Sandra Marcia Muxel.

O Projeto Biocientista Mirim do Instituto de Ciências Biomédicas (ICB) foi projetado em 2017 com o objetivo de prover a conexão Universidade-Escola por meio da alfabetização científica de alunos e professores do ensino básico. Da mesma maneira que este Edital, o Projeto nasceu a partir da necessidade de se preencher a lacuna de interação dos alunos de graduação e pós-graduação com realidades extra-muros. Acreditamos ser necessário viabilizar a participação dos estudantes nos processos de desenvolvimento sustentável e do fortalecimento da cidadania através da vivência em localidades distintas, tornando possível, assim, a formação de um profissional completo e socialmente consciente. Neste contexto, a escola de ensino básico é um rico local de interação com a comunidade e uma fonte de transformação social, propiciando ao aluno a oportunidade de aprender com ela e criar um círculo virtuoso que aproxima a academia da realidade social. Para essa proposta, o Biocientista Mirim servirá como um projeto guarda-chuva para unir esforços de duas iniciativas já estabelecidas, o CientificaMente e o Microbiologia para Todos, e uma nova proposta do Laboratório de Fisiologia de Tripanossomídeos (Bat Lab) do Instituto de Biociências (IB) e do Instituto de Química (IQ). Assim, o projeto conta com a participação e esforços de três unidades: o ICB, o IB e o IQ, distribuídos em três eixos: Universidade-Escola, Escola-Universidade e Universidade-Poder Público. Os objetivos são: (i) fornecer treinamento em metodologias ativas de ensino para alunos de graduação e pós-graduação a fim de prover subsídios para o desenvolvimento de oficinas científicas; (ii) envolver os alunos de graduação no desenvolvimento de 14 oficinas alinhadas ao currículo escolar do ensino básico para serem aplicadas por eles nas escolas participantes; (iii) envolver os alunos de graduação no desenvolvimento de três produtos a serem entregues às escolas participantes: um jogo didático do ?Microbiologia Para Todos?, um kit educacional ?do DNA a proteína? baseado em tecnologia ?BioBits Bright?, e um conjunto de equipamentos laboratoriais confeccionados a partir de eletrodomésticos e lixo eletrônico para serem utilizados nas oficinas; (iv) envolver os alunos de graduação no treinamento de professores de ensino básico em metodologias científicas baseadas nas oficinas, de forma que os mesmos virem multiplicadores do projeto; (vi) envolver os alunos de graduação na tutoria de alunos de ensino médio em projetos de pré-iniciação científica no ICB; e (vii) elaborar estratégias para uma política pública de alfabetização científica junto às secretarias de educação de Taquarivaí e Nova Campina, interior de SP. Esperamos envolver cerca de 70 alunos de graduação de cursos das áreas de biológicas, biomédicas, saúde, engenharias e humanas, e atingir cerca de 2 mil pessoas, entre estudantes e professores, e outras centenas de pessoas de maneira indireta. A aprendizagem menos conteudista do projeto proporcionará aos estudantes a oportunidade de adquirir competências e habilidades para formar um profissional completo e consciente socialmente, sendo essas medidas de maneira quantitativa e qualitativa como proposto neste projeto.

A compreensão da modulação da ativação dos macrófagos mediada por long noncoding RNA (lncRNA) e microRNAs (miRNAs) e sua influência na regulação transcricional e/ou pós-transcricional de genes que podem promover a sobrevivência ou morte do parasita será de extrema relevância para entender como fatores do parasita e do hospedeiro contribuem para a patogênese da leishmaniose. Os lncRNAs regulam a estrutura cromossômica, a transcrição de mRNAs, splicing e tradução das proteínas. Os microRNAs (miRNAs) regulam a tradução e degradação do transcrito do gene-alvo pela interação com a região 3'UTR do mRNA. Os miRNAs e LncRNAs tem sua expressão alterada em macrófagos infectados por Leishmania e podem ser mediar a ativação da resposta pró-inflamatória ou subversão da resposta do hospedeiro frente ao parasita. O objetivo central do projeto é avaliar a função de lncRNA, miRNAs na regulação da resposta imune e metabolismo de macrófagos infectados com Leishmania e usar interferência metabólica como estratégia terapêutica. A parte 1 do projeto será dedicada ao estudo expressão de lncRNAs, miRNAs e genes correlacionados (host-genes) para elucidar os sinais que regulam a ativação de macrófagos infectados por L. amazonensis e L. infantum. Na parte 2 do projeto avaliaremos a atividade leishmanicida de novas drogas desenvolvidas para bloquear a interação PEX5-14 e localização de enzimas no glicossomo em formas promastigotas e em modelos in vitro e in vivo de infecção com Leishmania. Essas drogas, por afetar o transporte de enzimas ao glicossomo, prejudicam o metabolismo do parasito levando-o a morte. Pela identificação de possíveis marcadores de prognóstico e eventuais novos tratamentos esperamos contribuir com um melhor manejo da leishmaniose.

