Daniele dos Santos Martins.

A extensão universitária tem como premissa garantir a aprendizagem recíproca da comunidade acadêmica e da sociedade, bem como estimular a comunidade universitária à realização de ações sociais e políticas. Assim, este trabalho objetiva realizar uma atividade de sensibilização e formação de consciência com relação à preservação e importância da fauna silvestre brasileira em crianças com idade entre 6 a 10 anos. As atividades são desenvolvidas em escolas parceiras e há disponibilização gratuita um vídeo explicativo gravado pelos alunos da Liga Acadêmica em Animais Selvagens GEAS PIRA USP, além de livretos, sugestão de jogos e brincadeiras.Este projeto é apoiado pelo Banco Santander.

Discutir com aos alunos de ensino médio a importância das pesquisas que envolvem animais, bem como desmistificar algumas notícias que não condizem com a realidade.

As Olimpíadas de Bem-estar Animal engloba alunos dos cursos de Zootecnia, Medicina Veterinária e Engenharia de Biossistemas da Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos da USP com a apresentação de projetos desenvolvidos pelos alunos com o objetivo de divulgar na mídia o correto entendimento sobre BEA.ATENÇÃO: O trabalho é coordenado conjuntamente pelas professoras: Profa. Dra. Cristiane G. Titto, Profa. dra. Daniele dos Santos Martins e Profa. Dra. Lucianne S. Martello.

Plano Diretor Socioambiental Participativo do Campus de Pirassununga (PDPiras) tem como objetivos a integração das atividades socioambientais do Campus; o estímulo a participação de pessoas nas ações existentes e possibilitar a criação de grupos que incrementem a percepção e melhoria dos aspectos socioambientais no Campus; a realização do levantamento, ordenamento, coordenação e monitoramento do planejamento socioambiental do Campus e a definição de diretrizes e instrumentos para orientar a Política Socioambiental das Unidades de Ensino presentes no Campus.

O Canil GRMD - Brasil ganhou esse nome por conter cães da raça Golden Retriever, portadores do Gene da distrofia muscular degenerativa para fins exclusivo de pesquisa. A distrofia muscular do Golden (GRMD) é geneticamente homólogo á distrofia muscular de Duchenne (DMD) em humanos, sendo que ambas afetam a produção da proteina muscular denominada distrofina que compromete a musculatura esquelética. Embora existem inúmeras pesquisas internacionais em andamento, com objetivo de encontrar a cura da DMD, ainda não existe um tratamento específico para esta doença e a fisioterapia exerce um papel fundamental na melhora da qualidade de vida destes pacientes..

O Brasil é país com o maior número de novas espécies descobertas na última década, todavia apresenta o maior número de aves ameaçadas 164 espécies. As aves brasileiras são animais alvo da ação antrópica ambiental, bem como do tráfico de animais silvestres; assim torna-se necessário buscar métodos para a preservação das espécies que impeçam a redução da variabilidade e até mesmo sua extinção. Nossa proposta visa desenvolver uma técnica eficiente para extração, isolamento e criopreservação das células do folículo das penas de aves, uma vez que neste tecido encontramos células com potencial multipotente responsáveis pela proliferação de linhagens celulares para a formação de tecidos específicos. Portanto o presente trabalho abrange os desafios e perspectivas da conservação de material genético de aves silvestres no Brasil, podendo no futuro, servir como uma ferramenta valiosa para a preservação de espécies de aves ameaçadas de extinção.

