Ricardo Ambrosio Fock.

A célula-tronco (CT) é caracterizada como uma célula não especializada com capacidade de autorrenovação e diferenciação, o que possibilita a formação de vários tipos teciduais a partir de estímulos externos. Entre os diversos tipos de CT, existe uma célula tronco denominada célula-tronco mesenquimal (CTM), também conhecida como célula estromal mesenquimal multipotente. Esta célula clonogênica, inicialmente isolada da medula óssea, possui a capacidade de formar o estroma medular. Adicionalmente, a CTM desempenha um papel crucial na manutenção do microambiente hematopoético, regulando outras células através da produção de citocinas e fatores de crescimento, sendo capaz de modular a hematopoese. Diversas doenças malignas, entre elas as hematológicas, utilizam a radiação ionizante como ferramenta terapêutica para destruir ou impedir o crescimento das células malignas, sendo que seu uso pode ser feito como tratamento neoadjuvante (antes de intervenções cirúrgicas ou quimioterápicas) ou como tratamento adjuvante (após cirurgia ou quimioterapia). Os efeitos diretos das radiações ionizantes são bem compreendidos na literatura; contudo, os impactos sobre as CTMs medulares são pouco explorados. Os efeitos diretos das radiações ionizantes são bem compreendidos na literatura, porém pouco explorados sobre as CTMs medulares, representando uma lacuna crítica no conhecimento. Se por um lado, os efeitos diretos da radiação nas CTMs são pouco conhecidos; por outro, os efeitos da radiação nas células adjacentes às células-alvo, chamado "efeito bystander" ou "efeito espectador", ainda constituem um campo totalmente desconhecido. Assim o efeito bystander causado pela radiação; em biologia, refere-se a um fenômeno em que células não irradiadas exibem efeitos de exposição à radiação devido a sinais recebidos de células irradiadas próximas e este efeito desafia o entendimento tradicional de que apenas células irradiadas diretamente são afetadas pela radiação, o que tem implicações significativas para a Radiobiologia. Diante do exposto, e com base em dados da literatura que contextualizam as CTMs como importantes células para a formação do microambiente medular e consequentemente com capacidade de modular a sobrevivência, proliferação e o desenvolvimento das células hematopoéticas em todos os seus níveis de diferenciação, este projeto tem como objetivo avaliar a influência direta da radiação nas CTMs, bem como o efeito bystander no controle da hematopoese. Para tal, propõe-se a realização de múltiplos experimentos celulares, tanto in vitro como in vivo, com o objetivo de avaliar e demonstrar a possível mecanística envolvida nesses processos.

A hematopoese ocorre na medula óssea (MO) em regiões chamadas de microambientes, que modulam os processos de diferenciação, proliferação e auto-renovação da célula tronco hematopoética (CTH). Nos últimos anos a literatura tem chamado atenção para o papel das células que compreendem e formam esses microambientes com destaque para a célula estromal mesenquimal. Adicionalmente, pessoas com idade mais avançada normalmente sofrem de algum grau de carência nutricional, sendo a mais comum a carência proteica e o envelhecimento e a desnutrição proteica estão diretamente relacionados ao comprometimento da hematopoese. Diante do exposto, e baseado em dados prévios que comprovam que o envelhecimento e a desnutrição proteica comprometem a hematopoese, e que microambiente medular apresenta distintos moduladores que atuam sinergicamente para influenciar a sobrevivência, proliferação e o desenvolvimento das células hematopoéticas em todos os seus níveis de diferenciação, esse projeto tem como objetivo desvendar alguns aspectos regulatórios da hematopoese, priorizando o estudo dos mecanismos envolvidos na participação das células estromais mesenquimais e avaliar aspectos da complexa regulação estromal sobre a hematopoese.

