Fernanda Canduri.

Proteínas quinases são importantes alvos de estudo devido ao seu envolvimento na sinalização celular, transcrição e divisão celular. Quinases dependentes de ciclinas (CDKs) compreendem uma família de proteínas que podem ser subdivididas em dois grupos funcionais majoritários baseados na sua função no ciclo celular e/ou controle transcricional. Os complexos da CDK10 se associam com o fator de transcrição Ets2, e está envolvida com ?splicing? de RNA, regulação de hormônios esteroides, além de participar de outros complexos reguladores da transcrição. A CDK8 possui um motivo de ligação a mediadores, sendo, portanto, parte do complexo mediador da transcrição. Nesta proposta, as CDK8 e CDK10 serão superexpressas e purificadas seguindo protocolo já estabelecido, e estudos funcionais e estruturais serão realizados, com o objetivo de alcançar maior entendimento do diferencial com relação a estrutura-função de cada uma delas. O estudo estrutural será realizado utilizando métodos de dicroísmo circular e métodos de cristalização na tentativa de se obter monocristais das proteínas para difração de raios X e resolução de estrutura. Adicionalmente, estudos de docking molecular irão auxiliar na busca por ligantes ATP competitivos que nortearão os estudos in vitro das referidas CDKs na presença dos diferentes ligantes previamente selecionados, utilizando métodos de espectrofotometria UV/Vis. Estes estudos poderão contribuir para o entendimento do modo de interação das CDK8 e CDK10 com ligantes ATP competitivos, bem como para o desenvolvimento de inibidores químicos de baixo peso molecular que possa inibir especificamente estas quinases.

Proteínas quinases são importantes alvos de estudo devido ao seu envolvimento na sinalização celular, transcrição e divisão celular. Quinases dependentes de ciclinas (CDKs) compreendem uma família de proteínas que podem ser subdivididas em dois grupos funcionais majoritários baseados na sua função no ciclo celular e/ou controle transcricional. Os complexos da CDK10 se associam com o fator de transcrição Ets2, e está envolvida com ?splicing? de RNA, regulação de hormônios esteroides, além de participar de outros complexos reguladores da transcrição. A CDK8 possui um motivo de ligação a mediadores, sendo, portanto, parte do complexo mediador da transcrição. Nesta proposta, as CDK8 e CDK10 serão superexpressas e purificadas seguindo protocolo já estabelecido, e estudos funcionais e estruturais serão realizados, com o objetivo de alcançar maior entendimento do diferencial com relação a estrutura-função de cada uma delas. O estudo estrutural será realizado utilizando métodos de dicroísmo circular e métodos de cristalização na tentativa de se obter monocristais das proteínas para difração de raios X e resolução de estrutura. Adicionalmente, estudos de docking molecular irão auxiliar na busca por ligantes ATP competitivos que nortearão os estudos in vitro das referidas CDKs na presença dos diferentes ligantes previamente selecionados, utilizando métodos de espectrofotometria UV/Vis. Estes estudos poderão contribuir para o entendimento do modo de interação das CDK8 e CDK10 com ligantes ATP competitivos, bem como para o desenvolvimento de inibidores químicos de baixo peso molecular que possa inibir especificamente estas quinases.