Marcelo Nicolás Muscará.

A inflamação crônica de baixa intensidade está sendo considerada como um dos fatores etiológicos importantes das doenças cardiovasculares (DCVs). A resposta imune inata (RII) é a primeira linha de defesa do organismo, sendo fundamental para induzir inflamação. Células da imunidade inata são ativadas por padrões moleculares associados a lesões celulares (DAMPs) ou a microrganismos (MAMPs), via receptores de reconhecimento do tipo Toll (TLRs), que estimulados ativam cascatas intracelulares, ativando NF-oB e produção de citocinas inflamatórias. Células vasculares e cardíacas também expressam TLRs, cuja ativação pode estar associada à inflamação crônica e à disfunção vascular, um dos fatores relacionados à lesão de órgãos alvos em DCVs. O papel dos TLRs tem sido investigado em infarto do miocárdio e aterosclerose. Em estudo pioneiro, demonstramos o papel da RII na hipertensão (HA), pois observamos aumento da expressão de TLR4 em artérias de resistência e coração de ratos hipertensos (SHR) e que seu bloqueio reduziu a ativação das vias de sinalização intracelular, inflamação, pressão arterial, disfunção vascular e remodelamento cardíaco. Entretanto, os mecanismos moleculares e celulares que ativam a RII e a inflamação crônica e como fatores de risco CVs modulam os diferentes tipos de TLRs ainda não estão definidos. Esse projeto multidisciplinar será conduzido em modelos animais de DCVs, cultura celular e em pacientes, oferecendo uma perspectiva translacional.

O nosso grupo demostrou que o tratamento de ratos com o reagente de Lawesson (um agente que libera H2S) resulta em redução da hiperalgesia e do edema articular secundários à artrite / sinovite de joelho induzida pela injeção intra-articular de carragenina (CGN). Similarmente, outros pesquisadores tem mostrado os efeitos benéficos de doadores de H2S em outros modelos de artrite de joelho, tais como aqueles induzidos por kaolin/CGN ou adjuvante de Freund. Recentemente, demonstramos que a presença de grupo funcional capaz de liberar H2S in vivo na molécula de naproxeno, o que resulta no composto ATB-346, não somente não interfere na atividade antiinflamatória do AINE naproxeno no modelo de sinovite causada por carragenina em joelho de rato, mas também previne os efeitos gástricos indesejados deste último. Entretanto, não há na literatura relatos sobre os efeitos da administração de doadores de H2S na artrite da articulação temporomandibular (ATM).

O prurido ou coceira, assim como a dor, é uma experiência sensorial igualmente aversiva associada ao desejo de coçar-se. Mas, ao contrário da dor, existe grande carência de estudos que exploram os estímulos ou mecanismos de ação capazes de induzir a percepção da coceira. A terapia atual para esse sintoma restringe-se na classe de fármacos anti-histamínicos, que nem sempre atua satisfatoriamente para algumas formas de prurido, comuns em doenças dermatológicas (ex. psoríase) e sistêmicas (ex. diabetes, colestase), indicando, portanto, a existência de mecanismos distintos. Desta feita, a inclusão de agentes adicionais/complementares para o tratamento do prurido se faz necessária. Por seu turno, vários estudos atuais propõem um potencial emprego anti-nociceptivo e anti-inflamatório para o sulfeto de hidrogênio (H2S), o novo gasotransmissor endógeno. Ademais, outros achados sugerem que as alterações no equilíbrio endógeno do H2S estão associadas à disfunção de células 2 e, consequentemente, na patogênese e sintomas da diabetes. É importante acrescentar que dados prévios deste grupo mostram, pela primeira vez, que doadores de H2S inibem marcantemente o comportamento de prurido (e inflamação cutânea relacionada) evocado por histamina e composto 48/80 em pele de camundongos, indicando um novo papel farmacológico para esse gás. Todavia, a caracterização dos mecanismos de ação envolvidos no prurido agudo e tampouco crônico ainda não foi estabelecida. Desta feita, considera-se pertinente o aprofundamento dessa investigação, cujo objetivo principal compreende averiguar a atuação do H2S (exógeno e endógeno) e seus mecanismos de ação no contexto da inibição das formas aguda (ex. histamina) e crônica (ex. psoríase) do prurido e inflamação associada. Considerando-se o papel do H2S no controle sensorial e da inflamação, a execução deste estudo poderá contribuir para melhor conhecimento da fisiopatologia e farmacologia do prurido e doenças de pele relacionadas. Serão realizados ensaios in vivo e in vitro na pele de camundongos isogênicos Balb/C tratados com doadores de H2S, usando-se modelos padronizados do laboratório de prurido e ensaios inflamatórios e bioquímicos.

