Ademilson Panunto Castelo.

A proposta abordará diferentes temas de interesse para os adolescentes vinculados à Organização Comunitária Santo Antonio Maria Claret (OCSAMC), assim como dos responsáveis pelos mesmos e da comunidade local, visando a instrução e esclarecimento de dúvidas que visam promoção de saúde e maior qualidade de vida. O enfoque será criar um espaço acolhedor, no qual os participantes possam aprender de forma interativa e significativa. Serão abordados temas como vacinas (HPV, COVID, gripe, dentre outras), microbiologia (infraestrutura), atividade sexual, paternidade e responsabilidade, cuidados nas relações sexuais com as IST, saúde mental, suicídio, alcoolismo, drogas de abuso, diabetes, hipertensão, hipercolesterolemia, interação entre fármacos de uso clínico, envelhecendo com saúde, saúde bucal, alimentação, acesso à internet e jogos aliciadores em ação (vitimização de abuso sexual, venda de órgãos, exploração sexual). Os temas serão trabalhados em palestras de curta duração (30-40 minutos) e/ou dinâmicas envolvendo atividade física, atividades manuais (materiais a serem adquiridos com recursos solicitados, como EVA, massinha, cartolina, canetas, pincel atômico, etc.), rodas de conversa, teatro/dramatização ou outras técnicas que sejam de interesse manifestado pelo público-alvo. Também será oferecido serviço de exame e diagnóstico das necessidades de tratamento de saúde bucal, para atendimento de demandas espontâneas pelo SUS (que incluem tratamento básico periodontal; restaurador; cirurgias básicas e endodontia) e diálogos fraternos de orientação para serviço de atendimento psicológico. Além das atividades teóricas e práticas, está prevista a realização de visitas monitoradas a USP, de acordo com o calendário de atividades institucionais, onde serão desenvolvidas diferentes atividades relacionadas aos temas em discussão. Outros temas também poderão ser desenvolvidos durante os encontros, em atendendo à demanda do público envolvido.

O H5N1, o vírus influenza responsável pela gripe aviária, é altamente patogênico. De acordo com o Ministério da Agricultura e Pecuária, o mundo enfrenta atualmente a maior epidemia já registrada de Influenza Aviária de Alta Patogenicidade, com a maioria dos casos ligados ao contato entre aves migratórias, aves domésticas de subsistência, aves de produção ou aves silvestres locais (MAPA, 2023). O H5N1 tem o potencial de causar doenças graves e representar desafios significativos à saúde pública. Atualmente, os ovos embrionados são o principal método utilizado para produzir vacinas contra a gripe aviária. No entanto, esta abordagem tem limitações. Esta proposta visa desenvolver uma plataforma que utiliza RNA circular como vacina contra a gripe aviária, com o objetivo de superar as limitações associadas ao uso de ovos embrionados. As conclusões deste estudo contribuirão para o avanço da tecnologia de vacinas e para melhorar a nossa preparação para combater futuros surtos de gripe aviária. As vacinas de RNA já provaram a sua eficácia, uma vez que tecnologias semelhantes de vacinas de RNA desempenharam um papel crucial no rápido desenvolvimento de vacinas eficazes contra a COVID-19. Isto demonstra a versatilidade e o potencial das plataformas baseadas em RNA no tratamento de ameaças virais emergentes. A investigação para combater a gripe aviária H5N1 é de suma importância devido ao seu impacto potencialmente catastrófico na saúde animal e humana. Infecções humanas esporádicas muitas vezes levam a doenças graves e mortalidade. Estudos abrangentes e abordagens inovadoras são essenciais para mitigar estes riscos, melhorar a preparação e desenvolver estratégias de vacinação mais eficientes para proteger a saúde pública global desta ameaça persistente e em evolução. A presente proposta aborda a necessidade urgente de se encontrar alternativas ao uso de ovos embrionados na fabricação de vacinas contra o vírus da gripe aviária H5N1. Este projeto centra-se no desenvolvimento de uma plataforma baseada em RNA com o objetivo de produzir uma vacina circular de RNA que codifica as proteínas hemaglutinina e neuraminidase do vírus influenza H5N1.

