Sabrina Francesca de Souza Lisboa.

A divulgação das atividades e descobertas científicas realizadas na academia para a sociedade tem se tornado cada vez mais fundamental, ainda mais em vista de tanta desinformação e fake News. Tal divulgação é importante não só com objetivo de instruir a população, de estimular o pensamento crítico e de mostrar onde são gastos os recursos públicos, mas também para destacar os avanços científicos e promover a valorização e importância da ciência para a sociedade. O laboratório de Neuropsicofarmacologia da Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (NPPLab) divulga diferentes conteúdos sobre Neuropsicofarmacologia, tanto relacionados ao laboratório quanto relacionados à assuntos de interesse geral e utilidade pública em Neuropsicofarmacologia, no Instagram

Este programa visa fornecer condições necessárias para aperfeiçoamento de profissional graduado necessário para a pesquisa em Psicofarmacologia, desde à execução até a análise. As habilidades que serão desenvolvidas envolvem o processamento de amostras obtidas após protocolos de estresse e avaliação comportamental.

Este programa visa desenvolver no pesquisador habilidades quanto ao processamento de amostras obtidas após protocolos de estresse e avaliação comportamental. Serão selecionadas amostras de experimentos já realizados. Estruturas encefálicas já obtidas serão processadas para análises proteicas, de DNA e de RNA. Encéfalos inteiros obtidos após os experimentos serão fatiados e processados para realização de técnicas de histologia.

Este trabalho correlaciona a prática educomunicativa e as atividades de confecção de uma edição do periódico Dor on line, uma ação de extensão universitária dedicada à divulgação científica na área do Estudo da Dor, em seu contexto tecnológico e organizacional, com estudantes de graduação e pós-graduação em Saúde e Farmacologia. O projeto mimetiza ações editoriais em um ambiente virtual de aprendizagem institucional e promove a integração dialógica e diminuir a distância transacional pelo emprego de tecnologias de aprendizagem, estabelecendo fluxos de trabalho operacionais para o desenvolvimento e elaboração de pautas editoriais de jornalismo científico na área da Saúde.

Dentre os mais de 200 fitocanabinoides presentes na planta Cannabis sativa, o que tem recebio maior atenção em relação ao potencial terapêutico é o canabidiol (CBD). O número de trabalhos científicos voltados a investigar este potencial vem aumentado de forma exponencial. Resultados obtidos nas últimas décadas sugerem que o CBD possa ser útil em um grande número de transtornos neuropsiquiátricos, incluindo a esquizofrenia, transtornos de humor e ansiedade, farmacodependência, autismo, epilepsia e doenças neurodegenerativas como Parkinson e Alzheimer. A contribuição do nosso grupo de pesquisa nesta investigação é significante e amplamente reconhecida na literatura mundial. Não obstante, diversos aspectos da farmacologia do CBD e moléculas semelhantes permanecem obscuros. O maior deles diz respeito ao mecanismo de ação. Trabalhos do nosso grupo foram pioneiros em demonstrar que o CBD atua, in vivo, por diversos mecanismos, que dependem, pelo menos em parte, da condição para a qual ele está sendo empregado. Como