Introdução: A inflamação é um fator presente na fisiopatologia de doenças agudas e crônicas, e, o intestino, órgão susceptível a disfunções e à disbiose, que está em constante exposição a microrganismos, pode estar associado a este processo. Por outro lado, aminoácidos de cadeia ramificada (ACR) podem apresentar efeitos anti-inflamatórios e antioxidantes em linhagem celular intestinal. Objetivos: Investigar os efeitos in vitro dos ACR na modulação da resposta inflamatória induzida por lipopolissacarídeo (LPS) em modelo de células intestinais Caco-2. Métodos: As células Caco-2 serão cultivadas e armazenadas em garrafas e placas de expressão (n = 6) até atingirem a confluência de 80%. As culturas de células serão distribuídas em seis grupos, sendo: dois grupos controle - controle com meio Dulbecco's Modified Eagle's Medium sem ACR (DMEM-0) e com ACR (DMEM-P) -, grupo leucina (LEU), grupo isoleucina (ISO), grupo valina (VAL) e associação de ACR (LIV). Será adotado um protocolo de pré-tratamento (PT), com os ACR e o LPS. A dosagem de citocinas inflamatórias (IL-1beta, IL-6, IL-8, IL-10 e TNF-alfa) será realizada por meio do método de ELISA. A análise de proteínas (mTOR, AKT, AMPK, NF-5B, TAK-1, IKK-beta, JNK e IkB-alfa) será feita por Western Blotting. Serão avaliados componentes do sistema antioxidante relacionado à glutationa (GSH, GSSH, GPx) por meio de kit comercial. Para as análises estatísticas, será realizada a análise de variância one-way, seguida do teste post hoc de Tukey. Os resultados serão apresentados na forma de média ± desvio padrão e será considerado p < 0,05. Resultados esperados: Espera-se compreender os potenciais mecanismos de ação de ACR - de forma isolada e associados entre si - no que concerne à modulação da resposta inflamatória induzida por LPS. Acredita-se que estes aminoácidos modularão proteínas da via inflamatória por meio de modelo experimental em células Caco-2.

Responsável pelo projeto de pesquisa com aplicabilidade e em Cooperação com a Siemens Healthcare Diagnóstico. Termo de Cooperação firmado em 2021.

A hematopoese ocorre na medula óssea (MO) em regiões chamadas de microambientes, que modulam os processos de diferenciação, proliferação e auto-renovação da célula tronco hematopoética (CTH). Nos últimos anos a literatura tem chamado atenção para o papel das células endoteliais medulares em possuírem capacidade de modular e sustentar a hematopoese, associado às células endoteliais, também se destaca o papel das células tronco mesenquimais na formação desses microambientes indutiveis, sendo que ambas possuem atuação, quer seja por contato direto ou mesmo pela síntese de mediadores capazes de modular as células hematopoéticas. Diante do exposto, e baseado em dados prévios que comprovam que desnutrição proteica compromete a hematopoese desencadeando um quadro de hipoplasia medular com comprometimento da produção e maturação das células hematopoéticas, principalmente da linhagem granulocítica, esse projeto tem como objetivo desvendar alguns aspectos regulatórios da hematopoese comprometidos na desnutrição proteica, priorizando o estudo dos mecanismos envolvidos na participação das células endoteliais, bem como sua a mediação via fator de crescimento granulocítico sobre a regulação da hematopoese.

Increase in life expectancy has been associated with high risk of development of age-associated diseases. Anemia and endothelial dysfunction are a common finding in the elderly and can lead to serious conditions such as heart failure. The causes of anemia in the elderly are multifactorial and commonly associate to micronutrient and/or macronutrient insufficiency. Endothelial cells play important function in the control of the hematopoiesis process, providing essential regulatory signals for maintenance, proliferation and differentiation of blood cells throughout life. For a long time stem cells have been considered self-renewing and therefore exempt from the adverse effects of the aging process. However, this assumption is currently found unacceptable. Although there is an intrinsic limit to the number of divisions that mammalian somatic cells can undergo, new data strongly suggest that even the most primitive stem cell exhibit a certain degree of aging. Little is known regarding the mechanisms that drive age-associated hematopoietic dysfunction. The bone marrow microenvironment has been shown to be essential for maintenance of the hematopoietic niche and cellular function. Any alterations in this microenvironment such as inflammation and malnutrition can have an impact and limit hematopoietic function directly or indirectly. Accordingly, this proposal aims to address important questions related to hematopoietic dysfunction and investigate novel mechanisms involved in the control of vascular aging and its contribution to hematopoietic homeostasis.

