Eleazar Chaib.

A morte encefálica é o passo inicial para captação de órgãos para transplante. Com intuito de entender as diversas alterações bioquímicas , hormonais, de mediadores químicos, citocinas quie ocorrem após a morte encefálica , desenvolvemos método inédito de indução de morte encefálica com ligadura das artérias carótidas e vertebrais no rato.
Num primeiro momento estamos monitorizando as alterações cerebrais imediatas e tardias da morte encefálica no cerébro com estudo do eletroencefalograma em diversos tempos pos morte encefálica bem como alterações fisiopatológicas das diversas células que compõe a massa encefálica.
Num segundo momento estudaremos alterações primarias e secundarias em diversos órgãos como coração, pumão , fígado, pâncreas e rins.

O NUCEL foi estruturado como um Centro de pesquisa translacional tendo, como missão, atuar na área de Terapia Celular e Molecular, partindo da Ciência básica, centrada em mecanismos moleculares do controle da proliferação e diferenciação celular e origem da transformação maligna, para transformar o conhecimento gerado na bancada em produtos e processos que possam ser utilizados tanto na clínica médica, odontológica, veterinária e agro-pecuária, como no setor empresarial farmacêutico e biotecnológico, visando à produção de biofármacos nacionais a serem utilizados no manejo e na cura de doenças degenerativas e não degenerativas. A Equipe, composta por mais de 50 membros, atua ativamente na nova Medicina Regenerativa, que visa reparar, reconstruir, regenerar e remodelar tecidos e órgãos, sendo baseada em três pilares: células-tronco, matriz extracelular/scaffolds e fatores peptídicos de crescimento e diferenciação celular. Nos últimos anos, a incidência de doenças crônico-degenerativas, como câncer e diabetes mellitus, tem aumentado significativamente devido ao envelhecimento da população brasileira e mundial, sedentarismo, hábitos alimentares, obesidade e doenças cárdio vasculares. Fraturas e lesões ósseas têm crescido na população jovem devido ao aumento da desnutrição e da violência urbana. Neste Projeto, são focalizados dois tipos de câncer: o glioblastoma multiforme, devido ao seu alto grau de letalidade por sua localização no sistema nervoso central, e o carcinoma mamário, devido à sua alta incidência e mortalidade na população feminina. Utilizando um enfoque múltiplo (genômica, transcriptômica e genômica funcional), espera-se encontrar novos alvos moleculares que possam ser utilizados como marcadores para diagnóstico precoce e prognóstico, e como ferramentas terapêuticas para estas neoplasias. Visando minimizar o risco de morte e o grande comprometimento da qualidade de vida de pacientes portadores de Diabetes mellitus tipo 1 (DM1) instável/hiperlábil, propõe-se as seguintes estratégias: a) transplante de ilhotas pancreáticas isoladas; b) diferenciação de células-tronco embrionárias em células produtoras de insulina (IPCs); c) encapsulamento de ilhotas isoladas e de IPCs, evitando o uso de imunossupressores; d) descelularização de pâncreas, gerando matriz pancreática/scaffold descelularizada e funcionalizada; e) maturação final de IPCs na matriz descelularizada, previamente ao implante das mesmas em animal tornado diabético. Em consonância com as políticas públicas de Pesquisa, Desenvolvimento e Inovação do governo brasileiro, particularmente nas áreas de Biotecnologia e Medicina Regenerativa, propõe-se, ainda, utilizar plataformas de expressão em sistemas heterólogos de células de eucariotos de última geração, para produzir proteínas recombinantes humanas estratégicas de interesse terapêutico (Biofármacos) como: PDGF-BB, TGF-β1 e TGF-β3, VEGF-A, R-Espondina1 e BMP-7, em sintonia com a demanda nacional por Terapia Celular Regenerativa livre de soro e de outros componentes animais, no mais avançado estado da arte. Ao perseguir estas Metas, espera-se continuar formando pessoal altamente qualificado para atuar nas áreas básica e clínica de Terapia Celular e Molecular, no campo nascente da Medicina Regenerativa e na construção da tão almejada ponte entre o setor Universitário e Empresarial de Saúde.

Estudo da mortalidade na lista de espera em relação ao tempo com dados do MELD inicial e final antes do óbito, aqueles foram transplantados estudo do MELD no dia do transplante e resultados finais . Também estudaremos a probabilidade de morrer nalista de acordo com o MELD.