Nas últimas décadas, a medicina veterinária e terapias inovadoras teve um crescimento exponencial, usando novas ferramentas terapêutica, sejam com uso de células-tronco ou edição gênica. Neste projeto focamos os estudos em células indiferenciadas com alta capacidade de proliferação e características fetais, de origem das membranas fetais, como o âmnio. A membrana amniótica, descartado na medicina veterinária é considerada uma fonte celular excelente para obtenção de células tronco, visto que não requer procedimentos invasivos para aquisição e oferece uma quantidade significativa para estudos pré-clínicos. Atualmente, na medicina veterinária, existem poucas informações relacionadas às propriedades imunomoduladoras de membrana amniótica. Dessa forma, torna-se relevante que estas células sejam caracterizadas pela sua potencialidade, papel imunomodulador e componentes secretores, tais como vesículas extracelulares. Além disso, a medicina terapêutica está constantemente em avanço, sendo o estudo do desenvolvimento dos órgãos e suas funções moleculares estão em plena progressão. Outro ponto de estudos será focado a comunicação célula-célula através do transporte de componentes epigenéticos (microRNA e mRNA) realizado pelas vesículas extracelulares do âmnio, que são secretadas por diferentes tipos celulares, os exossomos. Temos trabalhado na criação de um banco de células-tronco de fonte animal, que poderá auxiliar diferentes centros de pesquisa na compreensão molecular e clínica e integrar essas informações. Essa é uma das propostas nesse projeto, disponibilizar um banco de células-tronco mesenquimais das membranas placentárias de diferentes fontes animais com vistas a garantir a segurança e qualidade para utilização dessas linhagens celulares, com estabelecimento de protocolos de contaminação "free", visando a padronização e validação de procedimentos e técnicas analíticas envolvidas na fabricação de produtos de terapias celulares para uso veterinário representando um avanço importante. (AU)

Coordenadora do Convênio Acadêmico Internacional entre a FZEA e a Fundación Temaikèn - Argentina

As células de pluripotência induzida (iPS) foram reportadas pela primeira vez em 2006 e desde então vem sendo extensivamente estudadas. Através da técnica, células somáticas adultas adquirem comportamento muito semelhante às células tronco embrionárias, reduzindo as questões éticas relacionadas ao uso destas em pesquisas. Entretanto, os mecanismos biológicos das células iPS ainda não estão completamente elucidados. Assim, pesquisas mais aprofundadas são necessárias para garantir a segurança e eficácia para sua possível utilização em futuras terapias. As células tronco derivadas do tecido adiposo consistem em um tipo de célula tronco mesenquimal multipotente que se destaca pela facilidade, rapidez e segurança de coleta e processamento. A partir de células tronco derivadas do tecido adiposo de coelhos serão produzidas células iPS utilizando a introdução de quatro fatores de transcrição (Oct3/4, Sox2, c-Myc, e Klf4). O comportamento das células será analisado para marcadores de pluripotência Oct4 e Nanog, atividade da fosfatase alcalina, capacidade de diferenciação in vitro em corpos embrioides e formação de tumores in vivo. A partir destes dados, serão realizadas análises comparativas entre as células-tronco derivadas do tecido adiposo e células iPS de coelhos. Espera-se contribuir para o desenvolvimento de uma tecnologia brasileira ainda inédita em coelhos, além de criar uma linhagem de células iPS para futuros estudos aplicados. Com base nos resultados obtidos espera-se adicionar informações importantes à literatura a cerca das propriedades das células iPS, visando sua utilização como modelo experimental para futuras terapias. (AU)

