Francisco Javier Hernandez Blazquez.

Os alunos-bolsistas participarão dos processos ligados à parte de extroversão e mediação das exposições destes museus, nos projetos em desenvolvimento e nas ações junto aos visitantes (individuais ou em grupo. Os alunos que integrarão este projeto serão subsidiados com informações que normalmente não estão disponíveis nos cursos de graduação da USP, criando, dessa forma, uma excelente oportunidade de aperfeiçoamento acadêmico e desenvolvimento profissional. A supervisão e orientação do seu estágio estará sob a responsabilidade de uma equipe de médicos veterinários e do especialista em museologia

Aperfeiçoar o sistema de comunicação museológica das informações contidas na exposição de longa duração do Museu de Anatomia Veterinária da FMVZ USP, com a substituição de diferentes suportes expográficos estruturais e de comunicação visual. Mantido pela Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da USP, este espaço museológico recebeu recentemente uma série de ajustes em suas estruturas físicas e expográficas, possíveis graças a um planejamento museológico elaborado ao longo dos últimos meses e ao imprescindível apoio da direção da FMVZ e da Pró-Reitoria de Extensão Universitária da USP. Os ajustes previstos e já realizados consistem em um conjunto de ações que permitem a adequação de espaços e conteúdos para que seja possível dar continuidade ao novo plano museológico so MAV, o qual prevê o estabelecimento de uma nova prática museológica visando, sobretudo, a implantação de um sistema sólido da comunicação museológica, com enfoque nas estratégigias educacionais, fundamentais para a divulgação científica estruturada na noção da preservação patrimonial. O projeto aqui apresentado - "Projeto, produção e instalação de novos recursos expográficos para o Museu de Anatomia Veterinária da FMVZ" - garante o prosseguimento dessa série de adequações. Os novos recursos a serem adquiridos consistem em mobiliário expositivo, legendas explicativas sobre o material exposto e confecção de modelo didático de ancestral evolutivo das aves.

O auxílio foi concedido para a participação no 31O EUROPEAN SYMPOSIUM OF MARINE BIOLOGY, Zoological Institute, Russian Academy of Sciences, St. Petersburg (Russia), 9-13 de setembro de 1996, onde foram apresentados os seguintes trabalhos :

HERNANDEZ-BLAZQUEZ, F.J.; SILVA, J. R. M. C. Transepithelial transport of proteins in the intestine of the antarctic fish Notothenia neglecta. In: Symposium Programme and Abstracts, p.54, 1996.
HERNANDEZ-BLAZQUEZ, F.J.; SILVA, J. R. M. C. Absorption of lipids in the intestine of the antarctic fish Notothenia neglecta. In: Symposium Programme and Abstracts, p.53, 1996.
SILVA, J. R. M. C.; HERNANDEZ-BLAZQUEZ, F.J.; BARBIERI, R. L. Occurrence of induced inflammatory process at 0 oC in antarctic fish Notothenia neglecta. In: Symposium Programme and Abstracts, p.75, 1996.
SILVA, J. R. M. C.; MIYASAKA, C. K.; HERNANDEZ-BLAZQUEZ, F.J.; BARBIERI, R. L.; CURI, R. Catalase (CAT), superoxide dismutase (GOD) and glutathion peroxidase (GSH-PX) activities in the spleen and cephalic kidney of the antarctic fish Notothenia neglecta.. In: Symposium Programme and Abstracts, p.76, 1996.

Auxílio: Fapesp

A II Semana de Histologia de Peixes foi um encontro realizado na Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias do Campus de Jaboticabal - UNESP, nos dias 17 a 21 de julho de 1995, que teve duas atividades: a) ministração de cursos e palestras de histologia de peixes, abrangendo todos os sistemas e b) apresentação de trabalhos sobre histologia de peixes. Inscreveram-se 110 participantes no curso e foi elaborado um livro:
Santos, H. S. L.; Hernandez-Blazquez, F. J. Histologia de Peixes. Ed. Funep, Jaboticabal, 1995, 153 páginas. , contendo as palestras, editado pela Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias de Jaboticabal em colaboração com a FuneP, Fundação de Estudos e Pesquisas em Agronomia, Medicina Veterinária e Zootecnia
Auxílio Fapesp, processo 1994/6243-0