A infecção sintomática por Leishmania leva a leishmaniose, um conjunto de manifestações clínicas tegumentares ou visceral. É uma doença negligenciada endêmica em 97 países, com incidência anual aproximada de 1,5 milhões de casos para a doença cutânea e 300 mil para a visceral. No Brasil, é um importante problema de saúde pública, com incidência estimada de 100.000 casos/ano. As espécies de Leishmania causadoras da doença humana alternam seu ciclo de vida entre promastigotas nos hospedeiros invertebrados (flebotomineos fêmeas) e amastigotas nas células de mamíferos. Promastigotas são transmitidas ao mamífero pelo vetor no repasto sanguíneo e se diferenciam em amastigotas no interior de células fagocíticas como os macrófagos. A capacidade da Leishmania de modificar e subverter as funções da célula hospedeira em favor de sua sobrevivência é um desafio às intervenções terapêuticas. De fato, as opções terapêuticas disponíveis são insatisfatórias pela toxicidade dos tratamentos, por sua eficiência variável e pelo aparecimento de recidivas. Os glicossomos são organelas de protozoários da família Trypanosomatidae que abrigam a maior parte das enzimas da via glicolítica, e de outras vias metabólicas, que são produzidas no citoplasma e transportadas ao glicossomo com auxílio de proteínas PEX. A ligação de PEX5-PEX14 é essencial para o transporte, formando um poro transitório de importação. Trabalhos recentes criaram um modelo de farmacóforo 3D que mimetiza a ligação de PEX5 ao PEX14. Os compostos elaborados a partir desse modelo bloquearam a interação PEX14-PEX5 e foram tóxicos para Trypanosoma brucei e T. cruzi, com baixa toxicidade para células de mamíferos. Considerando a alta toxicidade e baixa eficiência dos tratamentos para leishmaniose, pretendemos avaliar o efeito dos compostos na viabilidade de Leishmania. Para isso, avaliaremos seu efeito em promastigotas e em infecções in vitro e in vivo. Esperamos contribuir com opções para um melhor tratamento da leishmaniose.

O controle da expressão gênica é uma complexa rede de regulação que pode ser mediada por três reguladores: 1) os fatores de transcrição (TFs) via ligação nas regiões de DNA regulatórias, regulando a transcrição do RNA mensageiro (mRNA); 2) os long noncoding RNAs (lncRNAs) via interação com DNA, RNA ou proteína, regulando a estrutura cromossômica, a transcrição de mRNAs e microRNAs (miRNAs), splicing e tradução das proteínas; e 3) os miRNAs via hibridização na região 3UTR do mRNA-alvo, regulando a tradução e/ou degradação do transcrito do gene-alvo. Alguns TFs e miRNAs já foram descritos modulando a infecção por Leishmania. Assim, a análise do perfil de expressão e dos mecanismos de regulação mediados por TFs (NF-kB, IRF1 e Cux1), lncRNAs e miRNAs durante a infecção por Leishmania amazonensis, auxiliará na compreensão dessa complexa rede de modulação da expressão gênica do hospedeiro em resposta ao parasita. A infecção por Leishmania é influenciada pelo background genético do hospedeiro. Por outro lado, o parasita é capaz de subverter as defesas do hospedeiro através do metabolismo de L-arginina para produção de poliaminas, além de regular a expressão de citocinas e quimiocinas, que resultam na sua sobrevivência e replicação. Baseado nesses dados, o objetivo central deste projeto visa avaliar a expressão de TFs, lncRNAs e miRNAs e de metabólitos em macrófagos de linhagem humana (THP-1) e de camundongos BALB/c e C57BL/6 infectados por L. amazonensis, e elucidar o papel de cada um desses reguladores no controle da infecção ou na resistência do parasita à resposta imune dos diferentes hospedeiros, permitindo assim identificar possíveis marcadores moleculares capazes de determinar o prognóstico da infecção, além de possibilitar a comparação de backgrounds genéticos de diferentes hospedeiros. O projeto tem potencial para produzir artigos científicos e apresentações em conferências nacionais e internacionais, além do potencial para a formação intelectual e treinamento de alunos.