A desnutrição é considerada uma doença responsável por 55 das mortes infantis em todo o mundo, principalmente em crianças com menos de cinco anos de idade. A FAO (Food and Agriculture Organization) relata que em 2012 havia cerca de 86 milhões de pessoas desnutridas no mundo e que a desnutrição protéico (DP) é a mais comum. Sabe-se que o DP provoca alterações hematológicas tais como anemia e alterações histológicas medulares e na matriz extracelular, afetando o microambiente da medula óssea e comprometendo a produção e funções de células polimorfonucleares. O microambiente da medula óssea desempenha um papel essencial na produção de vários moduladores hematopoietics; tais como fatores de crescimento, citocinas, que são capazes de modular a proliferação, diferenciação, adesão e migração de células hematopoiéticas. A leptina é uma proteína, conhecida como hormônio da saciedade, no entanto estudos anteriores relatam efeitos biológicos importantes na modulação da hematopoese. Assim, os estudos relacionados com fragmentos peptídicos bioativo da leptina têm sido de grande importância, uma vez que são mais fáceis de produzir e com baixo custo. Estudos anteriores com o fragmento LEP5 Ac- [Ser117] -hLEP116-140-NH2 foi demonstrado a sua bioatividade, induzindo o aumento da quantidade de células hematopoiéticas em modelos murínicos. Sabendo-se que o sistema hematopoiético de animais desnutridos são comprometidos e o fragmento LEP5 exibe algumas atividades biológicas no sistema hematopoiético, temos a intenção de estudar os efeitos tóxicos, in vivo, deste fragmento e como este fragmento pode modular o sistema de hematopoiético, avaliando os mecanismos envolvidos nesta regulação.

A desnutrição protéico-energética é um dos principais problemas alimentares do mundo. Dados do nosso laboratório e de outros autores evidenciam que entre as alterações presentes na DPE, está a alteração do tecido hemopoético, com modificações em componentes da matriz extracelular, alterações no ciclo celular da célula tronco/progenitora hemopoética, redução da produção de células e precursores hemopoéticos, tanto na série eritrocitária, como na série leucocitária, levando a anemia e leucopenia.As leucopenias podem levar a quadros de infecção e indivíduos desnutridos apresentam aumento da suscetibilidade a infecções A desnutrição protéica modifica tanto a resposta imune específica como a inespecífica do individuo. Já demonstramos, em modelo murino de desnutrição protéica, alterações histológicas da medula óssea com hipoplasia medular, alterações na matriz extracelular e alterações no ciclo da célula-tronco hemopoética que permanecem em maior número na fase G0 do ciclo celular em animais desnutridos. Diante destes eventos, nossa hipótese é de que, ao menos em nosso modelo experimental, as alterações na proliferação, diferenciação e maturação, observadas, podem ser decorrentes da alteração do microambiente indutor da hemopoese, comprometendo os processos de sinalização celular e a fisiologia das células tronco/progenitoras. Assim, nos propomos, nesse trabalho, avaliar a cinética, do estabelecimento dos componentes do estroma da medula óssea e a participação do cálcio na regulação desse processo enfatizando: a identificação dos tipos celulares, avaliação do estabelecimento do estroma e das áreas de &quot;cobblestone&quot;, detecção da produção de citocinas e fatores de crescimento (IL-3, IL-6, IL-7, IL-9, IL-11, SCF, GM-CSF, G-CSF) no sobrenadante das culturas, (IV) avaliação das relações célula-célula e célula-matriz e extracelular (MEC), avaliação da participação do cálcio intracelular, nas células estromais e na célula tronco hemopoética.