O rúmen, seu epitélio de revestimento e a musculatura ruminal sofrem várias adaptações fisiológicas e morfológicas que os preparam para suas funções de câmara de fermentação bacteriana e absorção de ácidos graxos voláteis. O epitélio ruminal e os plexos mioentéricos são cruciais para as adaptações digestivas e fisiológicas da alimentação adulta nos ruminantes, contudo o processo celular de adaptação e as moléculas mais importantes da arquitetura epitelial, que são as proteínas das junções celulares, foram pouco estudadas. O estudo de proteínas de junção se faz necessário para um maior entendimento das funções e das interações intercelulares neste tecido. A E-caderina e a N-caderina são moléculas que medeiam a adesão, a migração, os processos de diferenciação celular e os processo de reparação epitelial. A β-catenina liga a E-caderina e a α-catenina ao citoesqueleto, constituindo o complexo E-caderina-catenina-actina, as quais possuem papéis importantes na manutenção da integridade funcional do epitélio e das junções de comunicação. A β-catenina regula a diferenciação e a proliferação celular e atua nas interações entre as caderinas e outras proteínas transmembrânicas como as conexinas.. Estas, por sua vez, atuam na regulação homeostática de várias funções celulares, como o crescimento e diferenciação, apoptose, regeneração e a sincronização das atividades metabólicas do epitélio. O estudo das conexinas e proteínas de junção nos epitélios de revestimento tem sido revelador quando ao papel delas na fisiologia da pele e na cicatrização, inclusive sugerindo a adoção de novos procedimentos terapêuticos atuando nestas moléculas. Nos proventrículos dos ruminantes, além da Cx43 não se sabe quais outras são expressadas e nem como elas participam ou controlam a integridade tecidual, o comportamento celular e a manutenção da organização tecidual durante o desenvolvimento ruminal. Sabe-se que o epitélio sofre modificações desde sua formação embrionária até seu amadurecimento após o desmame, passando de um estado afuncional à um estado funcional, mas não se conhecem os mecanismos celulares que governam estas modificações. Estas proteínas interferem com a expressão gênica umas das outras, portanto elas devem ser estudadas em conjunto. Para tanto, o presente estudo utilizará técnicas de imuno-histoquímica para a identificação, localização microscópica e detecção de caderinas (E e N), cateninas (α e β) e conexinas (26, 32, 40 e 43) do rúmen de fetos bovinos (30, 110 e 150 dias de desenvolvimento), bezerros recém-nascidos e bovinos adultos. com o fim de verificar o padrão de expressão destas moléculas em cada etapa estudada. Em animais adultos, também será verificado e efeito de diferentes fontes energéticas alimentares sobre estes aspectos do epitélio ruminal. O projeto também estudará os mecanismos adaptativos dos plexos mioentéricos, em fases distintas do desenvolvimento pós-natal, sobretudo, na fase de transição do comportamento alimentar, ajudando a entender os estímulos que leva à especialização e diferenciação da mucosa ruminal associados ou em resposta à especialização epitelial. Em animais adultos, também será verificado e efeito de diferentes fontes energéticas alimentares sobre estes aspectos do epitélio ruminal. As conexinas selecionadas para o estudo são as que têm maior probabilidade de serem encontradas com base nos estudos realizados em pele, uma vez que não há um estudo abrangente do assunto sequer no epitélio do esôfago de animais que seria o tecido mais próximo. Contudo, também por sequenciamento genético e PCR em tempo real buscaremos outras moléculas de junção que também possam ser coexpressadas em cada etapa.

As plantas medicinais tem se destacado, pois há evidências de que estas possuem efeitos protetores na carcinogênese humana. O pequi (Caryocar brasiliense Camb.) um fruto nativo da região do Cerrado brasileiro é possuidor de substâncias com propriedades antioxidantes, as quais estão relacionadas com a redução do risco de doenças degenerativas como o câncer. Portanto este projeto propõe avaliar o potencial quimiopreventivo do óleo de pequi (C. brasiliense) contra lesões hepáticas pré-neoplásicas induzidas quimicamente pela dietilnitrosamina (DEN) em teste de média-duração. Para o modelo de hepatocarcinogênese com camundongo infantil, serão utilizados 100 animais da linhagem BALB/c machos, com idade de 15 dias. Será utilizado o carcinógeno dietilnitrosamina (DEN) como iniciador, injetado por via i.p. na concentração de 10µg/g. Serão formados 5 grupos experimentais, sendo: GI= controle positivo DEN; GII= dose de pequi+DEN (100mg); GIII= dose de pequi+DEN (400mg); GIV= dose de pequi+ DEN (1000mg) e; GV= controle pequi (400mg). Os animais serão expostos por gavagem, uma vez por dia, com o óleo de pequi a partir do 30° dia de vida, durante 119 dias. Ao término deste período os animais serão eutanasiados e seus fígados retirados e fixados em formalina tamponada a 10% por 48 horas possibilitando a avaliação das lesões pré-neoplásicas pela coloração de (HE), quantificação dos focos de hepatócitos alterados (FHA) e pela expressão das citoqueratinas 8/18 (CK 8/18) e CK 19

