Jarlei Fiamoncini.

Atividade extensionista desenvolvida no âmbito do programa USP 60+

Atividade de extensão desenvolvida no âmbito do programa USP 60+

Curto de extensão oferecido dentro do programa USP 60+

Curto de extensão oferecido dentro do programa USP 60+

O leite materno é fundamental para o estabelecimento da microbiota intestinal, pois contém microrganismos e compostos bioativos que possuem ação prebiótica. Ácidos biliares (AB) são compostos anfifílicos que possuem atividade antimicrobiana. Embora a presença desses compostos no leite materno tenha sido descrita na década de 80, sua relação com a colonização da microbiota intestinal de recém-nascidos ainda não foi avaliada. Considerando a alta variabilidade interindividual dos AB no plasma, é plausível considerar que a concentração de AB no leite materno também tenha uma alta variabilidade. Se essa hipótese for confirmada, recém-nascidos filhos de mães diferentes estariam expostos a diferentes concentrações de AB durante a amamentação. Essa proposta tem como objetivo investigar a relação entre a presença de AB no leite materno e o estabelecimento da microbiota intestinal através de dois estudos: 1) O primeiro estudo tem como objetivo avaliar a variabilidade interindividual e a relação entre a concentração de AB no plasma e leite materno. 2) O segundo estudo irá avaliar a relação entre a presença de AB no leite materno e a composição da microbiota intestinal de recém-nascidos. Para isso, serão utilizadas amostras de leite materno e plasma de biobancos e será conduzido um estudo clínico com pares de mães e bebês para a coleta e análise de amostras de leite materno, sangue e fezes. Esse projeto é inovador e pode contribuir para a compreensão de como o leite materno influência no desenvolvimento de infantes.

Os ácidos biliares (AB) são os metabólitos endógenos presentes na circulação sanguínea mais responsivos à ingestão de uma refeição, podendo aumentar até 20 vezes no plasma durante o período pós-prandial. Seu aumento na circulação se deve a um escape da absorção hepática de primeira passagem, quando o fígado capta cerca de 70 dos AB reabsorvidos pelo intestino. AB ativam receptores em diferentes tipos celulares, onde esses compostos podem participam da regulação do metabolismo e da resposta inflamatória. A presente proposta pretende mapear a variabilidade do aparecimento de AB na circulação sistêmica e investigar a relação entre esse fenômeno e a regulação da inflamação e metabolismo que ocorrem após a ingestão de uma refeição. Para isso, avaliaremos a variação pós-prandial da concentração de AB plasmáticos em 150 mulheres saudáveis, de modo a identificar os quintis extremos em termos de magnitude de incremento de AB na circulação. Essa avaliação será realizada através de um desafio dietético simplificado, onde sangue capilar (500 l) será coletado em 8 pontos de tempo durante 5 horas após a ingestão de uma refeição hiperlipídica e hiperglicídica. Em uma segunda fase, as voluntárias com o maior (n=20) e menor (n=20) incremento de AB na circulação serão convidadas para um novo desafio dietético com a mesma refeição teste e coleta de sangue venoso. Essa estratégia permitirá amostrar maior volume de plasma em 10 pontos de tempo e isolar células mononucleares da circulação periférica (PBMC). Serão avaliados marcadores de bioquímica clínica, o metaboloma plasmático, a concentração de moléculas sinalizadoras (hormônios e citocinas inflamatórias), a expressão gênica das PBMC e o microbioma intestinal. Considerando os recém-descobertos efeitos biológicos dos AB no controle do metabolismo e inflamação, esse estudo tem potencial para a descoberta de marcadores e mecanismo de doenças crônicas.