Regenerative Medicine, a rapidly growing field requiring comprehensive
interdisciplinary approaches, is an area of world wide strategic importance. Yet, in spite of its great
potential it has been difficult to move key discoveries from the bench to the bedside. While this "great
divide" is not unique to regenerative medicine this field does present some unique challenges. Thus,
great potential is accompanied by complex challenges. However, complex challenges also provide
great opportunities for groups with the expertise, the vision and the leadership to strategically tackle
key problems on how to translate regenerative medicine from the current basic research state to
clinical implementation. One of the key barriers to the implementation of this technology is the lack
of appropriate large animals models. This proposal focuses on this key aspect and proposes to
combine the expertise in this area at USP and NCSU to develop a canine model where unique stem
cells can be developed and tested before implementation in a human clinical setting. Takahashi and
Yamanaka in 2006 established a technique (Nobel Price 2012) where transcription factors are
incorporated into the somatic cells of humans and mice (OCT3/4, SOX2, KLF4, and C-MYC) and
these factors are sufficient to induce fibroblasts to pluripotency (induced pluripotent stem cells ?
iPS cells). iPS cells have properties analogous to embryonic stem cells but have the added advantage
that they can be developed from the patient being treated. However, for clinical application in
humans it is critical that an appropriate animal model be developed. The canine model provides a
valuable tool to study human diseases, since approximately 58% of dog genetic diseases have a
corresponding specific human disease caused by mutation in the same gene. Among the predicates
that make dogs a suitable model to human diseases investigation include size, a fully sequenced
genome, physiological similarities to humans and a longer lifespan when compared to mice. This
allow longer-term studies than what is currently afforded by rodent models of diseases and
therapeutics. In addition, the incorporation of genome editing in patient-derived iPS cells is a
promising step toward personalized cell therapy by enabling the possibility of curing genetic
diseases. Genome-editing technologies presenting high efficiency and specificity are needed for preclinical
studies. Transcription activator-like effector nucleases (TALENs) have been recently
engineered in order to fulfill such requirements, and indeed, have already been used for genetic
engineering of endogenous loci in human ESCs and iPSCs. Therefore, the specific aims of this
project are to: 1. Develop canine iPS cell and determine the ideal conditions for long term growth.
Canine iPS cell have been reported by other groups including the PI in this proposal (Piedrahita et
al., 2012, Gonçalves et al. 2012). While the isolated cell lines were found to be pluripotential, there
were also difficulties in identifying ideal culture conditions. This aim will focus on initiating a canine
iPS program at UPS so that additional investigations in how best to maintain these valuable cells
can be extended. 2. Implement TALEN technology as a tool to augment the therapeutic value of stem
cells prior to their use in clinically applications. TALEN technology is being utilized in Dr.
Piedrahita's laboratory with exciting and promising results. We would like to extend those
observations by testing the system in a canine iPS model so that we can develop a valuable animal
model combining the clinical use of iPS with genetic editing technologies.

Este projeto tem como objetivo o estudo morfofisiológico em animais não convencionais, sendo animais selvagens nossa foco principal. Temos como premissa desenvolver alternativas para o uso desses animais como uma fonte de conhecimento que possa ser empregada na pesquisa com animais convencionais.

O projeto do Centro de Terapia Celular (CTC) tem como foco a realização de pesquisas avançadas, básicas e aplicada s.com células-tronco (CT). O CTC congrega 9 pesquisadores principais (Pls) com reconhecida liderança nesta área no Bra sil. equipe se complementa com a participação de 20 pesquisadores associados e 10 colaboradores estrangeiros. A atual proposta continua e expande a experiência adquirida pelo grupo no projeto CEPID em vigor, tanto no aspecto cientifico: como nos aspectos de disseminação do conhecimento e de transferência tecnológica para a sociedade, como pode ser verificado no sítio: http://ctc.fmrp.usp.br . O projeto científico compreende um ambicioso programa de pesquisa multidisciplinar * que objetiva estudar aspectos moleculares, celulares e biológicos das CT normais e patológicas e avaliar, criticamente e. o seu papel terapêutico. Os estudos serão conduzidos com CT pluripotentes (CT Embrionária e CT de pluripotência induzida) e C i somáticas (CT Hematopoética, CT Mesenquimal e CP Endoteliai). No território das CTE pretendemos a geração de linhagens : brasileiras que possam ser expandidas e usadas em protocolos pré-clínicos e clínicos, bem como contribuir par a o , entendimento dos mecanismos da pluripotência. Serão geradas iPSCs derivadas de doentes com Disceratose Congênita: Anemia de Fanconi, Hemofilia A e Doença de Parkinson com o objetivo de entender mecanismos envolvidos na patologia. na 1 manutenção da pluripotência e no processo de diferenciação celular. CT Hematopoéticas serão derivadas de CTEs e de iPSCs i e estabelecidas linhagens celulares tanto de CT normais como leucêmicas para os estudos dos mecanismos envolvidos no i controle da hematopoese normal e neoplásica. Modelos animais transgênicos de leucemia promielocítica aguda serão gerados e usados para estudos básicos e pré-clínicos. CT do Câncer serão estudadas tendo como foco os mecanismos de trans1 cá o Epitélio-Mesenquimal e Endotélio-Mesenquimal (EMT e EndMT) . Estes mecanismos também serão estudados no contex to d2. . reprogramação celular e na geração de CT.Na arena clínica serão realizados ensaios clínicos usando CT mesenquimais no tratamento do diabetes insulino-dependente dos tipos 1 e 2, da Anemia Aplástica grave adquirida refratária, na prevenção da Doença do Enxerto contra o Hospedeiro (DECH) aguda e crônica e da falha de enxertia no transplante alogênico haploident ico Por fim serão desenvolvidos processos de produção de CT em grande escala em condições GMP para permitir o seu uso

