Camila de Oliveira Rodini Pegoraro.

A presença de um graduando tutor, que passou recentemente e de forma bem sucedida por essa experiência, tem potencial de facilitar tanto a mediação da comunicação entre os professores e os alunos ingressantes, quanto de colaborar na implementação de estratégias para o aperfeiçoamento do Ensino de Histologia Geral. Nesse sentido, acredita-se que a concessão da bolsa PAP traga benefícios diretos tanto aos alunos que cursarão a Disciplina, quanto aos docentes e ao graduando tutor.

Auxílio a pesquisa - Publicação de artigo

O carcinoma epidermóide de boca (CEB) é um tumor agressivo e heterogêneo, que pode ser precedido por desordens orais potencialmente malignas (DOPM). A carcinogênese bucal ocorre em múltiplos estágios, em que mutações se acumulam de forma imprecisa. Com o advento da medicina personalizada do câncer, é importante compreender o microambiente dos tecidos normais, displásicos, e tumoral do CEB. As técnicas de cultura de células 3-D são promissoras, pois são fisiologicamente mais representativos do micromabiente. Assim, para prever com precisão o risco de progressão maligna é importante caracterizar a diversidade molecular do microambiente tumoral de CEB e das DOPM, o que ainda não está estabelecido para essas doenças da boca. O objetivo do projeto será identificar e quantificar transcritos in situ em larga escala e proteínas em regiões espacialmente distintas de CEB e DOPM, a fim de determinar a heterogeneidade tumoral e seus diferentes fenótipos. A quantificação de alvos de mRNA será realizada em três nichos demarcados (células epiteliais, fibroblastos e leucócito) de cortes histológicos de DOPM e CEB através do Perfil Espacial Digital GEOMX e sequenciamento de nova geração. Serão analisadas linhagens celulares de displasia e de CEB em cultura 3D (organoides), em co-cultivo com fibroblastos primários normais e associado ao câncer e macrófago, e posterior mensuração de transcritos de células tronco tumoral por Taqman RT-qPCR array. A validação e mapeamento de alvos por imuno-histoquímica multiplex e análise através de inteligência artificial em DOPM e CEB serão realizados, associando-se aos estágios clínicos das doenças. Espera-se determinar a heterogeneidade tecidual e classificar com precisão o fenótipo da doença nas diferentes etapas da carcinogênese bucal. Assim, a compreensão do arranjo espacial e da complexa interação entre os diferentes componentes celulares pode auxiliar novas descobertas diagnósticas, prognósticas e terapêuticas.

Programa Unificado de Bolsas de Estudos - Vertente Ensino

Elaboração e criação de uma plataforma virtual contendo todo o acervo de preparados histológicos permanentes da Disciplina de Histologia da Faculdade de Odontologia de Bauru.

A Caveolina-1 (Cav-1) é a principal proteína que constitui as cavéolas, áreas ricas em colesterol na membrana plasmática. A Cav-1 tem sido implicada como importante biomarcador molecular na progressão tumoral no Carcinoma Epidermoide de Boca (CEB). A depleção de colesterol desestrutura a integridade da membrana, associando-se a alterações na sinalização e na permeabilidade celular. Ainda, pouco se sabe como os componentes da membrana plasmática podem afetar as propriedades e fenótipo das células-tronco tumorais. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito das alterações na relação colesterol/Cav-1 nas propriedades de membrana celular em linhagem celular de CEB, bem como a sua influência na caracterização de um perfil de células tronco-tumorais. Será determinado o nível de colesterol e a expressão gênica de CAV-1 em 6 grupos experimentais: SCC9 não-tratada; SCC9 depleção de colesterol; SCC9 depleção de colesterol sobrenadante; SCC9 enriquecida de colesterol; SCC9 transfectada com controle, siRNA não-específico; SCC9 transfectada siRNA CAV-1. A fluidez de membrana será; determinada através de marcação por sonda fluorescente seguida de análise por FACS. A adesão e invasão celular serão também determinadas. Adicionalmente, o perfil de expressão de marcadores de células- tronco (ALDH1, OCT4, SOX2, BMI1, CD44/ESA), que será; determinado por FACS, e o ensaio de formação de colônia auxiliarão na caracterização do fenótipo dos grupos experimentais. Os resultados do estudo contribuirão no entendimento do complexo colesterol/CAV-1 como possível regulador de eventos moleculares relacionados a proliferação, invasão e resistência tumoral em CEB. Assim, acredita-se que o estudo promova um auxílio direto na caracterização de um fenótipo tumoral que pode ser modulado e beneficiado com terapias alternativas.

