Gerson Francisco de Assis.

Com os recursos financeiros disponibilizados pelo Fundo de Cultura e Extensão Universitária (FCEX) complementado pela Prefeitura do Campus Administrativo da USP Bauru (PCAB) e Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB) foram realizadas duas viagens com servidores não docentes do Campus USP para conhecer osCampi da USP de Piracicaba e Pirassununga. Processo nº

Processo FOB-USP 2003.1.1.18.25.7 - Pró-Reitoria de Cultura e Extensão Universitária
Com os recursos financeiros disponibilizados pelo Fundo de Cultura e Extensão Universitária (FCEx) complementado pela Prefeitura do Campus Administrativo de Bauru (PCAB) e Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB) foram realizadas duas viagens a São Paulo atingindo um maior número de servidores não docentes, que aderiram com entusiasmo o projeto de conhecer os museus Paulista e de Zoologia da USP e a Cidade Universitária.

Com os recursos financeiros disponibilizados pelo Fundo de Cultura e Extensão Universitária (FCEx) complementado pela Prefeitura do Campus Administrativo de Bauru (PCAB) e Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB) foram realizadas duas viagens a São Paulo atingindo um maior número de servidores não docentes, que aderiram com entusiasmo o projeto de conhecer os museus Paulista, de Zoologia da USP e a Cidade Universitária. Processo n. 2002.1.3661.25.7.

As complicações ósseas decorrentes da Diabetes melittus (DM) é uma das maiores desordens que afetam a população. Drogas antidiabéticas como a insulina e biguanidas têm sido amplamente utilizadas no controle da DM. Ambas as drogas atuam diretamente no processo de remodelação óssea e seus efeitos durante a movimentação dentária não estão bem definidos. O objetivo é verificar os efeitos da insulina e metformina na remodelação óssea alveolar durante a movimentação ortodôntica em ratos diabéticos tipo 1 (DM1) e 2 (DM2). Cento e oitenta ratos serão aleatoriamente divididos em grupos Normoglicêmicos (NG,n=30) que receberão injeção intraperitoneal (i.p.) de solução salina a 0,9%, DM1 (n=90) induzidos com i.p. de 50mg/Kg de estreptozotocina e DM2 (n=60) induzidos com dieta hiperlipídica e i.p. de 30mg/Kg de estreptozotocina. Após 7 dias, os animais dos subgrupos Sem Tratamento (ST): ST-NG (n=30), ST-DM1 (n=30) e ST-DM2 (n=30) receberão diariamente solução fisiológica, e dos subgrupos Tratados (T): Insulina (TINDM1, n=30) 6U de insulina, Insulina e Metformina (TIN+MFDM1, n=30) 6U insulina ou de acordo com a glicemia e 150 mg/kg de metformina e Metformina (TMF-DM2, n=30) 150 mg/kg de metformina. Após 14 dias da indução, será realizada a movimentação mesial do 1º molar superior direito com 50g de força e o molar contralateral servirá como controle. Após 3, 7 e 14 dias da instalação do aparelho ortodôntico as hemimaxilas/grupo serão avaliadas por micro-CT e histomorfometria quanto à quantidade de movimentação dentária e a qualidade da remodelação óssea nos lados de pressão e tensão e por Imunohistoquímica a expressão das citocinas envolvidas na formação/ativação e sobrevivências dos osteoclastos (TNF-±, RANKL, OPG e HMGB1) e nas envolvidas na diferenciação e atividade osteoblásticas (Runx-2, OC e ALP). Assim, pretendemos verificar se a metformina associada ou não a insulina possa ter um efeito benéfico no processo de remodelação óssea.