Leishmania é o protozoário responsável pela leishmaniose, doença negligenciada que no Brasil ocasiona cerca de 100 mil casos novos por ano. Em seu ciclo de vida, o parasita é encontrado no tubo digestório de um inseto ou dentro do fagolisossomo no macrófago do hospedeiro mamífero. Os diferentes estágios de vida do parasita influenciam a regulação da expressão gênica, que ocorre em nível pós-transcricional. Utilizando abordagens genômicas, transcriptômicas e metabolômica pretendemos, em quatro subprojetos, dar continuidade à temática estabelecida pelo nosso grupo, determinando e/ou estabelecendo novas correlações entre metabolismo de arginina e produção de poliaminas na interação parasita-hospedeiro. Assim, pretendemos caracterizar parasitas resistentes à pentamidina e duramicina, drogas com alvo em vias de poliaminas (subprojeto A). Determinar como a infecção altera o perfil de miRNAs de macrófagos humanos ou de camundongos, correlacionando com o perfil de transcritos e metabólitos (subprojeto B). Utilizar CRISPR/Cas9 na obtenção de parasitas nocautes nulos de genes envolvidos no metabolismo de arginina, confirmando papéis fisiológicos e a localização dos seus produtos (subprojeto C). Correlacionar a fragmentação de sono e consequente alteração de montagem de resposta imune frente à infecção por Leishmania em camundongos C57BL/6, elucidando se há alterações no perfil de transcritos e de miRNAs que influenciem a resposta imune e o curso da infecção (subprojeto D). O desafio dos quatro sub-projetos é correlacionar, por meio de análise "ômicas", os diferentes aspectos da relação parasita-hospedeiro, levantando pontos que possam ser explorados tanto para o entendimento de sua biologia e fisiologia, como para o desenho de novas estratégias de combate ao parasita.

A infecção por Leishmania leva a um conjunto de manifestações clínicas caracterizadas por lesões tegumentares e/ou viscerais. A leishmaniose é uma doença tropical negligenciada endêmica em 88 países, com incidência anual de 1,5 milhões de casos com manifestações cutâneas e 300 mil com manifestações viscerais. No Brasil, a doença é considerada um importante problema de saúde pública, com incidência estimada de 100.000 casos/ano. A Leishmania é um protozoário parasita que alterna seu ciclo de vida entre os hospedeiros invertebrado (flebótomo) e mamífero. Formas promastigotas metacíclicas são encontradas encontradas na probóscide do inseto vetor e ao serem transmitidas se diferenciam para formas amastigotas no interior de células fagocíticas, entre elas os macrófagos, de hospedeiros mamíferos. As enzimas arginase de L. amazonensis (La-ARG) e arginase 1 (ARG1) do macrófago convertem a L-arginina em ureia e ornitina, este último atua como precursor da via de poliaminas, moléculas essenciais para a proliferação do parasita. Por outro lado, a competição pelo substrato L-arginina pela enzima óxido nítrico sintase 2 (NOS2) pode regular a produção de óxido nítrico (NO) em macrófagos infectados, que leva à morte do parasita. Contudo, a disponibilidade de L-arginina e regulação de seu metabolismo em macrófagos infectados, bem como a disponibilidade de poliaminas para as formas amastigotas do parasita ainda não é compreendida. O projeto pretende investigar o metaboloma em macrófagos murinos e humanos infectados com L. amazonensis, focando na interação parasita-hospedeiro e como a expressão de micro(mi)RNAs/mRNAs interferem na infectividade. Os objetivos do estudo estão focados na função dos miRNAs no metabolismo de poliaminas e na geração da resposta imunológica durante a infecção por L. amazonensis. A descrição desses componentes da resposta imunológica relacionados à disponibilidade e metabolismo de L-arginina na produção de NO versus poliaminas, são importantes para a descoberta de alvos para o diagnóstico e prognóstico da leishmaniose, bem como para o desenvolvimento de drogas para o tratamento. O projeto fará parte da colaboração entre a Universidade de São Paulo e a Universidad de San Pablo-CEU (Madri, Espanha), com o envolvimento de alunos e colaboradores.