Transtorno depressivo maior (TDM) afeta uma porção significativa da população mundial, sendo diagnosticado principalmente através de critérios estabelecidos pelo Manual Diagnóstico e Estatístico de Transtornos Mentais. Apesar da dor crônica não figurar entre os sintomas da depressão descritos pelo manual, estudos epidemiológicos indicam uma estreita associação entre transtorno depressivo e dor crônica. O modelo de estresse por derrota social está sendo utilizado atualmente para induzir comportamentos do tipo depressivo e hiperalgesia persistente em camundongos. Nesse modelo, camundongos são expostos por 10 dias consecutivos a um camundongo agressor de linhagem fisicamente mais robusta, sofrendo breves períodos de agressão corporal seguidos de períodos mais longos de contato visual e olfativo. Foi demonstrado, inclusive, que a dor crônica induzida por esse modelo se assemelha à fibromialgia humana, condição caracterizada por dor crônica difusa e intimamente associada com depressão. Sabe-se que a experiência da dor, em toda a sua complexidade, envolve a percepção de uma série de fatores integrados pelo sistema nervoso central (SNC), principalmente pelo córtex cerebral. Este processo integrativo é extremamente dinâmico, sendo ajustado continuamente às demandas do dia-a-dia. Sabe-se que a dor se inicia a partir da ativação de nociceptores periféricos que enviam sinais neurais ascendentes para níveis superiores do SNC através de vias neurais específicas. Estas vias ascendentes são moduladas por uma série de vias supraespinhais descendentes, as quais servem como um sistema endógeno de analgesia ou de facilitação da dor. Uma importante estrutura encefálica associada com a modulação descendente da dor é o bulbo rostral ventromedial (RVM). O RVM possui um papel chave tanto no sistema facilitatório quanto inibitório da dor, recebendo projeções de diversas estruturas encefálicas como substância cinzenta periaquedutal, núcleo accumbens e córtex cingulado anterior. De forma não surpreendente, as estruturas neurais supracitadas também possuem relação com o comportamento depressivo. Dados obtidos durante o meu primeiro ano de pós-doutoramento demonstraram a participação do RVM na dor induzida pelo estresse social e, de forma interessante, nos comportamentos do tipo depressivos induzidos pelo estresse social. Estes dados incitaram novas perguntas e, a partir deles, o presente projeto foi idealizado. Sendo assim, esta proposta objetiva estudar a fundo a participação do RVM nas alterações comportamentais induzidas pelo estresse social. Para isto, a proposta será dividida em 4 projetos. Brevemente, o primeiro projeto irá investigar se um modelo de estresse social modificado para fêmeas é capaz de induzir hiperalgesia persistente e se o RVM irá interferir nas alterações comportamentais induzidas pelo estresse, assim como já demonstrado em machos. O segundo projeto irá analisar a influência das vias de projeção para o RVM nas alterações comportamentais induzidas pelo estresse social. O terceiro projeto propõe avaliar as alterações no transcriptoma do RVM e de suas projeções no contexto do estresse social. Por fim, o quarto projeto objetiva investigar a ativação do RVM no contexto do estresse social.

Atualmente, o tratamento farmacológico de primeira escolha para o tratamento de transtornos psiquiátricos, como ansiedade, depressão e transtorno de estresse pós-traumático, são os antidepressivos da classe dos inibidores da recaptação de serotonina. Porém, eles possuem uma baixa eficácia clínica e muitos indivíduos desistem do tratamento por causa dos efeitos colaterais. Por esse motivo, a pesquisa básica tem buscado um melhor entendimento de mecanismos encefálicos alterados em animais submetidos a situações de estresse, como alterações em mecanismos neuroimunológicos e no sistema endocanabinoide (ECB), a fim de encontrar possíveis novos alvos para o desenvolvimento de fármacos que poderiam representar um tratamento mais efetivo.
Nas últimas décadas, vários trabalhos têm apontando para uma íntima relação entre transtornos psiquiátricos e alterações do sistema imune, inclusive no encéfalo. Observa-se que pacientes com transtornos que envolvem exposição ao estresse apresentam sinais de ativação imune e inflamação, enquanto modelos animais de exposição ao estresse têm demonstrado esta mesma relação. A exposição ao estresse homotípico, mas não heterotípico, pode resultar em ativação persistente de células da micróglia e neuroinflamação, com indução, por exemplo, da expressão do receptor de imunidade inata do tipo toll 4 (TLR4) no córtex pré-frontal medial (CPFm). É desconhecido, entretanto, se as células da micróglia e os receptores TLR4 nestas células em estruturas encefálicas importantes para o controle da resposta ao estresse (particularmente o CPFm e o hipocampo) exercem papel-chave no desenvolvimento das consequências comportamentais relacionadas à ansiedade induzidas por estresse. Em situações de estresse há também ativação do sistema ECB, a fim de limitar as consequências do estresse, inclusive ativação de mecanismos neuroimunes e disfunção em mecanismos de plasticidade sináptica. A ausência de ECBs poderia, portanto, facilitar mecanismos neuroimunes via TLR4, enquanto a inibição da via do TLR4 poderia facilitar a sinalização ECB, favorecendo a recuperação do efeito do estresse. A hipótese deste projeto é testar se o estresse homotípico induzirá ativação das células da micróglia e, particularmente, ativação da via do TLR4 e disfunção do sistema ECB nestas células, contribuindo para o desenvolvimento das consequências comportamentais e plásticas do estresse. Ainda, testar se a inibição de TLR4 nas células da micróglia prevenirá os efeitos do estresse e se este possível efeito envolve receptores para ECBs.