O consumo de pescado vem apresentando aumento nas últimas décadas, devido ao interesse do consumidor pelos efeitos positivos na saúde associados à ingestão regular deste alimento, entre outros fatores. Prévios estudos têm descrito resultados significativos sobre o consumo agudo de produtos de pescado com favorecimento da redução de triglicerídeos, colesterol total, lipoproteína de baixa densidade, redução da secreção de insulina, e aumento da concentração plasmática de lipoproteína de alta densidade durante o período pós-prandial. Apesar desse panorama, estudos que investigaram respostas agudas do metabolismo, como fenômenos fisiológicos pós-prandiais após o consumo das principais espécies ícticas ingeridas pelos brasileiros ainda são escassos. Considerando que a composição e a digestibilidade das proteínas do pescado são diferentes se comparada à outras fontes proteicas regularmente consumidas na dieta como carne bovina, espera-se que as respostas pós-prandiais ao consumo de pescado também sejam diferentes. A investigação dos efeitos agudos da ingestão de pescado sobre o metabolismo pós-prandial pode revelar novos efeitos benéficos associados a esse grupo de alimentos, que poderiam ser somados aos benefícios nutricionais crônicos já relatados. A presente proposta tem por objetivo comparar os efeitos agudos da ingestão de duas fontes de proteína de pescado e de origem bovina no metabolismo pós-prandial. Espera-se gerar dados inéditos acerca da fisiologia pós-prandial e investigar possíveis efeitos da ingestão de pescado que podem contribuir para gestão de saúde pública e de padrões de alimentação saudável.

Os ácidos biliares (AB) são moléculas anfipáticas derivadas do catabolismo do colesterol, recentemente reconhecidas como integradoras metabólicas, participando da regulação do metabolismo energético (incluindo a inibição da gliconeogênese e estimulação da beta-oxidação de ácidos graxos) e inflamação através de funções hormonais. Dentre os metabólitos endógenos, os AB são aqueles cuja concentração plasmática apresenta a maior variação após a ingestão de uma refeição. Inflamação pós-prandial, hiperlipemia e hiperglicemia são fatores de risco para o desenvolvimento de doenças crônicas, mas têm sido negligenciados por estudos que se concentram em amostras coletadas após jejum noturno, portanto, carecem de informações derivadas da resposta a uma refeição. Dado seus efeitos regulatórios e cinética plasmática pós-prandial que se assemelham a compostos sinalizadores como insulina e incretinas, propomos investigar se os AB podem influenciar as respostas metabólicas e inflamatórias pós-prandiais em ratos Sprague Dawley submetidos a desafios dietéticos. Quatro experimentos serão conduzidos como parte desta proposta: 1) uma caracterização da cinética plasmática pós-prandial dos AB em ratos desafiados com refeições compostas por diferentes proporções de macronutrientes. 2) Um estudo para avaliar o desenvolvimento das respostas inflamatória e metabólica pós-prandiais em diferentes tecidos e órgãos, investigando o papel dos AB nestes processos. 3) Um terceiro estudo aprofundando a investigação sobre os efeitos dos AB no metabolismo pós-prandial e na inflamação, analisando as respostas metabólicas pós-prandiais de ratos recebendo uma dose de ácido ursodesoxicólico em suas formas livre (UDCA) e conjugada com taurina (TUDCA). 4) O último estudo avaliará as respostas pós-prandiais no metabolismo e função de hepatócitos e células de Kupffer isoladas de ratos após a ingestão de refeições suplementadas ou não com AB. Esta proposta original estudará a relação entre os AB e processos fisiológicos regulados no período pós-prandial, com potencial para trazer novas contribuições para a área. Esperamos entregar a caracterização de um modelo animal para estudar os efeitos dos AB na fisiologia pós-prandial e gerar novas informações sobre a regulação do metabolismo e inflamação de uma maneira específica de órgãos e tecidos, em diferentes momentos durante o período pós-prandial.

