Fernando Neves Nogueira.

Reabsorção de tecidos mineralizados é um evento biológico presente em patologias orais desafiadoras como doença periodontal, periodontite apical e reabsorção radicular externa. O papel de células mesenquimais na modulação do metabolismo ósseo já é conhecido, mas não o papel de células da papila apical neste contexto especialmente por meio do efeito de osteprotegerina (OPG). O objetivo deste estudo é investigar o papel de OPG produzida por células-tronco da papila apical (SCAP) na apoptose, migração e diferenciação de monócitos in vitro. Cultura primária de SCAP será estabelecida e as células serão submetidas ao silenciamento de OPG por transfecção lipossomal (SCAP-OPG KD ou SCAP-scr KD como controle negativo). O sobrenadante será coletado para validação do silenciamento por meio da quantificação de OPG além da detecção de outros fatores envolvidos com apoptose como TRAIL e interleucina (IL)-33 ou com migração celular como CCL2. Além disso, também será detectado o ligante de receptor de fator nuclear kappa B (RANKL). Com base nestes achados, serão preparados meios condicionados e estocados. Monócitos de sangue periférico serão isolados a partir de indivíduos saudáveis e colocados em cultura. Estas células serão tratadas com os meios condicionados de SCAP-OPG KD ou SCAP-scr KD e serão investigados quanto à viabilidade celular e apoptose na presença ou não de anticorpos neutralizadores de TRAIL e IL-33. Para migração celular, o meio condicionado será utilizado em conjunto com anticorpo neutralizante de CCL2. Por fim, os monócitos serão induzidos à diferenciação em osteoclastos com adição de M-CSF e RANKL na presença do meio condicionado de SCAP-OPG KD ou SCAP-scr KD por 21 dias. A avaliação da diferenciação em osteoclastos será feita por meio da análise de anéis de actina, detecção de fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP) e catepsina K, atividade de TRAP e consumo de glicose e produção de lactato. SCAP serão imunomarcadas para RANKL nas membranas celulares e em seguida serão co-cultivadas com monócitos CD14+ por 14 dias. TRAP, catepsina K e RANKL serão avaliados por imunofluorescência bem como atividade de TRAP. Os dados serão analisados estatisticamente com base no padrão de normalidade de sua distribuição. Valores de p serão considerados significativos a 5. (AU)

Os currículos da Faculdade de Odontologia da USP passam por um processo de modernização, sendo os atuais conteúdos reorganizados dentro de Unidades Curriculares, havendo uma integração dos conteúdos e desfazendo a apresentação segmentada destes. Essa integração repercute tanto nas aulas teóricas quanto nas práticas. Desta forma, o objetivo deste projeto é o estabelecimento de novas atividades práticas relacionadas as aulas que serão ministradas pelos docentes da atual Bioquímica Oral dentro da nova grade e estrutura curricular da FOUSP. Para isso os alunos selecionados, após orientação, serão responsáveis pela criação de protocolos para as aulas práticas. Estes protocolos serão testados pelos demais participantes do estudo. Nestes protocolos serão determinados o tempo do exercício, custo por aluno e momento ideal para a sua realização. Esperamos ao final deste projeto apresentar a FOUSP uma lista de exercícios práticos que poderá enriquecer o conhecimento e facilitar a integração dos conteúdos dentro desta nova estrutura curricular.
Projeto PUB - Reitoria da USP

Projeto Institucional concedido pelo CNPq ao coordenador do PPG intitulado "APOIO A PROJETOS DE PESQUISA CIENTÍFICA, TECNOLÓGICA E DE INOVAÇÃO - BOLSAS DE MESTRADO"

A saliva é um fluido extremamente importante para a manutenção da homeostase bucal, sendo produzido e secretado pelas glândulas salivares. A glândula submandibular possui um papel principal neste processo por contribuir com cerca de 60% do total de saliva secretada durante o repouso. Esta glândula utiliza a glicose como principal fonte energética, deixando o ciclo de Krebs como fonte de aminoácidos para a síntese de proteínas. Em ratos diabéticos já demonstramos redução de atividade da glicólise e do ciclo de krebs e uma diminuição da concentração de mucina da saliva em repouso, sem redução de fluxo salivar. Estes achados evidenciam a relação entre metabolismo energético e secreção salivar. Associado a isso, há ausência de informações referentes ao uso de lipídeos como fonte energética desta glândula, apesar da importância desta via no estado diabético em outros tecidos. Sabendo do importante papel da insulina como um efetor positivo em diversas enzimas e das grandes e severas alterações sistêmicas decorrentes da hiperglicemia no estado diabético, o objetivo deste estudo é o de verificar o efeito do diabete e o da insulina na expressão, quantidade e atividade de enzimas chaves do metabolismo glicolítico, de glicogênio, ciclo de Krebs e metabolismo de lipídeos nas glândulas submandibulares de ratos diabéticos induzidos por estreptozotocina e seus controles, e o papel da insulina nas possíveis alterações encontradas nestes grupos.

Projeto Pesquisador Visitante Especial - PVE

Avaliação de possíveis alterações na cinética do ciclo de Krebs das glândulas salivares submandibular e parótida de ratos diabéticos induzidos por estreptozotocina

Verificar a viabilidade da utilização de hidroxiapatita nanoparticulada sobre o colágeno dentina exposto, promovendo a formação de tecido mineralizado ao redor deste colágeno.

Avaliar as alterações salivares e glandulares durante a evolução da disfunção renal crônica em ratos.

Desenvolvimento de material de apoio a ser distribuído aos pacientes atendidos na clínica odontológica da FOUSP, com ênfase nos procedimentos preventivos.
Financiado pelo Pró-Saúde.

O diabetes melito é um distúrbio metabólico decorrente da falta da insulina ou da incapacidade desta agir adequadamente, caracterizando uma hiperglicemia crônica. O aumento da glicemia está diretamente associado ao aumento de espécies reativas de oxigênio em outros tecidos. Esse excesso de glicose pode causar a glicação de proteínas, o que leva a sua inativação ou um uma auto-oxidação da glicose, gerando neste fenômeno um ânion superóxido. Estes ânios podem causar uma peroxidação lipídica, desestruturando as membranas celulares dos tecidos, causando perda parcial ou total da sua atividade. Para indução do diabetes serão injetado em ratos, via intraperitonial, estreptozotocina (60mg/kg de peso corporal) dissolvido em tampão citrato de sódio 0,1M pH 4,5. Quarenta e oito horas após sua indução será determinada a glicemia no sangue dos animais. Somente aqueles ratos que apresentarem glicemia superior a 350mg de glicose/100 ml de sangue serão considerados diabéticos. Após o período experimental (1-4 semanas e 1-6 meses), os animais serão sacrificados, sendo removidas as glândulas salivares e sangue para análise. Serão determinadas, através de espectrofotometria, as atividades das enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx). O conteúdo de glutationa reduzida (GSH) e oxidada (GSSG) serão determinado em HPLC. A peroxidação lipídica será determinada no sangue e nas glândulas salivares SM e P usando o ácido tiobarbitúrico (TBARS), que reage com o malonaldeído (MDA) decorrente da peroxidação lipídica.