O transtorno de estresse pós-traumático (PTSD) pode se desenvolver após exposição a traumas severos, resultando em sintomas debilitantes, como dificuldade em extinguir memórias aversivas. Apesar da severidade do PTSD, a farmacoterapia é limitada e ineficaz em muitos pacientes, o que torna necessária a identificação dos mecanismos alterados pelo trauma que poderiam servir como biomarcadores e indicar novos alvos terapêuticos a serem explorados. Os sistemas neuroimune e endocanabinoide (ECB) se encontram alterados em resposta ao trauma em humanos e em animais. Há evidências de interações entre estes sistemas na modulação das respostas ao estresse, como ativação de células da micróglia e alterações na plasticidade sináptica, podendo resultar em disfunção sináptica. Uma das alterações da micróglia que poderia contribuir para estes efeitos é a ativação do inflamassoma de NLRP3. Mecanismos epigenéticos podem regular a expressão de mediadores destes sistemas, contribuindo para o desenvolvimento das consequências comportamentais da exposição ao trauma. Este projeto tem como objetivo investigar se a exposição ao trauma promoveria níveis elevados de ECBs e ativação do inflamassoma de NLRP3 na micróglia, com consequentes prejuízos para a plasticidade sináptica e consequências comportamentais. Pretende-se, ainda, investigar se haveria envolvimento de mecanismos epigenéticos nestes efeitos. Para tanto, esses mecanismos serão investigados por meio de abordagens in vitro e in vivo (em animais ingênuos ou submetidos a um trauma), incluindo modulação farmacológica do sistema ECB e de mecanismos epigenéticos, animais geneticamente modificados e técnicas de biologia molecular de ponta. Os resultados deste estudo poderão contribuir para a compreensão da neurobiologia do PTSD e, potencialmente, identificar biomarcadores (induzidos pelo estresse) e indicar alternativas terapêuticas para indivíduos com PTSD resistentes ao tratamento convencional.

Estudos para entender os efeitos e mecanismos do canabidiol na depressão, usando modelos animais de depressão e depressão resistente ao tratamento com antidepressivos convencionais.

Nos últimos 15 anos nosso grupo tem contribuído para a elucidação do papel do óxido
nítrico (NO) e endocanabinóides (eCBs) em funções e disfunções do sistema nervoso
central. Mostramos que a manipulação destes neurotransmissores atípicos modifica
respostas comportamentais e autonômicas em modelos animais de ansiedade, depressão, psicoses e transtornos motores. Além disso, também verificamos que um fitocanabinóide,
o canabidiol (CBD), que entre outros efeitos pode modificar a neurotransmissão mediada
por eCBs, também é capaz de alterar estas respostas tanto em animais de laboratório
como em humanos. O objetivo primário do presente projeto, além de dar continuidade a
esta linha de pesquisa, abordando questões ainda não respondidas sobre os efeitos
comportamentais de canabinóides e NO (por exemplo, locais de ação e efeitos ainda não
explorados, presença de possíveis efeitos antiagressivos e antiparkinsonianos do CBD,
etc.), é procurar elucidar mecanismos celulares (alterações neuroplásticas e
imunológicas) e moleculares (vias de sinalização) responsáveis por estes efeitos. Para
isso empregaremos uma abordagem ampla, integrando técnicas comportamentais e de
registro autonômico com medidas de expressão gênica, atividade neuronial em grupos
específicos, alterações epigenéticas e silenciamento gênico. Como resultado, além de
ampliar nosso conhecimento sobre estes sistemas (NO e eCBs) e os mecanismos de ação do CBD, iremos incorporar abordagens metodológicas novas e importantes ao grupo bem como possibilitar a formação de recursos humanos nas áreas de Neurociência e
Farmacologia.