Este estudo foi delineado para investigar se o sulfeto de hidrogênio está envolvido na pancreatite aguda de maneira diferenciada em camundongos obesos e não obesos e se justifica por considerar (i) a carência de estudos que busquem esclarecer a participação do H2S no processo inflamatório pancreático, (ii) a alta prevalência da obesidade no mundo e das complicações a ela associadas ̶ como o aumento da gravidade da pancreatite aguda ̶ e, (iii) a modulação diferenciada da produção de H2S em indivíduos obesos.

Projeto inter-institucional entre a Uniceuma a UFMA e IES de diferentes estados brasileiros (USP, UFSC, UNICAMP, UERJ) apoiado pelo Edital Pró-Amazônia da CAPES. Objetiva o desenvolvimento científico e tecnológico e a cooperação acadêmica em diversos níveis da universidade, incluindo a interação entre alunos de graduação, através da Iniciação Científica; e alunos de pós-graduação, nível mestrado e doutorado. Ainda, este projeto visa a integração do ensino e pesquisa no âmbito da formação básica de 1o e 2o graus, através de oficinas de pesquisa e criação de material didático de forma a facilitar a absorção e aprendizado do conhecimento acerca de temas relacionados ao projeto, entre estes alunos.

A presente proposta visa a consolidação do Programa de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas (PROCFIS) da UFS, através da interação com o Programa Multicêntrico de Pós-Graduação da Sociedade Brasileira de Fisiologia (SBFis) e com o Programa de Pós-Graduação em Farmacologia da Universidade de São Paulo (ICB/USP), através do estabelecimento de parcerias e da criação de uma rede de estudos em Ciências Fisiológicas.

A inflamação é uma resposta adaptativa desencadeada por estímulos nocivos tais como infecções e dano tecidual que visa restaurar a homeostase. A destruição crônica do aparato de ligação periodontal devido a uma intensa resposta inflamatória a bactérias leva a um quadro clínico conhecido como doença periodontal. A inflamação periodontal geralmente causa úlceras superficiais no sulco gengival, onde capilares sanguíneos são expostos a bactérias. Patógenos periodontais podem ser translocados e liberados do sulco gengival à circulação sanguínea e assim apresentar efeitos periféricos. A bolsa periodontal também é importante reservatório de mediadores inflamatórios, que podem atingir a circulação sanguínea. Dessa forma, a periodontite pode apresentar efeitos em órgãos e regiões distantes da sua localização inicial. De fato, a relação entre doença periodontal e miocardite bacteriana em humanos foi a primeira evidência neste sentido, e a seguir, estudos adicionais passaram a documentar também a relação entre doença periodontal e disfunção endotelial, reversível pelo tratamento odontológico. Entretanto, os mecanismos e os mediadores farmacológicos envolvidos que sustentam esta correlação entre presença de periodontite e alterações vasculares não estão definidos; neste sentido, o uso de modelos animais da doença é o melhor meio para aprofundar nesta questão. No nosso laboratório estamos atualmente estudando a resposta vasomotora "in vitro" de anéis de aorta preparados do tecido isolado de ratos com periodontite induzida por ligadura, e os resultados preliminares mostram que a presença de periodontite provoca aumento significativo da resposta contrátil destes anéis à norepinefrina, quando comparada com a resposta dos vasos provenientes dos animais controle (Sham). Assim, considerando a importância dos efeitos da doença periodontal em órgãos à distância, em particular os cardiovasculares mencionados acima, o presente projeto objetiva avaliar a influência da periodontite induzida por ligadura em ratos sobre a pressão arterial e a reatividade vascular "in vitro" de vasos de condutância (aorta), assim como de resistência (artéria mesentérica). Tentar-se-á, ainda, caracterizar os mediadores envolvidos, com especial ênfase nos produtos derivados das diversas isoformas das enzimas ciclooxigenase (COX) e óxido nítrico sintase (NOS) em vista dos resultados obtidos em trabalhos anteriores quanto aos efeitos benéficos dos inibidores de COX (antiinflamatórios não esteroidais) ou NOS (em particular, da iNOS) sobre a perda óssea alveolar secundária à periodontite. Contudo, a participação de outros mediadores farmacológicos deverá também ser abordada, na dependência dos resultados que venham ser obtidos nos experimentos de reatividade vascular "in vitro".

