Elisabete Jose Vicente.

O Projeto tem quatro principais objetivos:1) Seleção e identificação de micro-organismos (bactérias e leveduras) que estejam presentes em águas, solos e sedimentos que sejam naturalmente adaptados à contaminação por metais pesados, que possam ser cultivados em meios minerais de baixo custo, em pequeno intervalo de tempo, e que sejam resistentes a elevadas concentrações de íons de metais pesados; 2) Caracterização dos microrganismos selecionados, empregando ensaios de:- Biosorção de metais pesados;- Desorção de metais pesados;- Determinação dos sítios de ligação às estruturas celulares destes metais pesados.3) Construção de cepas geneticamente modificadas com capacidade aumentada de realizar a biosorção de metais pesados. Realizar a caracterização destas cepas, como descrito no item anterior;4) Empregar os microrganismos selecionados e melhores clones construídos em ensaios em biorreator, visando avaliar o processo biosorção-desorção de metais pesados. Pelo menos, para algumas cepas.

Neste projeto, propomos o estudo da comunidade microbiana, isolamento de microrganismos (bactérias, arqueias e fungos) já adaptados ao crescimento no ambiente, que potencialmente poderão vir a ser empregados em processos futuros de biorremediação das contaminações presentes nestas áreas. Em seguida, a capacidade de biorremediação dos microrganismos autóctones (indígenas) resistentes selecionados será comparada ao de microrganismos já empregados em processos de biorremediação industriais.

Emprego de extratos vegetais visando eliminar ou baixar a carga viral de embriões durante processo de inseminação artificial de murinos, visando estabelecer parâmetros para esta técnica com bovinos.

Genes codificadores de antigenos presentes na superficie virus foram expressos na levedura Pichia pastoris. Objetivo do presente projeto é a produção destes antigenos em maior escala.
Recursos: Projeto PIPE-FAPESP com a Empresa ?Biossegurança do Brasil Ltda? (BIOSAFE) e o Centro de Pesquisas em Biotecnologia/Núcleo de Apoio a Pesquisa da Universidade da São Paulo (NAP-CPB/USP).

Selecionar e caracterizar clones de um Biblioteca genômica de Terra Preta de índio construída om colaboração com os pesquisadores da Universidade Federal do Amazonas (UFAM) Spartaco Astolfi Filho e Odanir Pereira, num Projeto anterior com recursos da CAPES. Cabe ao nosso lab na USP o estudo e clones produtores de lipases de polhidroialcanoato (PHA).

Isolamento e caracterização de bactérias produtoras de polihidroxialcanoatos a partir de residuos da agroindustria

Construção de microrganismos recombinantes com capacidade aumentada de realizar a biorremediação de água contendo metais pesados:
- Bacterias Gram-negativas: E. coli, Cupriavidus metallidurans, Pseudomonas putida, etc;
- Bacterias Gram-positivas: Deinococcus radiodurans, Bacillus, etc
- Leveduras: Saccharomyces cerevisiae, Pichia pastoris, Yarrowia lipolitica, etc.

Construção de biossensores bacterianos para metais pesados: mercurio, chumbo, arsenio, etc.

Prospecção dentro de biblioteca metagenomica construida com solo de Terra preta de índio de clones com capacidade:
- Produção de polihidroxialcanoatos
- Produção de lipase
- Com capacidade de realizar a biorremediação de moléculas organicas toxicas

Clonagem e expressão de genes em linhagens de levedura selvagens empregadas em Usinas sucro-alcooleiras, visando o melhoramento da produção de etanol a partir de:- sacarose de cana-de-açucar;- amido;- pentoses derivadas de hidrolisado de bagaço ou outras fontes oligocelulósicasVisa também a construção de sistemas que permita a super-secreção de enzimas recombinantes.

Desenvolvimento de bacterias para a produção de polihidroxialcanoatos (PHA), biopolimeros totalmente biodegradáveis e biocompativeis a partir de sacarose de cana-de-açúcar. Foram constuidas linagens da bacteria Cupriavidus necator geneticamente modificadas: capazes de assimilar diretamente a sacarose; com capacidade de produção PHA com capacidade melhorada de produção de co-polimero PHB-PHV.