Accidental and occupational exposure to ionizing radiation (IR) can induces cellular damage in many living organisms at sub-lethal doses. The energy deposited on the cells leads to the breakage of chemical bonds, damaging both basic structures and the DNA, resulting in a range of lesions in which DNA double strand breaks (DSB) have a pivotal role in determining whether cells survive radiation exposure. Cells possess several mechanisms to repair the damaged DNA, but once it is not correctly repaired or even unrepaired, chromosomal aberrations, loss of genetic material and cell death can occur as a direct effect. One consequence of chromosomal aberrations is the formation of micronuclei (MN), once chromosomes did not attach properly to the spindle during the segregation process in anaphase. Mammalian cells possess mechanisms for DSB repair and prevention of chromosomal rearrangements that involves a range of molecules, such as histone H2AX. Its activation is one of the earliest events in cells following exposure to DNA damaging agents. Phosphorylation of H2AX occurs in the chromatin surrounding a DSB site such that hundreds to of ³-H2AX molecules surround one DSB to form a focus which may function both to open the chromatin structure and to serve as a platform for the accumulation of many factors involved in the DNA damage response. DNA damage induction is not an exclusive feature of the irradiated cells. Cells surrounding those that were directly exposed to IR can exhibit a similar behavior: they die or show chromosomal instability and other abnormalities. This phenomenon is called bystander effect. Studies in vitro point to 2 main pathways involved in radiation-induced bystander effects (RIBE): gap junction communications and soluble factors secreted by the cells. In vivo, these indirect responses of the cells to IR are referred to as abscopal effect, in which the immune system seems to play a key role in promoting tumour cell killing or its regression, while genomic instability, cell death and oncogenic transformation of normal tissue also occurs as an off-target effect, which remains an issue to be solved. A deeper knowledge of the mechanisms involved in RIBE may allow the development of suitable strategies to enhance tumour cell killing and / or protect normal tissue cells from the damaging consequences of IR exposure. Regarding this issue, this work aims to evaluate the DNA damage related to the RIBE in normal mesenchymal stem cells (MSC), using the following strategies: analysis of the formation of MN and quantification of ³-H2AX molecules. C3H10T1/2 immortalized lineage of MSC from mouse embryos will be used. For the bystander system, MSC will be cultured in transwell inserts (1 ¼m) and transferred to the wells containing irradiated MSC immediately after irradiation. The irradiation will be performed in a conventional, broad-field 250 kVp X-ray machine in a dose rate of 300cGy/min, at single doses ranging from 0.5 to 6 Gy. Chromosome damage will be evaluated using the standard cytokinesis-block MN technique using cytochalasin-B; at least 500 binucleated cells in 10 view fields were examined under a fluorescence microscope. Thus, MN will be evaluated by flow cytometry using a commercial kit (In Vitro MicroFlow®); validation of this technique for MSC is advantageous, once FACS-based approach allows the simultaneously collection of multiple parameters, giving clues about the genotoxic mode of action (clastogenicity or aneugenicity). DNA damage will be also evaluated by flow cytometry, given by the geometric mean of fluorescence intensity of ³ -H2AX. Altogether these assays significantly contribute to address RIBE on MSC due their specificity in the analysis of DNA damage.