A correlação entre a exposição ativa e passiva de indivíduos à fumaça de cigarro e
respiratória / cardiovascular está bem estabelecida. Ao contrário, apesar da implicação do poluente atmosférico PED [partículas eliminadas na exaustão do diesel] e de seu contaminante, a 1,2-naftoquinona [1,2-NQ], como deflagadores da inflamação nas vias aéreas, as evidências e mecanismos de ação disponíveis ainda são poucos e controversos. Achados deste grupo mostram que camundongos neonatos expostos à 1,2-NQ exibiram na idade adulta maior susceptibilidade à inflamação alérgica. Hipotetizamos que tal efeito é resultante de alterações na expressão e/ou atividade de fatores da resposta imunológica inata em indivíduos susceptíveis (ex.: criança), que afeta a homeostase do sistema imunológico, causando o fenômeno de desbalanço da resposta Th1/Th2. Curiosamente, dados paralelos revelam que o pulmão de animais expostos às PED exibiu maior expressão gênica dos receptores TLR2 e 4, e que compostos químicos relacionados à quinona, i.e. imidazoquinolina, agem como ligante dos TLR7 e 8. Desta feita, este grupo julgou pertinente aprofundar a investigação, considerando o potencial deletério da poluição atmosférica, i.e. PED e 1,2-NQ, na saúde da população de grandes centros urbanos bem como a prevalência da asma na população mundial. Assim, os objetivos são: 1) elucidar o papel dos TLR4 e TLR7 na resposta imune inata de camundongo neonato exposto a 1,2-NQ e a susceptibilidade deste à inflamação alérgica na idade adulta, 2) avaliar o comportamento dos linfócitos T e B bem como dos genes inflamatórios e vias de transdução de sinais envolvidos na regulação/diferenciação das células Th (e.g. GATA-3, T-bet, IL-4R e IL-12R). As estratégias experimentais incluem ensaios farmacológicos / bioquímicos comparativos em diferentes linhagens de camundongos: selvagens, deficientes / nocautes das moléculas sinalizadoras TLR4 e MyD88 ou mutantes de TLR4. Dentre os ensaios funcionais, bioquímicos e outros empregados, destacam-se o teste funcional de reatividade das vias aéreas in vivo via Penh. Se necessário, a mensuração da expressão gênica (via qRT-PCR) e / ou protéica (via Western blot) de receptores (TLR4, TLR7, IL-1R, IL-4R e IL-12R22), moléculas adaptadoras (MyD88 e TRIF), além de fatores de transcrição (GATA-3 e T-bet). As moléculas de superfície (CD11c, CD19, CD80, CD86, CD40 e I-Ab) e população linfócítica (CD4+ e CD8+) será investigada via citometria de fluxo.