A cirrose é caracterizada como um estágio terminal da fibrose, onde ocorre a formação de nódulos regenerativos que resultam na desorganização da arquitetura tecidual, alterações vasculares e comprometimento das funções hepáticas. É considerado um processo irreversível, devido à incapacidade do tecido hepático degradar a matriz cicatricial. O transplante hepático é a única ação terapêutica em certos casos de cirrose crônica. A busca por terapias alternativas tem apontado a administração de fatores hepatotróficos como um instrumento redutor da matriz extracelular e restabelecimento da arquitetura e funções hepáticas. Em estudo recente deste grupo, foi constatado que fígados de ratos induzidos à cirrose hepática pela administração de tioacetamida e tratados com solução de fatores nutricionais (FN) apresentaram decréscimo de colágeno parenquimal, restabelecimento dos níveis de AST e ALT, redução de GGT e da expressão de Colα1; melhora morfológica do fígado, com reaparecimento de veias centrolobulares, regressão de septos fibrosos e diminuição do número de nódulos regenerativos. Recentes pesquisas têm alcançado resultados na redução e reversão de fibrose, entretanto, poucos estudos apontam uma possível ação terapêutica contra a cirrose. Os fatores nutricionais aparentemente têm influenciado processos proliferativos hepáticos e podem ser um instrumento na atenuação dos processos fibróticos e cirróticos, pela redução da deposição da matriz extracelular. Desta forma, elucidar as bases moleculares da modulação da matriz extracelular por estes fatores possibilitariam a regulação dos efeitos sobre o tecido hepático. Assim, o presente estudo terá como principal propósito avaliar, pela técnica de DNA microarrays e PCR em tempo real a expressão gênica no tecido hepático de ratos submetidos ao modelo de cirrose induzida pela tioacetamida e tratados com fatores nutricionais, identificando as possíveis vias influenciadas por este tratamento no processo cirrótico.

O fígado é um órgão que apresenta grande capacidade regenerativa após injúria. Contudo, é possível desencadear os processos regenerativos sem injúria, pelo uso de fatores hepatotróficos (FH) injetados intraperitonealmente. A via e a foram de administração ainda são controversas. Neste trabalho foram testadas dois protocolos de administração de uma solução de FH (Parra et al., 1992): em duas doses diárias e três doses diárias, sendo observado o efeito no crescimento e matriz extracelular (ME) hepática e o efeito do tratamento em outros órgãos viscerais. Os FHE (40 mg/kg) foram administrados intraperitonealmente em ratas Wistas por dez dias. Um grupo controle recebeu solução salina. Amostras dos fígados foram observadas por microscopia óptica (parafina) e o colágeno foi quantificado por análise morfométrica com a coloração Picrossirius. Os animais do grupo 2x e 3x apresentaram aumento da massa do fígado de 30,1% e 22,5% respectivamente em relação ao grupo C. Ocorreu mortalidade (26,7%) no grupo 3X.. Em ambos os grupos (2X e 3X) houve redução da quantidade de colágeno (51,8% e 34,9%) intersticial em relação ao grupo C. Não houve alteração no quadro histológico dos demais órgãos analisados. Os FHE estimularam o crescimento hepático e a redução da proporção de colágeno tecidual. A administração em 3 doses diárias pode causar mortalidade, possivelmente pelo exessivo estresse da manipulação, o que não ocorreu no grupo 2X, não sendo recomendada esta abordagem no tratamento com FHE. 2008/50258-6 Auxílio Pesquisa - Regular

Os modelos animais de cirrose hepática são importantes para o estudo dos mecanismos da doença e tratamentos relacionados a ela. Pode ser induzida por várias substâncias, porém nos modelos de indução por tioacetamida os nódulos regenerativos são mais proeminentes e o padrão histológico é mais próximo ao da cirrose humana. Todavia, durante o processo de indução por modelos de tioacetamida por via oral já estabelecidos nota-se adaptação dos animais à droga, ganho de peso e nível de marcadores sorológicos de lesão hepática próximo ao normal. Assim, o objetivo deste trabalho é atingir um quadro cirrótico em que as alterações sejam semelhantes às da cirrose não experimental, com perda ou manutençao de peso, quadro histopatológico mais intenso e bioquímica sorológica mais próxima da cirrose não-experimental, procurando evitar a adaptação por meio de aumentos progressivos nas doses de tioacetamida administradas por via intraperitoneal aos animais. O experimento contará com três grupos de ratas Wistar, as quais receberão injeções intraperitoneais de tioacetamida por um período de 14 semanas. O grupo A receberá doses de 20 mg/ 100g de peso corporal durante todo o período experimental. O grupo B receberá doses de 20 mg/ 100g na primeira metade do experimento e na segunda metade esta dose será aumentada em 20%. O grupo C também iniciará com a mesma dose e a cada 20 dias a dose será acrescida em 10%. O grupo D seguirá o mesmo esquema do grupo C, porém a dose será aumentada em 15% a cada 20 dias.. Após a eutanásia dos animais, serão realizados o exame histopatológico do fígado, quantificação de colágeno, a análise bioquímica do sangue para verificação dos marcadores de lesão hepática. Edital universal 2008 processo 479708/2008 8