Dietary restriction modify the innate and adaptive immune response, exerting effects on inflammatory and regulatory cytokine production also modifying the expression of genes directly involved in immune response. Macrophages and lymphocytes play key roles in innate and specific immune response and have high utilization rate of the amino acid glutamine, which is essential for energy and nitrogen supply. In addition, activation of macrophages and lymphocytes in vitro increases the transcription process and secretion of proteins, such as pro-inflammatory cytokines, allowing modulation of immune and inflammatory responses. This type of activation leads to an increased synthesis of messenger RNA, glutamine has an important role on this process, because this amino acid acts as a precursor of nitrogenous bases. In this context, it appears that the glutamine metabolism in macrophages and lymphocytes is essential for the cytokines synthesis and it is dependent on the extracellular concentration of glutamine. Cytokines, fall into two broad classes: pro-inflammatory and anti-inflammatory. In the classic immune response, the two antagonize one another in a carefully orchestrated manner in order to precisely regulate the vigor and duration of the immune response. Cytokines such as IL-10 develop regulatory roles controlling the production of pro inflammatory cytokines. It is produced by macrophages and lymphocytes, the deficiency of the IL-10 receptor can lead to a markedly proinflamatory cytokine production disrupting the inflammatory process. Thus, considering the modulatory effects of glutamine, and the effects exerted by dietary restriction on the immunity system, leading to higher synthesis of regulatory cytokines, we proposed in this project, addressing some complex aspects of immune regulation of the NF-kB family transcription factors, and the influence of glutamine supplementation modulating these processes in IL-10 knock-out mice subjected to dietary restriction.

A desnutrição protéica e a obesidade são dois importantes problemas nutricionais e de saúde pública no mundo todo na atualidade, afetando bilhões de pessoas. A transição nutricional que vem ocorrendo nas últimas décadas, está mudando o perfil nutricional levando ao aumento da porcentagem de indivíduos obesos. A resposta imune é influenciada pela dieta, sofrendo alterações significativas tanto em desnutrição quanto na obesidade. Em estudos recentes de nosso grupo, observa-se uma semelhança na resposta imune do animal desnutrido em relação ao obeso, como queda dos leucócitos circulantes e na medula óssea. Observamos também a redução de macrófagos no foco inflamatório. A redução de macrófagos pode acarretar comprometimento na imunidade inata e adaptativa, como diminuição de produção de citocinas e espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, além de prejudicar a apresentação do antígeno. Este estudo compara diversos parâmetros nutricionais, bioquímicos, hematológicos e imunológicos em condições de desnutrição e de obesidade em modelo murino, avaliando as semelhanças e diferenças que podem surgir com a ingestão alterada de proteínas e lipídios.

As bactérias anaeróbias Porphyromonas gingivalis (Pg) e Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) estão envolvidas no desenvolvimento de condições infecciosas incluindo periodontites e abscessos. A destruição destas bactérias depende da ativação, migração e ação efetora de células da imunidade inata e adaptativa. Nesse contexto, os neutrófilos são particularmente importantes. Uma vez no tecido infectado, essas células atuam por diferentes mecanismos como a produção de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, liberação de proteases e enzimas quelantes, fagocitose, recrutamento e ativação de outros leucócitos com o intuito de destruir os microrganismos invasores. Por outro lado, as bactérias apresentam mecanismos que dificultam sua eliminação pelo sistema imune como proteases, cápsula polissacarídea, hemaglutininas e lipopolissacarídeos. No caso das bactérias Pg e Aa, produtos de seu metabolismo como os ácidos graxos de cadeia curta (AGCCs: acetato, propionato e butirato), os quais sabidamente modulam a ativação e função efetora de leucócitos, podem alterar a resposta do organismo as mesmas. O presente projeto investigará o envolvimento dos AGCCs e seu receptor (GPR43) na resposta à bactérias anaeróbias Pg e Aa in vivo e in vitro e as vias intracelulares envolvidas. Para tanto realizaremos experimentos com neutrófilos e macrófagos isolados da medula óssea e incubados com as bactérias e os AGCCs. Analisaremos ainda, a resposta imune in vivo em modelo de doença periodontal e em câmara subcutânea. Nossa hipótese é que esses ácidos graxos produzidos no contexto da infecção por anaeróbios modificam a ação das células imunes e o resultado final do processo infeccioso.

Considerando-se que a desnutrição protéica promove alterações do estroma medular com comprometimento do nicho endosteal e alterações da hemopoese com diminuição do número de CTH, pretendemos neste trabalho avaliar o papel da sinalização osteoblasto-CTH em camundongos desnutridos.