As desordens temporomandibulares (DTMs) são distúrbios associados à própria articulação temporomandibular (ATM), músculos da mastigação ou demais estruturas faciais. As DTMs envolvendo a ATM apresentam-se freqüentemente como patologias inflamatórias associadas a hiperalgesia secundária, alodinia ou dor referida, sugerindo o envolvimento de componentes periféricos e centrais de sua inervação nesse processo. Dentre os vários componentes ou mediadores inflamatórios envolvidos na fisiopatologia da artrite, os neuropeptídeos substância P e o peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) parecem ter um importante papel nesse processo mediando mecanismos de inflamação neurogênica. A liberação de neuropeptídeos é um processo dependente da despolarização de membrana, ativação de receptores e aumento das concentrações intracelulares de cálcio ([Ca2+]i). O receptor de capsaicina TRPV-1 (?transient receptor potential vanilloid? tipo 1) está envolvido em diversas condições fisiopatológicas, tais como na modulação da artrite da ATM e da hiperalgesia térmica, sendo esta última, via participação/interação das ET-1 com os receptores TRPV1. Dessa maneira, o presente projeto visa relacionar a participação e interação funcional das ETs na modulação da artrite e alodinia mecânica induzidas por carragenina na ATM de ratos. Para tanto, serão empregadas algumas estratégias que incluem a depleção de fibras sensoriais nos animais (pelo tratamento com capsaicina durante a fase neonatal) e o uso de agonistas e antagonistas de receptores de ET, SP, neurocininas e TRPV1. AInda, serão investigadas mudanças na expressão gênica ou protéica destes receptores em amostras de tecido da cápsula articular da ATM através de RT-PCR ou Western blot, respectivamente.

As desordens temporomandibulares (DTMs) são distúrbios associados à própria articulação temporomandibular (ATM), músculos da mastigação ou demais estruturas faciais. As DTMs envolvendo a ATM apresentam-se freqüentemente como patologias inflamatórias associadas a hiperalgesia secundária, alodinia ou dor referida, sugerindo o envolvimento de componentes periféricos e centrais de sua inervação nesse processo. Dentre os vários componentes ou mediadores inflamatórios envolvidos na fisiopatologia da artrite, os neuropeptideos substância P e o peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) parecem ter um importante papel nesse processo mediando mecanismos de inflamação neurogênica. A liberação de neuropeptideos é um processo dependente da despolarização de membrana, ativação de receptores e aumento das concentrações intracelulares de cálcio. O receptor de capsaicina TRPV-1 ("transient receptor potential vaniloid" tipo 1) está envolvido em diversas condições fisiopatológicas, tais como na modulação da artrite da ATM e da hiperalgesia térmica, podendo esta última ocorrer via participação I interação das ETs com os receptores TRPV1. Dessa maneira, o presente projeto visa relacionar a participação e interação funcional das ETs na modulação da artrite e alodinia mecânica induzidas por carragenina na ATM de ratos. Para tanto, serão empregadas algumas estratégias que incluem a depleção de fibras sensoriais nos animais (pelo tratamento com capsaicina durante a fase neonatal) e o uso de agonistas e antagonistas de receptores de ET, SP, neurocininas e TRPV1. Ainda, serão investigadas mudanças na expressão gênica ou protéica destes receptores em amostras de tecido da cápsula articular da ATM através de RT-PCR ou Western blot, respectivamente.

A doença periodontal é resultado de uma complexa interação entre bactérias patogênicas e a resposta imuno- inflamatória. Um fator importante que pode estar envolvido na progressão da doença periodontal é a produção de Espécies Reativas de Oxigênio (EROs), níveis elevados destes nos tecidos contribuem para o estresse oxidativo gerando danos aos mesmos. As EROs induzem a ação da peroxidação lipídica-Tbars, mieloperoxidase (MPO) e arginase, cujos mecanismos de ação também refletem na severidade da doença periodontal, podendo estes servirem como biomarcadores da doença. O monitoramento dos biomarcadores poderia ser de grande valia para o desenvolvimento de testes diagnósticos e terapias para periodontite . O objetivo deste estudo é avaliar quantitativamente a presença de biomarcadores de estresse oxidativo (MPO, Tbars, arginase) na saliva e Fluido do Sulco Gengival-FSG de portadores de periodontite crônica fumantes e não fumantes, antes e após tratamento periodontal. Serão coletadas amostras de saliva total não estimulada durante 5 minutos e FSG de 50 fumantes e não fumantes portadores de periodontite crônica generalizada antes e após tratamento, e de 50 pacientes clinicamente saudáveis fumantes e não fumantes para controle. Os parâmetros clínicos de profundidade clínica de sondagem, nível clínico de inserção, sangramento a sondagem, e índice de placa serão avaliados. As atividades salivar e do FSG dos marcadores serão analisadas por espectrofotometria. Para a análise estatística dos dados em duplicata será realizado um teste de comparação das médias a ser definido, adotando-se nível de significância de 5% (p<0,05).