A cirrose hepática é uma lesão crônica resultante de injúria prolongada. É caracterizada morfologicamente pela formação de nódulos regenerativos de parênquima circundados por septos fibrosos e está associada a graves alterações da função e arquitetura hepáticas. Os modelos animais de cirrose hepática são importantes para o estudo dos mecanismos da doença e tratamentos relacionados a ela. Nos modelos de indução por tioacetamida em roedores, os nódulos regenerativos são proeminentes e o padrão histológico é mais próximo ao da cirrose micronodular humana, um modelo muito útil no estudo de substâncias antifibróticas. A tioacetamida pode ser adminitrada por via oral ou intraperitoneal. Estudos dos modelos de indução de cirrose por via oral relataram adaptação dos animais à droga, ganho de peso, nível de marcadores sorológicos de lesão hepática próximo ao normal e grande variação individual. O uso da via intraperitoneal revelou menos variação individual, mas o fenômeno da adaptação à tioacetamidaainda não foi estudado neste modelo, o que será feito no atual projeto, por meio de doses progressivamente maiores aos ratos. Também serão estudadas as células e as moléculas que participam do comportamento d matriz extracelular. Três grupos de ratos Wistar receberão uma dose inicial de 20 mg/100g de peso de tioacetamida. O grupo A receberá a mesma dose durante 14 semanas. O grupo B receberá 20% a mais de tioacetamida a partir da segunda metade do experimento. O grupo C receberá 10% a mais de tioacetamida a cada 24 dias até o final das 14 semanas. Após a eutanásia, amostras do fígado e do sangue serão colhidas, procedendo-se ao exame histopatológico, imuno-histoquímico, quantificação do colágeno, análise do marcadores sorológicos de lesão hepática e análise por PCR em tempo real. Os objetivos deste projeto são: a) obter um estado cirrótico por via intraperitoneal que mostre alterações da arquitetura hepática, com perda ou manutenção do peso corporal e aumento dos níveis dos marcad

A espécie Arctocephalus australis, também conhecida como Lobo-Marinho-do-Sul, mamífero marinho que ocorre no litoral sul brasileiro, não possuindo colônias reprodutivas em nosso território, migram buscando regiões mais quentes para descansar. Esses animais vivem em ambientes aquáticos e terrestres, sofreram algumas adaptações em seu sistema tegumentar e vascular que possibilitou essa adequação. Este projeto tem por objetivo descrever microscopicamente o sistema tegumentar dessa espécie, comparando várias regiões e comparar o índice de proliferação celular da epiderme das nadadeiras com outras áreas do corpo. Serão coletados fragmentos de várias regiões do corpo e submetidos às técnicas histológicas para utilização em microscopia óptica. Os índices de proliferação celular serão medidos pela quantificação do números de células expressando o antígeno PCNA. 

ABSTRACT
The species Arctocephalus australis, also known as South American fur seals, ia a sea mammal that is found in the brazilian southern seashores,. They do not have reproductive colonies in brazilian territory, but they migrate in search of warmer regions for resting. These animals.live in both aquactic and dry ground environment and thus developed some tegumentary adaptations to cope with both environments, specially those related with their epidermal and vascular systems. Our objective is to describe the microscopic aspect of the integument of this species, and to compare several regions of the seal body, specially the fins epidermis and to verify if there is difference between the cell proliferation index of the fins and other parts of the body. Fragments of several regions of the body will be collected from fresh deceased animals, processed by histologic techniques and observed under light microscope. The cell proliferation index will be evaluated by counting of the number of epidermal cell nuclei that express the PCNA antigen.
Processo Fapesp 2006/05896-9 valor de R$ 18..650,00 mais R$ 4.662,50 de re

Edital MCT/CNPQ/PADCT/CT-INFRA - Região Nordeste, Processo númro 620145/2004-8, com vigência de 24 meses, em execução na Universidade Federal do Piauí.