A desnutrição ainda é um dos principais problemas de saúde publica mundial acometendo países desenvolvidos mas, principalmente, os países em desenvolvimento, crianças e idosos. A desnutrição pode causar diversas alterações fisiológicas e estas dependem da causa da desnutrição, idade e sexo do individuo. Alguns trabalhos demonstram que a desnutrição pode causar alterações da matriz extracelular (MEC) que compõe o estroma medular. Nosso grupo demonstrou que animais desnutridos apresentam hipoplasia medular, redução de células Tronco/Progenitoras e alterações na MEC com aumento de laminina, trombospondina e fibronectina. Também demonstramos a presença de diferentes isoformas de fibronectina (dados ainda não publicados). As alterações encontradas na MEC podem ser devida ao processo de remodelamento, que compreende a síntese e a degradação da MEC. A MEC dos tecidos é degradada e sintetizada por um processo denominado de remodelamento, processo esse fisiológico, que ocorre durante o desenvolvimento, manutenção do tecido normal, reparação tecidual e em alguns processos patológicos tais como arteriosclerose. Ao longo da reparação tecidual a deposição da MEC promove a integridade do tecido e sua funcionalidade, sendo que uma deposição inapropriada ou excessiva leva a um comprometimento da função do órgão. As metaloproteinases de matriz (MMPs) são enzimas zinco dependentes associadas à degradação e AO &quot;turnover&quot; das proteínas que compõem a MEC, tendo assim um importante papel no remodelamento DA MESMA. Alguns trabalhos da literatura já observaram a presença de MMPs no estroma medular e que o equilíbrio entre as MMPs e seus inibidores é fundamental para a integridade da MEC, participando assim da manutenção da hemopoese. A AKT (serine-threonine Kinase) participa de diversas funções celulares, tais como; crescimento, proliferação, migração.

O aumento da adiposidade corpórea pode gerar diversos mediadores inflamatórios com capacidade de influenciar a proliferação e a diferenciação hematopoética e, consequentemente, a complexa regulação da hematopoese. Por isso, propusemo-nos, neste trabalho, avaliar alguns aspectos relacionados ao controle da hematopoese em um modelo de obesidade.

As bactérias anaeróbias Porphyromonas gingivalis (Pg) e Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) estão envolvidas no desenvolvimento de condições infecciosas incluindo periodontites e abscessos. A destruição destas bactérias depende da ativação, migração e ação efetora de células da imunidade inata e adaptativa. Nesse contexto, os neutrófilos são particularmente importantes. Uma vez no tecido infectado, essas células atuam por diferentes mecanismos como a produção de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, liberação de proteases e enzimas quelantes, fagocitose, recrutamento e ativação de outros leucócitos com o intuito de destruir os microrganismos invasores. Por outro lado, as bactérias apresentam mecanismos que dificultam sua eliminação pelo sistema imune como proteases, cápsula polissacarídea, hemaglutininas e lipopolissacarídeos. No caso das bactérias Pg e Aa, produtos de seu metabolismo como os ácidos graxos de cadeia curta (AGCCs: acetato, propionato e butirato), os quais sabidamente modulam a ativação e função efetora de leucócitos, podem alterar a resposta do organismo as mesmas. O presente projeto investigará o envolvimento dos AGCCs e seu receptor (GPR43) na resposta à bactérias anaeróbias Pg e Aa in vivo e in vitro e as vias intracelulares envolvidas. Para tanto realizaremos experimentos com neutrófilos e macrófagos isolados da medula óssea e incubados com as bactérias e os AGCCs. Analisaremos ainda, a resposta imune in vivo em modelo de doença periodontal e em câmara subcutânea. Nossa hipótese é que esses ácidos graxos produzidos no contexto da infecção por anaeróbios modificam a ação das células imunes e o resultado final do processo infeccioso.