As desordens temporomandibulares (DTMs) são distúrbios associados à própria articulação temporomandibular (ATM), músculos da mastigação ou demais estruturas faciais. As DTMs envolvendo a ATM apresentam-se freqüentemente como patologias inflamatórias associadas a hiperalgesia secundária, alodinia ou dor referida, sugerindo o envolvimento de componentes periféricos e centrais de sua inervação nesse processo. Dentre os vários componentes ou mediadores inflamatórios envolvidos na fisiopatologia da artrite, os neuropeptídeos substância P e o peptídeo relacionado ao gene da calcitonina parecem ter um importante papel nesse processo, através da inflamação neurogênica. A liberação de neuropeptídeos é um processo dependente da despolarização de membrana, ativação de receptores e aumento das concentrações intracelulares de cálcio. O receptor ativado por proteinases tipo 2 (PAR2) parece mediar a liberação desses neuropeptídeos através da co-ativação do receptor para capsaicina (TRPV1). Esses receptores recentemente clonados estão sendo alvos de extensos estudos com o intuito do desenvolvimento de novas ferramentas terapêuticas, considerando as diversas condições fisiopatológicas nas quais estão envolvidos, tais como na modulação da artrite e da hiperalgesia associada. Contudo, não há na literatura relatos que especificamente relacionem receptores PAR2 com DTMs. Dessa maneira, os objetivos gerais do presente projeto são estudar e caracterizar a expressão desses receptores em aferentes trigeminais, a sua participação e interação funcional na modulação da artrite e alodinia mecânica induzidas na ATM do rato, assim como os mecanismos envolvidos, como Liberação de neuropeptideos e espécies reativas do oxigênio e do nitrogênio. Para tais fins, será estudada a resposta à administração intra-articular de agonistas PAR2, e seu papel na inflamação será avaliado através das alterações na infiltração de células inflamatórias. A atividade de serino-proteinases será analisada em lavados de ATMs sob artrite induzida por carragenina. A transmissão nociceptiva será avaliada através de teste de hiperalgesia e expressão da proteína Fos em neurônios do sub-núcleo caudal do núcleo espinal do nervo trigêmeo (Sp5C), e a interação funcional entre esses receptores será avaliada através de bloqueio farmacológico do TRPV1.

OBJECTIVE: intra-articular co-injection of kaolin with carrageenan (CGN) in rodents is widely used as an experimental model of arthritis. However, the ability of kaolin to cause arthritis and related immune responses when administered alone is unclear. We evaluated the contribution of prostanoids and sensory C-fibres (and their neuropeptide substance P) to kaolin-induced inflammation in the rat knee. METHODS: Wistar rats, 8-10 weeks old, received an intra-articular injection of kaolin (1-10 &#956;g/joint) or saline into the knee joint. Knee inflammation, proinflammatory cytokines, pain behaviour and secondary tactile allodynia were assessed over 5 h, when synovial leukocyte counts, histopathological changes and proinflammatory cytokine levels were evaluated. RESULTS: The intra-articular injection of kaolin caused a dose- and time-dependent knee swelling and impairment of motion that were associated with secondary tactile allodynia, elevated concentrations of IL-1&#946;, IL-6 and TNF&#945;, leukocyte infiltration, and histopathological changes in the ipsilateral hindpaw. The neurokinin-1 (NK1) receptor antagonist SR140333 or neonatal treatment with capsaicin markedly reduced the inflammatory parameters, cytokines and allodynia but failed to significantly inhibit the impaired motion. The cyclo-oxygenase inhibitor indomethacin partially inhibited knee oedema and allodynia but did not affect the leukocyte influx, myeloperoxidase activity or impaired motion in the kaolin-injected rat. CONCLUSIONS: We show the first evidence that intra-articular injection of kaolin without CGN produced severe acute monoarthritis. This was highly dependent on substance P (released from C-fibres) and NK1 receptor activation, which stimulated local production of proinflammatory cytokines. This model may be of critical importance for mechanistic studies and screening new anti-inflammatory/analgesic drugs.

