Andrea Micke Moreno.

Diagnóstico das doenças infecciosas de importância econômica que afetam os suínos atendendo granjas e empresas que atuam na suinocultura nacional.

To investigate the diversity and evolution of antimicrobial resistance (AMR) determinants in Salmonella isolated from Brazilian pigs and poultry over the past ten years.
To explore the role played by AMR in the success of different Salmonella serotypes.

A tipificação dos isolados de leptospiras é essencial para melhor entendimento das características epidemiológicas da doença aguda em humanos e animais e da instalação da condição de portador renal em diversas espécies animais. A caracterização genotípica dos isolados através do MLST tem sido considerada atualmente como a técnica padrão ouro na caracterização de agentes bacterianos, devido menor variação dos resultados em comparações inter laboratoriais. A proposta do presente estudo é caracterizar, através do MLST e da PFGE, as estirpes de Leptospira isoladas de animais domésticos, silvestres, sinantrópicos e de humanos, em diferentes regiões geográficas do Brasil, no período de 1961 a 2008 e mantidas pelo Laboratório de Zoonoses Bacterianas do Departamento de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo. Os resultados obtidos permitirão além da completa caracterização desta coleção, identificar novas espécies e diferenciar sorovares do banco de estirpes, que não puderam ser caracterizadas pelos métodos sorológicos, comparando com os resultados que serão obtidos através da eletroforese em campo pulsado (PFGE).

Bordetella bronchiseptica é um dos agentes etiológicos da tosse dos canis, infecções do trato respiratório superior em gatos, rinite atrófica, broncopneumonia em suínos, sendo freqüentemente isolada em coelhos e animais de laboratório. O impacto deste agente em saúde humana ainda é subestimado, o risco da infecção de pessoas imunodeprimidas que tem contato com animais domésticos existe e é relatado na literatura. No Brasil não há estudos caracterizando o agente isolado a partir de espécies de animais de companhia. O conhecimento dos aspectos epidemiológicos da infecção por Bordetella bronchiseptica é de fundamental importância para a adoção de medidas efetivas de controle e prevenção da infecção em seres humanos e animais domésticos, neste sentido, estudos de epidemiologia molecular são de grande relevância. O presente estudo tem como objetivos caracterizar amostras de Bordetella bronchiseptica isoladas de suínos, coelhos, cães e gatos através da eletroforese em campo pulsado (PFGE) e do perfil de resistência a antimicrobianos.

Escherichia coli são bactérias gram-negativas não esporuladas, anaeróbias facultativas, bastonetes móveis com flagelos peritríquios e produtores de catalase. É o principal agente infeccioso das diarréias em leitões e gera perdas importantes ao setor devido à redução do desempenho de crescimento e mortalidade, com consequente queda de produtividade. A doença do edema é uma doença de caráter sistêmico que afeta os leitões desmamados e é causada por cepas de E. coli adaptadas ao hospedeiro que produzem uma variante da toxina Shiga 2 (Stx2e). Estas cepas de E.coli colonizam o trato intestinal (íleo) através da ação da fímbria F18 que são específicas para os suínos. Nos últimos anos, destaca-se uma preocupação com relação ao alto grau de bactérias resistentes aos antimicrobianos, em especial E. coli. Apesar de sua grande ocorrência no Brasil, a epidemiologia da infecção por E. coli positiva para Stxe2 e estudos envolvendo a caracterização molecular e as características de resistência a antimicrobianos destas cepas tem sido pouco estudadas. O presente estudo propõe a caracterização genotípica e fenotípica de cepas de E. coli associadas a doença do edema e isoladas em suínos provenientes de diferentes regiões do Brasil.

Staphylococcus hyicus é o agente causador da epidermite exsudativa em suínos. Esta enfermidade acomete animais em todos os países produtores desta espécie animal e apresenta ampla ocorrência no Brasil. Estudos avaliando a ocorrência deste agente em nosso país datam da década de 70 e 80. Desde então não tem sido realizadas avaliações referentes à presença de toxinas esfoliativas, resistência a antimicrobianos e avaliações do perfil fenotípico e genotípico de isolados nacionais. O presente estudo propõe a caracterização de isolados de S. hyicus provenientes de suínos doentes e sem sinais de epidermite exsudativa, provenientes de uma coleção de 30 anos e de isolados recentes. Os isolados serão caracterizados e comparados quanto ao perfil de resistência a antimicrobianos, presença de genes codificadores de toxinas esfoliativas, caracterização genotípica através da eletroforese em campo pulsado (PFGE) e do polimorfismo de restrição de fragmentos amplificados (AFLP). Os resultados obtidos permitirão maior conhecimento sobre a disseminação desta espécie bacteriana em nosso meio, além da avaliação das mudanças genotípicas e de resistência a antimicrobianos, ocorridas nestas três décadas.