A regulação pós-transcricional mediada por microRNAs em processos infecciosos causados por bactérias, vírus e parasitas, assim como de células cancerígenas, vem sendo intensamente estudada nos últimos anos. A infeção promovida por Leishmania também é capaz de modular a expressão de miRNAs e esses regulam genes envolvidos na resposta do macrófago frente ao parasita. A modulação na expressão de miRNAs do macrófago promovida pelo parasita poderia inibir a produção de óxido nítrico (NO) direcionando a L-arginina para produção de poliaminas, através do aumento na expressão da arginase I do hospedeiro, o que resulta na sobrevivência e replicação do parasita. Ainda não foi elucidado como a sinalização mediada pelos receptores Toll-like (TLR) atua no processo de regulação de expressão de miRNAs e mRNAs-alvo em modelos de infecção por Leishmania amazonensis. O projeto está baseado na hipótese de que a expressão de microRNAs do hospedeiro seja modificada durante a entrada e replicação da L. amazonensis no macrófago, sendo mediada pelo reconhecimento através de receptores da imunidade inata, os TollLike Receptors (TLRs), como meio de subverter a resposta imune do hospedeiro. Deste modo, a ativação da sinalização via TLRs modularia a expressão de alguns miRNAs envolvidos no controle pós-transcricional da sinalização intracelular das vias dos receptores da imunidade inata, ou ainda a modulação da expressão de miRNAs regularia a ativação da via dos TLRs. Assim, a modulação dos miRNAs mediada por TLR, ou vice-versa, teria papel funcional na maturação do fagolisossomo, na ativação da produção de citocinas, na ativação da sinalização via NF-kB ou na via de produção de poliaminas/NO (arginase/NOS2). A idéia central deste projeto é investigar se as sinalizações via MyD88, TLR2 ou TLR4 durante a infecção de macrófagos promovem mudanças na composição de miRNAs do hospedeiro induzindo maior capacidade do macrófago em fagocitar e eliminar o parasita. Ainda, entender se a regulação na composição de miRNA devido a alteração na maneira de reconhecer o parasita contribui para a ativação dos macrófagos e resposta imune gerada durante a leishmaniose. Assim, este projeto tem como objetivo central avaliar a expressão de microRNAs em macrófagos oriundos de camundongos nocautes de MyD88, TLR2 ou TLR4 infectados por L. amazonensis e suas implicações na regulação de vias relacionadas a fagocitose, produção de poliaminas e NO e consequente sobrevivência do parasita. Os miRNAs que tiverem sua transcrição alterada e que possuam relevância para as vias estudadas serão utilizados como "candidatos" em estudos de silenciamento de sua expressão e impacto na infectividade. A execução do projeto tem potencial para gerar produtos em forma de artigos científicos e em conferências, para ampla divulgação do conhecimento, bem como formação intelectual e treinamento de alunos da graduação e pós-graduação. Ainda, os dados preliminares indicam a possível identificação e desenvolvimento de marcadores gênicos da infecção por L. amazonensis ou de inibidores específicos das vias descritas no projeto com o objetivo de controlar a infecção.

Na fase de montagem de respostas inflamatórias, a ativação do eixo imune-pineal facilita a migração de leucócitos para tecidos periféricos por inibir a produção de melatonina pela glândula pineal, e imunomodula localmente a resposta devido à produção de melatonina por células imunocompetentes periféricas e pelas células glias do sistema nervoso central. Durante o desenvolvimento adequado destas respostas, o restabelecimento da produção de melatonina pela glândula pineal e a supressão de sua produção por fontes extra-pineais regula a intensidade da inflamação. Processos desregulados, que não ajustam a resposta inflamatória, podem resultar na morte do indivíduo. Deste modo, é importante entender as diferenças no padrão de ativação do eixo imune-pineal entre situações letais e não letais. Neste projeto, compararemos a ativação do eixo imune-pineal (inibição/estimulação da produção de melatonina pela pineal e fontes extra-pineais periféricas e do sistema nervoso) em ratos injetados com doses letais e não letais de LPS. As dosagens de melatonina serão acompanhadas pela detecção da expressão dos receptores para melatonina MT1 e MT2 nas diferentes células e tecidos. Além disso, será avaliada a eficácia de intervenções farmacológicas (agonistas ou antagonistas melatonérgicos) ou físicas (eletroacupuntura) em reduzir a letalidade deste quadro. A expectativa é que o ajuste da ativação do sistema melatonérgico possa reverter a mortalidade induzida por altas doses de LPS, e que possamos basear a proposição de estratégias terapêuticas para inflamações letais no entendimento da relevância endógena do eixo imune-pineal