Projeto submetido para o CNPq - Projeto Universal 14/2011 - faixa B, coordenado pelo Prof. Dr. Gustavo Pompermaier Garlet.

http://www.bv.fapesp.br/pt/projetos-regulares/30174/avaliacao-citocinas-vegf-tnf-rankl/
Este projeto tem como objetivo verificar se a MAOD melhora o reparo de defeitos ósseos em ratos diabéticos e normoglicêmicos e se altera ou não a expressão do VEGF, RANKL e OPG e TNF-alfa. Para isso, serão utilizados 200 ratos machos Wistar com 90 dias de idade divididos em Grupo não diabétido (n = 100) os quais receberão uma dose de solução fisiológica a 0,9% e Grupo diabético (n = 100), os quais serão induzidos à diabetes pela aplicação de uma dose única intraperitoneal de estreptozotocina (47 mg/Kg). Após 7 dias os índices glicêmicos dos animais serão obtidos e apenas os que apresentarem em torno de 180 até 300 mg/dL serão enquadrados dentro do grupo diabético. Em seguida, serão realizados defeitos críticos de 8 mm de diâmetro nos ossos parietais, sendo que, no Subgrupo tratado (n = 50/grupo) os defeitos serão preenchidos com matriz alogênica óssea desmineralizada (MAOD) obtidas de fêmures de ratos doadores desmineralizados em HCl 0,6N, e o Subgrupo não tratado (n = 50/grupo) os defeitos serão preenchidos apenas com coágulo sanguíneo obtido do próprio animal por punção cardíaca. Ao término dos períodos experimentais de 0, 7, 14, 21 e 42 dias (10 animais de cada subgrupo/período) as calotas cranianas serão coletadas sendo 5 fixadas em formol a 10% e submetidas a processamentos histológicos para análise morfométrica e imunohistoquímica, e 5 serão trituradas, sendo metade acondicionada em Trizol e congelada para análise do RNAm pelo RT-PCR real-time e a outra metade apenas congelada para análise protéica pelo western blotting para o VEGF, RANKL, OPG e TNF-alfa. Diante das análises propostas, verificaremos: a) o volume de tecido ósseo neoformado em ambas as condições (diabéticos e normoglicêmicos) e tratamento (não tratado e o tratado com MAOD); b) a expressão da proteína VEGF e o padrão de vascularização e ossificação; e c) a cinética do número de osteoclastos/mm2 em ambas condi

Estudos têm demonstrado que a diabetes mellitus favorece a perda óssea, sendo comum a osteopenia da cabeça do fêmur e/ou da espinha lombar, bem como a osteoporose, além de apresentar efeitos negativos também durante o reparo de fraturas, como a redução da angiogênese e do suprimento sanguíneo, resposta inflamatória severa, diminuição na síntese de colágeno, distúrbio no processo de mineralização e um desequilíbrio entre a reabsorção óssea pelos osteoclastos e a deposição da matriz pelos osteoblastos. Além disso, várias outras células, como também sinalizadores bioquímicas participam desse metabolismo. Por outro lado, os enxertos ósseos alógenos (MAOD), oriundos de um indivíduo doador da mesma espécie que o receptor, mas com genótipo diferente, tem sido uma alternativa no tratamento de extensos defeitos ósseos, devido sua capacidade osteocondutora e osteoindutora. Assim, o atual trabalho tem como objetivo verificar por métodos morfométricos se a MAOD melhora o reparo de defeitos ósseos em ratos diabéticos e normoglicêmicos. Para isso, serão utilizados 60 ratos machos Wistar com 90 dias de idade divididos em Grupo não diabétido (n = 30) os quais receberão uma dose de solução fisiológica a 0,9% e Grupo diabético (n = 30), os quais serão induzidos à diabetes pela aplicação de uma dose única intraperitoneal de estreptozotocina (47 mg/Kg). Após 7 dias os índices glicêmicos dos animais serão obtidos e apenas os que apresentarem em torno de 200 até 400 mg/dL serão enquadrados dentro do grupo diabético. Em seguida, serão realizados defeitos críticos de 8 mm de diâmetro nos ossos parietais, sendo que, no Subgrupo tratado (n = 15/grupo) os defeitos serão preenchidos com matriz alogênica óssea desmineralizada (MAOD) obtidas de fêmures de ratos doadores desmineralizados em HCl 0,6N, e o Subgrupo não tratado (n = 15/grupo) os defeitos serão preenchidos apenas com coágulo sanguíneo obtido do próprio animal por punção cardíaca. Ao término dos períodos experimentais de 0, 14 e 42 di