bendo-se que animais desnutridos apresentam hipoplasia severa de órgãos linfo-hemopoéticos, com comprometimento na resposta imune, alterações funcionais em macrófagos e de linfócitos, com menor síntese de citocinas pró-inflamtórias propõe-se neste projeto, abordar alguns aspectos da complexa regulação imunológica e destacar as prováveis contribuições provenientes dos novos conhecimentos envolvidos na resposta imune em situações de desnutrição protéico

Os mecanismos moleculares de ação da glutamina em macrófagos ativados, decorrente de processos infecciosos e inflamatórios, não estão elucidados. Uma vez que a ativação e translocação do fator de transcrição denominado fator nuclear-Kappa B (NF&#954;B) do citosol para o núcleo promove a transcrição de diversos genes, incluindo aqueles referentes às citocinas pró-inflamatórias ? TNF-&#945;, IL-1&#946; e IL-6 ?, e que animais desnutridos apresentam alterações funcionais em macrófagos, com menor síntese de citocinas pró-inflamatórias propõe-se neste projeto, abordar a complexa regulação do NF-kB e investigar a participação da glutamina na via de sinalização do NF-&#954;B em macrófagos peritoniais de camundongos desnutridos estimulados com LPS.

Sabendo-se que animais desnutridos apresentam hipoplasia severa de órgãos hematopoéticos e que microambiente medular apresenta distintos moduladores que atuam sinergicamente para influenciar a sobrevivência, proliferação e o desenvolvimento das células hematopoéticas em todos os seus níveis de diferenciação. Propõe-se neste projeto, avaliar alguns aspectos da complexa regulação estromal avaliando o comprometimento dos fatores de transcrição envolvidos no processo de diferenciação da célula tronco mesenquimal em um modelo de desnutrição protéico-energética.

A obesidade representa grave problema de saúde pública. Essa condição patológica esta associada a maiores taxas de morbidade e mortalidade, o que se explica pela sua associação com doenças crônicas como hipertensão arterial, dislipidemia, diabetes mellitus do tipo 2 (DM2) e certos tipos de câncer. A obesidade promove um quadro de inflamação crônica de baixa intensidade, o qual está envolvido na disfunção de órgãos observada nessa condição. Por outro lado, os ácidos graxos de cadeia curta (acetato, propionato e butirato), os quais são gerados durante processo de fermentação bacteriana de fibras no trato gastrointestinal, têm importantes efeitos antiinflamatórios e podem prevenir o desenvolvimento de obesidade e resistência a insulina. Neste projeto temos como objetivo investigar o efeito da suplementação com tributirina, pró-droga de butirato, sobre a ativação inflamatória e o desenvolvimento de resistência a insulina em modelo murino de obesidade. Para isso, camundongos C57BL/6 serão submetidos a dieta hiperlipídica e suplementados com tributirina pelo perídodo de 10 semanas. Após esse período, serão determinadas a resposta à insulina (metabolismo de glicose e sinalização ao hormônio), a produção de mediadores inflamatórios por macrófagos peritoneais e tecido adiposo branco e a ativação de vias inflamatórias em fígado, músculo esquelético e tecido adiposo branco. O presente projeto é importante não somente para a compreensão dos mecanismos envolvidos na fisiopatologia da resistência à insulina induzida pela administração prolongada de dieta hiperlipídica, mas também para investigação de possível intervenção preventiva e/ou terapêutica, uso de tributirina ou de compostos que geram grandes quantidades de butirato (fibras, por exemplo

