Francemilson Goulart da Silva.

Trata-se da elaboração de textos científicos com uma linguagem informal e várias ilustrações para ampla divulgação entre acadêmicos e não acadêmicos.

O tratamento da dislipidemia previne doenças cardiovasculares e é feito com fármacos que diminuem os níveis séricos do colesterol total (CT) e dos triacilgliceróis (TAG), tais como os fibratos (FF) e a ezetimiba (EZ). No intestino, o FF, agonista do receptor ativado por proliferadores do peroxissoma tipo alfa (PPAR-a), aumenta a oxidação lipídica, enquanto a EZ inibe a captação intestinal do colesterol. Contudo, essas ações não esclarecem se a absorção dos lipídios está diminuída após tratamento com FF e EZ, o que impactaria diretamente a lipemia. Nossa hipótese é que FF e EZ promovem alterações fenotípicas e funcionais nos enterócitos, diminuindo o metabolismo e o conteúdo do CT e do TAG secretado na linfa e, consequentemente, melhorando o quadro de dislipidemia. Para testar nossa hipótese, camundongos selvagens da linhagem C57BL/6 serão alimentados com dieta normal ou HFD durante 9 semanas e, após, tratados com FF e EZ por 15 dias. Em seguida, os animais serão eutanasiados e o jejuno removido para análise: a) das alterações estruturais por microscopia eletrônica; b) da permeabilidade paracelular; c) da secreção do CT e TAG marcados com radioisótopos; d) e da proteômica e fosfoproteômica. O sangue será utilizado para dosagem dos lipídios (CT, TAG, LDL-C, HDL-C). Experimentos serão conduzidos com camundongos TLR4 KO para avaliar a via de sinalização ativada pela HFD e o impacto do FF e EZ nesta sinalização. Com base nos resultados será possível correlacionar os achados morfofuncionais e da proteômica no jejuno com a melhora da dislipidemia, e, dessa forma, descrever um mecanismo de ação robusto para o FF e EZ assim como identificar seus alvos no intestino, o que contribuirá com o avanço nas pesquisas na área da fisiologia e farmacologia da dislipidemia.

O epitélio intestinal representa uma barreira à entrada de produtos bacterianos, e o dano ao epitélio está associado com o aumento de LPS circulante e com inflamação sistêmica de baixo grau, ambos observados na obesidade. O mecanismo molecular que sustenta essas alterações na barreira tem sido estudado, e os dados atuais apontam para alterações no padrão de expressão de citocinas pró-inflamatórias e de proteínas das junções de oclusão. Sabe-se que a dieta hiperlipídica (dieta HF) e os hormônios tireoidianos (HTs), ambos capazes de afetar severamente o peso corporal, alteram a expressão de citocinas e o estado inflamatório em diversos tecidos, o que precisa ser melhor caracterizado no intestino. Dessa forma, considerando o aumento marcante da ingestão de lipídios na dieta ocidental e a prevalência de disfunções tireoidianas, faz-se necessário entender o impacto dos componentes da dieta, em especial, a hiperlipídica, e dos HTs, na integridade da barreira intestinal. Nesta proposta, pretendemos avaliar a expressão de mediadores pró-inflamatórios, proteínas de junções de oclusão e características morfológicas do jejuno proximal de camundongos alimentados com dieta hiperlipídica e dieta padrão, associadas ou não ao hipo e hipertireoidismo, por meio das seguintes abordagens experimentais: Western blotting, imunofluorescência, PCR em tempo real e análise histológica da parede intestinal por hematoxilina-eosina. Os resultados obtidos contribuirão para a compreensão dos mecanismos moleculares envolvidos na regulação da integridade da barreira intestinal e na ampliação do conhecimento na área da fisiologia do sistema digestório, a qual tem sido muito pouco explorada.

O transporte dos produtos de hidrólise dos macronutrientes através do epitélio intestinal é feito por proteínas carreadoras específicas, cujo processo de regulação, principalmente por parte dos próprios nutrientes, precisa ser melhor compreendido. Existem evidências de que fatores de transcrição, como os PPARs, regulam a captação e expressão dos transportadores de macronutrientes em tecidos e linhagens celulares; contudo, pouca ênfase é dada na regulação desses transportadores na barreira intestinal. Sabe-se que os PPARs são ativados por ácidos graxos, assim como pelos hormônios tireoidianos (HTs) e, considerando o aumento marcante da ingestão de lipídios na dieta ocidental e a prevalência de disfunções tireoidianas, faz-se necessário entender o impacto dos componentes da dieta, em especial, a hiperlipídica, e dos HTs, nos mecanismos de transporte dos nutrientes através da barreira. Nesta proposta, pretendemos avaliar a expressão do PPAR alfa e dos transportadores de macronutrientes no jejuno proximal de camundongos alimentados com dieta hiperlipídica e dieta padrão e em linhagem celular (Caco-2), mantidas ou não com mistura de ácidos graxos saturados e associadas ou não ao hipo e hipertireoidismo. Por haver descrição na literatura de inflamação de tecidos após introdução de dieta hiperlipídica, consideramos importante avaliar a expressão de citocinas pró-inflamatórias e suas repercussões naquela que é o primeiro alvo dos lipídios da dieta, e a primeira via de entrada de nutrientes para a circulação, ou seja, a barreira intestinal. Os resultados obtidos contribuirão para a compreensão dos mecanismos moleculares envolvidos na regulação do transporte de nutrientes no intestino e na ampliação do conhecimento na área da fisiologia do sistema digestório, a qual tem sido muito pouco explorada.

A instalação da caquexia está associada à expressão de citocinas pró-inflamatórias. Estas, por sua vez, reduzem os estoques energéticos por induzir lipólise, proteólise e distúrbios no metabolismo glicídico. A resistência à ação de hormônios anabólicos, tais como, insulina ou hormônio do crescimento tem sido comum nessa condição. O tratamento com glutamina tem se mostrado eficaz no combate à caquexia o que pode estar atrelado à melhora da sensibilidade insulínica. Desta forma, o objetivo do nosso estudo é avaliar o papel da glutamina na resposta periférica dos tecidos à insulina. Para tanto, ratos normais e portadores do tumor Walker-256 serão utilizados nos experimentos; em relação aos últimos, estes também serão tratados ou com insulina, ou glutamina, ou ambos, insulina mais glutamina por 12 dias. No final do tratamento, os animais serão sacrificados e os seguintes tecidos serão removidos: (1) músculo gastrocnêmio para avaliar a atividade da PI3K, o conteúdo fosforilado de Akt e AS160, o conteúdo total do RNAm e da proteína GLUT4, assim como o conteúdo de GLUT4 presente tanto na membrana plasmática quanto no microssoma; (2) fígado para avaliar a atividade da PI3K e o conteúdo fosforilado de Akt e AS160. Os resultados obtidos poderão esclarecer os mecanismos moleculares envolvidos com a melhora da sensibilidade periférica à insulina frente à administração de glutamina, o que é fundamental no combate à caquexia.