Heraldo Possolo de Souza.

PRojeto Temático em desenvolvimento no Serviço de Emergência do Hospital das Clínicas da FMUSP

Projeto multicêntrico e multidisciplinar que tem por objetivo promover avanços na caracterização fisiopalologia, na prevenção, terapêutica e difusão de conhecimento a respeito da obesidade e doenças associadas
Natureza: pesquisa

A regulação espacial e temporal da expressão gênica é um meio importante através onde células respondem aos sinais fisiológicos ou do meio ambiente. Fatores de transcrição que se ligam ao DNA, co-reguladores da transcrição que não se ligam ao DNA e a maquinaria da RNA polimerase II são elementos capazes de modular de maneira adequada (isto é, apropriada do ponto de vista do desenvolvimento e específico para aquele estímulo) o padrão de expressão gênica. Receptores nucleares (NRs) abrangem uma superfamília de fatores de transcrição que, uma vez ativados por ligantes, podem se acoplar ao DNA e tanto ativar quanto reprimir a expressão gênica. São conhecidos hoje 49 genes que codificam receptores nucleares, incluindo alguns que ainda não tem ligantes conhecidos (NRs "órfãos"), outros cujos ligantes foram identificados somente recentememente (NRs "órfãos adotados") e os receptores de esteróides, que foram os primeiros NRs a serem descritos. Excetuando-se os receptores de glucocorticóides, cuja função sempre foi ligada à inflamação, os demais NRs foram inicialmente conhecidos por controlarem vias metabólicas, reprodutivas ou de desenvolvimento. Todavia, mais recentemente passou-se a demonstrar a importância desses fatores de transcrição na modulação do processo inflamatório, tanto em modleos experimentais quanto em pacientes. Exemplo mais conhecido é o papel dos PPARs, especialmente o PPAR³ como modulador da inflamação em doenças cardiovasculares. Os co-ativadores da transcrição gênica compartilham com os receptores nucleares não só sua localização, mas também a capacidade de controlar a homeostase e o metabolismo celular. PGC-1 ("PPAR-gamma coativator 1") é o mais estudado desses co-ativadores, devido à sua importância em doenças cardiovasculares). Ao contrário dos NRs, porém, o papel desses co-ativadores no controle do processo inflamatório ainda não foi investigado. Em nosso laboratório temos trabalhado na elucidação dos mecanismos de transdução de sinal que controlam

A partir da década de 80 passou-se a considerar as doenças cardiovasculares, especialmente a aterosclerose, como tendo importante componente inflamatório em sua fisiopatologia. Hoje sabemos que ativação de diversos tipos celulares e vias de sinalização pró-inflamatória do sistema imunológico (como citocinas e CD40/CD40L) é crucial para a evolução da doença, desde a disfunção endotelial até a ruptura da placa. Em projetos anteriores financiados pela FAPESP (# 02/02930-0), demonstramos que angiotensina II, sabidamente fator de risco para doença coronariana, aumenta a expressão de CD40 em células musculares lisas vasculares, fenômeno dependente da geração intracelular de espécies reativas de oxigênio. Demonstramos também que a ausência do receptor toll-like 4 em camundongos LDLr -/- induz formação de placas menores, com menor conteúdo de gordura, sugerindo que a imunidade inata desempenha importante papel no desenvolvimento da plac. Ambos os trabalhos reforçam a relação entre a formação e desenvolvimento das placas de ateroma e a ativação de vias específicas de sinalização do sistema imune. Sabemos que as causas da disfunção endotelial, evento inicial do processo aerosclerótico na parede do vascular, são bastante complexas, estando associada a uma predisposição genética e à exposição a fatores de risco ambientais, como tabagismo, níveis séricos elevados de LDL derivados da dieta, estresse, sedentarismo. Além da associação com outras doenças multi-fatoriais, como hipertensão e diabetes. Como essas doenças e fatores de risco interagem com o sistema imune, levando à formação das placas de ateroma ainda é um assunto esclarecido apenas parcialmente. Nesse projeto, nos propomos a analisar aspectos importantes dessa questão. Inicialmente (Sub-Projeto 1), utilizando células endoteliais em cultura, pretendemos estudar a influência dos oxisteróis nas vias de sinalização envolvidas no processo inflamatório vascular. Oxisteróis são derivados de modificações oxidativas do colestero

Aderências de órgãos internos à parede são uma ocorrência comum após cirurgias abdominais, principalmente naquelas onde há necessidade do implante de telas para correção de hérnias. Pacientes com aderências apresentam quadros clínicos variáveis, desde leve desconforto, até quadros graves de obstrução intestinal, que podem necessitar de correção cirúrgica. Devido à gravidade do quadro e sua alta prevalência, estratégias para sua prevenção são necessárias. Entretanto, para se criar uma prevenção efetiva, é obrigatório que se conheça com profundidade a resposta inflamatória às telas e as vias de sinalização envolvidas no processo. O óxido nítrico (NO) é produzido pelas NO sintases (NOS) e participa da regulação do tônus vascular, da neurotransmissão e da resposta imune. Nos fagócitos, a NOS2, ou NOS induzível, produz NO com o objetivo de destruir bactérias e também como molécula sinalizadora intracelular e para outras células. Os dados referentes ao papel do NO na resposta inflamatória a telas ainda snao escassos e sua relação com a formação de aderências ainda não estudada. Assim, nosso objetivo principal nesse projeto será determinar o papel do óxido nítrico na resposta inflamatória a telas utilizadas para correção de hérnias da parede abdominal. Em experimentos iniciais, demonstramos que existe um aumento na expressão de NOS2 e na geração de NO após o implante de telas em peritôneo de camundongos. Para melhor definir o papel do NO, será necessário mostrar uma reação causal entre a produção de NO e o desenvolvimento de aderências. Pretendemos alcançar esse objetivo utilizando dois tipos de abordagem: - implante de tela em camundongos deficientes em NOS2 (induzível) - aplicação local de doadores de NO como agentes terapêuticos para evitar a formação de aderências. Acreditamos que o primeiro passo seja melhor entender a relação entre NO e a resposta à implantação da tela, que é o objetivo desse projeto. Uma vez adquirido esse conhecimento, poderemos partir para um ambi