A cirrose hepática é caracterizada pela fibrose e por nódulos regenerativos que resultam na desorganização da arquitetura hepática, sendo considerado um estágio irreversível. Verificou-se contudo, que as alterações histopatológicas diminuem após estimulação do fígado através de uma hepatectomia parcial. Porém, este modelo leva a uma diminuição adicional do déficit morfofuncional do órgão já deficitário, ocasionando altos índices de mortalidade. Outra linha de pesquisa para uma possível reversão da cirrose, seria a administração de fatores hepatotróficos exógenos (FHE), uma vez que estas substâncias reduziram a fibrose induzida em ratos. Assim, nosso estudo visará estudar o efeito do tratamento de ratos com FHE, nos quais a cirrose foi induzida experimentalmente com tioacetamida, droga essa, que produz uma cirrose similar à estabelecida nos humanos, além de ser eliminada mais rapidamente pelo sistema excretor e por causar menor mortalidade nos animais. A avaliação do efeito da solução será realizada pela quantificação do volume colágeno intersticial e ao redor dos vasos, pelo estudo da proliferação celular e por ensaios bioquímicos de prova de função hepática. Processo FAPESP 2004/10971-04 vigência de 11/2004-11/2006.

Os bagres do gênero Pseudoplatystoma (pintado) são muito usados na pesca em rios interiores e sua carne tem boa aceitação pelo consumidor. Embora estratégias de produção comercial estejam sendo estudadas envolvendo arraçoamento artificial, são poucos os trabalhos em revistas científicas sobre a morfologia do trato digestório de animais adultos e não há nenhum sobre o mesmo tema em larvas. Neste projeto, propomo-nos a estudar o aspecto histológico e histoquímico desenvolvimento do digestório de larvas de pintado desde o início da alimentação exógena, com 3 dias, até o 16o. dia, identificando a evolução e o aparecimento dos principais órgãos deste trato, como o estômago e o intestino. Também será estudada as alterações na composição dos mucopolissacarídeos secretados pela células mucosas epiteliais deste sistema com o objetivo de fornecer subsídios anatômicos e histológicos para esquemas de alimentação nesta fase da vida do animal.
Auxílio Fapesp processo 2003/12878-6 Valor U$ 6.335,00

As conexinas são proteínas de membrana que formam canais intercelulares estabelecendo um tipo de comunicação direta pela qual as células vizinhas sincronizam seu metabolismos. A expressão ou distribuição de conexinas em tecidos sob algum processo patológico geralmente está alterada, como é o caso da cirrose hepática, onde há uma redução das junções comunicantes. O presente projeto visa estudar as conexinas 26 e 32 presentes em cortes histológicos de fígados cirróticos de ratos albinos (Wistar), fêmeas e estabelecer uma relação entre o número, tipo e distribuição celular de conexinas e o estado de cirrose hepática. O processo de cirrose hepática será induzido pela administração de solução dimetilnitrosamina através da técnica de gavagem, duas vezes por semana e em dias consecutivos. As referidas lâminas serão coradas através de método de imunofluorescência para a visualização das conexinas.
Auxílios: CNPQ Auxílio à pesquisa, processo 470717/2003-3, Valor R$ 19.950,00 ou U$ 6.879,00 Fapesp, Bolsa de Mestrado:02/11182-8

O uso de soluções de fatores hepatotróficos que acelerem a regeneração hepática pode ser útil como tratamento perioperatório das hepatectomias. Embora algumas substâncias usadas isoladamente tenham demonstrado efeito hepatotrófico, recomenda-se o uso de soluções para se obter o melhor resultado. O presente trabalho visa estudar os efeitos da administração de uma solução de fatores hepatotróficos exógenos no processo regenerativo do fígado de rato, especialmente seus efeitos nos componentes fibrosos da matriz extracelular. Após a hepatectomia parcial de 26%, os ratos receberão intraperitonialmente uma solução de fatores hepatotróficos exógenos (glicose, aminoácidos, insulina, glucagon, triiodotironina) durante sete dias, outro grupo controle receberá apenas solução salina. Em seguida ao sacrifício em intervalos preestabelecidos, o fígado será colhido para estudo da proporção entre os componentes parenquimatosos e estromais e para a avaliação da taxa de proliferação celular, pela técnica de imuno-histoquímica para detecção de bromodeoxiuridina (BrdU).
Auxílio: Bolsa CNPq produtividade em pesquisa A2, processo 551479/2002-7, Fapesp 2002/08186-1 bolsa de iniciação científica, Fapesp Auxílio à pesquisa 2002/08185-5, valor total de R$ 36.000,00

O projeto desenvolve tecnologia para separar larvas recém-eclodidas por tamanho com o fim de selecionar animais com maior potencial de crescimento final. A pesquisa está sendo desenvolvida no CEPTA-IBAMA, em Pirassununga e foi financiada com recursos do CEPTA.