Incontinência fecal é uma condição que prejudica muito a qualidade de vida dos pacientes e que acarreta gastos elevados com tratamentos sofisticados e pouco eficientes. Uma das principais causas para essa condição em mulheres é a realização de múltiplos partos. Dessse modo, a fim de avaliar como as características funcionais do esfincter são afetadas por parto esse projeto simulará a realização de múltiplos partos em ratos. Os animais serão divididos em 4 grupos. O primeiro será o controle. O segundo passará por simulação de parto. O terceiro passará por duas simulações. e o quarto por 3 simulações. Todos os procedimentos serão realizados por meio de introdução anal de 7 cm de um cateter de Foley , insuflação do balão com 5 ml de água destilada e posterior remoção. Depois disso os animais terão sua atividade esfincteriana avaliada por meio de manômetro específico. Após os animais serão sacrificados e seu assoalho pélvico retirado para análise histopatológica.

A morte encefálica é etapa fundamental no transplante de órgãos porque viabiliza a doação post-mortem.Neste contexto a manutenção dos doadores em morte encefálica é fundamental para a viabilização de enxertos de boa qualidade para os diversos transplantes que incluem fígado, rins , coração, pâncreas, intestino, córneas, ossos e pele.O presente projeto visa criar modelo de morte encefálica baseado na isquemia das carótidas e vertebrais. Serão utilizados 30 ratos Wistar macho pesando 250-300 g provenientes do Biotério da FMUSP. Serão divididos em 2 grupos de 15 ratos cada.Os animais serão submetidos a anestesia via intra-peritoneal.Será realizada incisão transversal em colar ampla na região cervical ventral e dissecção e reparo com fio de algodão 3-0 das carótidas e ramos vertebrais direito e esquerdo.Serão monitorados movimentos respiratórios e reflexos do tronco cerebral córneo-palpebral e foto-motor atá parada respiratória por 2 minutos. Durante o procedimento serão implantados eletrodos intracerebrais para estudo da função cerebral com polígrafo.Após a parada respiratória os animais serão sacrificados para coleta dp encéfalo. Serão analisados estudos histopatológicos de diversos tecidos bem como marcadores inflamatórios.

O objetivo deste trabalho é criar modelo morfofuncional de avaliação do tecido hepático baseado nas alterações ultraestruturais e das funções oxidativas e fosforilativas das mitocôndrias após indução da isquemia e reperfusão hepática.

O estudo experimental com novos fármacos na prevenção das lesões por isquemia/reperfusão hepática é de fundamental importância para a tentativa de preservação do órgão especialmente em procedimentos cirúrgicos de transplantes. O fondaparinux sódico é uma proposta para tal finalidade uma vez que tem efeitos anti-inflamatórios comprovados além de seu potencial como redutor do calcio intracelular

O estudo experimental com novos fármacos na prevenção das lesões por isquemia/reperfusão hepática é de fundamental importância para a tentativa de preservação do órgão especialmente em procedimentos cirúrgicos de transplantes. O fondaparinux sódico é uma proposta para tal finalidade uma vez que tem efeitos anti-inflamatórios comprovados além de seu potencial como redutor do calcio intracelular

O projeto compreende 24 transplantes multiviscerais entrte coelho e porcos.Durante a nestesia geral serão monitorados e corrigidas as alterações metabólicas e hemodinâmicas dos animais por meio de gasometria e dosagens eletrolíticas seriadas.Os doadores e receptores serão divididos em quatro grupos: Grupo I oito porcos receberão enxerto multivisceral de oito coelhos.Grupo II - oito coelhos receberão enxerto multiviscerqal de oito porcos. Grupo III- oito porcos receberão enxerto multiviscerqal de coelhos e serão submetidos à infusão de jaraquina 10 minutosantes do transplante. Grupo IV - oito porcos receberão maniupulação cirúrgica e tempo operatório semelhante aos grupos anteriores (SHAM). Serão observados lesão tecidual ,macroscópica por meio da observação de mudança da cor e aspectodas diversas visceras e análise histopatológica e imunohistoquímicas de biópsia seriada das víscerasdo enxerto para detecção de lesões e imunoglobulina G, Ig M e fatores C3 e C% do complemento por meio de imunohioquímica.Eutanasiaremos os receptores três horas após a reperfusão do enxerto para necrópsia . Analisaremos por meio de estudo histopatológico os tecidos do enxerto e do receptor obtidos na necrópsia. Parte do material colhiso será guardado em freezer -80 oC para futura análises moleculares.

Auto- Transplante de ilhotas de Langerhans após pancreatectomia total para indução de diabetes mellitus em porcos

Injeção de ilhotas no timo de ratos novos para indução de tolerância imunológica em transplante de ilhotas