Natália Pieretti Bueno.

Estratégias para otimizar a regeneração de defeitos ósseos com o emprego de células-tronco mesenquimais (CTM) de diferentes origens vêm sendo investigadas. CTMs derivadas do tecido adiposo (CTM-TA) são uma alternativa interessante uma vez que são obtidas em maior quantidade por métodos menos traumáticos e onerosos, comparado às CTMs de outras origens. Contudo, às CTM-TA têm sido atribuído um menor potencial osteogênico, o que limita seu uso. Para potencializar a diferenciação celular, a fotobiomodulação (FBM) surge como uma terapia não invasiva e que tem sido relacionada à aceleração do processo de reparo. Nesse contexto, o objetivo do presente projeto é investigar a fotobiomodulação (FBM) como uma alternativa terapêutica para potencializar a diferenciação osteoblástica de CTM-TA para serem empregadas como terapia celular no reparo de defeitos ósseos. Para tanto, CTM-TA de ratos mantidas em meio de expansão ou osteogênico serão submetidas à FBM (660 nm; 0,14 J; 20 mW; 0,714 W/cm2 e 5 J/cm2). A diferenciação de CTM-TA tratadas com FBM ou cultivadas em meio condicionado por CTM-TA irradiadas será avaliada por expressão gênica e proteica de marcadores ósseos, pela atividade de ALP e pela produção de matriz mineralizada. O meio condicionado será caracterizado quanto a expressão de um painel de proteínas. Defeitos ósseos de calvárias de ratos serão implantados com CTM-TA tratadas com FBM ou meio condicionado por CTM-TA irradiadas, e o reparo avaliado por análises microtomográfica e histológica. Os dados serão comparados por testes estatísticos apropriados de acordo com a aderência à curva normal, com nível de significância de 5. Os resultados desse estudo contribuirão para o entendimento dos mecanismos intracelulares desencadeados pela FBM e envolvidos com a diferenciação osteoblástica de CTM-TA, favorecendo o reparo ósseo.

A terapia celular tem sido proposta como uma estratégia para o tratamento de defeitos ósseos, constituindo uma abordagem de interesse para a Odontologia e a Medicina. Dentre os diferentes tipos celulares que podem ser empregados, as células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo (CTM-TA) surgem como uma alternativa pela sua facilidade de obtenção associada à menor morbidade, comparadas às células derivadas da medula óssea (CTM-MO). Contudo, às CTM-TA têm sido atribuído menor potencial osteogênico. Resultados prévios evidenciaram a diminuição da diferenciação osteoblástica induzida pelo fator de necrose tumoral alfa (TNF-) liberado por adipócitos. Assim, nossa hipótese é que o TNF- produzido e liberado pelas CTM-TA tenha efeito inibitório na diferenciação osteoblástica destas células. Nesse contexto, o objetivo do presente projeto é investigar o papel do TNF- endógeno no potencial osteogênico das CTM-TA. Ratos Wistar serão utilizados para obtenção de CTM-TA, que serão avaliadas quanto a expressão temporal gênica e proteica de TNF- e seus receptores TNFR1A e TNFR1B. Em seguida, as CTM-TA serão transfectadas com clones de shRNA para os receptores isoladamente ou associados e avaliadas com relação à diferenciação osteoblástica por: 1) expressão dos genes fosfatase alcalina (ALP), RUNX2, osteopontina (OPN) e osteocalcina (OC); 2) atividade de ALP e 3) produção de matriz extracelular mineralizada. Como parâmetro para a diferenciação osteoblástica, serão utilizadas CTMs-MO obtidas dos mesmos animais. Para avaliar o efeito do silenciamento de TNF-± no reparo ósseo, as CTM-TA silenciadas que apresentarem resultados mais evidentes em termos de diferenciação osteoblástica, serão injetadas em defeitos ósseos criados em calvárias de ratos e o reparo avaliado após 4 semanas por meio de microtomografia computadorizada e análise histológica. Os resultados desse estudo podem contribuir para o entendimento dos mecanismos intracelulares envolvidos na diferenciação e atividade de células osteoblásticas derivadas de CTM-TA, e contribuir na aplicação e o desenvolvimento de novas estratégias de tratamento envolvendo terapia celular na regeneração óssea.