A biologia de parasitas pertencentes ao gênero Leishmania oferece características impares como modelo de estudo na interação patógeno - hospedeiro. Neste projeto estamos propondo 2 sub-projetos que visam estudar aspectos bioquímicos, moleculares e fisiológicos dessa interação, principalmente quando da infecção do macrófago no hospedeiro mamífero, sem no entanto esquecer da relação da Leishmania com o inseto vetor. São objetivos do projeto: Avaliar mecanismos moleculares patogênicos na interação Leishmania - hospedeiro envolvidos nas vias de arginina e poliaminas, pela análise do perfil global de alterações na expressão de mRNAs e microRNAs induzidas durante e após a fagocitose de L. (L.) amazonenses, selvagem ou nocautes para arginase, por macrófagos murinos, tratados ou não com diferentes concentrações do hormônio melatonina. Identificar e validar os genes com a expressão gênica diferenciada durante e após a fagocitose de L. (L.) amazonensis por macrófagos murinos. Estabelecer a associação de genes alterados na sua expressão gênica na infecção, patogenia e nas alterações metabólicas. Identificar o gene que codifica um possível- translocador de fosfolipídeo para a face externa da membrana plasmática de L. (L.) amazonenses. Determinar qual o papel fisiológico desse translocador e identificar o papel dessa exposição na invasão do macrófago e na posterior inativação do macrófago. Determinar o fosfolipídeo exposto como sinal de apoptose.

O estabelecimento do conceito de um eixo imune-pineal dá subsidio para o entendimento da interação entre as respostas de defesa, recuperação e disfunção com a produção pineal e extra-pineal de melatonina. O objetivo do presente temático é ampliar o entendimento desta relação entre cronobiologia e defesa considerando: 1 - Bases Moleculares que coordenam o Eixo Imune-Pineal 2 - Aplicação do conceito do eixo imune-pineal em modelos animais de inflamação leve (obesidade e poluição do ar) e parasitose. 3 - Aplicação Clínica do conceito do eixo imune-pineal na discriminação de agressividade/ invasibilidade de gliomas humanos e na predição da eficácia de tratamento com antidepressivos. Empregaremos tecnologia de biologia celular, molecular e respostas funcionais usando cultura de células e de órgãos, modelos animais que mimetizem processos inflamatórios e modelos clínicos.

O projeto está baseado na hipótese de que a composição de miRNA do hospedeiro seja modificada durante a entrada e replicação da Leishmania amazonensis no macrófago, como meio de subverter a resposta imune do hospedeiro. Deste modo, a alteração na expressão de alguns miRNAS, envolvidos no controle pós-transcricional da sinalização intracelular das vias dos receptores da imunidade inata, TLRs, na maturação do fagolisossomo e ativação da produção de citocinas e iNOS (NF-κB), auxiliariam a manutenção do parasita no vacúolo endocítico, ao mesmo tempo que diminuiria a interação com o fagolisossomo, portanto sua replicação no macrófago aumentaria a infectividade deste parasita. 
A composição de miRNAs em processos infecciosos causados por bactérias e vírus, assim como de células cancerígenas, vem sendo intensamente estudada nos últimos anos, mas a composição de miRNAs durante a infecção por Leishmania não foi estudada anteriormente. Este projeto tem como objetivo central avaliar as alterações na composição de microRNAs em macrófagos infectados por L. amazonensis e suas implicações na regulação de vias relacionadas a fagocitose, permanência do parasita no fagolisossomo e sua replicação, bem como diminuição na resposta de produção de iNOS e citocinas, utilizando L. amazonensis selvagens e nocaute para arginase (menor infectividade), macrófagos selvagens e nocaute para MyD88 (mais susceptíveis a infecção) ou tratados com melatonina (maior capacidade fagocíticas) ou knockdown para as subunidades do NF-κB, e os miRNAs que tiverem sua transcrição alterada e que possuam relevância para as vias estudadas serão utilizados como ?candidatos? no estudo de silenciamento de sua expressão e impacto na infectividade.