Atualmente, a desnutrição é considerada um dos maiores problemas de saúde pública mundial. Em sua grande maioria, os indivíduos desnutridos encontram-se nos países em desenvolvimento: na Ásia e Pacífico, estima-se que 642 milhões de pessoas apresentem-se cronicamente desnutridos; na África Sub-Saariana, 265 milhões; na África do norte 42 milhões e na América Latina e Caribe, 53 milhões. Já nos países desenvolvidos, a desnutrição afeta, aproximadamente, 15 milhões de pessoas. Mundialmente, um sexto da população é considera desnutrida, ou seja, cerca de 1 bilhão de pessoas. A desnutrição acomete principalmente crianças, idosos e indivíduos hospitalizados sob alimentação parenteral ou que apresentam distúrbios alimentares. No Brasil, estima-se que mais de 13 milhões de pessoas apresentam algum tipo de desnutrição, das quais aproximadamente 60% encontram-se em áreas urbanas. Segundo a Organização Mundial da saúde, a fome é a maior ameaça à saúde pública mundial, sendo que em 2006, foram registrados 58% de mortalidade devido à desnutrição ao redor o mundo. A desnutrição protéica e protéico-energética (DPE) são as formas mais freqüentes de desnutrição. A DPE apresenta amplo espectro de sinais e sintomas que decorrem, não só da(s) causa(s) que induzem a desnutrição, mas também dos diferentes graus de carência de proteínas e, ou de calorias. A DPE acomete 50 a 90% dos pacientes hospitalizados de países desenvolvidos e subdesenvolvidos, respectivamente, alterando a resposta terapêutica, dificultando tratamentos clínicos e aumentando a morbidade e a mortalidade. Cerca de 60% das infecções que evoluem para sepse são adquiridas no ambiente hospitalar, envolvendo geralmente bactérias Gram negativas e incidindo especialmente em indivíduos com nutrição inadequada.

O microambiente medular é composto basicamente pelo sistema celular hematopoético e estromal, conjuntamente com a matriz extracelular a ele associada, e por substâncias solúveis, apresentando-se como uma estrutura compartimentalizada e dinâmica que, além de fornecer o parênquima de sustentação para as células hematopoéticas, permite um &quot;ambiente bioquímico&quot; fundamental para a proliferação, diferenciação e maturação das mesmas. O presente projeto visa estudar as células tronco mesenquimais com objetivo principal de compreender o mecanismo de formação de microambientes indutivos e o controle da hematopoese, e a influência da adipogênese medular nesse controle

Dados da literatura e do nosso grupo, evidenciam que a desnutrição compromete órgãos linfo-hemopoéticos e modifica a resposta imune. Nossos trabalhos demonstram alterações estruturais e ultra-estruturais da medula óssea., baço e timo; alterações funcionais como redução da migração celular, do espraiamento, fagocitose, atividade bactericida e fungicida bem como alterações na produção de espécies reativas do oxigênio, menor expressão de moléculas de adesão e nitrogênio. Nossos dados também revelam diminuição na síntese de citocinas pró-inflamatórias, TNF, IL-1 e IL-6. Os mecanismos que levam a este quadro ainda não estão totalmente esclarecidos. Nos últimos anos muitos esforços têm sido empregados para elucidar os mecanismos envolvidos na regulação da transcrição gênica. Moléculas que participam desses processos regulatórios, como os fatores de transcrição, têm recebido atenção especial, existindo evidências de que a sinalização intracelular das células envolvidas na resposta inflamatória fornece novas perspectivas para a compreensão dos mecanismos envolvidos nos processos inflamatórios e talvez para delinear novos caminhos terapêuticos. O fator de transcrição NFkB destaca-se pela sua vasta gama de ações e pelo fato de diversas proteínas estarem integradas na dinâmica de sua ativação. Vários fenômenos como a plasticidade, migração celular, aumento da taxa de renovação celular, aumento da síntese de enzimas, peptídeos, receptores, neurotrofinas, moléculas de adesão, entre outros, são caracterizados pela alteração na expressão de múltiplos genes.

O objetivo do projeto é estudar a fabricação de filmes poliméricos bioativos que ativem o crescimento de células de fibroblastos humanos. Pretende-se investigar a interação das proteínas angiogênicas, tanto as já conhecidas na literatura (FGFs), como aquelas extraídas do látex de seringueira, com filmes nanoestruturados de polímeros

Sabendo-se que animais desnutridos apresentam pancitopenia e atrofia medular, interessou-nos saber se os mesmos respondem a fatores de crescimento hemopoéticos, o que pode ser relevante em termos de terapia de seres humanos