Expressão heteróloga de uma lectina putativa de Paracoccidioides brasiliensis similar à jacalina e determinação de sua ligação a carboidratos.Lectinas são proteínas que possuem pelo menos um domínio não catalítico que se liga de modo específico e reversível a um mono ou oligossacarídeo. Em fungos patogênicos, as lectinas têm sido descritas como moléculas importantes para a adesão desses micro-organismos aos tecidos e, consequentemente, na interação com os hospedeiros. Em relação às lectinas de fungos do gênero Paracoccidioides, a literatura ainda é bastante escassa, o que justifica o investimento em se isolar e descrever o papel biológico dessas moléculas nesses micro-organismos. A importância desses fungos jaz no fato de serem os agentes patogênicos da paracoccidioidomicose (PCM), uma doença sistêmica que é endêmica na América Latina, sendo o Brasil o país com maior número de casos. Preliminarmente, obtivemos sucesso na clonagem do gene de uma proteína hipotética de P. brasiliensis com domínio semelhante ao das lectinas da família da jacalina em plasmídeo que continha o gene de resistência à zeocina e transformação de Komagataella phaffii (Pichia pastoris). Porém, foram infrutíferas as inúmeras tentativas de expressão da molécula tanto no sobrenadante de cultura quanto das leveduras. Assim, no presente projeto, objetiva-se modificar o sistema de expressão proteico para Escherichia coli, tendo como meta final a obtenção de proteína com domínio de reconhecimento de carboidrato funcional, o que será realizado por investigação da propriedade lectínica da molécula.

Os fungos termodimórficos do gênero Paracoccidioides causam uma doença sistêmica, a paracoccidioidomicose (PCM), que é endêmica em países da América Latina, incluindo o Brasil, que detém a maioria dos casos da doença. Diferentes grupos de pesquisa têm buscado identificar antígenos de Paracoccidioides para uso em ensaios diagnósticos ou vacinas profiláticas ou terapêuticas. Em estudos preliminares, nosso grupo identificou a presença de uma #945;-manosidase, presumidamente vacuolar, e sua atividade enzimática em sobrenadantes de culturas de leveduras do isolado Pb18 de P. brasiliensis. Determinou-se que a expressão do RNAm dessa #945;-manosidase em isolados com diferentes graus de virulência era significativamente maior nos transcritos de leveduras do que de micélio e maior em leveduras da linhagem virulenta cultivada em diferentes meios de cultura do que nas leveduras da linhagem com baixa virulência. O presente projeto visa avaliar essa #945;-manosidase de P. brasiliensis e o RNAm que codifica essa enzima como tratamentos para PCM, em um estudo pré-clínico em camundongos. Essa avaliação também será realizada em associação com terapia medicamentosa a fim de aprimorar as intervenções disponíveis para a resolução das infecções por P. brasiliensis. Além disso, será analisada a expressão gênica da #945;-manosidase em leveduras obtidas de animais infectados em diferentes tempos. Esse estudo poderá abrir perspectivas do uso de um novo agente terapêutico na PCM.

A paracoccidioidomicose (PCM) é uma doença infecciosa causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis. Dentre as micoses profundas, a PCM é a mais prevalente da América Latina e representa um importante problema de Saúde Pública nos países onde há uma maior incidência da doença Brasil, Argentina, Colômbia e Venezuela. Embora importantes avanços em termos de imunopatogênese da PCM tenham ocorrido nos últimos anos, pequena parcela desse conhecimento tem se convertido em estratégias de imunoterapia e descobertas de antígenos candidatos a alvos vacinais e terapêuticos. Dentre esses alvos, algumas glicoproteínas têm recebido destaque como candidatos promissores, porém, nenhuma delas realmente se mostrou eficiente em diminuir a carga fúngica e o comprometimento pulmonar na PCM experimental. Resultados preliminares do nosso grupo têm mostrado que a injeção terapêutica de adjuvantes predisponentes da resposta imunitária do padrão T helper 1, protetora na PCM, induz a proteção de camundongos previamente infectados com P. brasiliensis. O fato de esses adjuvantes terem sido administrados na ausência de antígeno suscitou a hipótese de que antígenos liberados durante o curso da infecção pudessem desempenhar um papel importante na proteção observada e, consequentemente, na ativação do sistema imunológico do hospedeiro. Tais observações justificam a identificação desses antígenos como moléculas que possam modular a resposta imunitária, sendo assim, alvos terapêuticos. A gravidade que o quadro clínico da PCM pode assumir, somada à ausência de um antifúngico de baixa toxicidade e, ainda, à falta de vacinas aprovadas para o tratamento das infecções fúngicas de importância médica nos motivaram a propor o isolamento e a caracterização de componentes antigênicos de P. brasiliensis que possam ser utilizados no desenvolvimento de um modelo de intervenção imunoterapêutica, cuja indução de imunidade específica ocorra em camundongos infectados cronicamente.

Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da paracoccidioidomicose (PCM), uma doença endêmica em países da América Latina. O Brasil corresponde ao país com maior número de ocorrências, abrigando 85 de todos os casos relatados de PCM, com alta prevalência nas regiões Sul, Sudeste e Centro-Oeste. A PCM é uma doença crônica, granulomatosa e progressiva, e está associada a vários graus de supressão da imunidade celular. Essa imunossupressão tem sido alvo de estudos de alguns grupos de pesquisa que têm mostrado a existência de mecanismos que podem se somar para a indução de anergia celular específica. Nesse contexto, a busca de novos antígenos fúngicos poderia auxiliar na compreensão desses mecanismos de imunossupressão. Dados preliminares de nosso grupo mostram que P. brasiliensis apresenta uma fração protéica que, quando injetada em camundongos infectados, induz a um agravamento da infecção, avaliado através do aumento expressivo da carga fúngica desses animais quando comparado aos controles. Assim, o presente trabalho visa identificar qual é a proteína de P. brasiliensis supressora da resposta imunológica, bem como clonar e expressar o gene dessa proteína. O seqüenciamento do gene dessa proteína permitirá a avaliação da estrutura protéica in silico, enquanto as expressão da mesma possibilitará estudar o papel dessa molécula na infecção pelo P. brasiliensis. Além disso, avaliaremos se o silenciamento do gene da proteína imunossupressora atenuará a virulência do fungo. Esse estudo poderá ampliar a compreensão do processo infeccioso desencadeado por P. brasiliensis.

A paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica causada por fungos do gênero Paracoccidioides, tais como P. brasiliensis e P. lutzii. A enfermidade é autóctone da América Latina, sendo o Brasil o país com o maior número de casos. A PCM se manifesta como uma inflamação crônico-granulomatosa, acometendo principalmente os pulmões. A depender de fatores do hospedeiro e do fungo, a PCM pode variar de uma infecção assintomática até doença disseminada grave. A resposta do hospedeiro ao fungo é dependente da efetuação de resposta imunológica celular, sendo a preponderância inicial do padrão de resposta do tipo T (Th1), responsável pela proteção. Já a resposta Th2 inicial inviabiliza o controle do crescimento fúngico, gerando doença ativa e disseminação do fungo pelo organismo. As proteínas de estresse (Hsp) são moléculas que desempenham uma série de papéis fisiológicos dentro da célula, dentre os quais destaca-se o processo de enovelamento correto das proteínas recém sintetizadas. Assim, quando as células são submetidas a eventos estressores, por exemplo, estresse térmico, infecção, radiação, ocorre um aumento da produção dessas Hsp. Embora ainda não se tenha determinado a localização exata da Hsp60 em Paracoccidioides spp., sabe-se que em mamíferos é localizada dentro das mitocôndrias. Quando liberadas pelas células de mamíferos, Hsp60 é reconhecida pelo sistema imunológico como um sinal de lesão celular, o que leva à liberação de mediadores inflamatórios, com apresentação dessas moléculas pelas células apresentadoras de antígeno. A Hsp60 parece ser importante no curso da paracoccidioidomicose, tendo em vista que os soros de pacientes infectados com Paracoccidioides spp. reconhecem essa proteína. Nesse projeto visamos avaliar a Hsp60 como uma molécula terapêutica contra PCM e analisar a resposta imunológica que ela desencadeia.