Avaliar o comportamento de animais deficientes para diferentes mediadores e vias inflamatórias, como animais deficientes para genes de diferentes citocinas e outros mediadores inflamatórios, em modelos animais preditivos de drogas ansiolíticas, antidepressivas e antiagressivas. Além disso, será avaliada a responsividade a fármacos utilizados clinicamente para tratar tais transtornos.

O estresse é um fator de risco para o desenvolvimento de transtornos afetivos como ansiedade e depressão. A resposta do organismo ao estresse leva a alterações neuroquímicas e comportamentais que podem estar associadas à produção excessiva tanto de espécies reativas de oxigênio (EROs), responsáveis estresse oxidativo, quanto de nitrogênio (ERNs), responsáveis pelo estresse nitrosativo. Diversos modelos animais de estresse podem induzir o aumento de EROs/ERNs ou promover alterações nas atividades de enzimas antioxidantes. Um deles é o modelo do estresse por restrição, um modelo de estresse agudo inescapável capaz de provocar alterações comportamentais, autonômicas, hormonais e danos neuronais em estruturas encefálicas como o córtex pré-frontal (CPF) e o hipocampo (HIP). Estas estruturas fazem parte do sistema límbico e estão envolvidas na modulação de respostas autonômicas e comportamentais durante situações de estresse. Vários estudos têm demonstrado que alterações bioquímicas e comportamentais induzidas pelo estresse por restrição podem estar associadas ao estresse oxidativo/nitrosativo. Assim, o encéfalo parece ser bastante suscetível às EROs/ERNs, visto que possui alto metabolismo oxidativo e baixas defesas antioxidantes. Além disso, o encéfalo possui grandes quantidades de ácidos graxos insaturados em suas membranas, que as tornam altamente suscetíveis à peroxidação lipídica causada por estas espécies reativas. Assim, neste projeto pretendemos investigar se o estresse por restrição pode influenciar o estado redox no CPF e HIP e propomos estudar os efeitos deste estresse nas respostas comportamentais e autonômicas (resposta emocional condicionada-REC) avaliadas posteriormente no modelo experimental de ansiedade e medo aprendido, o medo condicionado ao contexto (MCC). Os parâmetros oxidativos/nitrosativos serão avaliados após o estresse por restrição ou após o término da avaliação da REC por alterações nas atividades das enzimas superóxido dismutase e glutationa peroxidase, pela dosagem de nitritos e nitratos, por verificação de carbonilação proteica e peroxidação lipídica. O melhor entendimento destes mecanismos poderá possibilitar intervenções farmacológicas mais eficazes para os transtornos de estresse que as usadas atualmente. (AU)

Por quase um século o estudo dos mecanismos neurais e bioquímicos que tangem os diferentes processos da aprendizagem utilizam o condicionamento Pavloviano aversivo, o qual consiste na associação de um estímulo neutro (ex: som ou contexto) com um estímulo não-condicionado (ex: choque nas patas). Recentemente tem se observado um crescente interesse nos mecanismos envolvendo os processos de reconsolidação e extinção da memória aversiva, uma vez que terapias para o tratamento de desordens de ansiedade se baseiam nesses processos. Sólidas evidências demonstram que a porção ventral do córtex pré-frontal medial (vCPFM) está envolvida na modulação dos processos que envolvem a aprendizagem e a memória, principalmente nos processos de expressão e extinção da resposta emocional condicionada (REC). Aparentemente existe uma interação entre o glutamato, o óxido nítrico (NO) e os endocanabionóides no vCPFM. Essa interação parece ser importante para a expressão e extinção da REC em vários modelos, entretanto, o estudo dessa interação nas porções pré-límbica (PL) e infra-límbica (IL) do vCPFM nos processos de reconsolidação e extinção da memória contextual aversiva ainda não foram estudados. Para isso serão utilizados ratos Wistar que foram previamente submetidos ao implante de uma sonda de rádio-telemetria para registro da atividade autonômica e cânulas guias nas porções PL ou IL do vCPFM para administração de drogas. Será utilizado um protocolo de condicionamento ao contexto, seguido se sessões de reconsolidação ou extinção da memória aversiva. A administração de drogas que interferem na ação dos endocanabinóides ou na via glutamato-NO serão feitas antes das sessões de reconsolidação ou extinção. Finalmente, no dia do teste serão avaliados os efeitos da manipulação farmacológica sobre os processos de reconsolidação e extinção da memória contextual aversiva. (AU)

