Emmanuel de Almeida Burdmann.

A preocupação com a qualidade de vida e com a estética fez com que a prática de atividade física se tornasse cada vez mais comum. Um método de treino que a cada dia ganha mais praticantes é o treino intervalado de alta intensidade (HIIT), que pode proporcionar efeitos positivos no condicionamento físico com pouco tempo de duração de prática. Porém este modelo corresponde à realização de exercício de alta intensidade, levantando dúvidas sobre a segurança de sua prática, já que o exercício deve ser de intensidade adequada para que ocorram os benefícios esperados, sem dano à saúde. Os objetivos desse projeto são avaliar se a realização de exercício extenuante de curta duração causa alteração aguda da função renal em indivíduos saudáveis, praticantes de atividade física regular e estudar os possíveis mecanismos de lesão renal nestes indivíduos. Serão estudados alunos do curso de Educação Física, submetidos a uma sessão de exercício físico de aproximadamente dez minutos. Serão avaliados marcadores de função renal, de lesão tubular renal, e de lesão muscular. Espera-se que os resultados deste estudo forneçam informações sobre a ocorrência de alterações da função renal nestes indivíduos.

Injúria renal aguda (IRA) é síndrome de prevalência e incidências crescentes, acarretando altas mortalidades hospitalar e tardia, prolongamento da internação, elevação do custo de tratamento e desenvolvimento de doença renal crônica (DRC). Considera-se que este fenômeno ocorra em nível mundial, embora dados epidemiológicos de países em desenvolvimento sejam relativamente escassos. De fato, a epidemiologia da IRA assume particularidades bimodais em países em desenvolvimento. Em grandes centros urbanos, os pacientes com IRA têm características semelhantes ao dos países desenvolvidos: pacientes graves, idosos, infectados e com múltiplas insuficiências orgânicas, usualmente internados em unidades de terapia intensiva (UTI). Em contraste, em áreas rurais e pequenos centros populacionais, a IRA acomete pacientes jovens, previamente saudáveis e sua etiologia está associada à desidratação, doenças infecciosas, acidentes por animais peçonhentos ou medicamentos naturais. Recentemente, três novas definições de IRA foram propostas (RIFLE, AKIN e KDIGO), todas fundamentadas em pequenos aumentos abruptos da creatinina sérica ou diminuição do volume urinário. No entanto, a elevação da creatinina frequentemente ocorre tardiamente em relação ao momento da lesão renal, prejudicando a instalação de manobras preventivas. Assim, tem-se procurado intensamente biomarcadores capazes de detecção precoce e sensível de lesão renal, de forma semelhante ao que ocorre com a troponina cardíaca. Visa-se também caracterizar se estes biomarcadores estão associados ao prognóstico destes pacientes. A detecção precoce de lesão renal e mensuração correta da função renal é particularmente importante em pacientes e/ou situações de alto risco de IRA. Este conjunto de projetos de pesquisa visa suprir lacunas importantes no conhecimento da IRA em pacientes de alto risco (UTI, Emergência Clínica, trauma, câncer, grandes cirurgias não cardíacas, uso de cisplatina, e desidratação associada a trabalho exaustivo). Eles incluem a comparação dos três novos critérios diagnósticos utilizados prospectivamente, análise da eficácia dos biomarcadores de lesão renal para detecção precoce de IRA e seu papel no prognóstico destes pacientes, estudo dos mecanismos de alteração da função renal em condições de desidratação associada a trabalho exaustivo e análise das fórmulas para determinar a função renal de pacientes com câncer. Será possível identificar a incidência e/ou prevalência de IRA entre populações socioeconomicamente vulneráveis na nossa realidade, incluindo pacientes graves da região norte e cortadores de cana. Os resultados obtidos constituirão importantes ferramentas para planejamento de alocação de recursos e desenvolvimento de campanhas preventivas de IRA em nosso meio e constituirão a maior amostra de IRA obtida prospectivamente no Brasil.