A inflamação é uma resposta adaptativa desencadeada por estímulos nocivos tais como infecções e dano tecidual que visa restaurar a homeostase. A destruição crônica do aparato de ligação periodontal devido a uma intensa resposta inflamatória a bactérias leva a um quadro clínico conhecido como doença periodontal. A inflamação periodontal geralmente causa úlceras superficiais no sulco gengival, onde capilares sanguíneos são expostos a bactérias. Patógenos periodontais podem ser translocados e liberados do sulco gengival à circulação sanguínea e assim apresentar efeitos periféricos. A bolsa periodontal também é importante reservatório de mediadores inflamatórios, que podem atingir a circulação sanguínea. Dessa forma, a periodontite pode apresentar efeitos em órgãos e regiões distantes da sua localização inicial. De fato, a relação entre doença periodontal e miocardite bacteriana em humanos foi a primeira evidência neste sentido, e a seguir, estudos adicionais passaram a documentar também a relação entre doença periodontal e disfunção endotelial, reversível pelo tratamento odontológico. Entretanto, os mecanismos e os mediadores farmacológicos envolvidos que sustentam esta correlação entre presença de periodontite e alterações vasculares não estão definidos; neste sentido, o uso de modelos animais da doença é o melhor meio para aprofundar nesta questão. No nosso laboratório estamos atualmente estudando a resposta vasomotora &quot;in vitro&quot; de anéis de aorta preparados do tecido isolado de ratos com periodontite induzida por ligadura, e os resultados preliminares mostram que a presença de periodontite provoca aumento significativo da resposta contrátil destes anéis à norepinefrina, quando comparada com a resposta dos vasos provenientes dos animais controle (Sham).&#10;Assim, e considerando a importância dos efeitos da doença periodontal em órgãos à &#10;distância (em particular os cardiovasculares mencionados acima), o presente projeto objetiva avaliar a influência da periodontite

A doença periodontal é a doença crônica mais prevalente na dentição humana e está etiologicamente relacionada à presença de associações de bactérias (e seus produtos) e à própria destruição tecidual causada pelas células de defesa do hospedeiro. A produção de citocinas (como o TNF-&#945;) e metabólitos do ácido araquidônico (prostaglandinas e leucotrienos) desempenham um importante papel no processo de perda óssea através do aumento no número de osteoclastos (osteoclastogênese). Esse processo está mediado pela ativação do receptor RANK (receptor ativador do fator nuclear kappa B) presente nas células precursoras de osteoclastos. A supressão da osteoclastogênese pelo uso de inibidores da expressão de TNF-&#945; tem sido usada, com sucesso, no tratamento da artrite reumatóide em ratos. Sugerindo, assim, a aplicação desta nova alternativa terapêutica no tratamento de doenças que envolvem alterações no metabolismo ósseo, tais como a periodontite e a artrite reumatóide.&#10;Drogas como o antidiabético rosiglitazona possuem atividade antiinflamatória mediada pela inibição da produção de alguns mediadores (tais como o NO, TNF-&#945; e IL-1), a qual ocorre pela ativação do ?peroxisome proliferator-activated receptor gamma? (receptor nuclear gama ativado por proliferadores de peroxissomos; PPAR-g). Alguns estudos sugerem que a ativação de PPAR-g resulta em inibição indireta da osteogênese. Assim, e possivelmente devido à maior probabilidade de ocorrência de osteoporose e menor taxa de metabolismo ósseo, pacientes idosos com fratura de fêmur apresentam aumento da expressão gênica do PPAR em relação aos jovens. Assim, com base nestas observações, o objetivo do presente projeto é estudar os efeitos da rosiglitazona na perda óssea alveolar secundária à periodontite induzida por ligadura em ratos, assim como a caracterização dos possíveis mediadores envolvidos na resposta.