O medo e a ansiedade têm sido associados à Odontologia por provocarem expectativa de dor, que aumenta o medo e a ansiedade mantendo um círculo vicioso. Dentre os procedimentos relacionados à expectativa de dor está a injeção dos anestésicos locais, que pode ser minimizada pela aplicação prévia de anestesia por via tópica, especialmente em pacientes ansiosos. Dentre os sais anestésicos empregados por via tópica estão a Benzocaína 20% e o EMLA 5% (do inglês, Eutectic Mixture of Local Anesthetics), com diferentes potenciais analgésicos. O objetivo desse estudo é avaliar o efeito da aplicação dos anestésicos tópicos na percepção de dor em pacientes ansiosos. Para isso, quarenta pacientes saudáveis com indicação para exodontia bilateral dos terceiros molares superiores serão classificados de acordo com o nível de ansiedade dental. Posteriormente, serão submetidos à anestesia tópica ou placebo de maneira randomizada previamente à injeção anestésica do nervo palatino maior. Respostas de dor serão avaliadas por meio de uma escala visual analógica e por alterações dos sinais vitais. Os dados serão submetidos ao teste de aderência à curva de distribuição normal para a definição da análise estatística a ser empregada, paramétrica ou não-paramétrica, e o nível de significância adotado será de 5 %. Os resultados desse estudo contribuirão para o entendimento do efeito psicológico e fisiológico da anestesia tópica na percepção de dor em pacientes ansiosos.

A reconstrução de defeitos ósseos em pacientes portadores de Diabetes Mellitus (DM) é um desafio, uma vez que a reparo ósseo está comprometido pela doença. DM é um problema de saúde global, caracterizado por hiperglicemia, e que resulta em complicações em vários órgãos e sistemas. No sistema esquelético, o DM é associada à diminuição da densidade óssea, aumento do risco de fraturas e atraso no reparo. Os mecanismos pelos quais o DM afeta o metabolismo e saúde óssea não estão elucidados, mas sabe-se que o estresse oxidativo causado pela DM pode afetar a atividade celular e o potencial osteogênico das células-tronco mesenquimais (CTMs), sugerindo que CTMs obtidas de indivíduos portadores de DM podem não ser uma alternativa para a regeneração óssea. Assim, estratégias para recuperar seu potencial osteogênico são uma alternativa promissora para o tratamento dos defeitos ósseos e otimização do reparo ósseo em pacientes diabéticos. A terapia de fotobiomodulação (TFBM) é um tratamento não invasivo que diminui o estresse oxidativo e tem sido relacionado à diminuição do estado hiperglicêmico e aceleração do processo de reparo ósseo. Com base no conhecimento da capacidade das CTMs e dos osteoblastos (OBs) em reparar o tecido ósseo e o efeito terapêutico da FBM em pacientes diabéticos, nosso objetivo é avaliar o efeito da TFBM no potencial osteogênico de CTMs de ratos diabéticos. As CTMs serão obtidas a partir da medula óssea de ratos diabéticos e não diabéticos. Após isolamento e expansão, as CTMs serão tratadas com o FBM e diferenciadas em OBs. As culturas serão mantidas por até 21 dias para avaliar a proliferação celular, a atividade da fosfatase alcalina (ALP), a produção de matriz extracelular mineralizada, e a expressão gênica dos marcadores ósseos. Os dados serão submetidos ao teste de aderência à curva normal para determinação do teste estatístico apropriado. Os resultados deste estudo irão esclarecer os potenciais efeitos da TFBM sobre o potencial osteogênico das CTMs e, assim, compreender os mecanismos que afetam negativamente o tecido ósseo na DM. Nossos resultados irão contribuir para o desenvolvimento de abordagens terapêuticas para otimizar reconstruções estético-funcionais de defeitos ósseos em pacientes diabéticos.