As doenças periodontais (DPs) são alterações inflamatórias crônicas que acometem os tecidos de sustentação do órgão dental. São consideradas as patologias ósseas de maior prevalência em humanos, sendo a principal causa de perda dental em adultos. Dentre os diversos fatores de risco envolvidos, o diabetes exerce notável influência sobre o periodonto. A presença do diabetes é refletida em maior severidade e prevalência das DPs tanto em humanos quanto em modelos experimentais. Em ratos diabéticos, a doença periodontal induzida com ligaduras e/ou inoculação de bactérias é mais severa. Contudo, na ausência de estímulos agressivos como ligaduras, a influência do diabetes sobre o periodonto de rato é pouco conhecida. Nossos resultados prévios mostram que somente a indução do diabetes interfere na severidade e prevalência da doença periodontal em ratos. Foi observado, na presença do diabetes, redução na densidade de fibras colágenas, fibroblastos e vasos sangüíneos concomitante ao aumento dos osteoclastos e células inflamatórias. Desta forma, sugere-se que o diabetes seja responsável pela presença e pela progressão da doença periodontal em ratos, caracterizada por reabsorção óssea alveolar e destruição do tecido periodontal. Neste projeto, avaliaremos a expressão de citocinas inflamatórias e interação AGE-RAGE. Acredita-se que a expressão de citocinas inflamatórias e a interação AGE-RAGE estão envolvidas na patogênese, contudo pouco se sabe sobre os mecanismos envolvidos. Serão utilizadas hemimandíbulas previamente obtidas em experimentos anteriores de ratos Wistar após a indução do diabetes (n=25) pela administração endovenosa de 42 mg/kg de aloxana e, juntamente com os animais controle (n=25), serão analisados nos períodos de 1, 3, 6, 9 e 12 meses. Posteriormente, os cortes provenientes das hemimandíbulas serão analisados por meio de imunohistoquímica em relação à expressão de TNF-, IL-1, MMP-2, MMP-9 e RANKL. E ainda, será avaliada a expressão de AGEs e s

Processo FAPESP n. 02/13984-4
Durante a formação do esmalte dentário, os ameloblastos passam por modulações morfológicas para executarem as funções de secreção e maturação da matriz do esmalte. A matriz é inicialmente formada por um grupo especial de proteínas, sendo que a maioria delas são reabsorvidas durante a amelogênese. As amelogeninas constituem o principal grupo dessas proteínas estruturais e a sua retenção na matriz, encontra-se entre os possíveis fatores relacionados a distúrbios do desenvolvimento do esmalte, como os observados na fluorose. No incisivo de rato adulto o flúor pode interferir tanto na matriz como no ameloblasto, mas durante o período fetal ou pós-natal inicial ainda faltam informações que melhor caracterize esta influência. Por isso, no atual trabalho pretendemos observar as principais alterações morfológicas de ameloblastos de dentes incisivos de ratos submetidos a fluorose, utilizando-se eletromicrografias obtidas no Microscópio Eletrônico de Transmissão e correlacionar as possíveis alterações a um estudo imunohistoquímico com anticorpo primário contra amelogenina. As ratas grávidas serão submetidas á exposição crônica de fluoreto de sódio na água de beber durante toda gestação e durante o aleitamento e as mandíbulas dos ratos com 0, 7 e 14 dias serão colhidas para estudo da matriz do esmalte e dos ameloblastos nas fases de secreção e maturação. Constarão do experimento dois grupos experimentais de 100 ppm e 7 ppm de flúor na água e um grupo controle com água deionizada.