Equipamento Multiusuário vinculado a Auxílio Jovem Pesquisador.

No Brasil, cerca de 15.290 novos casos de carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço (HNSCC) estão previstos para 2015. Em 2012, mesmo com o tratamento de primeira linha, dos mais de 40 mil casos estudados, cerca de 50% foram previstos para ter recorrência ou metástase, com uma sobrevida global média de cerca de 10 meses, sendo este câncer, considerado um problema de saúde pública em todo o mundo. Recentemente, a subpopulação denominada como células iniciadoras tumorais ou células-tronco tumorais (CSC), vem sendo apontada como um dos principais responsáveis pela falha do tratamento, recorrência e metástases. Acredita-se também que, além de serem responsáveis pelas metástases e recidivas na maioria dos pacientes, as CSC são o motivo da ineficácia dos métodos de tratamento convencionais para o câncer, uma vez que essa subpopulação apresenta mecanismos de defesa contra a ação da radioterapia e de quimioterápicos. Um dos mecanismos de escape dessas células é sua maior resistência aos danos ao DNA, exibindo maior expressão de proteínas antiapoptóticas (Bcl2) e de bombas transportadoras de drogas (ABCB1 e ABCG2), que funcionam como transportadores de quimioterápicos para fora das células. Um dos tratamentos de primeira linha para esses casos é a associação de anticorpos monoclonais com a droga quimioterápica 5-Fluoracil (5-FU). Entretanto, além de não demonstrar grande eficácia, reações adversas como anemia, neutropenia, trombocitopenia, alterações cutâneas e sepse diminuem consideravelmente a qualidade de vida, além de aumentar o risco de doenças relacionadas à imunodepressão. Desta forma, a utilização da quimioterapia metronômica apresenta-se como alternativa por manter níveis séricos eficazes da droga sem desenvolver resistência à mesma. De forma complementar, diferentes compostos com atividades biológicas vêm sendo associados a inúmeros efeitos antitumorais e/ou imunomoduladores. O cogumelo Ganoderma lucidum (GL) apresenta, dentre suas inúmeras propriedades, a capacidade de evitar a invasão de células tumorais e estimular a resposta imune, sendo capaz de agir nas proteínas ABC de HNSCC e de facilitar a sensibilização dessas células quanto à quimioterapia. Desta forma, o objetivo principal deste estudo é avaliar, in vitro, os efeitos do fitoterápico Ganoderma Lucidum sobre a ação antitumoral de baixas doses de 5-FU na subpopulação de células-tronco tumorais presentes na linhagem SCC9 de carcinoma espinocelular de boca.

A característica principal do câncer é a capacidade de invadir tecidos adjacentes e causar metástases, evento dependente da transição epitélio-mesenquimal (TEM) para que as células alterem suas características epiteliais e adquiram um fenótipo invasivo (mesenquimal). A promoção da TEM está relacionada a diferentes vias de sinalização (adesão, migração, motilidade, e morfogênese; diferenciação, desenvolvimento, crescimento, proliferação celular; transdução de sinal e fatores de transcrição). A inversão das caderinas, representada pela perda de expressão de E- caderina e ganho de N-caderina, caracteriza-se como evento chave da TEM durante a carcinogênese de boca, e propicia a dissociação de células tumorais devido à perda da adesão célula-célula. Porém, ainda não está elucidado qual sinalização efetivamente contribui para os diferentes fenótipos tumorais no câncer de boca. Para avaliar a relação da TEM com distintos compotamentos biológicos do carcinoma epidermóide de boca (CEB), o presente estudo pretende induzir a TEM e mensurar em nível gênico e proteico as vias que atuam nos diferentes fenótipos e contribuem para agressividade de linhagens celulares de CEB. As diferentes vias de sinalização de TEM serão avaliada através de qRT-PCR antes e após indução da TEM pelo fator transformador de crescimento beta (TGFB) em linhagens celulares de CEB com distintos perfis biológicos e fenotípicos. Será utilizada a tecnologia RT2 ProfilerTM PCR Arrays, que detecta a expressão gênica de 84 genes alvos de TEM simultaneamente. A expressão proteica das principais moléculas sinalizadores de TEM diferencialmente expressas será avaliada por Western blot, e a sublocalização celular avaliada através de imunofluorescência. Os parâmetros celulares de proliferação, índice de apoptose e invasão celular serão determinados com intutito de fornecer melhores perspectivas na compreensão da participação de potenciais biomarcadores na carcinogênese de boca.