Estratégias envolvendo engenharia de tecidos como terapia para o tratamento de defeitos ósseos produzidos por trauma, processo infeccioso ou patológico são de grande interesse nas áreas de cirurgia buco-maxilo-facial e ortopedia. Dentre os biomateriais disponíveis para serem utilizados como arcabouços, as vitrocerâmicas surgem como um material promissor por suas características mecânicas e de biocompatibilidade. Resultadosprévios evidenciaram que o Biosilicato com duas fases cristalinas (BioS-2P) é um material com características osteoindutoras, capaz de aumentar a diferenciação osteoblástica, além de conduzir a neoformação óssea quando implantado em efeitos criados em calotas de ratos, sugerindo que esse biomaterial pode ser adequado para o uso em engenharia de tecido ósseo. Contudo, o processo de remodelação óssea envolve ações sinérgica e controlada dos processos de neoformação e reabsorção, modulados por mecanismos locais e sistêmicos, e com a participação de outros tipos celulares além dos osteoblastos. A literatura tem poucos estudos que abordam o processo de reabsorção no contexto da engenharia de tecidos e não existem dados sobre o efeito do BioS-2P sobre a diferenciação e atividade dos osteoclastos. Assim, o objetivo do nosso estudo é avaliar o efeito do BioS-2P e dos produtos de sua dissolução na diferenciação e atividade osteoclástica, in vitro, comparados com o vidro bioativo padrão ouro, o Bioglass® 45S5 (45S5). Para tanto, osteoclastos da linhagem RAW 264.7 serão cultivados (1) sobre discos de BioS-2P e 45S5 e em meio osteoclastogênico; e (2) sobre o plástico de cultura e em meio osteoclastogênico condicionado por BioS-2P e 45S5. Nas diferentes condições de cultivo, serão avaliados a morfologia, a proliferação e a diferenciação atividade osteoclásticas, pela marcação da fosfatase ácida resistente ao tártaro TRAP e pela expressão de genes marcadores de osteoclastos por PCR em tempo real: TRAP, fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) receptor ativador do fator nuclear kapa B (RANK), metaloproteinase 9 (MMP9), metaloproteinase 13 (MMP13), receptor associado ao osteoclasto (OSCAR), catepsina K (CTSK). Os resultados desse estudo poderão contribuir para o entendimento do papel das vitrocerâmicas no processo de remodelação óssea focado na atividade reabsortiva e no estabelecimento de novas estratégias de modulação das atividades osteoclástica, favorecendo a interação entre o tecido ósseo e os biomateriais.

A osteomielite da mandíbula é definida como uma inflamação do osso cortical e esponjoso mandibular, causada geralmente por invasão bacteriana a partir de um foco contíguo. Focos odontogênicos são as fontes mais frequentes, seguidos de fraturas de mandíbula infectadas. A mandíbula é o osso da face mais acometido devido ao seu padrão de vascularização. Este estudo tem como objetivo avaliar retrospectivamente casos de osteomielite mandibular tratados no serviço de Cirurgia Bucomaxilofacial do Hospital Santa Casa de Misericórdia de São Paulo. Foram avaliados os prontuários de pacientes diagnosticados com osteomielite mandibular, submetidos a tratamento entre janeiro de 2005 a junho de 2017. Foram analisados dados como gênero, idade, presença de comorbidades, hábitos e vícios, etiologia, exames de imagem, análise microbiológica obtida e tratamento realizado.

O objetivo deste trabalho é realizar um estudo sobre a presença, tipo, tamanho e medidas tanto do forame como da incisura supra-orbital em crânios secos humanos, bem como relacionar estes achados com a forma dos crânios segundo o índice craniano horizontal. Serão utilizados 400 crânios humanos secos. Em cada crânio serão obtidas medidas lineares (diâmetro transverso e diâmetro ântero-posterior) para classificação segundo o índice crânio horizontal, em dolicocrânio, mesocrânio ou braquicrânio.Obtido o índice craniano horizontal, serão estudados: 1.	a presença ou ausência do forame ou da incisura supra-orbital em todos os crânios da amostra; 2. quando presentes se são únicos ou múltiplos; 3. a incidência do forame ou da incisura supra-orbital segundo o lado (uni ou bilateral). Concluída esta classificação, todos os crânios serão posicionados em um craniostato para que possamos localizar com exatidão o plano aurículo-orbital (plano horizontal de Frankfurt) de cada um. Todos os dados obtidos durante as diferentes fases do trabalho serão anotados em fichas apropriadas, fotografados e posteriormente submetidos à análise estatística, utilizando-se os testes t de Student e qui-quadrado.