A gengivite e a periodontite constituem doenças periodontais infecciosas comuns do homem, nas quais as bactérias periodontais e seus produtos participam ativamente para indução da inflamação local e efeitos sistêmicos (ex.: coração). Sabendo que a saliva representa a primeira e grande barreira às infecções orais, este projeto visa avaliar a perda óssea induzida pela doença periodontal em ratos submetidos à indução de &#10;doença, via implante de ligadura, após os intervalos de 3, 7 e 14 dias, investigando possíveis alterações de fluxo (estimulado ou não com pilocarpina) e composição salivar nesses animais. Ainda, avaliar-se-á a concentração / expressão de marcadores de estresse oxidativo e inflamatórios em glândulas salivares e em amostras de saliva, assim como a funcionalidade ex-vivo das glândulas salivares (avaliada como produção de amilase em resposta à estimulação dos receptores muscarínicos).

A resposta do hospedeiro à infecção ou dano tecidual inicia uma cascata de eventos envolvendo o recrutamento de leucócitos para o sítio da injúria, e a liberação de vários mediadores inflamatórios, como citocinas, radicais livres, neuropeptídeos e metabólitos do ácido araquidônico. No caso particular da presença de reações inflamatórias e imunológicas contra a placa dental, ocorre desequilíbrio na microbiota gengival e aumento do número de células do sistema imune (como por exemplo, leucócitos polimorfonucleares). Assim, os componentes do periodonto começam a sofrer perdas irreversíveis, em um processo conhecido como periodontite, a qual conta-se dentre as doenças humanas mais comuns e freqüentemente não diagnosticada. De forma ainda mais importante, estudos epidemiológicos mostram que a periodontite está relacionada à ocorrência de doenças crônicas e inflamatórias, como a endocardite e artrite. Fibras que inervam os tecidos periodontais em humanos são imunoreativos a neuropeptídeos, incluindo SP, CGRP (liberado juntamente com SP), VIP (peptideo vasoativo intestinal) e NPY (neuropeptídeo Y). Foi mostrado, ainda, que há receptores para CGRP, VIP e NPY nos vasos sanguíneos que irrigam o ligamento periodontal do rato, sugerindo-se um papel dessas substâncias no controle do fluxo sanguíneo dessa região. As desordens temporomandibulares (DTMs) são distúrbios associados à articulação temporomandibular (ATM), músculos da mastigação ou demais estruturas faciais. Estudos mostram que aproximadamente 50% da população apresenta algum sinal de DTM. Destes, em torno de 2 a 10% apresentam sintomas severos, com expressiva queda de qualidade de vida. O mecanismo de desenvolvimento e progressão das DTMs não está elucidado; porém situações tais como injúria mecânica direta, hipóxia/reperfusão ou inflamação neurogênica têm sido propostas na patogênese das desordens temporomandibulares. Um dos aspectos de interesse é a observação de que um processo artrítico unilateral resulta em efei.

As disfunções temporomandibulares envolvendo ATM são frequentemente secundária à inflamação e associada a hiperalgesia, a alodinia ou dor referida. Baseado em estudos anteriores, mostrando a participação da ET em alguns modelos de nocicepção, o presente projeto visa investigar o papel da ET-1 na inflamação e na resposta nociceptiva induzida por carragenina (CGN) na ATM de ratos Wistar. Para tanto, serão empregados antagonistas seletivos para os diferentes receptores de ET-1 (ET(A) e ET(B)) a fim de caracterizar os efeitos na migração celular e alodinia mecânica, assim como a participação dops receptores vanilóides do tipo TRPV1. A expressão (protéica e/ou gênica) destes mediadores também será avaliada em resposta à injeção intra-articular de carragenina.

