de novas alternativas terapêuticas e promoção de políticas públicas de saúde e bem-estar. Ademais, a compreensão do potencial terapêutico da OR de copaíba agrega valores socioambiental, científico-tecnológico e econômico aos recursos naturais do país, todos em consonância com objetivos de desenvolvimento sustentável da agenda 2030 da OMS. Palavras-chave: Neutrófilos; sistema complemento; Copaíba; anti-inflamatório; produto natural.

O papel do inibidor de CLEC12 nas doenças autoimunes: imunocomplexos e neutrófilos. Projeto com colaboração da Profa. Dra, Maria Fernandes, na área de doenças imunes e infecciosas,no Depto de Microbiologia e Imunologia, Faculdade de Medicina, Universidade de Laval, Quebec. Com bolsa de doutorado sanduíche pela Mitacs Globalink - Agence Universitaire de la Francophonie concedida para a aluna de doutorado Allana Ferreira da Costa Pessoa.

Os sapos Bufonídeos possuem bufadienolídeos com atividades biológicas no tratamento de doenças inflamatórias; ação imunomoduladora, antioxidante, ação sob sistema cardiovascular, antimalárica, antiplasmodial e antimutagênica. Apesar dos efeitos tóxicos, os venenos possuem grande potencial para produção de novos medicamentos. Os neutrófilos fazem parte do sistema imune inato e possuem um papel crucial na primeira linha de defesa contra microrganismos. A ativação dessas células desencadeia os processos de fagocitose, degranulação, ativação do metabolismo oxidativo e produção e liberação do seu conteúdo de DNA, que atuam em conjunto para a morte dos patógenos. Em seguida, estas células sofrem apoptose, um processo essencial para o término da resposta inflamatória.Entretanto, em algumas patologias inflamatórias, ocorre intenso recrutamento dessas células para o microambiente inflamado ativando-as, culminando com a liberação maciça do conteúdo tóxico dos seus grânulos e de espécies oxidantes, capazes de lesar o tecido em processo de injúria. Diante disto, há uma abordagem atraente para a modulação das funções efetoras dos neutrófilos, com o uso de compostos naturais presentes nos venenos de sapo dos generos Rhinella e Rhaebo. Estudos prévios realizados em nosso laboratório, tem sido investigado sobre análise in vivo e in vitro, apresentaram uma significante atividade anti-tumoral, antioxidante e antiinflamatória. Desta forma, para o melhor entendimento do papel dessas substâncias na modulação dos neutrófilos e para o reconhecimento das mesmas como um potencial agente terapêutico no tratamento de doenças inflamatórias, o projeto pretende avaliar a ação moduladora dos venenos de sapo Rhinella margaritifera, Rhinella marina e Rhaebo guttatus, sobre algumas importantes funções efetoras dos neutrófilos, como a produção de especies reativas de oxigênio, a degranulação de enzimas como a elastase, e a liberação do conteúdo de DNA (NETs). Além disso, pretende-se avaliar o efeito dessa substância no processo citotóxico destas células, uma vez que esse processo é importante para manter a homeostase do organismo.

Implantar Hortos de Plantas Medicinais e aromáticas como Unidades Produtivas e micropropagadora e para as Comunidades do Eixo Forte, que liga Santarém à vila de Alter do Chão como forma de incentivar o processo de mudança do modelo extrativista atual para um modelo de produção controlada visando maior geração de renda e desenvolvimento das comunidades atingidas

O projeto visa isolar linhagens de bactérias autóctones da microbiota intestinal de tambaquis saudáveis com efeitos imune-protetor e de valor zootécnico para mesma espécie, com foco na compreensão da dinâmica das relações probiótico-microbiota-hospedeiro durante o desenvolvimento de Colossoma macropomum. A descrição desses mecanismos amplia o entendimento da interação patógeno-hospedeiro, que possibilitará a construção de estratégico voltados para à melhora do desempenho zootécnico e no controle e na profilaxia das doenças graves, como a sepse. Para tanto, a prospecção in vitro dos probióticos autóctones será feito pelos isolados em tambaquis saudáveis. Após o isolamento e caracterização das bactérias, estas passarão pelos testes: resistência ao pH, atividade hemolítica, auto-agregação e co-agregação, hidrofobicidade, formação de biofilme, tolerância a sais biliares, resistência a antimicrobiano e atividade anti-aeromonas. Após seleção cepa(s), tambaquis (40g) serão separados 4 grupos: suplementados com probiótico liofilizado, 1x1012 UFC, kg ração comercial na concentração 1g, 3g e 5g e grupo controle; por 90 dias. Após o período serão analisados: parâmetros zootécnicos, composição bromatológicas da carcaça e eficácia na aeromonose. Destas será definida a melhor concentração e repetira-se a suplementação para verificar a interação probiótico-microbiota-hospedeiro. Para tanto, nos tempos de 15, 30, 60 e 90 dias os peixes suplementados e controle serão coletados para análise: hemograma, bioquímico sérico, perfil hormonal (tiroidiano e cortisol), imunidade inata (fagocitose, lisozima, sistema complemento e aglutinação), avaliação da modulação química (qPCR e imunomarcação das citocinas pró e anti-inflamatória no rim e intestino).

Produção de material didático. Bolsas aos alunos de graduação pelo Programa Unificado de Bolsas da Pró-Reitoria de graduação.

Projeto Doutorado: Allana Ferreira da Costa Pessoa. Programa de Pós-graduação em Imunologia Básica e Aplicada - FMRP-USP. Bolsa Capes Financial Code 001. Resumo: O LES é uma doença autoimune e inflamatória crônica de etiologia complexa, cujafisiopatologia é marcada pela deposição de imunocomplexos, tentativa de fagocitose frustrada, pelosneutrófilos, liberação de enzimas e espécies reativas de oxigênio (ERO) e consequente lesão tecidual.Vários imunoreceptores estão envolvidos na ativação ou inibição das funções dos neutrófilos, tais como,receptores para IgG (FcR) e para o sistema complemento (CR) no LES. A regulação desses receptores temse mostrado promissora como alvo terapêutico. Atualmente, os pacientes com LES são tratados comimunossupressores, que estão associados com toxicidade e baixa ineficácia em controlar a doença. Neste contexto, propõe-se avaliar os efeitos dos extratos e frações de cianobactérias marinhas Leptolyngbya sp. como anti-inflamatórios e antioxidantes sobre as funções dos neutrófilos de indivíduos saudáveis e de pacientes com LES mediadas pelos receptores FcR e CR. Serão avaliados o burst oxidativo, e a formação e liberação de armadilhas extracelulares dos neutrófilos (NET). A hipótese é que dentre os extratos e frações testados haja algum(uns) que exerça(m) regulação sobre as funções dos neutrófilos, com potencial para reduzir danos oxidativos para que no futuro sejam explorados como terapia em pacientes com doenças inflamatórias.

UNIVERSAL/CNPq 2013 - Faixa C (484189/2013-1)

FAPESP 09/14732-8, Auxílio Pesquisa
FAPESP 09/12649-6, Bolsa Mestrado

Projeto de iniciação científica.

CNPq, Edital Universal 481873/2009-0