A biologia de parasitas pertencentes ao gênero Leishmania oferece características ímpares como modelo de estudo na interação patógeno - hospedeiro. São propostos 3 sub-projetos que visam estudar aspectos bioquímicos e fisiológicos dessa interação principalmente quando da infecção do macrófago, no hospedeiro mamífero. São objetivos do projeto: Correlacionar a localização sub-celular da arginase no glicossomo de Leishmania com o seu possível papel funcional na manutenção do parasita e da infecção. Verificar a existência de uma competição ou regulação cruzada entre a arginase do parasita e a enzima óxido nítrico sintase induzida (iNOS) do macrófago. Avaliar o transporte de L-arginina nas diferentes fases da vida do parasita. Caracterizar o efeito da melatonina, produzida pelo mamífero, na infecção. Determinar o transporte de fosfolipídeos em Leishmania e sua importância na manutenção da infecção. Estão envolvidos no desenvolvimento dos sub-projetos, 2 Pós-Doc's (Marcos Gonzaga dos Santos e Maria Fernanda Laranjeira da Silva); 1 Doutorando (Emerson A. C. Martins) e 2 alunos de IC (a serem selecionados) e os técnicos Ricardo A. Zampieri e Sandra M. Muxel. Há ainda o estabelecimento de uma importante colaboração com o Laboratório de Cronofarmacologia (IB-USP) coordenado pela Profa. Regina P. Markus, no sentido de estudar como a infecção por Leishmania pode sinalizar modificações na expressão da célula hospedeira e produção de respostas que podem ser exploradas pelo parasita para instalar a infecção, ou do hospedeiro para eliminar o parasita. Entender essa relação pode permitir o desenho de ações efetivas no controle da parasitose. (AU)

A integração de conhecimentosdas diferentes áreas contribuirá para um melhor entendimento sobre o controle da doença. Formação de recursos humanos com competência em análise molecular e sequenciamento de nucleotídeos.

A integração de conhecimentosdas diferentes áreas contribuirá para um melhor entendimento sobre o controle da doença. Formação de recursos humanos com competência em análise molecular e sequenciamento de nucleotídeos.

SDF-1 foi inicialmente identificado como um fator derivado do estroma da medula óssea e um fator estimulador das células B. Atualmente, o SDF é também conhecido com oum quimioatraente altamente eficiente para linfócitos T. O fragmento amplificado do SDF-1 neste trabalho é pertencente a região 3' não codificante do mRNA transcrito (3' UTR). Sabe-se hoje, que muitas regiões 3' UTR participam da regulação da transcrição gênica de muiots fatores imunológicos. O sequenciamento da quimiocina SDF (CXCL12), (GEN BANK: L 36033), revelou um polimorfismo no segmento evolucionário conservado da região 3' não codificadora (3'UTR), (Posicção 801 G È A) do gene estrutural transcrito. Este alelo variante pode ter funções regulatórias importantes, resultantes do aumento na concentração de SDF. Baseado nestas informações, a hipótese levantada pelo presente trabalho, advém do fato que, se a mutação descrita produz um aumento na concentração da quimiocina SDF-1, possivelmente há implicações desse aumento em câncer de mama e também em outras neoplasias hematológicas relacionadas à susceptibilidade ou aparecimento de metástases.

é copnhecido que a imunidade celular exerce função importante na resposta por células CD8+ citotóxicas, que reconhecem o complexo glicoprotéico MHC classe I-peptídeos antigênicos. O peptídeo sintético HIV-P9 é um peptídeo reconhecido por células CD8+. O qual se liga ao MHC classe I das células intactas com grande afinidade mas não se ligam a proteína purificada do MHC classe I. É possível, que P9 em cultura possa estimular a expressão de HLA-DR na superfície celular, consequentemente, ativando muitas células presentes nesta cultura. Nakamura (1997) presume que o melhor candidato para uma vacina-peptídeo seriamepitopos de regiõpes conservadas do HIV capaz de serem reconhecidos por células T CTLs. Neste contexot, utilizamos como uma nova metodologia o estudo da expressão de um RNA regulador-NTT (Nonconding Transcript T cell RNA) que apenas transcrito, porém não é utilizado, o qua lseria de fundamental imoprtância na analise da ativação celular, especialmente linfócitos envolvendo várias patologias.