Escherichia coli é uma espécie de enterobactéria que compreende um grande número de grupos e tipos sorológicos. Apesar de fazer parte da microbiota do instestino grosso de seres humanos e serem benéficas, tornam-se infecciosas em indivíduos imunossuprimidos e/ou quando a barreira gastrintestinal é rompida. Alguns componentes dessas bactérias são importantes para que as infecções por essas bactérias se estabeleçam, tendo as fímbrias um papel de destaque. Dados preliminares de nosso grupo mostram que E. coli apresenta uma lectina ligante de D-manose, chamada Ec60/66, ainda não descrita na literatura. A identificação dessa lectina se constitui em etapa essencial na descoberta do seu papel na biologia dessa bactéria, bem como em um possível envolvimento dessa proteína no processo de colonização de tecidos. Assim, nesse projeto estaremos investindo esforços em caracterizar tal molécula, seqüenciá-la para posterior identificação e avaliar seu potencial como fator responsável pela liberação de citocinas inflamatórias e imunomoduladores, o que possibilitaria determinar o papel dessa molécula como um fator de virulência. A implicação de Ec60/66 nos processos de colonização e infecção abrirá perspectivas de torná-la alvo de intervenções terapêuticas.

A gravidade e desenvovimento de algumas doenças são dependentes da dominância de respostas imunitárias adaptativas do tipo 1 ou tipo 2, que são estimuladas por IL-12 e IL-4, respectivamente. Dados preliminares do nosso grupo tem mostrado que a lectina ArtinM, ligante de D-manose e extraída de sementes de jaca (Artocarpus heterophyllus), apresenta a propriedade de induzir células esplênicas a produzir interferon(IFN)-gama. Tal propriedade fundamentam a proposta de avaliar o efeito da lectina ArtinM na paracoccidioidomicose experimental, através de abordagens experimentais que permitirão uma análise ampla do curso da infecção. Planejamos, avaliar um eventual efeito terapêutico de ArtinM e o mecanismo pelo qual IFN-gama é produzido pelas células esplênicas.

Nesse projeto pesquisamos proteínas ligantes de carboidratos, além da lectina ligante de N-acetil-glucosamina chamada paracoccina. Tal proposta se baseia no fato de lectinas serem moléculas ubiqüitárias em uma ampla gama de interações biológicas, inclusive em processos de colonização e infecção por microorganimos.

Dados preliminares de nosso grupo tem mostrado que Toxoplasma gondii apresenta proteína ligante de lactose. Nesse projeto visamos identificar, determinar o papel dessa lectina na interação do parasita com a célula do hospedeiro, bem como uso dessa proteína como preparação vacinal. Sua ação em células humanas também será avaliada.

Dados preliminares de nosso grupo tem mostrado que Paracoccidioides brasiliensis apresenta proteína ligante de N-acetil-glucosamina. Nesse projeto visamos identificar, determinar o papel dessa lectina na interação do fungo com a célula do hospedeiro, bem como uso dessa proteína como preparação vacinal.

A gravidade e desenvovimento de algumas doenças são dependentes da dominância de respostas imunitárias adaptativas do tipo 1 ou tipo 2, que são estimuladas por IL-12 e IL-4, respectivamente. Dados preliminares do nosso grupo tem mostrado que a lectina KM+, ligante de D-manose e extraída de sementes de jaca (Artocarpus heterophyllus), apresenta a propriedade de induzir células esplênicas a produzir interferon(IFN)-gama. Tal propriedade fundamentam a proposta de avaliar o efeito da lectina KM+ na toxoplasmose experimental, através de abordagens experimentais que permitirão uma análise ampla do curso da infecção. Planejamos, avaliar um eventual efeito terapêutico de KM+ e o mecanismo pelo qual IFN-gama é produzido pelas células esplênicas.

Nesse projeto, pesquisou-se a interação da lectina KM+, extraída de sementes de jaca (Artocarpus heterophyllus), com receptores encontrados em macrófagos e neutrófilos, e a conseqüente indução de migração e secreção da citocina IL-12. Em relação aos neutrófilos foi observado que os receptores de quimiocinas CXCR2 são regulados postivamente, podendo ser provavelmente o receptor envolvido no processo de migração. Em realção aos macrófagos, não foi possível estabeler relação entre as proteínas isoladas e a a produção de IL-12.