Atualmente muitos são os estudos com animais silvestres, no entanto, pouco se sabe sobre os aspectos biológicos. Os histricomorpha são uma subfamília da classe Rodentia, que representa 43% das 4629 espécies reconhecidas encontradas na classe Mamalia, sendo os roedores animais que oferecem uma extraordinária variedade de adaptações ecológicas, suportando os mais diversos tipos de climas e altitudes, podendo com isso apresentar grande diversidade funcional. A viscacha é um roedor pertencente a esta subfamília, e de grande importância para o ambiente em que habitam, pois, representam a base da cadeia alimentar, todavia desenvolvem apenas uma cria anual. Entretanto, vem sendo constantemente perseguida pelos agricultores, pois vivem em grandes colônias de 10-30 indivíduos, dentro de extensivos sistemas de buracos, o que prejudica a plantação, alem de serem comercializadas em restaurantes e terem sua pele vendida como casacos. Como resultado, estes animais vêm desaparecendo; sendo restritas hoje apenas nas zonas de fronteiras agrícolas. Por esta razão, objetivamos colaborar na preservação e na criação controlada e racional desses animais, principalmente em relação aos aspectos reprodutivos, a fim de contribuir com o melhor conhecimento sobre os aspectos da biologia da reprodução desta espécie, cujas informações são carentes ou parciais na literatura. Detendo-se em elucidar as características morfológicas e imunohistoquímicas do sistema reprodutor feminino, masculino e da placenta. Desta forma, favorecendo o processo de cooperação entre Brasil e Argentina, a fim de ampliar as fronteiras do conhecimento e avanços tecnológicos, funcionando como uma ferramenta de interligação das investigações sócio-economicas, proporcionando conhecimento técnico e método de desenvolvimento no âmbito científico-tecnológico.

Estima-se que cerca de 3000 diferentes compostos são usados como constituintes de
produtos na medicina humana e veterinária, compreendendo uma grande extensão de moléculas de vários grupos terapêuticos, com diferentes propriedades físico-químicas, estruturas químicas, ação ambiental e muitas vezes de natureza persistente. Assim, o impacto da sua presença em águas ainda é um problema pouco conhecido e os dados existentes sobre a biodegradação, toxicidade e destino no meio ambiente são insuficientes. Com o propósito de estudar a ação dos xenobióticos (compostos químicos estranhos ao ambiente) nos seres vivos, os pesquisadores utilizam-se de peixes como biomarcadores, pois sofrem bioacumulação e respondem a agentes mutagênicos em baixas concentrações, alem de proporcionar a avaliação de seus efeitos em órgãos ou tecidos específicos, em células germinativas ou somáticas assim como diferenças entre contaminações crônicas e agudas. Estas possibilidades de comparações podem nos fornecer uma gama de resultados que reproduzem, o melhor possível, as condições de uma exposição dos seres humanos a estas substâncias.

O isolamento, cultivo e caracterização completa de células-tronco de diversas fontes contribuirão para estudos que possam definir linhagens celulares derivadas do embrião ou das membranas fetais, cordão umbilical, e medula óssea em diferentes espécies de animais ou em diferentes estágios do desenvolvimento. Essas linhagens celulares representam promessas para o desenvolvimento de modelos adequados para terapias com células tronco em seres humanos, animais e na Medicina Regenerativa. Sendo assim, este projeto pretende capacitar profissionais que trabalham com células-tronco, assim como treinar pessoal em grupos emergentes de pesquisa na área de Biotecnologia de células-tronco. Processo CNPq- 402220/2010-2.