O hipocampo dorsal (HD) é uma estrutura do sistema límbico que está envolvida em processos emocionais, de memória e aprendizado. Além disso, essa estrutura também exerce influência sobre a atividade autonômica. Durante situações aversivas pode se observar tanto respostas autonômicas (aumento da pressão arterial, freqüência cardíaca e alterações da temperatura) quanto comportamentais. O HD está envolvido com diversas alterações associadas a reações defensivas e apresenta conexões com diversas estruturas que modulam essas respostas, fazendo parte de uma via responsável por modular as respostas associadas a situações aversivas. Em particular o HD esta envolvido com a modulação das respostas autonômicas observadas durante o medo condicionado ao contexto (MCC). Além disso, durante a exposição de ratos ao modelo do estresse por restrição (ER) ocorre um aumento da atividade dos neurônios do HD. Finalmente, é possível observar uma elevação nos níveis de glutamato no HD durante o MCC e durante ER. A ativação de receptores glutamatérgicos do tipo NMDA aumenta a atividade da isoforma neuronial da síntese de óxido nítrico (nNOS). Além disso, essa interação, NMDA/ óxido nítrico (NO), no HD parece ser importante nas reações defensivas. Finalmente, tem sido descrito que o sistema endocanabinoide presente no HD tem envolvimento com a modulação de respostas defensivas através de receptores CB1 e pode modular a liberação local de glutamato. Considerando que a ativação de receptores NMDA pelo glutamato é a principal via de ativação da nNOS, e conseqüente produção de NO, e que a ativação de receptores CB1 modula a liberação de glutamato no SNC, o presente projeto tem como objetivo testar a hipótese de que o sistema glutamatérgico presente no HD, atuando via receptores NMDA, e dependente da formação de NO, e sofrendo modulação de receptores CB1, modularia as respostas comportamentais e autonômicas geradas pelo MCC e o ER. Para tanto, investigaremos os efeitos da administração no H.

Descrição: O funcionamento anormal do CPFM tem sido associado a diversas psicopatologias incluindo o transtorno de estresse pós-traumático e transtornos de ansiedade. Além disso, o CPFM modula respostas aversivas em ratos submetidos a modelos animais sensíveis a drogas ansiolíticas. A porção ventral do CPFM (vCPFM) é responsável pela influência do CPFM sobre a atividade autonômica e comportamental observadas durante reações de defesa. Estudo explorando o bloqueio não seletivo da neurotransmissão no vCPFM resultou em respostas do tipo ansiolíticas quando testado no modelo do lamber punido de Vogel (LPV), um dos modelos de ansiedade mais utilizados. No entanto, nenhum estudo até o momento investigou quais neurotransmissores no vCPFM podem estar envolvidos com essas respostas neste modelo. Dentre os neurotransmissores presentes no vCPFM o glutamato é descrito como tendo uma função importante tanto em respostas autonômicas como comportamentais associadas com situações aversivas. Além disso, essa função do sistema glutamatérgico esta diretamente relacionada com o sistema nitrérgico via ativação da isoforma neuronial da enzima que sintetiza o óxido nítrico (nNOS). Finalmente, tem sido descrito que o sistema endocanabinoide presente no vCPFM tem envolvimento com a modulação de respostas defensivas através de receptores CB1 e pode modular a liberação local de glutamato. Considerando que a ativação de receptores NMDA pelo glutamato é a principal via de ativação da nNOS e conseqüente produção de NO, e que a ativação de receptores CB1 modula a liberação de glutamato, o presente projeto tem como objetivo testar a hipótese de que o sistema glutamatérgico presente no vCPFM, atuando via receptores NMDA, e dependente da formação de NO, modularia as respostas comportamentais e autonômicas geradas pelo modelo do LPV. Além disso, testar se a manipulação do sistema endocanabinoide no vCPFM poderia mimetizar os efeitos observados com o NO. Para tanto, investigaremos os efeitos da administração .