A finalidade deste projeto é avaliar os efeitos do emprego de dois tipos de probióticos comerciais na dieta de suínos, um composto por microorganismos viáveis e outro de bactérias inativadas. Para tanto foram avaliadas:modificações morfológicas nas vilosidades intestinais, através de análise morfométrica em microscopia de luz; a resposta imune, através da contagem de coliformes nas fezes, da dosagem de IgA no soro pelo método ELISA e da avaliação de possível aumento na população de células secretoras de IgA no intestino delgado (íleo) e em linfonodos mesentéricos, empregando-se para tanto metodologia imuno-histoquímica associada à análise de imagens. 
Auxílio: Fapesp processo 2002/13398-8 Valor R$ U$ 6.335,00

O fígado é um órgão importante para se analisar como o animal reage a agressões químicas. Um dos métodos utlizado para estudar a regeneração hepática é a hepatectomia parcial (HP). Nosso objetivo foi verificar a influência da hepatectomia de 30% e de 70% sobre a taxa de proliferação das células hepática medida pela incorporação de BrdU na região da incisão e no resto do fígado e a proliferação de ductos biliares e de células epiteliais pré-ductulares biliares (CEPDBs) com o uso de de 2 anticorpos para citoqueratinas humanas, AE1/AE3. O pico de proliferação nos animais que sofreram HP de 30% do parênquima hepático deu-se após 1 dia da cirurgia. Os animais que sofreram a HP de 70% o pico ocorreu no terceiro dia após a cirurgia.O índice de proliferação foi semelhante para a região próxima ou distante do corte. Para ambas as HP não houve diferença na regeneração do tecido retirado próximo ou distante da área de incisão. Nas regiões distantes da HP havia maior número de ductos havendo o pico do número de ductos coincidindo com o pico de proliferação celular de ambas as HP. Depois da HP o número de CEPDBs cresce consideravelmente. Os pico de proliferação também ocorreram no primeiro e terceiro dia para a HP de 30% e de 70% respectivamente, sendo mais altos na região distante do corte. Assim, durante a regeneração do fígado de C. gariepinus ocorre hiperplasia compensatória por proliferação de hepatócitos, de ductos biliares e de CEPDBs. A hepatectomia de 30% gerou uma resposta regenerativa intensa e é menos traumática para o animal, a região distante do corte reage mais intensamente que a região próxima do corte no que se refere aos ductos biliares e as CEPDBs.
Auxílio: Fapesp processo 2000/13911-1 valor US 25.389,00, Cnpq bolsa de iniciação científica processo 524550/96-4

Esta pesquisa teve como objetivo avaliar os efeitos do emprego de dois tipos de probióticos comerciais na dieta de suínos, um composto por microorganismos viáveis e outro de bactérias inativadas. Para tanto foram avaliadas:modificações morfológicas nas vilosidades intestinais, através de análise morfométrica em microscopia de luz; a resposta imune, através da contagem de coliformes nas fezes, da dosagem de IgA no soro pelo método ELISA e da avaliação de possível aumento na população de células secretoras de IgA no intestino delgado (íleo) e em linfonodos mesentéricos, empregando-se para tanto metodologia imuno-histoquímica associada à análise de imagens. 
Auxílio: CNPq processo 475807/2001-4 e recebeu U$ 3.375,00.

A maioria dos estudos sobre a regeneração de feridas na pele de peixes foram realizados em peixes que possuem escamas. Tendo em vista que o teleósteo Clarias gariepinus é um peixe de couro, o estudo da cicatrização neste animal poderá dar novas informações sobre o processo regenerativo em peixes. Escolhemos também esta espécie pela sua tolerância a temperaturas extremas, o que permite que seja adotado como um modelo biológico para pesquisas sobre o efeito da temperatura na cicatrização da pele. O estudo a que nos propomos foi centrado na cinética do processo regenerativo, na forma como ocorre a cobertura da lesão e na resposta tecidual e celular à lesão, em especial quais células são estimuladas a se dividir e em que momento isto ocorre. Para isso realizamos lesões de 2x1cm na região dorso cranial dos mesmos. A epitelização começa com 3h com a separação da epiderme da borda da lesão da derme, tendo a partir daí a migração da mesma em um movimento em massa para a cobertura da lesão, essas frentes migratórias se encontram em 12h e se ancoram à derme com 1 dia. A incorporação de BrdU pelas células da epiderme na fase ?S? tiveram dois picos, um com 3h e outro com 2 dias, tendo maior atividade proliferativa na área da lesão no que na área da borda entre o 1. e o 5. dia, esse aumento proliferativo na área da lesão permite que a epiderme apresente espessura normal com 3 dias. A formação da membrana basal acontece com 5 dias, período na qual também se pode distinguir perfeitamente o estrato esponjoso do estrato compacto e notar a presença de melanócitos no estrato esponjoso, o que confere a tonalidade natural à pele. Concluímos assim que a regeneração da pele de peixes sem escamas ocorre mais rapidamente do que em animais de escamas e em mamíferos.
Auxílio: Fapesp bolsa 2002/10940-3

