Lucas Tabajara Parreiras e Silva.

Receptores acoplados a proteínas G (GPCRs) são as principais proteínas de membrana envolvidas no processo de transdução de sinal. GPCRs possuem uma estrutura típica de sete alfa-hélices transmembranares e podem ser ativados por uma enorme gama de moléculas com relevância fisiológica como monoaminas, peptídeos, neurotransmissores, hormônios, entre outras, regulando virtualmente todos os processos vitais ao organismo. Devido à sua distribuição ubíqua e a seus papéis pleiotrópicos, os GPCRs são alvos para cerca de 35 dos medicamentos disponíveis no mercado e ainda são os principais alvos para descoberta e desenvolvimento de novos fármacos.Como o nome GPCR sugere, o mecanismo de ação destes receptores envolve a ativação de proteínas G, as quais por sua vez possuem uma estrutura heterotrimérica compostas por subunidades #945;, #946; e #947;, sendo as responsáveis pela regulação e ativação de diferentes efetores. Como a localização clássica dos GPCRs é a membrana plasmática, a ativação de proteínas G é principalmente estudada e melhor entendida neste local. Porém, estudos recentes sugerem a mobilidade dos GPCRs e das proteínas G para diferentes compartimentos intracelulares, com mecanismos de ativação muito além dos conhecidos para estas proteínas. Neste contexto, novos papéis das proteínas G, chamados de papéis não-canônicos, estão sendo propostos, tornando essencial o entendimento dos mecanismos moleculares e possíveis consequências patofisiológicas da regulação da localização e função destas proteínas em diferentes compartimentos intracelulares.O projetode pesquisa aqui proposto tem caráter inovador, pois aborda temas atuais e de interesse farmacológico, com enfoque nas ações não-canônicas de proteínas G, assuntos aos quais poucos grupos de pesquisa no Brasil estão dedicados. Além disso, esse projeto implementará novas ferramentas farmacológicas para o estudo de mecanismos de sinalização de GPCRs de difícil abordagem metodológica. Por sua vez, isto levará a uma melhor compreensão da sinalização não-canônica de proteínas G e seu envolvimento na ação de fármacos e medicamentos já utilizados na clínica, viabilizando também o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas para o tratamento de patologias nas quais os GPCR estejam envolvidos.

Receptores acoplados à proteína G (GPCRs) são as principais proteínas de membrana envolvidas no processo de transdução de sinal. GPCRs possuem uma estrutura típica de sete alfa-hélices transmembranares e podem ser ativados por uma enorme gama de moléculas com relevância fisiológica como monoaminas, peptídeos, neurotransmissores, hormônios, entre outras, regulando virtualmente todos os processos vitais ao organismo. Devido à sua distribuição ubíqua e a seus papéis pleiotrópicos, os GPCRs são alvos para cerca de 40% de todas as drogas disponíveis no mercado e ainda são os principais alvos para descoberta e desenvolvimento de fármacos. Como o nome GPCR sugere, o mecanismo de ação destes receptores envolve a ativação de proteínas G, as quais por sua vez possuem uma estrutura heterotrimérica compostas por subunidades ±, ² e ³, sendo as responsáveis pela regulação e ativação de diferentes efetores. Como os GPCRs se localizarem na membrana plasmática, a ativação de proteínas G é principalmente estudada e melhor entendida neste local, porém, descrições recentes na literatura sugerem ações em diferentes compartimentos intracelulares e mecanismos de ativação muito além das conhecidas para estas proteínas. Estes novos papéis das proteínas G, chamados de "papéis não-canônicos", incluindo os mecanismos moleculares e possíveis consequências patofisiológicas da regulação da localização e função destas proteínas em diferentes compartimentos intracelulares ainda não foram esclarecidos. Temos convicção que o desenvolvimento deste Projeto trará não somente resultados importantes, mas também proporcionará o desenvolvimento de novas ferramentas e metodologias de ponta que permitirão o entendimento da regulação espaço-temporal de GPCRs, proteínas G, e outros efetores de sinalização; todos estes com grande potencial também para aplicação em pesquisa e desenvolvimento de novos fármacos.

A proposta deste projeto é avaliar as vias de tráfego intracelular do receptor AT1 de angiotensina II após ativação por seu agonista seletivo, [Sar1-Ile4,8]AngII (SII) usando Rab GTPases como marcadores intracelulares, e o papel das β-arrestinas nos processos de reciclagem e degradação do receptor AT1. Além disso, correlacionar a rota intracelular adotada por este GPCR com as vias de sinalização ativadas por ele, utilizando dominantes negativos das Rab GTPases.

Analisando a colocalização do receptor AT1 com diferentes Rab GTPases, nosso objetivo era monitorar as rotas intracelulares adotadas por este receptor após ativação com diferentes agonistas.

Este estudo visa a geração de receptores AT1 de angiotensina II modificados, além de agonistas com modificações químicas que permitam investigar diferentes vias de sinalização e a relação estrutura/função envolvida no fenômeno de ?agonismo seletivo?.

Estudar o envolvimento destes dois sistemas com o estabelecimento e progressão do processo de atrofia muscular.

Analisar a participação do fator eIF5A durante as fases do desenvolvimento embrionário de murinos, uma vez que tal fator está diretamente envolvido com proliferação celular.