A ciclosporina A (CsA) é um fármaco imunossupressor empregado para inibir a rejeição de transplantes. Porém, sua utilização está associada ao desenvolvimento de vários efeitos adversos, sendo o mais limitante a nefrotoxicidade, que pode se manifestar de forma aguda ou crônica, com manifestações clínicas distintas. O estabelecimento de biomarcadores que sejam indicadores precoces do desenvolvimento de doença renal pode ser útil na monitoração do uso da CsA. Para tanto, o presente estudo tem por objetivo caracterizar os possíveis marcadores urinários indicativos de lesão renal na toxicidade causada pela CsA em ratos, correlacionando estes marcadores ao desenvolvimento das alterações hemodinâmicas e estruturais nas fases aguda e crônica da lesão renal causada pelo fármaco. Assim, ratos Munich-Wistar, machos com aproximadamente 220 g, serão distribuídos em 6 grupos, onde a nefrotoxicidade da CsA será estudada em 3 fases: 7, 14 e 21 dias. Cada fase contará com um grupo CsA (15 mg/Kg/dia) e um veículo, com 8 animais cada. Ao término dos tratamentos, os animais serão colocados em gaiolas metabólicas, e ao final de 24 horas, submetidos à cirurgia para estudo da filtração glomerular (por depuração de inulina) e do fluxo sanguíneo renal. Serão determinadas dosagens de ciclosporina sanguínea, creatinina, sódio e potássio sanguíneos e urinários, verificação do hematócrito, osmolalidade urinária e micro-albuminúria. Os rins serão utilizados no estudo histo-morfométrico para fibrose intersticial e imunohistoquímica para macrófago, osteopontina, TGF-β, fibronectina, podocalixina, colágeno IV, -SMA (alfa-actina) e vimentina. Kits de ELISA serão utilizados para determinação dos marcadores urinários, conforme segue: podocalixina como marcador de injúria glomerular; KIM-1 (molécula 1 de lesão tubular proximal) como marcador de injúria tubular proximal e lesão renal aguda; NGAL (lipocalina associada à neutrófilo-gelatinase) como marcador de lesão renal aguda; fibronectina, TGF-β e colágeno IV como marcadores de fibrose; MCP-1, osteopontina, TNF- e IL-6 como marcadores de macrófagos e inflamação

Sabe-se que a ciclosporina administrada de forma crônica causa nefrotoxicidade, levando à fibrose intersticial renal irreversível. O fato mais precoce na cadeia de eventos levando à esta fibrose é a presença de significativo infiltrado intersticial por macrófagos. Este infiltrado antecede em muito o surgimento das alterações funcionais e estruturais causadas pela ciclosporina. O objetivo do presente estudo é verificar o papel do macrófago na indução da fibrose intersticial na nefrotoxicidade crônica causada pela ciclosporina. Para tanto, ratos machos Munich-Wistar serão submetidos a tratamento diário de 21 dias com 7,5 mg/Kg de ciclosporina pela via subcutânea, e um outro grupo apenas com o veículo da droga (grupo controle). O papel do macrófago será estudado com a utilização de lipossomos de clodronato que causam depleção destas células no organismo do animal. Para isto, um terceiro grupo receberá o mesmo protocolo de tratamento de ciclosporina, porém receberá também 1ml de uma solução 5 mg clodronato/ml destes lipossomos, pela via intraperitoneal 4 dias antes do início da ciclosporina, e no 1º, 4º, 11º e 18º dia de ciclosporina. Os animais serão avaliados no 3º,10º e 22º dia de tratamento através da determinação do fluxo sanguíneo renal, resistência vascular renal, pressão arterial média, filtração glomerular, análise histológica com quantificação do grau de fibrose intersticial, e estudo imunohistoquímica para identificação de macrófagos.

O uso da ciclosporina A causa nefrotoxicidade aguda e crônica, levando a alterações morfofuncionais,
caracterizadas por queda da filtração glomerular e fibrose túbulo-intersticial irreversível. O objetivo do
presente estudo é verificar a importância de alguns fatores que podem influenciar esta nefrotoxicidade, a
saber, hormônios sexuais, infiltração por macrófagos e uso de fumo. Para tanto, ratos Munique-Wistar serão submetidos a tratamento diário (21 ou 28 dias) com ciclosporina (5, 7,5 ou 15 mg/Kg/dia) pela via
subcutânea. O grupo controle receberá apenas o veículo da droga. O papel do macrófago será estudado com a utilização de lipossomos de clodronato, que causam depleção destas células no organismo do animal. A castração e reposição hormonal serão as ferramentas para o estudo da ação do gênero. A exposição crônica dos animais em câmara de fumo será utilizada para estudar a ação do cigarro. Serão realizados estudos de hemodinâmica renal e sistêmica (fluxo sanguíneo renal, resistência vascular renal e pressão arterial média), de filtração glomerular (depuração de inulina), de função tubular (osmolalidade, fração de excreção de eletrólitos), de análise histoquímica (macrófago, angiotensina II, TGF-B, renina), morfométrica e estereológica (avaliação quantitativa de fibrose intersticial e da histoquímica) e da presença de estresse oxidativo.