A periodontite é o tipo mais comum de doença periodontal e resulta da extensão do processo inflamatório iniciado na gengiva para os tecidos de suporte dental.&#10;Nas infecções orais, a saliva é geralmente a primeira barreira que os microorganismos encontram. O fluxo e a composição salivares exercem uma grande influência sobre o controle do biofilme, formação de cálculos, doença periodontal e cáries.&#10;Quanto à produção de citocinas, ela tem um papel importante tanto no início como no controle do processo inflamatório e da homeostase tecidual. Periodontites, bem como qualquer outra doença inflamatória crônica, resulta em um desarranjo desses fatores no hospedeiro, envolvendo uma rede complexa de interações entre células e moléculas reguladoras. Uma interação bem caracterizada envolve a liberação de interleucina?1, fator de necrose tumoral (TNF), e prostaglandinas de macrófagos e monócitos expostos a endotoxinas bacterianas (lipopolissacarídeos). Essas toxinas derivadas do hospedeiro têm o potencial de estimular a reabsorção óssea e ativar ou inibir outras células imunes do mesmo (Carranza et al, 1997).&#10;Outro importante mediador importante é o óxido nítrico, que tem sido apontado como regulador local da progressão da periodontite, bem como na liberação salivar mediada pelo aumento da concentração intracelular de cálcio (para revisão, vide Looms et al., 2002).&#10;Enquanto alguns estudos, relacionando periodontite com NO, sugerem que PMNs de pacientes com gengivite e periodontite produzem menos NO que as células provenientes de indivíduos hígidos (Auer et al, 2001), outros autores reportam que não somente PMNs mas também linfócitos, macrófagos e fibroblastos de pacientes portadores de doença periodontal liberam grandes quantidades de NO durante períodos prolongados (Kendall et al, 2001).&#10;Alguns estudos mostram que a ação local do NO é importante para manter a integridade do tecido e impedir a reabsorção óssea (Gilliam et al,1977; Kendall et al, 2001), enquanto que outros m

A doença periodontal é a doença crônica mais prevalente na dentição humana, e está relacionada com dois fatores etiológicos principais: a presença de associações de bactérias e seus produtos e a própria destruição tecidual causada pelas células de defesa do hospedeiro. Esse sistema imune envolve uma rede complexa de interações entre células e moléculas reguladoras. A produção de citocinas joga importante papel tanto no início como no controle do processo inflamatório e da homeostase tecidual. Na periodontite, bem como em outras doenças inflamatórias crônicas, há alteração na produção de citocinas por parte do hospedeiro, as quais têm, dentre outros efeitos, capacidade de estimular tanto a reabsorção óssea como a proliferação de fibroblastos. Outro mediador envolvido na doença periodontal é o óxido nítrico (NO), o qual parece ser um importante regulador do metabolismo ósseo. Experimentos &quot;in vitro&quot; demonstram que osteoblastos e osteoclastos não só produzem mas também respondem ao NO, o qual em altas concentrações deprime a formação de osteoclastos e favorece a maturação dos osteoblastos, inibindo assim a reabsorção óssea, e podendo ser importante agente no desenvolvimento da doença periodontal. Contudo, e apesar destas evidências, a relação entre o NO e a doença periodontal &quot;in vivo&quot; não está muito clara, sendo limitadas e/ou controversas as informações disponíveis sobre produção e ação do NO na cavidade bucal. Desta forma, os objetivos do presente projeto são estudar na doença periodontal em ratos: 1) a produção local e sistêmica de NO e espécies relacionadas (através da medida dos íon nitrito, nitrato, proteínas nitradas em resíduos de tirosina e/ou S-nitrosiladas), assim como a caracterização das isoformas de NOS envolvidas (através da avaliação da atividade e expressão protéica e gênica); 2) a participação do NO proveniente das diversas isoformas de NOS envolvidas na etiologia da doença periodontal, através da avaliação da perda óssea em animais com periodontite tratados com diversos inibidores de NOS (L-NAME, 7-nitroindazol, aminoguanidina, 1400W, etc.); 3) o estresse oxidativo local (gengiva, glândulas salivares) e periférico (pulmão, coração, rim, baço, fígado) secundário à produção de espécies reativas derivadas do oxigênio e nitrogênio, através da análise do conteúdo tecidual de mieloperoxidase, malondialdeído, e produção de ânion superóxido por leucócitos polimorfonucleares circulantes.