As células germinativas constituem um fascinante processo da biológico e representam a classe de células responsáveis pela perpetuação da espécie. A obtenção in vitro de células germinativas e células tronco espermatogoniais tem criado uma grande expectativa entre os pesquisadores, pois surgem como uma opção de modelo desejável em pesquisas na área reprodutiva, sendo uma fonte potencial de produção futura de gametas in vitro, pois uma vez estabelecida a linhagem, as células podem ser utilizadas em transplantes para auxiliar na produção de gametas maduros e nas tecnologias voltadas à reprodução. Nosso objetivo é isolar, cultivar e caracterizar as células germinativas embrionárias caninas (EGCs) para fornecer a base aos estudos seguintes de diferenciação e reprogramação celular, identificar e analisar qual a dinâmica de marcadores pluripotentes, germinativos e epigenéticos importantes para o desenvolvimento das células germinativas primordiais (PGCs) e das EGCs, identificar marcadores específicos de células tronco espermatogoniais caninas (cSSCs) em diferentes fases de vida reprodutiva a fim de esclarecer os mecanismos pelos quais essas células mantêm um equilíbrio entre a autorregeneração e diferenciação e demostrar a aplicabilidade do transplante de cSSCs adultas. Os métodos utilizados constam da caracterização e proliferação in vitro das células germinativas embrionárias e adultas, através de técnicas de cultivo celular das PGCs, EGCs e cSSCs, análises miscroscópicas de histológia, imunohistoquimica, transmissão e varredura; análises das proteínas relacionadas à pluripotencialidade e reprogramação germinativa e epigenética durante o desenvolvimento de PGCs canina masculina, análise da pluripotencia e expressão por R-qPCR do gene germinativo e transplante de cSSCs em camundongos.

Esta proposta tem como objetivo avaliar o potencial terapêutico de células-tronco utilizando o modelo animal (cães GRMD ? Golden Retriever Muscular Dystrophy). Esta colônia de animais já existe na FMVZ - USP e vem sendo acompanhada clinicamente em estudos relativos à evolução da doença. Como o cão GRMD tem fraqueza muscular semelhante à que ocorre na distrofia muscular progressiva em humanos, este modelo pode ser considerado de excelência para avaliar a eficácia do tratamento (terapia celular). Os eventuais resultados poderão proporcionar a possibilidade do tratamento de crianças com distrofia muscular, e ao mesmo tempo aprimorar a tecnologia voltada para a clínica veterinária. Focaremos inicialmente o estudo referente à biomorfologia de células totipotentes, seu manuseio e expansão em cultura, com intuito de utilizar a terapia celular neste modelo experimental que apresenta grande dificuldade de sobrevida desde o nascimento, até as fases de crescimento. Para tanto deveremos acompanhar as fases de pré-tratamento (preparo) e pós-tratamento. Tais procedimentos incluem desde os processos de reprodução da espécie, parto, coleta de células-tronco (cordão umbilical, sangue periférico de recém nascidos, placenta, âmnio, saco vitelino e entre outras), manipulação e congelamento, até mesmo identificação dos animais afetados e portadores, dos cuidados com a sanidade da colônia, nutrição e imunossupressão dos escolhidos para receber o tratamento. Um banco de células será estabelecido, assim como estudos relativos à compatibilidade em animais terão prioridade na proposta. Os resultados eventualmente obtidos no modelo animal serão fundamentais para atender os preceitos éticos, de eventuais tratamentos em seres humanos, além de desenvolvimento de tecnologia básica com células-tronco para a Medicina Veterinária.