A CsA tem potente atividade imunossupressora, singular por seus efeitos seletivos sobre linfócitos. O seu uso na prática clínica revolucionou o campo dos transplantes de órgãos reduzindo significativamente a morbidade e a incidência de rejeição. O principal efeito adverso da CsA é nefrotoxicidade, que pode ser crônica ou aguda. A nefrotoxicidade crônica caracteriza-se pelo desenvolvimento no parênquima renal de fibrose intersticial irreversível, atrofia tubular e queda progressiva da filtração glomerular, enquanto a nefrotoxicidade aguda é um fenômeno funcional e reversível, causado por vasoconstricção da arteríola aferente. O desenvolvimento de um modelo de nefrotoxicidade crônica em ratos através da restrição de sal na dieta permitiu grandes avanços no conhecimento da lesão. A crescente utilização da CsA na prática clínica faz com que um grande número de pacientes seja exposto ao fármaco, inclusive mulheres em idade fértil, aumentando a chance de gestação sob o efeito desta droga. A CsA é uma droga lipossolúvel e passa através da placenta para o feto em desenvolvimento, determinando variações na suas concentrações séricas maternas. Durante a gravidez ocorrem mudanças anatômicas e funcionais nos rins como aumento do fluxo sanguíneo renal, da filtração glomerular, da expressão de angiotensina, liberação de prostaglandinas, bem como mudanças sistêmicas, como diminuição da resistência periférica e da pressão arterial. Estas alterações hormonais e hemodinâmicas podem ter impacto significativo na nefrotoxicidade da CsA, e até o momento esta possível influência não foi adequadamente estudada. O presente trabalho tem como objetivos avaliar os efeitos da gravidez sobre a nefrotoxicidade aguda e crônica causadas pela ciclosporina A em ratos. Serão utilizadas ratas Munique Wistar (200 a 250g), recebendo dieta (Harlan Teklad) pobre em sal (0,06%) e normoproteica (25%) que serão divididas em quatro grupos de estudo: ratas virgens tratadas com CsA (V/CsA), ratas prenhas tratadas com CsA (G/CsA), ratas virgens tratadas com Veículo (V/CO) e ratas prenhas tratadas com Veículo (G/CO). A CsA será dissolvida em álcool absoluto e diluída em óleo de oliva e injetada por via subcutânea na dose de 15mg/Kg de peso corpóreo/dia. As ratas serão avaliadas em dois períodos, na metade e final do período gestacional. Serão estudados parâmetros hemodinâmicos, funcionais, histológicos e marcadores de fibrose e inflamação renal (imunohistoquímica) na mãe.

Existem diversos animais peçonhentos causadores de acidentes humanos no Brasil. Dentre eles, alguns possuem peçonhas capazes de provocar insuficiência renal aguda (IRA), que acaba sendo o principal fator de mortalidade nos pacientes que sobrevivem aos efeitos iniciais da peçonha. O objetivo deste projeto, dividido em três subprojetos, é estudar aspectos da lesão renal aguda provocada por peçonha de serpentes do gênero Bothrops, de aranhas do gênero Loxosceles e de abelhas. 1. Subprojeto 1: Avaliação do efeito do soro antiofídico sobre a lesão renal produzida pela peçonha botrópica. Este projeto visa avaliar se a admistração de soro antibotrópico é capaz de prevenir ou atenuar a lesão renal causada pela peçonha, e qual o intervalo de tempo em que esta proteção ocorreria. O experimento será realizado em modelo animal de IRA por peçonha botrópica desenvolvido pelo nosso grupo, validado e já publicado. IRA ocorre em aproximadamente 10% dos casos de acidente botrópico e é considerada a principal causa de mortalidade nestes pacientes. 2. Subprojeto 2: Insuficiência renal aguda por peçonha de aranha Loxosceles gaucho (aranha marrom). Este projeto visa avaliar os possíveis mecanismos da lesão renal causada pela peçonha de Loxosceles, visando buscar formas de atenuá-la ou preveni-la. Foi desenvolvido um projeto piloto aonde conseguiu-se determinar a dose de peçonha causadora de lesão renal reprodutível em ratos. A ocorrência de IRA após acidente com Loxosceles determina significativo aumento de mortalidade. Os mecanismos envolvidos na lesão renal são ainda desconhecidos. 3. Subprojeto 3: Mecanismos precoces da lesão renal aguda provocada pela peçonha de abelhas. Este projeto visa avaliar os mecanismos deflagradores da IRA que ocorre após acidente com múltiplas picadas de abelha. O surgimento de abelhas africanizadas aumentou de forma importante o número de acidentes com seres humanos no continente americano. IRA é uma grave intercorrência deste tipo de acidente. Os possíveis mecanismos hemodinâmicos e de nefrotoxicidade associados à peçonha são pouco conhecidos e serão estudados em um modelo já validado de IRA por peçonha de abelhas