A alteração do esquema da metilação do DNA tem como repercussão a mudança da configuração da cromatina, contribuindo assim à instabilidade do genoma e à desorganização da replicação que geram a aneuploidia. A hipometilação do DNA está associada às aberrações cromossômicas, tais como as translocações e as disfunções das mitoses. As neoplasias mamárias são o segundo tipo mais frequente de tumor em cães. Ao estudar a metilação em tumores de cães, procuramos correlacionar a perda de grupos metilados e deste tipo de câncer. Determinamos o estado de metilação de 5 casos de neoplasias malignas e cinco casos de neoplasias benignas, as quais foram comparadas com glândulas mamárias normais. Todas as amostras foram fixadas em metacarn (60% metanol, 30% cloroformio and 10% ácido acétic). Um anticorpo monoclonal anti-5-MeCyd foi aplicado aos cortes e revelado pela DAB. A intensidade de coloração foi medida por análise de imagem. Pelo menos 150 núcleos de cada caso clínico foram medidos. Nossos resultados mostraram que tanto os tumores benignos como os malignos estão hipometilados quando comparados com o tecido normal, embora o grau de metilação varie com o tipo de tumor. Verificamos também que alguns tumores benignos são tão hipometilados quanto os malignos, o que pode indicar que a hipometilação não ocorre paralelamente à malignidade. O fato de que os tumores benignos são hipometilados, embora em menor grau, sugere que em tumores da glândula mamária de cães, a hipometilação é um evento precoce, e pode ocorrer antes do início da malignidade.
Auxílio Integrado CNPQ processo 461637/--6, Cnpq Bolsa de Produtividade em pesquisa processo 1998/10397-3

The mouse skin papilloma cell line P3/22 expresses Cx43 but not E-cadherin and are deficient in gap junctional communication (GJIC). Upon transfection of the E-cadherin gene, these cells (P3/E1) started to communicate in a calcium-dependent manner (Jongen et al., J. Cell biol., 114, 545-555, 1991). We studied how E-cadherin restores the connexins function. At low calcium, Cx43 molecules remain in the cytoplasm of P3/E1 cells and appear at cell-cell contact area only at high calcium. While Cx43 is unphosphorylated in P3/E1 cells at low calcium medium, two phosphorylated bands appeared at high calcium. However, when Cx26, which has no phosphorylable C-terminal tail, was expressed in P3/22 cells, these connexins also moved to the plasma membrane after the calcium shift and partly colocalized with Cx43, suggesting that C-terminal phosphorylation may not be essential for E-cadherin-mediated recovery of GJIC nor for the intracellular trafficking of connexins. In low calcium, both Cx26 and Cx43 remained and colocalized in the endoplasmic reticulum as shown by double-staining with concanavalin A. The formation of E-cadherin junctions at high calcium was confirmed by immunostaining of E-cadherin and b-catenin. Cx43 and Cx26 are cumulated in the Golgi. The treatment by brefeldin A blocked the movement of Cx43 and Cx26 from ER to the cell membrane, suggesting that both connexins were transported through the Golgi. Recovery of GJIC and intracellular movement of connexins at high calcium were associated with increased formation of actin filaments and microtubules, and were effectively blocked by cytochalasin D, but not by nocodazole. These results, taken together with others, suggest that E-cadherin junction formation at high calcium lead to formation of actin cables which directly or indirectly transport connexins from cytoplasm to the cell-cell contact membranes, where GJIC is restored.
Auxílio: Fapesp, bolsa de Pós-Doutorado 1998/10397-3

O projeto consistiu na reunião de projetos de pesquisa desenvolvidos no Departamento de Ciências Básicas da FZEA para aquisição de equipamentos laboratoriais multiusuários para apoio às pesquisas em desenvolvimento.
Auxílio: Projeto de Infra-Estrutura da Fapesp, Equipamentos Multi-usuários, processo 1996/9428-6, valor de US 136.840,00