Pasteurella multocida é um importante patógeno para suínos, causando rinite atrófica progressiva, pneumonia, pleurite, e septicemia. Para implantação de estratégias de controle e prevenção desta infecção, torna-se necessário o conhecimento a respeito do perfil de disseminação do agente em condições naturais e em diferentes tipos de sistema de produção. O presente estudo propõe a determinação dos perfis imunológicos dos animais contra o agente em diferentes faixas etárias através de testes imunoenzimáticos em nove propriedades de ciclo completo em que haja circulação do agente e que utilizem diferentes formas de prevenção e controle da infecção. Os perfis sorológicos serão acompanhados pelos perfis de eliminação do agente através da pesquisa do mesmo pela PCR. Serão empregados testes imunoenzimáticos para detecção de anticorpos contra P. multocida e contra a toxina dermonecrótica envolvida na rinite atrófica progressiva. A PCR será realizada da mesma forma para pesquisa do DNA do agente e do gene codificador da toxina. As granjas serão selecionadas a princípio pela presença do agente e de lesões sugestivas do quadro de rinite atrófica em abatedouro. Serão selecionadas dentro do grupo de granjas positivas, três propriedades em que não seja utilizada vacinação contra o agente e com baixa utilização de antimicrobianos, três propriedades em que seja utilizada a vacina comercial na matriz e três propriedades em que seja utilizada a vacinas comerciais em matriz e leitões. Serão colhidas amostras de sangue e suabes de tonsilas de 12 animais, nas seguintes faixas etárias: leitões de 20 dias, leitões de 40 dias, leitões de 60 dias, leitões de 90 dias, aos 110 dias e aos 140 dias. Serão colhidas ainda amostras de sangue e suabe de 12 fêmeas por propriedade, mães dos leitões de 20 dias, nas primeiras horas após o parto. O total de amostras examinadas por propriedade será de 84 amostras de sangue e 84 suabes de tonsila. A partir dos resultados obtidos será possível obter informações sobre o comportamento do agente nos rebanhos suínos e melhores opções de prevenção e controle em casos de rinite e surtos de pneumonia.

O projeto tem por objetivos avaliar a importância da Listeria monocytogenes e yersinia enterocolitica em sistemas de produção de suínos e abatedouros, além da caracterização genotípica dos isolados.

Atualmente, a salmonelose representa uma das zoonoses de maior importância sobre a Saúde Pública no mundo, em razão da alta endemicidade, mortalidade, e dificuldade do seu controle. No Brasil, vários estudos relatam a alta frequência de suínos eliminando o agente em diferentes fases do sistema de produção. No município de São Paulo, é possível encontrar diferentes realidades no que se diz respeito às boas práticas de produção e ao controle de qualidade dos produtos de origem animal, principalmente quando se considera os pontos de venda ao consumidor. A contaminação por agentes causadores de infecções de origem alimentar está presente e tem sido pouco avaliada nestes ambientes. O presente estudo é parte de uma colaboração internacional envolvendo a North Carolina State University e a University of Surrey que atuarão como parceiras na realização de parte dos testes propostos e permitirão o treinamento e a troca de conhecimento entre seu grupo de pesquisa e o aluno responsável pelo projeto. Os objetivos principais são avaliar a presença de Salmonella entérica em cortes de carne suína vendidos em mercados municipais, açougues e mercados de pequeno porte distribuídos nas cinco regiões do município de São Paulo. As cepas isoladas serão caracterizadas quanto ao sorotipo, perfil de resistência a antimicrobianos, perfil genotípico através da eletroforese em campo pulsado (PFGE) e da tipagem por sequenciamento de múltiplos sítios (multilocus sequence typing - MLST). Os dados obtidos serão comparados aos perfis de cepas oriundas de criações de suínos e casos de infecção alimentar relatados no país.

O projeto em questão visa a caracterização de amostras de C. perfringens isoladas de suínos com ou sem diarréia e a pesquisa dos genes codificadores de toxinas através da PCR, do AFLP, da PFGE e da PCR ribotipagem.

O projeto tem como objetivo principal avaliar a importância do Campylobacter spp. na contaminação de carcassas de suínos no Estado de São Paulo e caracterizar os isolados através de técnicas moleculares.

O projeto tem como objetivo a pesquisa de possíveis marcadores de virulência em amostras de Streptococcus suis através da PCR e a análise genética dos isolados através de eletroforese em campo pulsado.

As perdas reprodutivas representadas pelos retornos ao cio, abortamentos, mumificação fetal e natimortalidade representam um grave prejuízo ao mercado suinícola. O presente estudo teve por objetivo a detecção dos principais agentes bacterianos e virais envolvidos nos casos de mumificação fetal, natimortalidade e abortamento através da PCR.

No referido projeto 100 cepas de Escherichia coli isoladas de leitões com diarréia provenientes do Estado de São Paulo, foram caracterizadas quanto a presença dos genes codificadores das enterotoxinas STa, STb e LT e verotoxinas VT1, VT2 e VT2e através da PCR.

As enterites de etiologia bacteriana são muito frequentes em suínos das fases de crescimento e terminação, levando ao retardo no crescimento e aumento da mortalidade. No presente estudo foi padronizada a PCR sob a forma de multiplex para detecção de Lawsonia intracellularis, Salmonella spp, Brachyspyra hyodysenteriae e B. pilosicoli. A reação padronizada foi então utilizada para detecção destes agentes em amostras de fezes de suínos dessas faixas etárias.

A Escherichia coli é um importante agente causador de diarréia em suínos e possui vários mecanismos conhecidos de resistência a antimicrobianos e disseminação dos mesmos. No referido projeto 600 amostras de E. coli isoladas de leitões com diarréia foram analisadas através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM) quanto ao perfil de resistência a diferentes antimicrobianos amplamente utilizados em suinocultura.