Durante a formação do esmalte dentário o flúor pode interferir tanto na matriz como no ameloblasto. No atual trabalho examinamos as principais alterações morfológicas da matriz de esmalte e do ameloblasto de dentes incisivos de ratos adultos submetidos a água de abastecimento sem e com 7 e 100 ppm de flúor por 42 dias. Utilizamos imagens do ameloblasto obtida pela Microscopia Eletrônica de Transmissão para uma análise morfológica e estereológica e lâminas histológicas com secções de hemimandíbula de ratos marcadas com anticorpo primário contra amelogenina, presente no ameloblasto e na matriz do esmalte para um exame morfológico. Os principais resultados mostraram que: a) a massa corporal bem como o consumo médio de água dos ratos dos grupos experimentais foram semelhantes à do controle; b) houve um aumento de flúor plasmático de 143% e 155% (P<0,01) do grupo de 100 ppm em relação ao grupo controle e de 7 ppm, respectivamente; c) o ameloblasto de secreção mostrou os volumes do núcleo, citoplasma, retículo endoplasmático granular (RER) e grânulos de secreção semelhantes, mas da mitocôndria 29% (P<0,05) maior no grupo de 100 ppm; d) no ameloblasto de maturação o volume citoplasmático, o volume total do RER, a superfície total das mitocôndrias e dos lisossomos do grupo de 100 ppm reduziram, respectivamente, 31%, 45%, 63% e 54% (P<0,05) em relação ao controle e a relação superfície-volume dos vacúolos digestivos dos grupos de 7 e 100 ppm aumentaram, respectivamente, 23% e 25% (P<0,05) em relação ao controle; e) o padrão de identificação imuno-histoquímica da matriz do esmalte, manteve-se homogêneo na fase de secreção, apresentando variações de intensidade discretas nas fases de transição e maturação do grupo de 100 ppm onde a matriz permaneceu retida, in situ, em torno de 300% (P<0,05) a mais em relação aos outros grupos. Concluímos que o flúor oferecido em alta concentração em água de abastecimento durante 42 dias provoca retenção da matriz do esmalte devido sua influ

CNPq Projeto Integrado AI Proc. 463077-2000-8&#10;O futuro do tratamento de defeitos ósseos, caminha em direção da simbiose entre a biotecnologia do DNA com a produção em maior escala e a custos mais reduzidos do que na atualidade de um ?pool? de BMPs e de outros fatores indutores da osteogênese e a ciência dos biomateriais com a produção de um veículo sintético imunologicamente inerte para essas proteínas. O objetivo do atual projeto de pesquisa foi isolar e purificar uma faixa de proteínas em torno de 20 kDa, à partir do ?pool? de BMPs bovinas obtidas de osso fetal bovino e avaliar do seu potencial osteoindutor em sítio heterotópico, com implantação da matriz alogênica carreada com as BMPs bovinas, entre as fáscias musculares do músculo abdutor da coxa do rato e em defeitos ósseos de tamanho crítico em calvária de cobaias. Em vista dos resultados obtidos no presente estudo, concluímos que as proteínas presentes na fração de 20.000 Daltons extraídas de osso fetal bovino onde estão presentes em quantidade relativamente maior do que em osso de animais adultos ? fração correspondentes as BMPs ? não tem capacidade de induzir a neoformação óssea em sítio heterotópico e ortotópico de ratos e cobaias, respectivamente, quando reconstituídas com matriz óssea colagênica alogênica inativada, sugerindo que podem ser BMPs latentes no estado inativo. Esses resultados nos permitem emitir a hipótese de que durante o desenvolvimento embrionário e fetal, quando o controle da diferenciação e do crescimento ósseo é crítico, as BMPs necessárias para esse controle seriam expressas pontual e temporalmente nos locais necessários ou no caso das BMPs latentes, ativadas de modo controlado no local, e quando de uma fase do desenvolvimento onde houvesse a necessidade de um crescimento ósseo mais generalizado e sincronizado, as BMPs seriam secretadas via endócrina por orgãos como os rins, e atuariam nos ossos via sanguínea.