Aflatoxin is a potent hepatic carcinogen when ingested by rainbow trout, but less is known about its action in tropical fishes. The long-term hepatic effect of aflatoxin B1 given in food for one year at several levels (80 mg/kg, 160 mg/kg, 240 mg/kg, 320 mg/kg and 400 mg/kg) was studied in, a freshwater fish. The fish were very resistant to aflatoxin B1 and showed no histological lesions. However, a large number of apoptotic cells and other signs of cell injury were observed both histologically and ultrastructurally. There were no neoplastic or preneoplastic in the liver parenchyma. These results suggest that apoptosis may be an important mechanism for eliminating the cells damaged by aflatoxin B1 in this animal model. 
Auxílio: Fapesp processo 1997/10562 valor US 10.980,00

A fim de se determinar os efeitos causados por diferentes teores de fibra em detergente neutro (FDN), sobre o crescimento e morfo-histologia intestinal de suínos, digestibilidade dos componentes fibra dietética, produção e proporção de ácidos graxos voláteis do intestino grosso, bem como os principais parâmetros de carcaça, serão oferecidas rações isoenergéticas e isoprotéicas, contendo incrementos de 0 e 8 % de FDN, obtido através da inclusão de 0 e 10 % de feno de tifton, a suínos nas fases de recria, crescimento e terminação. Os animais por ocasião do início do período experimental (fase de recria), deverão apresentar cerca de 11,0 kg de peso corporal. O final do período experimental (fase de terminação) será determinado quando os animais apresentarem 95 kg de peso vivo. A alimentação (água e ração experimental) será oferecida à vontade, em bebedouro tipo chupeta e comedouro semi-automático. Após o abate, os órgãos viscerais (duodeno, jejuno, íleo, ceco, colo, fígado e pâncreas) serão pesados e devidamente segmentados, para obtenção de amostras epiteliais. Serão analisados dados referentes ao peso dos órgãos viscerais; altura das vilosidades epiteliais do duodeno, jejuno e íleo; profundidade das críptas do duodeno, jejuno, íleo, ceco e colo, além da produção de muco das críptas do ceco e colo. Serão utilizados 26 animais, distribuídos em dois tratamentos, em experimento inteiramente casualizados.
Auxílio: Fapesp processo 1995/3789-4, valor US 9.310,00
Bolsa de iniciação científica FAPESP n. 96/02275-0, Marcos Antonio Gomes

O presente projeto visou estudar a capacidade hepática de responder a agressões (fio de sutura "catgut") e a parasitas mortos para verificar se a imunossupresão observada é decorrente de produtos secretados pelo parasito ou induzida pelo peixe e pesquisar eventuais alterações morfológicas (relação parênquima/estroma) no fígado de peixes antárticos após ablação de um lóbulo do mesmo.
O material foi fixado e analisado ao microscópio óptico sob diferentes técnicas de coloração, assim como ultra-estruturalmente sob microscopia eletrônica de transmissão.
Auxílio: processo 48.0717/96-6 Recebeu U$ 35.615,00 de auxílio do CNPQ

O presente projeto visa estudar a capacidade hepática de responder a agressões (fio de sutura "catgut") e a parasitas mortos para verificar se a imunossupresão observada é decorrente de produtos secretados pelo parasito ou induzida pelo peixe e pesquisar eventuais alterações morfológicas (relação parênquima/estroma) no fígado de peixes antárticos após ablação de um lóbulo do mesmo. O material será fixado e analisado à nível microscópico sob diferentes técnicas de coloração para microscopiá óptica, assim como ultra-estruturalmente sob microscopia eletrônica de transmissão.
Auxílio:CNPq processo 48.1315-95-0 no valor de US 14.398,00 
e FAPESP 1996/9429-2 US 34.650,00

A absorção de macromoléculas protéicas em teleósteos é um processo diferente do que ocorre em mamíferos, devido à existência de um segmento intestinal especializado na captação de proteínas por pinocitose. Neste etudo abordamos alguns aspectos morfofuncionais da absorção de ferritina e hemoglobina no segmento médio do intestino de curimbatá (Prochilodus scrofa). As moléculas ingeridas se localizam na região supranuclear dos enterócitos. Ao microscópio eletrônico, observou-se que estas moléculas situam-se em lisossomos e nos vacúolos digestivos dos macrófagos intraepiteliais, aumentando com o tempo de observação. Estes vacúolos foram positivos para enzimas lisossomais, como a fosfatase ácida.
Auxílio: FAPESP, processo 94/0069-8, valor US 16.800,00