A menopausa é um período da vida das mulheres no qual verifica-se a redução na concentração de hormônios sexuais e o fim da atividade menstrual. Devido às mudanças hormonais, ocorre ganho de peso e alterações endócrinas e metabólicas. Nesse período, observa-se aumento do risco de desenvolvimento de hiperlipidemias, doenças cardiovasculares, resistência à insulina e predisposição a síndrome metabólica. Os ácidos biliares têm despertado atenção devido a relatos recentes da sua capacidade de modular o metabolismo energético e diferentes processos fisiológicos. Seu metabolismo envolve a síntese hepática e transformações decorrentes da atividade da microbiota intestinal. A hipótese desse estudo é que o D-limoneno, principal monoterpeno da laranja, devido a suas propriedades antimicrobianas, possa modular a composição da microbiota intestinal e dos ácidos biliares. Devido aos efeitos dos ácidos biliares no metabolismo de lipídios e glicose, como demonstrado em modelos animais, espera-se aumento na oxidação de ácidos graxos e redução da lipogênese em decorrência da suplementação com D-limoneno. O principal objetivo desse projeto é avaliar o efeito da suplementação com D-limoneno na concentração plasmática de triglicerídios e colesterol e na resposta glicêmica pós-prandial de mulheres na pós-menopausa. A composição dos ácidos biliares circulantes será avaliada para investigar seu papel no mecanismo de ação do monoterpeno. Realizaremos um estudo onde mulheres na pós-menopausa receberão suplementação de 2 g de D-limoneno por dia ao longo de 3 semanas. Antes e depois do período de suplementação, será realizado um desafio dietético, avaliando-se a resposta pós-prandial a uma dieta mista líquida. Marcadores do metabolismo intermediário, a atividade de enzimas hepáticas e a concentração dos ácidos biliares serão avaliados no plasma. Os resultados obtidos neste estudo permitirão uma avaliação inédita dos efeitos da suplementação com D-limoneno no metabolismo de lipídios e glicose e na composição dos ácidos biliares em mulheres na pós-menopausa.

Avaliar os efeitos da modulação da função peroxissomal no fígado sobre o metabolismo de lipídios e carboidratos. Desta forma, busca-se alvos para o tratamento e prevenção da resistência à insulina e obesidade.

A resistência à insulina ocorre em situações como obesidade e diabetes mellitus tipo 2, onde também é observado aumento de ácidos graxos (AG) livres no plasma, sugerindo seu envolvimento no estabelecimento desta síndrome. Ao contrário dos AG saturados, AG poliinsaturados (PUFA) ômega-3 melhoram a resposta à insulina. O objetivo deste projeto é estudar a modulação da resposta à insulina por PUFA ω-3 em músculo sóleo de ratos, comparando os efeitos destes AG com os do ácido palmítico. Músculos sóleos serão pré-incubados por 5 h em tampão contendo glicose na ausência ou presença de 100 µM dos ácidos palmítico, alfa-linolênico, eicosapentaenóico, docosahexaenóico e palmítico + PUFA ômega-3. Após este período será mensurada a captação de glicose basal e estimulada por insulina pela determinação do conteúdo de 2-desoxi-[2,6-3H]-glicose e a incorporação de [U-14C]-glicose em glicogênio. Será investigado se os efeitos dos PUFAs ω-3 na sensibilidade à insulina envolvem modulação da expressão e fosforilação de proteínas envolvidas na sua cascata de sinalização (Western blotting) e expressão de genes do metabolismo de glicose e AG (PCR em tempo real). Também serão determinadas a atividade e a expressão dos PPARs alfa/ beta (PCR em tempo real e EMSA) e o envolvimento das cavéolas neste mecanismo (determinação do perfil em AG e conteúdo de proteínas da cascata de sinalização à insulina nas cavéolas). O efeito dos eicosanóides na sensibilidade à insulina será determinado pela quantificação da prostaglandina E1 (PGE1) e avaliação dos efeitos da inibição da cicloxigenase e lipoxigenase e da administração de PGE1. Investigando diversos mecanismos pelos quais os AG podem atuar na melhora da resistência à insulina, espera-se esclarecer a relação entre PUFA ω-3 e a sensibilidade a este hormônio.

Apesar do grande número de trabalhos relatando os efeitos nutracêuticos dos ácidos graxos poliinsaturados, ainda existe a demanda pelo estabelecimento de um modelo experimental para o estudo dos mesmos. Os experimentos conduzidos visam determinar em qual concentração os ácidos graxos poliinsaturados devem ser administrados aos ratos de forma que melhor expressem seus efeitos no metabolismo, contrastando estes resultados com os obtidos em função da administração de ácidos graxos saturados. O aperfeiçoamento das técnicas analíticas alcançado em trabalhos anteriores, possibilitou a avaliação da dinâmica tecido-específica dos ácidos graxos e a influência dos tratamentos quando o fornecimento das dietas experiemtais é interrompido.