O estímulo de receptores CB1 (CB1) na substância cinzenta periaquedutal dorsolateral (SCPdl) leva a uma diminuição do comportamento de ansiedade em ratos submetidos ao labirinto em cruz elevado, enquanto a facilitação da transmissão nitrérgica nesse local leva à produção de comportamentos de fuga e de ansiedade. Nesta estrutura foram descritas tanto a enzima sintase do óxido nítrico na sua forma neuronial (nNOS) quanto receptores CB1. A interação entre os sistemas canabinóide e nitrérgico foi sugerida em outras regiões do sistema nervoso central, porém ainda é desconhecido se eles interagem na SCPdl. Nosso objetivo geral, portanto, é o de verificar a possível ocorrência desta interação na SCPdl na modulação de comportamentos defensivos. Para isso iremos testar as hipóteses de que: 1. o efeito antiaversivo induzido pela facilitação do sistema endocanabinóide na SCPdl de ratos expostos ao labirinto em cruz elevado pode envolver a inibição da via do NO; 2. a ativação de neurônios positivos para nNOS na SCPdl, que ocorre após exposição a um predador natural (gato), é modulada pela sinalização endocanabinóide, via ativação de CB1; e 3. que reações de fuga induzidas por doadores de NO intra-SCPdl são atenuadas pela facilitação local do sistema canabinóide. Além disso, considerando nossos resultados prévios sugerindo que as reações de fuga produzias por doadores de NO na SCPdl são mediadas por facilitação da liberação de glutamato, iremos verificar se há co-localização de CB1 com o transportador de glutamato nessa região. Por último, iremos verificar a hipótese de que o sistema canabinóide possa modular diretamente a produção de NO através de estudos em slices de encéfalo contendo a SCPdl.

A exposição de animais a situações de perigo faz com que seu organismo apresentem reações de defesa a fim de favorecer sua sobrevivência através . Essas reações envolvem alterações autonômicas e comportamentais e visam adaptar o organismo às novas demandas ambientais. Várias estruturas do sistema nervoso central têm sido implicadas no controle de destas alterações. O projeto estuda a interação entre os sistemas glutamatérgico e nitrérgico, presentes em estruturas do SNC envolvidas com a resposta de medo, modula as atividades cardiovascular e comportamental, bem como as variações da temperatura e de atividade simpática decorrentes da REC em ratos, observadas no modelo do medo condicionado ao contexto.

Neste projeto, avaliamos o comportamento de camundongos machos e fêmeas adultos expostos prolongadamente ao chumbo a partir do desmame.

Realizar-se-ão alguns testes tradicionais para análise comportamental, como o teste de natação forçada (FST) e teste de suspensão pela cauda (TST), ambos para avaliar comportamento depressivo; o teste de labirinto em cruz elevado (EPM), para avaliar a ansiedade do animal; o teste de campo aberto (OF) para avaliar a atividade locomotora geral do animal; e o teste de agressividade.
Para a avaliação imunológica, realizar-se-ão reações de aglutinação e hemograma completo mais contagem de reticulócitos.
As reações de aglutinação avaliam a produção de anticorpos no soro do animal pela aglutinação com um antígeno introduzido na placa (hemácia de carneiro). O hemograma visa verificar a normalidade do número de células sanguíneas.

Avaliar, por técnicas de aglutinação e realização de hemogramas, a resposta imune de camundongos a antidepressivos, principalmente à fluoxetina.

Neste projeto avaliamos o comportamento de ratos machos e fêmeas adultos, expostos ao chumbo durante a prenhez e a amamentação, no teste de natação forçada.