Processo FAPESP nº 99/11597-9&#10;As glândulas submandibulares do rato albino de laboratório crescem marcadamente durante as 10 primeiras semanas de vida pós-natal. Durante este crescimento ocorre diferenciação e maturação das estruturas glandulares definitivas: ácinos, ductos intercalares, túbulos granulares convolutos, ductos estriados e ductos excretores, dentro de um estroma ricamente vascularizado. Na presente pesquisa, avaliamos morfometricamente os volumes absolutos de cada compartimento morfológico glandular durante o desenvolvimento pós-natal. Os dados obtidos de massa glandular e desses volumes compartimentais foram submetidos a análise alométrica em relação a evolução de massa corporal, pelo método não paramétrico de Wald. O crescimento alométrico de massa glandular foi monofásico e do tipo negativo (k<1), com k =0,86. Os volumes compartimentais dos ácinos + túbulos terminais, dos ductos intercalares, dos ductos estriados e dos ductos excretores exibiram todos um padrão bifásico, com a 1a fase entre 2 e 28 dias e a 2a fase entre 28 e 96 dias. Na 1a fase, todas essas estruturas exibiram crescimento alométrico tipo positivo (k>1), com valores de k valendo, respectivamente, 1,09, 1,15, 1,49 e 1,17, e na 2a fase, todas do tipo negativo (k<1), com valores de k, respectivamente, de 0,72, 0,33, 0,77 e 0,82. Os túbulos granulares convolutos exibiram uma única fase de crescimento alométrico do tipo positivo (k>1) entre 28 e 96 dias de idade, com k=1,28. Por outro lado, o volume estromal, mostrou crescimento alométrico do tipo negativo (k<1) no período de 14 a 96 dias de vida pós-natal, com k=0,77. Esta mudança no tipo de crescimento diferencial entre uma fase e a outra, provavelmente esteja ligada a ação de fatores extrínsecos como, por exemplo: hormônio, mudança de dieta alimentar, desmame, etc., que passam a atuar mais efetivamente a partir desse momento.

CNPq Projeto Integrado AI Proc. 521603/96-0 NV&#10;O pâncreas em mamíferos é uma glândula anexa ao tubo digestivo que contém componentes exócrinos e endócrinos. A porção exócrina, relacionada com a secreção de enzimas digestivas no duodeno para a digestão dos alimentos, está constituída por ácinos serosos, células centroacinosas, ductos intercalares, ductos excretores e ducto principal. Entremeadas ao tecido pancreático exócrino, ocorre a presença de grupamentos celulares arredondados, altamente vascularizadas, as ilhotas de Langerhans, que representam a porção endócrina e são responsáveis pela secreção dos hormônios: insulina, glucagon e somatostatina (Cormack, 1987). O início do desenvolvimento ontogenético do pâncreas depende de uma complexa interação entre as células do endoderma do intestino primitivo e as células mesenquimais subjacentes (Golosow e Grobstein, 1962). Essa interação é essencial para a ulterior diferenciação bioquímica e morfológica das células epiteliais secretoras. Em roedores, como o rato ou o camundongo, o início do desenvolvimento pancreático ocorre entre o 9o e o 10o dia de gestação, com a proliferação celular do endoderma e a formação dos brotos epiteliais dorsal e ventral para dentro do mesênquima. Quando o duodeno, devido ao seu crescimento gira para a direita, o broto ventral se desloca e fusiona com o broto dorsal. Nos 4 a 5 dias subsequentes, as células epiteliais do broto agora único, proliferam intensamente, promovendo a rápida morfogênese do órgão. Após o 15o dia de vida pré-natal, as células acinosas começam a sofrer assincronicamente dentro do órgão em desenvolvimento, a citodiferenciação. No intervalo do 17o dia até próximo ao nascimento, as células acinosas acumulam progressivamente grânulos de zimogênio, que preenchem grande parte do citoplasma (Wessels e Rutter, 1969; Parsa, Marsh e Fitzgerald, 1969a e b; Pictet et al., 1972; Taga, 1994). Ao nascimento, o pâncreas do rato e do camundongo, já exibe as suas células acinosas t

Auxílio à Pesquisa - Processo FAPESP 97/03126-0&#10;Em hamster com idades entre 2 a 70 dias de vida pós-natal foi avaliado a evolução da massa corporal e pancreática. Por meio de métodos estereológicos foi determinado ao microscópio óptico, os volumes absolutos dos vários compartimentos morfológicos pancreáticos. Os crescimentos de massa do pâncreas e dos volumes compartimentais foram alometricamente analisados pelo método de Wald em função do crescimento de massa corporal. Esse estudo foi complementado com a análise morfológica das modificações qualitativas que ocorrem no órgão durante o seu desenvolvimento pós-natal.