A domesticação dos cães produziu-se simultaneamente em várias partes do globo o que ocasionou, o aparecimento por seleção de várias raças. Desde então o cão passou a ser utilizado para várias e diferentes tarefas, dentre elas acompanhar o homem, que usufruiu da sua conveniência, descobrindo que muitas vezes ambos podem sofrer dos mesmos males. Estudos com modelos animais tem mostrado que transplante de células tronco fetais ou células tronco pluripotentes podem ter sucesso no tratamento de muitas doenças crônicas, sendo assim, objetivamos estabelecer a diferenciação das células germinativas embrionárias caninas em linhagens celulares precursoras de gametas, vislumbrando a formação de um banco de células tronco para utilização em terapia celular veterinária.

A pesquisa tem como objetivo verificar a relação entre função de marcha versus deposição de colágeno muscular após um programa de exercício ativo-livre no modelo canino GRMD, buscando elucidar os efeitos morfofuncionais da fisioterapia motora em humanos portadores da DMD. Serão selecionados dez animais machos e distróficos, do grupo do Canil GRMD / USP. Os dez animais serão separados randomicamente pelos parâmetros biométricos de peso e altura, em dois grupos: treinado, formado por cinco animais, onde os mesmos participarão de um programa de atividade ativo ? livre em terreno cercado e elaborado para a pesquisa e outro controle, com cinco animais, que manterão sua rotina normal junto ao grupo do Canil GRMD / USP. Os animais serão avaliados no primeiro momento, determinado como tempo zero (To) e reavaliados, vinte e quatro semanas depois, com os mesmos parâmetros do To e mesmo examinador. Os parâmetros utilizados serão: 1. avaliação biomecânica da cinemática da marcha, 2. morfometria do músculo vasto lateral quantificando a área de colágeno muscular, 3. imunohistoquímica para diferenciação dos tipos de colágeno I, III e IV encontrado neste músculo e 4. Western blotting para quantificação de cada um dos tipos de colágeno. Será aplicado o teste de normalidade, pelo método de Kolmogorov-Smirnov, para verificar se os valores relacionados a cada variável dos dois grupos estudados respeitam uma distribuição normal de Gauss. Posteriormente os valores de média e desvio padrão dos dois grupos serão confrontados pelo teste t de Student a fim de verificar diferenças entre as médias do grupo treinado e controle, e ANOVA para diferença entre médias dos mesmos animais no To e após as 24 semanas de atividade. Os achados da quantificação do colágeno e das variáveis da análise biomecânica serão confrontados pelo teste de correlação de Pearson

Este projeto visa a correção do gene causador da distrofia muscular através de modificações genéticas específicas e permanentes. Através da terapia gênica, certas doenças monogênicas, como é o caso da distrofia muscular, podem ser tratadas na sua origem. Nos últimos anos estamos presenciando grandes progressos nesta área, que vem revelando problemas importantes, tais como o da oncogênese insercional. Uma alternativa para a minimização da integração incontrolada do DNA no genoma é através da integração no sítio alvo através da recombinação homóloga ou gene targeting. A aplicação do gene targeting em células somáticas de mamíferos é muito limitada devido a sua baixa eficiência, um fato que bloqueia a pesquisa e o progresso em favor da segurança e eficiência na terapia gênica. O desenvolvimento de novas classes de terapêuticos que podem desencadear rearranjos no DNA genômico de maneira específica representa uma nova promessa para um aumento significativo de eficiência desta técnica. Uma maneira de aumentar a eficiência da recombinação homóloga a níveis que podem ser considerados para uso terapêutico é através da indução de uma quebra na molécula de DNA. Recentemente, desenvolveu-se uma tecnologia para a criação de proteínas que se ligam ao DNA de uma maneira específica e induzem uma quebra na molécula do DNA dupla fita dos genes alvo, formados por zinc finger nucleases (ZFNs). Estas endonucleases específicas oferecem grandes vantagens à terapia gênica em relação a outras estratégias que envolvem regulação gênica devido ao fato destas modificações serem de natureza permanente e transmitidas para a progene celular. O DNA de cães acometidos com a distrofia muscular representa um alvo novo e um excelente modelo para este tipo de terapia gênica e celular. O potencial terapêutico das ZFNs em corrigir a mutação gênica causadora da distrofia muscular em cães vai ser avaliada em linhagens de células-tronco recentemente isoladas, oriundas de populações mononucleares de sangue de