Fernando Rodrigues de Moraes Abdulkader.

Pretendemos estudar os mecanismos celulares subjacentes à secreção hormonal por ilhotas pancreáticas e a sua regulação por glicose e outros estímulos que levam à despolarização da membrana plasmática. É nosso interesse identificar quais são as populações de grânulos secretórios responsáveis pela primeira fase da secreção de insulina (fenômeno que é abolido na diabete melito do tipo 2). Para tanto serão utilizadas ilhotas pancreáticas isoladas de camundongos C57BL/6 das quais a secreção dinâmica de insulina será avaliada frente a diferentes estímulos.

O conhecimento sobre o papel das espécies reativas de oxigênio (EROs) na função da ilhota pancreática ainda é motivo de controvérsia. Tanto efeitos estimuladores como deletérios têm sido imputados a essas substâncias. Até mesmo o efeito da glicose sobre a produção de EROs na ilhota não está definido. Há indícios de que a regulação de EROs pela glicose seja uma via adicional de sinalização para a secreção de insulina. Já o efeito de EROs sobre a secreção de glucagon por células alfa nem sequer foi avaliado até o momento. Quanto à célula beta, as investigações têm se restringido mais à regulação do conteúdo de EROs pela glicose e o efeito dessas substâncias sobre a secreção de insulina. Porém, os mecanismos pelos quais esses efeitos se dão não têm sido sistematicamente abordados. O presente projeto visa a preencher essas lacunas, avaliando a função de canais iônicos, a dinâmica do cálcio intracelular e a exocitose em células alfa e beta e sua modulação por EROs. Para tanto, técnicas eletrofisiológicas (medida da capacitância elétrica da membrana celular), eletroquímicas (amperometria) e de imagem (microsopia de campo evanescente) inéditas no país serão empregadas para a avaliação da exocitose, bem como técnicas de fluorescência para a avaliação da concentração intracelular de cálcio em células alfa e beta isoladas e em ilhotas pancreáticas intactas de ratos e camundongos.